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HPLC测定牡丹皮中去甲基丹皮酚的含量



全 文 :鱼腥草中进行选育 ~如果以收获鱼腥草地下部分根
茎为主要目的 o则应从建瓯野生鱼腥草中进行选育 ∀
3q4 栽培鱼腥草与野生鱼腥草挥发油含量略有差
异 o达到入药要求 ≈v  ∀本试验中 o鱼腥草地上部分 !
地下部分和全株产量的比较 o除福建建阳栽培鱼腥
草比福建建瓯野生鱼腥草略高或相等外 o其他产地
栽培鱼腥草都比福建建瓯野生鱼腥草产量低 o二者
差异达到显著或极显著水平 ∀
≈参考文献  
≈t  聂仁强 o李泉森 o冉肩文 q不同产地鱼腥草的比较 ≈ q中国新
医药 oussvoukul}ztq
≈u  吴 卫 o郑有良 o马勇等 q鱼腥草不同居群产量和质量分析
≈ q中国中药杂志 oussvou{k{l}zt{q
≈v  齐迎春 o田国政 o胡 诚 q栽培与野生鱼腥草质量比较研究
≈ q特产研究 ot|||ow}uyq
≈责任编辑 张宁宁  
‹°≤测定牡丹皮中去甲基丹皮酚的含量
盛习锋 t o谭健兵 u o徐康平 u o李福双 u o黄 伟 u o谭桂山 u3
ktq湖南师范大学 医学院 o湖南 长沙 wtsstv~
uq中南大学 药学院 药物化学系 o湖南 长沙 wtsstvl
≈收稿日期   ussx2sz2tu
≈通讯作者   3 谭桂山 oר¯}kszvtluyxsv|x
牡丹皮为毛茛科植物牡丹 Παεονια συφφρυτιχοσα
„±§µq的干燥根皮 ≈t  ∀丹皮酚是牡丹皮的主要有效
成分之一 o具有抗炎 !抗氧化 !血小板凝聚抑制等药
理活性 ≈u  o一直作为牡丹皮药材的质量控制指标 ∀
研究表明 o牡丹皮中还有多种丹皮酚的结构类似物 o
这些苯乙酮类成分显示出强大的抗菌 !抗炎 !抗凝血
活性及增加巨噬细胞吞噬细胞的活性 ≈v  ∀作者在
对湖南邵东产牡丹皮进行系统化学成分研究时得到
几个苯乙酮类成分 o其中去甲丹皮酚的收率明显高
于文献报道的 sqssvh ≈w  o达到 s1txh ∀作者认为
有必要对牡丹皮药材中的去甲丹皮酚的含量进行分
析 o为牡丹皮的综合利用与开发提供依据 ∀
牡丹皮中丹皮酚的含量测定方法 o文献已有报
道 ≈xoy  o但去甲丹皮酚的含量测定分析尚未见文献
报道 ∀本实验首次建立了测定牡丹皮中去甲丹皮酚
kµ¨¶¤¦¨·²³«¨ ±²± l¨的高效液相色谱法 o并用建立的
分析方法 o分析测定了不同产地的牡丹皮药材中去
甲丹皮酚的含量 ∀
1 仪器 !样品和试剂
美国 „ª¬¯¨ ±·ttss型高效液相色谱仪 k低压四
元泵 o自动进样器 o柱温箱 o二极管阵列检测器 o
≤«¨ °≥·¤·¬²±¶色谱工作站 l∀
共收集 v个产地 v批牡丹皮样品 ∀按 5中国药
典 6usss年版一部牡丹皮项下 o经中南大学药学院
生药教研室李劲平博士鉴定 ov批样品均为毛茛科
植物牡丹 Π. συφφρυτιχοσα的干燥根皮 ∀对照品自湖
南产牡丹皮中提取分离得到 o经 ˜∂ oŒ• ot ‹ 2‘ • o
tv ≤ 2‘ •鉴定结构 o‹°≤分析 oth自身对照法计算
纯度均大于 ||1xh ∀乙腈和甲醇为色谱纯 ~水为双
蒸水并经 s1wx Λ°水系滤膜过滤 ~磷酸和 |xh乙醇
为分析纯 ∀
2 方法与结果
2q1 色谱条件 Žµ²°¤¶¬¯ ’⁄≥2tkw1y °° ≅ uss
°°ox Λ°l色谱柱 o流动相乙腈 2磷酸水溶液 k调 ³‹
v1slo梯度洗脱 }s ∗ x °¬±oxh ∗ twh乙腈 ox1st ∗
vs °¬±otwh ∗ ush 乙腈 ovs1st ∗ ws °¬±oush ∗
vxh乙腈 ~流速 t1s °# °¬±pt o检测波长 uzx ±°o
柱温 vs ε ∀采用外标峰面积法计算含量 o理论塔板
数均大于 tsw o对称因子均在 s1|x ∗ t1sxo与相邻杂
质峰的分离度均大于 u1so且经 ⁄„⁄进行峰纯度检
测 o表明均为单一成分峰 ∀
2q2 对照品溶液的制备 精密称取去甲丹皮酚
ts1s{ °ª置 xs °量瓶中 o甲醇超声溶解并稀释至
刻度 o摇匀制得对照品溶液 ∀
2q3 标准曲线的绘制 精密吸取对照品溶液 uo
#xvy#
第 vu卷第 z期
ussz年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ z
„³µ¬¯o ussz
u1xoxotsotxous ˏ进样分析 ∀按 ‹°≤条件测定
峰面积积分值 o重复 v次 o取峰面积平均值 o以峰面
积 kΨl为纵坐标 o以进样量 kΞl为横坐标 o进行回归
计算 o得方程 Ψ € w1sw ≅ tsv Ξ p {x1toρ€ s1||| |zo
表明在 s1ws ∗ w1s Λª有良好的线性关系 ∀
2q4 精密度试验和稳定性试验 精密吸取对照品
溶液 x ˏ进样 o在上述色谱条件下连续进行测定 o
得去甲丹皮酚面积 • ≥⁄ s1u{h kν €xlo表明该色谱
系统具有较好的精密度 ∀取同一批样品溶液 o分别
在 souowoyo{otuouwovyow{ «后测定峰面积 o• ≥⁄
t1{h o表明样品溶液在所考察时间内基本稳定 ∀
2q5 回收率测定 精密称定已知含量的牡丹皮药
材粉末 x份 o每份约 s1x ªo精密加入一定量的去甲
丹皮酚对照品 o按样品的制备方法制备及上述色谱
条件测定 o计算 ∀结果见表 t∀
2q6 重复性试验 精密称取同一批号牡丹皮药材
粗粉 x份 o按样品的制备方法制备 o分别测定其中去
甲丹皮酚的含量 o• ≥⁄ t1|h o表明重复性较好 ∀
表 t 牡丹皮中去甲丹皮酚的加样回收率 kν € xl
样品中含量
r°ª
加入量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
rh
平均值
rh
• ≥⁄
rh
t1ww t1w{ u1|s |{1y
t1w{ t1xt v1sx tsw1s
t1wu t1xy v1st tst1| tss1{ u1{
t1wu t1wt u1z| |z1u
t1vy t1x| u1|| tsu1x
2q7 取牡丹皮药材干燥粗粉约 s1x ªo精密称定 o加
入 |xh乙醇 ux °o索氏提取 ts «o溶液浓缩至干浸
膏 o甲醇超声溶解 o转移至 ts °量瓶中 o并稀释至
刻度 o摇匀 o用微孔滤膜 ks1wx Λ°l滤过 o取续滤液
作为供试品溶液 o进样 x ˏo在上述色谱条件下进
行测定 o根据回归方程计算 o结果湖南邵东 !安徽亳
州 !四川垫江干品中去甲丹皮酚的质量分数分别为
s1u{h os1tyh os1t{h ∀色谱图见图 t∀
3 讨论
3q1 经过紫外扫描去甲丹皮酚在 uzx ±°有最大吸
收 o检测波长选择为 uzx ±°∀
3q2 对牡丹皮干燥药材设计正交试验考察提取条

图 t 样品的 ‹ °≤图
„q对照品 ~…q样品 ~tq去甲丹皮酚
件 o考虑项目为溶剂 k水 !乙醇 !丙酮 l!粉碎度 k切
片 !粗粉 !中粉 l!提取方式 k回流 !超声 !索氏提取 l!
提取时间 k{otsotu «l∀结果表明最佳提取条件为
|xh乙醇索氏提取 ts «∀
3q3 考察多个溶剂系统 o以乙腈 2水系统分离效果
较好 o但峰形脱尾 ∀应用 ‹v °’w调节 ³‹ v1s时峰形
和分离度得到有效改善 o柱效显著提高 o峰形与分离
度达到最佳 ~采用等度洗脱时去甲丹皮酚出峰拖后
kτ• Υ xs °¬±lo故考虑应用梯度洗脱 ~最终确定以乙
腈 2磷酸水溶液 k³‹ v1sl为流动相进行梯度洗脱 ∀
3q4 试验结果表明 o不同产地牡丹皮中去甲丹皮酚
的含量存在较大差异 ∀以湖南邵东产牡丹皮中去甲
丹皮酚含量最高 ∀安徽亳州 !四川垫江为传统的牡
丹皮道地药材产地 o作者的试验结果也可能提示湖
南邵东的牡丹皮药材有其独特性 ∀因此 o对牡丹皮
中去甲丹皮酚进行含量测定 o有益于完善牡丹皮药
材的质量评价体系 ∀
≈参考文献  
≈t  中国药典 ≈≥ q一部 qusss}t|vq
≈u  章灵华 o肖培根 q丹皮酚的药理与临床研究进展 ≈ q中国中西
医结合杂志 ot||yotykvl}t{zq
≈v  ¬± ‹ ≤o ≤ «¨ ± ‹  q °«¼·²¦«¨ °¬¦¤¯ ¤±§³«¤µ°¤¦²¯²ª¬¦¤¯ ¶·∏§¼ ²±
Παεονια συφφρυτιχοσα k´ l) ) ) ¬¶²¯¤·¬²± ²©¤¦¨·²³«¨ ±²± ¶¨≈  1中
华药学杂志 o t||towvkul}tzxq
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≈x  高鲁霞 o梁素谦 o王 苓 o等 q牡丹皮中丹皮酚和芍药苷的反相
薄层色谱 ≈ q山东中医学院学报 ot||xot|kwl}uyyq
≈y  房杏春 q‹°≤法测定丹皮中丹皮酚的含量 ≈ q中国药科大学
学报 ot|{|ouskul}ts|q
≈责任编辑 张宁宁  
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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