全 文 ：4 结论
本研究采用 ‹°≤2˜∂2≥法 o建立了贯叶连翘
提取物k含金丝桃素类和黄酮类化合物的提取物l的
指纹图谱分析方法 o可对提取物的质量控制以及制
备工艺的过程评价提供依据 ∀对提取物制备工艺的
有效性和质量稳定性进行综合评价的结果显示 o本
研究的提取物制备工艺可有效地从贯叶连翘药材中
富集黄酮类和金丝桃素类成分 o而且工艺的批内稳
定性良好 o批间稳定性较好 o但尚需对个别工艺操作
条件进行严格控制 ∀此外 o抗氧化剂的使用与否对
提取物的质量影响较小 o但药材的采摘部位不同对
提取物的质量会产生显著影响 o相对于采收地上全
草来说 o从顶端至以下 vs ¦°的植物体所制得的提
取物中多数指标成分的含量较高 ∀
≈参考文献 
≈t  Šµ¨ ¶¨²±   o≥¤±©²µ§ …o ²±·¬⁄ „ q≥·q²«±. ¶º²µ·( Ηψπεριχυµ
περφορατυµ) }„ µ¨√¬¨º ²©·«¨ ¦∏µµ¨±·³«¤µ°¤¦²¯²ª¬¦¤¯ o·²¬¬¦²¯²ª¬¦¤¯ o
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¶·¬·∏¨±·¶²©·«¨ «¨µ¥©µ²° Ηψπεριχυµ περφορατυµ qq Πηαρµαχοπσψ2
χηιατρψ, t||z ovskxl }tu| q
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qq Αναλ Χηεµ ot||| oztkuul }xuvx q
Εϖαλυατιον οφ πρεπαρινγ προχεσσ οφ εξτραχτ οφ Ηψπεριχυµ
περφορατυµ υσινγ ΗΠΛΧ φινγερπριντ αναλψσισ
• „‘Š ⁄²±ª2° ¬¨oŒ˜ ≤«¤²2¶«¨ ±o ≠„‘Š ⁄¨ 2³²
(Λαβορατορψ οφ Πηαρµαχογνοσψ ανδ Νατυραλ Μεδιχιναλ Χηεµιστρψ, Σχηοολ οφ
Πηαρµαχευτιχαλ Σχιενχεσ , Συν Ψατ2σεν Υνιϖερσιτψ, Γυανγζηου xtss{s , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶¨·¤¥¯¬¶«·«¨ ∏´¤¯¬·¼¦²±·µ²¯ °¨ ·«²§²©·«¨ ¬¨·µ¤¦·¨ ±µ¬¦«¨§«¼³¨µ¬¦¬±¶¤±§©¯¤√²±²¬§¶k‹ƒ∞∞l ³µ¨³¤µ¨§©µ²° Ηψ2
περιχυµ περφορατυµ ¥¼ °¨ ¤±¶²© ‹°≤ ©¬±ª¨µ³µ¬±·¤±¤¯¼¶¬¶o¤±§·² √¨¤¯∏¤·¨·«¨ √¤¯¬§¬·¼o¶·¤¥¬¯¬·¼ ²©º¬·«¬±2§¤¼ ¤±§¥¨·º¨ ±¨2§¤¼ ²©·«¨ ³µ¨³¤µ¬±ª³µ²2
¦¨¶¶²©‹ƒ∞∞¤¶º¨ ¯¯ ¤¶·«¨ ¬±©¯∏¨±¦¨ ²©¤±·¬²¬¬§¤±·¤±§·«¨ «¨µ¥¤¯ ¶²∏µ¦¨ ·²·«¨ ∏´¤¯¬·¼²©‹ƒ∞∞qΜετηοδ : ‹°≤2˜∂2≥ º¤¶ °¨³¯²¼¨ §·²·«¨ ∏´¤¯2
¬·¤·¬√¨ ¤±§ ∏´¤±·¬·¤·¬√¨ ¤±¤¯¼¶¨¶²© ‹ƒ∞∞qΡεσυλτ : ר ± ³¨¤®¶²±·«¨ ‹°≤ ©¬±ª¨µ³µ¬±·²© ‹ƒ∞∞ º¨ µ¨ ¬±§¬¦¤·¨§o¤±§ ¬¨ª«·¦²°³²∏±§¶²©·«¨ ° «¤§
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¶¨µ√¨ §²±·«¨ ∏´¤¯¬·¼ ²© ‹ƒ∞∞ º«¨·«¨µ²µ±²·¤§§¬±ª·«¨ ¤±·¬²¬¬§¤±·§∏µ¬±ª·«¨ ³µ²¦¨¶¶q‹²º¨ √¨ µo§¬©©¨µ¨±·³¤µ·¶²©·«¨ ³¯¤±·¦²¯¯¨ ¦·¨§¤¶·«¨ °¤·¨µ¬2
¤¯¶¦²∏¯§¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼¤©©¨¦··«¨ ∏´¤¯¬·¼²©‹ƒ∞∞qΧονχλυσιον : ׫¨ °¨ ·«²§ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨§¬±·«¨ ³µ¨¶¨±·¶·∏§¼¬¶¦²±√¨ ±¬¨±·oµ¨¯¬¤¥¯¨o¤±§¦²∏¯§¥¨ ∏¶¨§
©²µ·«¨ ∏´¤¯¬·¼ ¦²±·µ²¯ ²©·«¨ ¬¨·µ¤¦·²© Η. περφορατυµ ¤±§©²µ·«¨ °²±¬·²µ¤±§¦²±·µ²¯ ²©·«¨ ³µ¨³¤µ¬±ª³µ²¦¨¶¶²©·«¨ ¬¨·µ¤¦·q
[ Κεψ ωορδσ] Ηψπεριχυµ περφορατυµ ; ¬¨·µ¤¦·¬²±~ ‹°≤ ©¬±ª¨µ³µ¬±· ≈责任编辑 刘  
≈收稿日期  ussx2sz2uu
≈基金项目  国家自然科学基金资助项目kv||zs|ttl ~国家中医药管理局科研基金资助项目ksw2sx°zsl
≈通讯作者  3肖小河 oר¯ }kstslyy|vvvuu o∞2°¤¬¯}³«¤µ°¤¦¼ vsu ƒ ¶²«∏q¦²°
板蓝根提取物中总有机酸和水杨酸含量测定方法研究
马 莉t ou o唐健元v o李祖伦u o赵艳玲t o廖庆文t o肖小河t 3 o赵祥军t o金 城t
kt1 解放军 vsu医院解放军中药研究所 o北京 tsssv| ~u1 成都中医药大学 o四川 成都 ytsszx ~
v1 国家食品药品监督管理局 药品审评中心 o北京 tsssv{l
≈摘要  目的 }建立板蓝根提取物的质量控制方法 ∀方法 }采用酸碱滴定法测定总有机酸含量 o并用反相高效
#ws{#
第 vt卷第 ts期
ussy年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt oŒ¶¶∏¨ ts
¤¼oussy
液相色谱法测定板蓝根提取物中水杨酸的含量 ∀结果 }酸碱滴定法测得总有机酸含量为 tv1s h o• ≥⁄ u1s h ~‹°≤
测得提取物中水杨酸的含量为 s1uu h o• ≥⁄t1y h ∀结论 }该方法能有效控制板蓝根提取物的质量 ∀
≈关键词  板蓝根 ~提取物 ~总有机酸 ~水杨酸 ~含量测定
≈中图分类号  • u{w1t ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussylts2s{sw2sv
板蓝根为十字花科菘蓝属植物菘蓝 Ισατισινδιγ2
οτιχα ƒ²µ·1的干燥根≈t  o其性寒味苦 o有清热解毒 !凉
血利咽的功效 ∀目前板蓝根的质量控制尚无行之有
效的评价指标 o5中国药典6ussx年版板蓝根项下以
精氨酸的薄层检识为定性依据 o没有明确的与药效
相关的质控成分≈u  ∀现代研究表明 o中药材的清热
解毒功效主要集中于其有效成分的抗内毒素作用和
抗病原微生物作用 ∀药理试验已证实≈v ow  o板蓝根
中有机酸类成分具有明显的抗菌 !抗内毒素作用 ∀
有报道以电位滴定法≈x 测定总有机酸含量 o毛细管
电泳法≈y 测定单体成分的含量 ∀酸碱滴定法 !高效
液色谱法作为有机酸类成分分析的常用手段 o简便 !
快捷 !普适性强 ∀本研究对板蓝根中有机酸类成分
进行分析 o采用酸碱滴定法测定总有机酸含量 o反相
高效液色谱法测定板蓝根提取物中水杨酸含量 o以
期为板蓝根提取物质量控制提供依据 ∀
1 仪器与试剂
„ª¬¯¨ ±·高效液相色谱仪k在线真空脱气机 !四元
梯度泵 !⁄„⁄检测器 !化学工作站l ~„∞tyv型电子分
析天平 ~ux °碱式滴定管 ∀水杨酸对照品k中国药
品生物制品检定所l ~酚酞指示剂k北京芳草医药化
工研制公司l ~水杨酸k北京化学试剂公司l ~甲醇 !乙
腈为色谱纯 ~水为重蒸水 ~其他试剂均为分析纯 ~实
验药材由解放军 vsu医院中药房提供 ∀
2 方法与结果
211 样品制备
取板蓝根药材加 ts倍量 zx h乙醇浸泡 tu «o回
流提取 u次 o每次 u «o滤过 o合并滤液 o减压浓缩至
相对密度 t1sxkys ε l o浓盐酸调 ³‹至 u ∗ v o用醋酸
乙酯萃取 v次 o少量水洗醋酸乙酯层 o减压回收醋酸
乙酯 o浓缩至稠膏 o干膏加适量水溶解 o滤过 o滤液加
至已预处理好的大孔吸附树脂柱k干膏和树脂的比
例为 tΒtxl上 o用水洗至洗脱液无色 o换用 ys h乙醇
洗至水杨酸检识为阴性 o合并中间洗脱液 o减压浓缩
得流浸膏 o低温真空干燥 ∀
212 酸碱滴定法测定总有机酸含量
21211 氢氧化钠溶液ks1t °²¯#ptl的配制 取适
量氢氧化钠加水振摇使溶解成饱和溶液 o冷却后 o静
置 o澄清后备用 ∀取澄清的氢氧化钠饱和溶液 x1y
°o加新沸放冷的蒸馏水使成 t sss °o摇匀 ∀
21212 供试品溶液的制备 精密称取板蓝根提取
物 s1w ªo置 xs °锥形瓶中 o无水乙醇溶解 o即得 ∀
21213 样品含量测定 供试品溶液中 o加入酚酞指
示液 u滴 o用标定好的氢氧化钠滴定液ks1szw | °²¯
#ptl滴定 o滴定至溶液显粉红色 ∀每 t °氢氧化
钠滴定液相当于 |1|ty °ª的水杨酸k≤z‹y’vl o总有
机酸以水杨酸计 ∀
213 反相高效液色谱法测定板蓝根总有机酸中水
杨酸的含量≈z 
21311 色谱条件 Žµ²°¤¶¬¯ ≤t{柱kw1y °° ≅ uxs
°° ox Λ°l ~流动相乙腈2t h醋酸水溶液kuxΒzxl o检
测波长 uux ±° o流速 t1s °#°¬±pt o柱温为室温 o理
论塔板数按水杨酸计算不低于 v sss ∀
21312 对照品溶液的配制 精密称定干燥的水杨
酸对照品 ts1y °ªotss °量瓶甲醇定容 o摇匀 o
s1wx Λ°微孔滤膜过滤 o即得对照品溶液 ∀
21313 供试品溶液的制备 精密称取板蓝根提取
物 s1ux ªo置 tss °量瓶中 o加甲醇溶解并稀释至
刻度 o摇匀 o精密量取上述溶液 t °o置 tss °量瓶
中 o甲醇稀释至刻度 o摇匀 o用 s1wx Λ°微孔滤膜滤
过 o取续滤液即为供试品溶液 ∀
21314 线性关系的考察 精密量取上述配制的对
照品溶液 s1ux ot1s ou1s ov1s ox1s oy1s °置 ts °
量瓶中 o无水乙醇稀释至刻度 o摇匀 os1wx Λ°微孔
滤膜过滤 o取上述溶液在选定的色谱条件下 o分别进
样 ts ˏo以峰面积为纵坐标 o含量为横坐标 o绘制标
准曲线 ∀回归方程 Ψ€ u zys Ξ n tsx1s , ρ€ s1||| { ∀
结果水杨酸在 s1suz ∗ s1yv Λª线性关系良好 ∀
21315 精密度试验 对同一对照品溶液 o重复进样
x次 o测定峰面积值 o• ≥⁄t1s h ∀
21316 重复性试验 取提取物粉末 x份 o适量 o精
密称定 o按上述方法制备供试品溶液 o测定计算含
量 o• ≥⁄t1u h ∀
21317 稳定性试验 对照品和供试品溶液 o按上
#xs{#
第 vt卷第 ts期
ussy年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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¤¼oussy
述方法每隔 u «测定 t次峰面积 o结果水杨酸对照
品溶液和供试品溶液在 tu «内稳定 ∀
21318 加样回收率试验 精密称取已知含量的样
品 x份 o每份约 s1tu ªo分别精密加入水杨酸对照品
溶液ks1tv °ª#°ptlu °o按/供试品溶液制备0项
下操作 o测定 o计算回收率 o结果见表 t ∀
表 t 水杨酸加样回收率
称样量
rª
样品中含量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
r h
平均值
r h
• ≥⁄
r h
s qtut y s quyz x s qxvu u tst q{
s qtt| x s quyu | s qxvt { tsv qw
s qtt| { s quyv y s qxu| v tsu qu tst q| t qt
s qtuw y s quzw t s qxv{ z tst q{
s qtuu x s quy| x s qxvs y tss qw
21319 样品含量测定 根据上述条件 o分别精密
吸取对照品与供试品溶液各 ts ˏo注入液相色谱
仪 o按外标法以峰面积计算 o对 v批样品的含量数据
如表 u ∀
表 u 板蓝根提取物中总有机酸及水杨酸含量 h
批次
总有机酸 水杨酸
含量 • ≥⁄ 含量 • ≥⁄
t tv qst s q|y s quv s q{z
u tu qxy t qu s quu t qv
v tu q|{ s q{ s quu s qxy
3 讨论
311 试验所采用的酸碱滴定法是较常用的一种酸
类物质含量测定方法 o方法简单易操作 o但由于中药
提取物颜色较深 o会干扰滴定终点的确定 o因而限制
了它的应用 ∀实验中样品经 ⁄tst大孔吸附树脂制
备 o提取物粉末颜色浅 o避免了滴定时颜色的干扰 o
结果准确 ∀
312 试验采用大孔吸附树脂制备样品 o上样液以澄
清为好 o以免堵塞树脂床 o影响吸附效果 ∀
313 有机酸在水中很容易发生电离 o产生多峰现
象 ∀为使有机酸尽可能以分子形式存在 o一般使用
酸性流动相来抑制有机酸的离解 ∀在流动相中加入
醋酸 o可使被测物保留时间适当 o分离度良好 o系统
稳定 ∀
≈参考文献 
≈t  高学敏 q中药学 q北京 }人民卫生出版社 ousss qw{x q
≈u  中国药典 q一部 qussx qtwu q
≈v  刘云海 o秦国伟 o方建国 o等 q板蓝根抗内毒素活性化学成分的筛
选 q医药导报 oussu outkul }zw q
≈w  ¬∏≠ ‹ o±¬± Š • o⁄¬±ª≥ ° oετ αλ. ≥·∏§¬¨¶²±¦«¨ °¬¦¤¯ ¦²±¶·¬·∏¨±·¶
©µ²° µ²²·²© ΙσατισινδιγοτιχαŒq Χηιν Τραδι Ηερβ ∆ρυγσ ,usst ovuktul }
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≈x  金 薇 o尤献民 o张曦弘 q电位滴定法测定复方板蓝根冲剂中
总有机酸的含量研究 q中医药学刊 oussw ouukvl }xzw q
≈y  范国荣 o胡晋红 o李博华 o等 q四倍体板蓝根中五种有机酸成分
的毛细管电泳分离分析 q中国药科大学学报 ousss ovtkul }ttt q
≈z  赵景婵 o郭治安 o常建华 o等 q有机酸类化合物的反相高效液相
色谱法的分离条件的研究 q色谱 ousst ot|kvl }uys q
∆ετερµινατιον οφ τοταλ οργανιχ αχιδσ ανδ σαλιχψλιχ αχιδ
ιν εξτραχτ οφ Ραδιξ Ισατιδισ
„ ¬tou oׄ‘Š ¬¤±2¼∏¤±v oŒ ∏2¯ ∏±u oŒ„’ ±¬±ª2º ±¨t o ÷Œ„’ ÷¬¤²2«¨ t o‹„’ ÷¬¤±ª2­∏±t oŒ‘≤«¨ ±ªt
(t1vsu Ηοσπιταλ οφ ΠΛΑ ανδ ΠΛΑΙνστιτυτε οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα , Βειϕινγ tsssv| , Χηινα ;
u1 ∆επαρτµεντ οφ Πηαρµαχψ, Χηενγδυ Υνιϖερσιτψ οφ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε , Χηενγδυ ytsszx , Χηινα ;
v1 Χεντερφορ ∆ρυγ Εϖαλυατιον , Στατε Φοοδ ανδ ∆ρυγ Αδµινιστρατιον , Βειϕινγ tsssv{ , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ §¨ √¨¯²³¤ ∏´¤±·¬·¤·¬√¨° ·¨«²§©²µ§¨·¨µ°¬±¤·¬²± ²©·«¨ ·²·¤¯ ²µª¤±¬¦¤¦¬§¶¤±§¶¤¯¬¦¼¦¯¬¦¤¦¬§¬±·«¨ ¬¨·µ¤¦·²©
•¤§¬¬Œ¶¤·¬§¬¶q Μετηοδ : ׫¨ ·²·¤¯ ²µª¤±¬¦¤¦¬§¶º µ¨¨ §¨·¨µ°¬±¨ §¥¼ ¤¦¬§2¥¤¶¨ ·¬·µ¤·¬²± ¤±§·«¨ ¶¤¯¬¦¼¯¬¦¤¦¬§º¤¶§¨·¨µ°¬±¨ §¥¼ ‹°≤ q Ρε2
συλτ : Œ·º¤¶¶«²º±·«¤·¦²±·¨±·¶²©·²·¤¯ ²µª¤±¬¦¤¦¬§¶¤±§¶¤¯¬¦¼¯¬¦¤¦¬§¬±·«¨ ¬¨·µ¤¦·²© •¤§¬¬Œ¶¤·¬§¬¶º µ¨¨ tv qs h ¤±§s quu h oµ¨¶³¨¦·¬√¨¯¼ q
Χονχλυσιον : ׫¨ ° ·¨«²§¦¤± ¦²±·µ²¯ ·«¨ ∏´¤¯¬·¼ ²©·«¬¶ ¬¨·µ¤¦·¨©©¨¦·¬√¨¯¼ ¤±§¤¦¦∏µ¤·¨¯¼ q
[ Κεψ ωορδσ] • ¤§¬¬Œ¶¤·¬§¬¶~ ¬¨·µ¤¦·~·²·¤¯ ²µª¤±¬¦¤¦¬§¶~¶¤¯¬¦¼¯¬¦¤¦¬§~§¨·¨µ°¬±¤·¬²±
≈责任编辑 刘  
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第 vt卷第 ts期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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