全 文 ：葛根配方颗粒的制备工艺和含量测定
邓轶渊 t o高文远 t3 o刘新桥 t o陈海霞 t o张铁军 u
ktq天津大学 药物科学与技术学院 o天津 vssszu~
uq天津药物研究院 o天津 vsst|vl
≈收稿日期 ussx2tt2su
≈基金项目 天津市科技攻关项目 kswvt{s|ttl
≈通讯地址 3 高文远 oר¯}ksuul{zwst{|xo∞2°¤¬¯}³«¤µ°ª¤²
·∏q §¨∏q¦±
葛根为豆科植物野葛 Πυεραρια λοβατα k• ¬¯§ql
«º¬或甘葛藤 Π. τηοµ σονιι
±¨·«的干燥根 o主要活
性成分为异黄酮类化合物 o如葛根素 !大豆素 !大豆苷
等 ∀葛根配方颗粒是葛根饮片经水提 !浓缩 !干燥 !制
粒等工序制成的单味中药颗粒剂 ≈t ∀将传统的葛根
饮片改变为颗粒剂 o可以有效地去除植物纤维等无活
性成分 o增加稳定性 o易储存 o服用方便 ∀关于葛根配
方颗粒的制备工艺和含量测定未见报道 o作者采用高
效液相法控制颗粒中的葛根素含量 o方法简便可行 o
重复性好 o可以作为控制产品质量的方法 ∀
1 仪器与试药
美国 ° ttss色谱仪 ª¬¯¨ ±·公司 otvtt四
元泵 otvuuotvtw ∂ • ⁄o° √¨q qsxst化学
工作站 ~美国 ×⁄p ws
高速离心机 ∞公司 ~
≥¤µ·²µ¬∏¶
≥uts≥型电子天平天津奥特赛恩斯仪器
有限公司 ∀甲醇为色谱纯 o水为二次重蒸水 o乙醇 !
交联淀粉等其他试剂均为分析纯 ∀
葛根饮片为天津中药饮片厂提供的 x ®ª塑封
包装粉葛饮片 k批号 svsyvs2svlo符合 5中国药典 6
ussx年版要求 ~葛根素对照品 k批号 usswswtv§l购
于天津市药品检验所 ∀
2 方法与结果
2q1 葛根配方颗粒制备工艺优选
2q1q1 提取条件选择依据 葛根素为异黄酮类成
分 o具有良好的水溶性 ∀预试验取葛根饮片 ts ªo加
tu倍量水微沸回流 t «后离心分离 o滤渣再次微沸
回流 o共回流 u次 o合并滤液 o用高效液相色谱法测
定提取液中和原饮片中葛根素含量 o计算葛根素提
取率大于 {sh o测得得膏率大于 uxh ∀预试验证明
在此基础上设计正交试验可达到预期效果 ∀
2q1q2 试验因素水平 根据葛根中主要有效成分
葛根素的水溶性及预试验结果 o确定以葛根素的提
取率和得膏率为指标 o以加水量 !提取时间 !提取次
数进行正交试验 o选择 | kvw l正交表 o对水提工艺
的各参数进行考察 o因素水平表见表 t∀
表 t 因素水平
水平
Α
加水量
r倍
Β
提取时间
r«
Χ
提取次数
r次
t { s1x t
u ts t u
v tu t1x v
2q1q3 葛根素提取率考察 高效液相法分别测定
|次试验提取液中葛根素的含量和葛根饮片中所含
葛根素含量 o计算其提取率 ∀
葛根素提取率 kh l ≈kΧt ≅ ςt l rkΧu ≅ Ωu l ≅ tssh
ςt }提取液定容体积 ~Χt }提取液中葛根素浓度 ~
Χu }葛根饮片中葛根素含量 ~Ωu }称取的葛根饮片质
量 ∀
样品溶液的制备 }按表 t分别称取 |份葛根饮
片各 us ªo分别加入相应倍量的自来水 o微沸回流提
取 ov sss µ# °¬±pt离心提取液 x °¬±o上清液用布氏
漏斗滤过 o收集 o加水定容至 t sss °o摇匀 ∀吸取
x °os1uu Λ°微孔滤膜滤过 o弃去初滤液 o即得 ∀
另取葛根饮片适量 o粉碎 o取粉末 k过三号筛 l
约 s1t ªo精密称定 o置锥形瓶中 o精密加入 vsh乙
醇 xs °o称定重量 ∀加热回流 vs °¬±o放冷 o再称
定重量 o用 vsh乙醇补足减失的重量 o摇匀 o滤过 o
取续滤液 o即得葛根供试品溶液 ∀
对照品溶液制备 }精密称取葛根素对照品 z1xzx
°ªo置 ux °量瓶中 o用 vsh乙醇溶解并稀释至刻
度 o摇匀 o即得 k每 t °含葛根素 s1vsv °ªl∀
色谱条件 ≈v } ¬´¶¬¯ ≤t{色谱柱 kw1y °° ≅ uxs
°°ox Λ°lo流动相甲醇 2水 kuxΒzxlo检测波长 uxs
±°o柱温 vs ε ∀
#uwx#
第 vu卷第 y期
ussz年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ y
¤µ¦«o ussz
测定结果 }按 | kvw l正交表 o以葛根素的提取
率为指标 o实验结果如表 u所示 ∀从表 u中可看出
误差项极差远小于其他项 ∀葛根素提取率方差分析
结果见表 vo从表 v可知各因素对提取率的影响程
度依次为 Χ Β Α∀
表 u 正交试验结果 h
²q 提取率 得膏率
t u|1yw tt1{|
u x|1v| uw1v{
v {t1vy vx1x{
w wy1y| t{1uv
x zu1vu vs1x{
y xu1wz ut1st
z yu1vs uw1zv
{ xt1xx us1vv
| zx1xt vt1yy
表 v 方差分析
指标 方差来源 方差平方和 自由度 Φ比 Π
提取率 Α zx1yv{ u tx1svz s1sx
Β {xu1wvw u tzs1twz s1sx
Χ t tv|1yvx u uuz1wy{ s1sx
∆ x1sts u t1sss
得膏率 Α {1v{v u u1vws s1sx
Β t{|1svx u xu1zzw s1sx
Χ uvz1wyx u yy1u|w s1sx
∆ v1x{ u t1sss
注 }Φs1sx kuoul t|
2q1q4 得膏率考察 精密吸取 |次正交试验提取
液各 x °o分别置于已经经过干燥恒重的表面皿
中 o蒸发水分至恒重得到干浸膏 ∀以得膏率为指标 o
对其进行直观分析和方差分析 o结果见表 uov∀从
两表可知各因素对得膏率的影响程度依次为 Χ
Β Α∀与提取率考察得到的结论一致 ∀
得膏率 ≈kΩu ≅ ςt l rkςu ≅ Ωt l ≅ tssh
Ωu }干燥后干膏质量 oςt }提取液定容体积 oςu }
吸取提取液体积 oΩt }葛根饮片总质量 ∀
2q1q5 最佳提取工艺的确定 将葛根素提取率和
得膏率列于同一图中 o见图 to可以看出葛根素提取
率和得膏率两指标的变化趋势基本一致 ∀因此结论
为 }提取次数对提取结果影响最大 o其次为提取时
间 o加水量对结果的影响在 v个因素中为最小 ∀最
终确定最佳条件为 }ts倍量水 o微沸回流 t1x «o回
流 v次 o可得到较高的葛根素含量和较多的水溶性
成分 ∀
2q1q6 最佳提取工艺的验证 按照确定的最佳工
图 t 得膏率和葛根素提取率变化趋势图
艺 }ts倍量水 o微沸回流 t1x «o回流 v次 o提取葛根
饮片 o测定葛根素提取率和得膏率 ∀重复验证 v次 o
测定平均提取率为 {v1|{h o平均得膏率为
vy1tvh o证明最佳工艺数据可靠 ∀
2q2 葛根配方颗粒的成型
以葛根配方颗粒优选后的工艺 o即取葛根饮片
xss ªo加 ts倍量水 o微沸回流 t1x «o回流 v次 o合
并 v次提取液 o浓缩至相对密度 t1vu ∗ t1v|kxs ∗
ys ε l的干浸膏 o按照质量比为 tΒt的比例加入交
联淀粉 o用 zxh 的乙醇适量制成软材 ∀软材过 tw
号筛制成颗粒 o干燥 o整粒 o即得葛根配方颗粒 ∀
2q3 葛根配方颗粒的含量测定
分别精密称取 v批葛根配方颗粒各 s1u ªo置于
tss °圆底烧瓶中 o加入 vsh乙醇 xs °o精密称
定重量 o加热回流 vs °¬±o放冷 o补足减失重量 o摇
匀 o滤过 o取续滤液为供试品溶液 ∀分别吸取供试品
溶液及葛根素对照品溶液各 x Λo注入液相色谱
仪 o按测定法色谱条件测定 o计算葛根素含量 o测定
v批葛根配方颗粒中葛根素平均质量分数为
u1z{h o结果见表 w∀
表 w 葛根配方颗粒中葛根素质量分数 h
批号 葛根素 平均值
sxswst u1yz
sxswst u1zw
sxswsu v1sx u1z{
sxswsu v1st
sxswsv u1wt
sxswsv u1wt
3 讨论
3q1 提取溶剂的选择
尽管有许多研究者用不同体积分数的乙醇作为
提取溶剂优选葛根的提取工艺 o并且葛根素提取率
也较高 o但考虑到颗粒剂的实际工业生产经济因素
和颗粒剂是与传统汤剂作对比研制的改变剂型的新
药 o实验中采取水作为提取溶剂 o葛根素提取率在
{xh以上 o得膏率为 vxh以上 ∀这既保证了配方颗
#vwx#
第 vu卷第 y期
ussz年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ y
¤µ¦«o ussz
粒中葛根素含量又能尽可能地保证其他水溶性成分
较多 o是较合适的提取方法 ∀
3q2 最佳工艺的确定
在许多正交优化试验中 o当有 u项评价指标时
往往采取两项指标加权评分的方法确定最佳工艺 o
该方法在 u项指标变化趋势情况不一致时更显出它
的优越性 o但 u项指标的权重比并没有权威理论的
指导 o完全是经验确定的 o因为针对不同类药材 o药
典中规定的药理活性成分和总体提取物 k得膏 l二
者对最终产品药效的影响孰大孰小不能一概而论 ∀
本实验中没有引入权重的概念 o因为提取率和得膏
率 u项指标的变化趋势是一致的 o有利于葛根素提
取率的提取工艺 o其得膏率也较高 o因此最终选择上
述最佳工艺 ∀
≈参考文献
≈t 顾志平 o陈碧珠 o冯瑞之 q中药葛根及其同属植物资源的利用
和评价 ≈ q药学学报 ot||yovtkxl}vq
≈u 郭建平 o孙其荣 q葛根化学成分及临床应用研究概况 ≈ q药学
实践杂志 ot||yotwkvl}twyq
≈v 梁 静 q中药配方颗粒的现状与展望 ≈ q医学动物防治 o
ussxoutkul}txtq
≈w 中国药典 ≈≥ q一部 qussx}uvwq
≈x 王美东 o李常行 o孙钦美 q葛根提取工艺的正交设计试验 ≈ q
齐鲁药事 oussxouwktl}wxq
≈y 许根英 o杨春欣 o吕迁洲 q葛根提取工艺的优化选择 ≈ q中国
医学研究与临床 oussvotktl}yzq
≈责任编辑 鲍 雷
°≤测定一清胶囊的溶出度
田书霞 o蒋 晔 3 o李艳荣
k河北医科大学 药学院 o河北 石家庄 sxsstzl
≈收稿日期 ussx2s|2tt
≈通讯作者 3 蒋晔 oר¯}ksvttl{yuyysy|o∞2°¤¬¯}¬¤±ª¼¨
«¨ ¥°∏q §¨∏q¦±
一清胶囊是由大黄 !黄连和黄芩等 v味中药组
成的复方中药 o具有清热泻火解毒 !化瘀凉血止血等
作用 o常用于火毒血热所致的身热烦躁 o目赤口疮 o
咽喉 !牙髓肿痛 o大便秘结 o吐血 o咯血等症的治
疗 ≈t ∀复方中药是通过中药中多种成分的共同或
协调作用起效的 o这些成分在体外的溶出情况必然
会影响其体内吸收 o而体外溶出是药品体内溶出的
指标 o是表征药品质量的重要指标 ∀一清胶囊的溶
出度测定方法尚未见报道 ∀作者采用 °≤以大黄
中的大黄素 !大黄酚 o黄连中的盐酸小檗碱 o黄芩中
的黄芩苷为指标测定了一清胶囊的体外溶出度 o为
评价和控制一清胶囊的质量提供了依据 ∀
1 仪器与试药
高效液相色谱仪 }°||µ三元梯度泵 !∂ ||紫
外检测器 k北京温分分析仪器技术开发公司 l∀南
京千谱色谱工作站 ∀
大黄 素 k szxy2usstts l!大 黄 酚 k ttsz|y2
ussvs|l!黄芩苷 kttsztx2ussutul和盐酸小檗碱
kttzstv2ussus{l对照品 k中国药品生物制品检定
所 l~一清胶囊样品 k成都康弘制药有限公司 lo甲
醇 !乙腈 k均为色谱纯 o美国 ⁄ 公司 l!三乙胺
k分析纯 o北京益利精细化学品有限公司 l!水 k石英
亚沸重蒸水 l∀
2 方法与结果
2q1 色谱条件和系统适应性试验
µ²°¤¶¬¯≤t{色谱柱 kw1y °° ≅ uxs °°ox Λ°l∀
流动相 甲醇 2乙腈 kxsΒxslo
甲醇 2乙腈 2s1xh三
乙胺水溶液 k稀醋酸调 ³ v1slkusΒusΒysl∀梯度
洗脱 }s °¬±otxh ~x °¬±otxh ~ts °¬±ozsh ~ux
°¬±ozsh o检测波长 uxw ±°o流速 t1s °# °¬±pt o
柱温为室温 ∀在此色谱条件下测定黄芩苷 !盐酸小
檗碱 !大黄素和大黄酚对照品 !一清胶囊样品色谱图
见图 t∀由图可知一清胶囊中的 w种有效成分与杂
质完全分离 ∀
2q2 标准曲线的制备
分别配制一定浓度的黄芩苷 !盐酸小檗碱 !大黄
素和大黄酚对照品的甲醇储备液 o然后精密量取各
#wwx#
第 vu卷第 y期
ussz年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ y
¤µ¦«o ussz