全 文 ：药杂志，２００３，２８（９）：８０１．
［２］ 曾 南，沈映君，刘旭光，等．荆芥挥发油抗炎作用研究［Ｊ］．中
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［４］ 王佩琪，宋 宇，刘晓娟．挥发油类透皮吸收促进剂的研究进
展［Ｊ］．时珍国医国药，２００６，１７（７）：１２９３．
ＳｔｕｄｉｅｓｏｎｃｕｔａｎｅｏｕｓｐｅｒｍｅａｔｉｏｎｉｎｖｉｔｒｏｏｆＫｕｓｈｅｎｒｅｃｉｐｅｇｅｌ
ＰＥＮＧＣｈｅｎｇ，ＨＵＪｉｎｈｏｎｇ，ＺＨＵＱｕａｎｇａｎｇ，ＬＩＵＪｉｙｏｎｇ，ＱＩＮＺｈｕｏ，ＷＡＮＧＪｉｎｇ
（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，ＣｈａｎｇｈａｉＨｏｓｐｉｔａｌ，ｔｈｅＳｅｃｏｎｄＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２００４３３，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｓｕｉｔａｂｌｅｄｏｓａｇｅｆｏｒｍｆｏｒａｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｔｉａｎａｐｈｙｌａｘｉｓＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅｏｆＫｕｓｈｅｎｒｅｃｉ
ｐｅ，ａｎｄｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｃｕｔａｎｅｏｕｓｐｅｒｍｅａｔｉｏｎｉｎｖｉｔｒｏｏｆｔｈｅｒｅｃｉｐｅ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｗｉｔｈｅｔｈａｎｏｌａｎｄｐｕｒｉｆ
ｙｉｎｇｗｉｔｈａｂｓｏｒｂｅｎｔｒｅｓｉｎｔｏｏｂｔａｉｎａｌｋａｌｏｉｄｓｆｒｏｍＫｕｓｈｅｎｒｅｃｉｐｅｗｅｒｅａｄｏｐｔｅｄ，ｗｈｉｌｅｖｏｌａｔｉｌｅｏｉｌｗａｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｂｙｓｔｅａｍｄｉｓｔｉｌａｔｉｏｎ．
Ｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｗａｓｍａｄｅｔｏｇｅｌ．ＴｈｅｓｋｉｎｆｒｏｍＳＤｒａｔｓ’ａｂｄｏｍｅｎｗａｓｕｓｅｄａｓｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙｂａｒｉｅｒｓ．Ｔｈｅｎｅｆｅｃｔｓｏｆｐｅｒｍｅａｔｉｏｎｏｆｔｈｅ
ａｑｕｅｏｕｓｅｘｔｒｃａｔｉｏｎ，ｔｈｅｐｕｒｉｆｙｉｎｇｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｇｅｌｗｅｒｅｃｏｍｐａｒｅｄｂｙＶａｌｉａＣｈｉｅｎａｎｄＦｒａｎｚｄｉｆｕｓｉｏｎｃｅｌｍｅｔｈｏｄ．ＨＰＬＣｗａｓｕｔｉ
ｌｉｚｅｄｔｏｑｕａｎｔｉｔａｔｅｔｈｅａｌｋａｌｏｉｄｓｉｎｐｅｒｍｅａｔｉｎｇｌｉｑｕｉｄ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｉｎｖｉｅｗｏｆｔｈｅｐｅｒｍｅａｔｉｏｎｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｑｕａｎｔｉｔｙ，ｔｈｅｐｅｒｍｅａｔｉｏｎｖｅｌｏｃｉｔｙ
ａｎｄｔｈｅｌａｇｔｉｍｅｏｆｔｈｅｆｏｕｒｋｉｎｄｓｏｆａｌｋａｌｏｉｄｓ，ｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｐｅｒｍｅａｔｉｏｎｏｆｐｕｒｉｆｙｉｎｇｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｗａｓｂｅｔｅｒｔｈａｎｔｈｅａｑｕｅｏｕｓｅｘｔｒｃａｔｉｏｎ，
ａｎｄｔｈｅｐｕｒｉｆｙｉｎｇｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｇｅｌｓｕｒｐａｓｓｅｄｂｏｔｈｔｈｅａｑｕｅｏｕｓｅｘｔｒｃａｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｐｕｒｉｆｙｉｎｇｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｉｔｗａｓｃｅｒｔｉｆｉｅｄｔｈａｔｔｈｅ
ｐｕｒｉｆｙｉｎｇｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｇｅｌｈａｄｉｍｐｒｏｖｅｄｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｃｕｔａｎｅｏｕｓｐｅｒｍｅａｔｉｏｎｏｆａｌｋａｌｏｉｄｓ，ａｎｄｉｔｉｓｔｈｅｂｅｆｉｔｉｎｇｄｏｓａｇｅｆｏｒｍｆｏｒＫｕｓｈｅｎｒｅｃｉ
ｐｅｔｏｔｒｅａｔａｎａｐｈｙｌａｘｉｓｄｉｓｅａｓｅｉｎｓｋｉｎ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｋｕｓｈｅｎｒｅｃｉｐｅ；Ｓｏｐｈｏｒａｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ；Ｓｃｈｉｚｏｎｅｐｅｔａｔｅｎｕｉｆｏｌｉａ；ｇｅｌ；ｃｕｔａｎｅｏｕｓｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ
［责任编辑 鲍 雷］
［收稿日期］ ２００６０４１４
［通讯作者］ 杨祥良，Ｔｅｌ：（０２７）８７７９４５２０，Ｆａｘ：（０２７）
８７７９４５１７，Ｅｍａｉｌ：ｙａｎｇｘｌ＠ｍａｉｌ．ｈｕｓｔ．ｅｄｕ．ｃｎ
齐墩果酸纳米悬浮液冻干方法的研究
赵晓玲１，陈华兵２，陈亚军２，杨祥良２
（１．华中科技大学 化学系，湖北 武汉 ４３００７４；
２．华中科技大学 生命科学与技术学院，湖北 武汉 ４３００７４）
［摘要］ 目的：考察几种冻干保护剂对齐墩果酸纳米悬浮液冻干过程中的保护作用，筛选出最佳配方。方法：
通过测定齐墩果酸纳米粒冻干前后的粒径变化，来评价保护效果和优选配方。结果：１０％的蔗糖能对齐墩果酸纳
米粒起到最佳的保护效果，样品的粒径为２３６３ｎｍ（冻干前２１１２ｎｍ），多分散系数０２４２比冻干前（０１８０）有很
少的增加。结论：合适浓度的冻干保护剂在合理的冷冻条件下可以获得最佳的纳米悬浮液的冻干粉。
［关键词］ 纳米悬浮液；冷冻干燥；冻干粉
［中图分类号］Ｒ２８３ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００７）１８１８７４０３
齐墩果酸（ｏｌｅａｎｏｌｉｃａｃｉｄ，ＯＬＡ）纳米悬浮液是针
对ＯＬＡ溶解度差（２０℃时４６１μｇ·Ｌ－１，３７℃时
１７５９μｇ·Ｌ－１），溶出速度慢，口服生物利用度低的
问题而研究的一种新型给药系统［１］，利用纳米沉淀
技术制备的ＯＬＡ纳米悬浮液放置较长时间会产生
团聚，如果能将 ＯＬＡ悬浮液干燥成粉末，对于 ＯＬＡ
的贮存、包装、运输等方面的方便和稳定性都是一种
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第３２卷第１８期
２００７年９月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ １８
Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００７
良好的选择。本实验对冷冻干燥法制备纳米 ＯＬＡ
粉末的冻干参数进行了研究。
１ 材料与仪器
ＯＬＡ原药（９５％）；大豆卵磷脂（杭州伟华香料
化学有限公司）；海藻糖（上海恒信化学试剂有限公
司）；蔗糖（上海试剂一厂）；葡萄糖（广州化学试剂
厂）；乳糖（上海运宏化工制剂辅料技术有限公司）；
甘露醇（天津市博迪化工有限公司）。
７９－１磁力加热搅拌器（国华电器有限公司）；
激光粒度仪（Ｎａｎｏ－ＺＳ９０，ＭａｌｖｅｒｎＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）；透
射电子显微镜（ＪＥＭ－１００ＣＸП，Ｊａｐａｎ）；冷冻干燥机
（ＬａｂｃｏｎｃｏＣｏｒｐ．，ＫａｎｓａｓＣｉｔｙ，ＵＳＡ）。
２ 方法与结果
２．１ 纳米悬浮液的制备
４０ｍｇＯＬＡ溶解于２５ｍＬ乙醇作为有机相，４０
ｍｇ卵磷脂分散在５０ｍＬ水中作为水相，室温１０００ｒ
·ｍｉｎ－１搅拌，将乙醇慢慢滴入水中，体系渐渐产生
乳光。滴毕，将所得溶液用旋转蒸发仪减压浓缩
（４５℃）至２０ｍＬ，即得ＯＬＡ纳米悬浮液。
２．２ 纳米悬浮液的的表征
２．２．１ 粒径及Ｚｅｔａ电位的测量 取纳米悬浮液适
当稀释，于２５℃，６３３ｎｍ，ＨｅＮｅ光源条件下，在激
光粒度仪上测得粒径为 ２１１２ｎｍ，多分散指数为
０１８０，Ｚｅｔａ电位为－３５５ｍＶ。
２．２．２ ＴＥＭ观察 取纳米悬浮液适量，稀释后，滴
加于覆盖碳膜的铜网上，干燥后用１％磷钨酸染色，
进行ＴＥＭ观察。ＯＬＡ纳米粒为规则的球形或近球
形颗粒，粒径在２００ｎｍ左右，有较高的均一稳定性，
而且分散性好，未出现明显团聚现象，见图１。
图１ ＯＬＡ纳米悬浮液的ＴＥＭ图
２．３ 纳米悬浮液的稳定性考察
粒径为２１１１ｎｍ的ＯＬＡ纳米悬浮液在室温下
密闭保存，并于７，１４，２８，６０，９０ｄ测纳米悬浮液的
粒径。由表１可知，纳米悬浮液在第１个月平均粒
径从２１１２ｎｍ增加到２２４５ｎｍ，第３个月，平均粒
径增加到５３５４ｎｍ。ｄ（０９）（此时低于该粒径的纳
米颗粒数占体系全部颗粒的９０％）从２９５３ｎｍ增
加到３９６１ｎｍ，第３个月，ｄ（０９）增加到６１５４ｎｍ，
颗粒出现大量的团聚。这可能与Ｏｓｔｗａｌｄｒｉｐｅｎｉｎｇ［２］
有关，即药物在大颗粒和小颗粒附近的饱和溶解度
和浓度梯度存在差异，当药物从小颗粒附近扩散到
大颗粒附近时，大颗粒周围形成过饱和溶液使药物
在大颗粒上结晶析出，即大颗粒尺寸增加，同时小颗
粒周围溶液中药物低于饱和浓度，药物不断溶解，即
小颗粒逐渐变小。这个连续不断的过程最终导致小
粒径的药物颗粒最终消失，体系中粒径较大的颗粒
越来越多，纳米粒粒径分布范围变宽。
表１ 稳定性试验
时间／ｄ 粒径／ｎｍ ｄ（０９） 时间／ｄ 粒径／ｎｍ ｄ（０９）
７ ２１６０ ２９５３ ２８ ２２８５ ３９６１
１４ ２２０２ ２９５３ ６０ ３６１１ ５３１２
２１ ２２６４ ３４２０ ９０ ５３５４ ６１５１
注：ｄ（０９）表示表中给出粒径一下的颗粒数占体系全部颗粒的
９０％（表２同）
２．４ ＯＬＡ纳米冻干粉参数的选择
２．４．１ 纳米冻干粉的制备 由稳定性实验可知，
ＯＬＡ纳米悬浮液放置时间过长会产生团聚。为解
决这一问题，考虑制备 ＯＬＡ冻干粉。取葡萄糖、蔗
糖、甘露醇、海藻糖、乳糖，分别加入２０ｍＬ粒径为
２１１２ｎｍ的ＯＬＡ悬浮液中，混合均匀后，放入超低
温冰箱中冷冻２４ｈ（－７０℃），然后在冷冻干燥机中
干燥３６ｈ（温度为－４８℃，压力为９８×１０－３Ｍｂａｒ）。
得到ＯＬＡ的纳米冻干粉。
２．４．２ 冻干保护剂的选择 取葡萄糖、蔗糖、甘露
醇、海藻糖、乳糖各１ｇ，按２．４．１方法冻干，将制备
的冻干粉重新分散在水溶液中测定粒径，通过冻干
前后纳米悬浮液粒径的变化来筛选最佳的保护剂。
与刚制备的ＯＬＡ纳米悬浮液相比，添加蔗糖样品的
纳米悬浮液的粒径变化最小，因此采用蔗糖作为冻
干保护剂比较合理。结果见表２。
表２ 不同种类的保护剂（５０％）对冻干
再分散后粒径的影响
Ｎｏ． 保护剂 粒径／ｎｍ ｄ（０９）
０ 无 ９６９１ ９５５４
１ 葡萄糖 ３２０１ ５３１２
２ 蔗糖 ２９０６ ４５８７
３ 甘露醇 ６６６６ ９５５４
４ 海藻糖 ３０８２ ５３１２
５ 乳糖 ３９０５ ５３１２
２．４．３ 蔗糖浓度对纳米悬浮液冻干粉再分散的影
响 取蔗糖１，２，３，４ｇ，分别加入２０ｍＬＯＬＡ纳米
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悬浮液中，按２．４．１的方法冻干并测定粒径。添加
不同蔗糖浓度的４个样品和 ＯＬＡ纳米悬浮液以及
不加保护剂的对照样品的粒径变化趋势。可以看
出，添加了蔗糖冻干保护剂的样品（２１～２４）的粒
径比刚制备的ＯＬＡ纳米悬浮液的均有增大，但远小
于不加保护剂相同条件下直接冻干的２０号样品。
其中以添加了 １００％浓度的 ２２号样品（２３６３
ｎｍ）的粒径增加最小。１０％的蔗糖具有最佳的保护
效果。结果见表３。
表３ 不同的蔗糖浓度对ＯＬＡ纳米悬浮液的影响
Ｎｏ． 添加量／％ 粒径／ｎｍ ＰＤＩ
０ ０ ２１１２ ０１８０
２０ ０ ９６９１ ０５６６
２１ ５ ２９０６ ０２２１
２２ １０ ２３６３ ０２４２
２３ １５ ２５８８ ０３１６
２４ ２０ ２５９０ ０１４２
３ 小结与讨论
为了防止在冻干过程中颗粒粒径变大［３］，选用葡
萄糖、蔗糖、乳糖、甘露醇和海藻糖５种多元醇作为冷
冻保护剂。通过对冻干前后纳米悬浮液粒径的变化
来考察冻干保护剂对纳米粒的保护效果。蔗糖、葡萄
糖和海藻糖均显示良好的效果，其中以蔗糖的效果最
佳，乳糖和甘露醇的保护效果稍差。说明蔗糖既保护
了ＯＬＡ纳米粒在冷冻过程中不会因形成冰晶而聚集
融合，又使得在水化的过程中能迅速溶于水。可能是
蔗糖分子替代了水分子与卵磷脂的头部基团形成氢
键［４］，使ＯＬＡ纳米颗粒周围水分子减少，从而减少了
在冷冻时形成的冰晶；还可以在纳米颗粒之间形成空
间位阻，阻止纳米颗粒的聚合和融合。
［参考文献］
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粒度分布的影响及机理考察［Ｊ］．中国医药工业杂志，２００２，３３
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Ｆｒｅｅｚｅｄｒｙｉｎｇｏｆｏｌｅａｎｏｌｉｃａｃｉｄｌｏａｄｅｄｎａｎｏｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｓ
ＺＨＡＯＸｉａｏｌｉｎｇ１，ＣＨＥＮＨｕａｂｉｎｇ２，ＣＨＥＮＹａｊｕｎ２，ＹＡＮＧＸｉａｎｇｌｉａｎｇ２
（１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｗｕｈａｎ４３００７４，Ｃｈｉｎａ；
２．ＣｏｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＨｕａｚｈｏｎｇＵｎｉｖｅｓｉｔｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｗｕｈａｎ４３００７４，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｓｅｖｅｒａｌｃｒｙｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔｓｗｅｒｅｅｍｐｌｏｙｅｄｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｅｃｔｏｎｔｈｅｆｒｅｅｚｅｄｒｙｉｎｇｐｒｏｃｅｓｓｏｆｔｈｅ
ｏｌｅａｎｏｌｉｃａｃｉｄｌｏａｄｅｄｎａｎｏｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｓ（ＯＬＡＬＳ）ｉｎｏｒｄｅｒｔｏｓｅｌｅｃｔｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｈｅｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｅｃｔｗａｓｅｖａｌｕ
ａｔｅｄｂｙｍｅａｓｕｒｉｎｇｔｈｅｍｅａｎｐａｒｔｉｃｌｅｓｉｚｅｏｆｓａｍｐｌｅｓｂｅｆｏｒｅａｎｄａｆｔｅｒｆｒｅｅｚｅｄｒｙｉｎｇｐｒｏｃｅｓｓ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｓｕｃｒｏｓｅｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ
１０％ ｗａｓｓｅｌｅｃｔｅｄａｓｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｃｒｙｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔ．Ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｓｉｚｅｏｆｅｘｃｅｌｅｎｔｓａｍｐｌｅｗａｓ２３６３ｎｍ（ｖｅｒｓｕｓ２１１２ｎｍｏｆｆｒｅｓｈｏｎｅ），
ａｎｄａｍｕｃｈｈｉｇｈｅｒｐｏｌｙｄｉｓｐｅｒｓｉｔｙｉｎｄｅｘｏｆ０２４２（ｖｅｒｓｕｓ０１８０）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄｐｏｗｄｅｒｃｏｕｌｄｂｅｏｂｔａｉｎｅｄ
ｗｉｔｈｓｕｉｔａｂｌｅｔｙｐｅｏｆｃｒｙｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔｗｉｔｈａｐｐｒｏｐｒｉａｔｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎａｎｄｐｒｏｐｅｒｆｒｅｅｚｅｄｒｙｉｎｇｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｎａｎｏｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｓ；ｃｒｙｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔ；ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄｐｏｗｄｅｒ
［责任编辑 鲍 雷
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