全 文 ：半夏的 ＨＰＬＣ指纹图谱研究
戎其月１，伍 庆２，童 红３，梁小洁２，邹 晶２
（１．扬州中医学院，江苏 扬州 ２２５０００；
２．贵州师范大学 分析测试中心，贵州 贵阳 ５５０００１；
３．贵州省药品检验所，贵州 贵阳 ５５０００４）
［收稿日期］ ２００７１０１６
［基金项目］ 贵州省中药现代化项目［黔科合农字（２００５）５０３４］
［通讯作者］ 伍庆，Ｔｅｌ：１３９８４０２９７３５，Ｅｍａｉｌ：ｗｑ０８５１＠１２６．
ｃｏｍ
半夏Ｐｉｎｅｌｉａｔｅｒｎａｔｅ（ｔｈｕｍｂ）Ｂｒｅｉｔ为天南星科植
物的干燥块茎，具有燥湿化痰，降逆止呕，消痞散结
之功效［１］，主要含鸟苷、腺苷、胆碱、盐酸麻黄碱等
化学成分 ［２，３］，当前对半夏的研究主要是含量测定
和以氨基酸类成分为主的指纹图谱的研究［４，５］，但
由于药材各产地生境不同，其化学成分出现差异，为
更好地控制其生产的质量，本研究根据鸟苷具有改
善心脑循环，防止心率失常等作用［４］，选其作为参
照物，采用ＨＰＬＣ确定半夏药材的指纹图谱，作为半
夏药材的质量控制方法。
１ 仪器与试药
１．１ 仪器
安捷伦 １１００高效液相色谱仪，紫外检测器
（ＤＡＤ），ＨＰＣｈｅｎｓｔａｔｉｏｎＳｙｓｔｅｍ色谱工作站，中药色
谱指纹图谱相似度评价系统；ＣＸ－３００型超声清洗
机（中国北京医药设备厂出品）；电子分析天平
（ＡＥＧ－２２０，岛津）。
１．２ 试药
鸟苷对照品购于中科院上海生化研究所，
纯度＞９９％；甲醇为色谱纯，水为重蒸水，其他试剂
均为色谱纯。半夏样品于２００４年９～１１月采集于
贵州省赫章河镇（１）、贵州省六盘水（２）、贵州省清
镇市（３）、贵州省威宁县（４）、贵州省遵义市（５）、贵
州省开阳县（６）、四川长寿县（７）、贵州省习水（８）、
贵州省赫章县（９）、贵州省平坝（１０），所有样品均经
贵阳中医学院药学系陈德媛研究员鉴定。
２ 方法与结果
２．１ 对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的
鸟苷对照品用３０％的甲醇制成０６００ｍｇ·ｍＬ－１对
照品储备液。精密吸取２ｍＬ鸟苷对照品储备液于
５０ｍＬ量瓶中，用３０％的甲醇溶解并稀释至刻度，即
得。
２．２ 供试品溶液的制备 精密称取半夏药材（粉
碎，过６０目筛）１０ｇ，置５０ｍＬ锥形瓶中，精密加入
３０％甲醇，称量，超声提取３０ｍｉｎ，冷却后补足失重，
过滤，滤液过０４５μｍ微孔滤膜，即得。
２．３ 色谱条件 流动相洗脱程序如表１所示，检测
波长为２６０ｎｍ，流速为１ｍＬ·ｍｉｎ－１柱温为３０℃，
进样量２０μＬ，洗脱时间为６５ｍｉｎ。
表１ 流动相洗脱程序
时间／ｍｉｎ ００１％磷酸水溶液／％ 乙腈／％
０ １００ ０
１５ １００ ０
３５ ９４５ ５５
５８ ６４ ３６
６５ ６４ ３６
２．４ 精密度试验 称取河镇地区半夏药材（粉碎，
过６０目筛）１０ｇ，精密称定，按２．１项下方法制备
供试品溶液，按２．３项下色谱条件进行测定，连续进
样６次，测定并记录色谱图。结果显示各色谱峰相
对峰面积和相对保留时间的 ＲＳＤ分别为０１３％ ～
１０８％和００９３％～０１％，表明仪器的精密度符合
色谱指纹图谱测定要求。
２．５ 稳定性试验 称取河镇地区半夏药材（粉碎，过
６０目筛）１０ｇ，精密称定，按２．１项下方法制备供试
品溶液，按２．３项下色谱条件分别在０，２，４，８，１６，２４ｈ
进样测定。结果表明各主要色谱峰相对峰面积和相
对保留时间的ＲＳＤ分别为０１８％～４８４％和０２３％
～２２７％，说明样品在２４ｈ内基本稳定。
２．６ 重复性试验 称取河镇地区半夏药材（粉碎，
过６０目筛）１０ｇ，精密称定，按２．１项下方法制备６
份供试品溶液，按２．３项下色谱条件分别进行测定，
记录色谱图。选择图２中的主要色谱峰１～１１，以
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第３３卷第１１期
２００８年６月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １１
Ｊｕｎｅ，２００８
色谱图中的强色谱峰５（鸟苷峰）为 Ｓ峰，计算相对
峰面积和相对保留时间，结果显示各色谱峰相对峰
面积和相对保留时间的 ＲＳＤ小于３％，表明测定方
法符合ＨＰＬＣ色谱指纹图谱测定要求。
２．７ 结果 １０批具有代表性的半夏药材的指纹图
谱见图１，２。
图１ 不同产地半夏药材的指纹图谱
图２ １０批药材指纹色谱图的共有模式图
由表２可见，１０批药材与对照指纹图谱的相似
性较好，在０８７８～０９６５，说明得到的共有模式图
具有代表性，可反映半夏药材的指纹特征。
３ 讨论
鸟苷［６］，可用水、不同浓度的甲醇或乙醇进行
提取，乙醇对ＨＰＬＣ有溶剂干扰，水提取液过滤困
表２ １０批药材相似性分析结果
Ｓ１ Ｓ２ Ｓ３ Ｓ４ Ｓ５ Ｓ６ Ｓ７ Ｓ８ Ｓ９ Ｓ１０ Ｒ
Ｓ１ １０００ ０８６８ ０８６４ ０７６３ ０９８９ ０８６８ ０８６４ ０７６３ ０９８５ ０７６３ ０８９９
Ｓ２ ０８６８ １０００ ０８８３ ０９０２ ０８８３ ０７８３ ０８８３ ０９０２ ０８６１ ０９０２ ０９６５
Ｓ３ ０８６４ ０８８３ １０００ ０８４２ ０８６７ ０８８３ ０８８７ ０８４２ ０８５５ ０８４２ ０９２１
Ｓ４ ０７６３ ０９０２ ０８４２ １０００ ０７６８ ０９０２ ０８４２ ０８９３ ０７３４ ０９０３ ０９３３
Ｓ５ ０９８９ ０８８３ ０８６７ ０７６８ １０００ ０８８３ ０８６７ ０７６８ ０９９６ ０７６８ ０９０３
Ｓ６ ０８６８ ０７８３ ０８８３ ０９０２ ０８８３ １０００ ０８８３ ０９０２ ０８６１ ０９０２ ０９６５
Ｓ７ ０８６４ ０８８３ ０８８７ ０８４２ ０８６７ ０８８３ １０００ ０８４２ ０８５５ ０８４２ ０９２１
Ｓ８ ０７６３ ０９０２ ０８４２ ０８９３ ０７６８ ０９０２ ０８４２ １０００ ０７３４ ０９１１ ０９３３
Ｓ９ ０９８５ ０８６１ ０８５５ ０７３４ ０９９６ ０８６１ ０８５５ ０７３４ １０００ ０７３４ ０８７８
Ｓ１０ ０７６３ ０９０２ ０８４２ ０９０３ ０７６８ ０９０２ ０８４２ ０９１１ ０７３４ １０００ ０９３３
Ｒ ０８９９ ０９６５ ０９２１ ０９３３ ０９０３ ０９６５ ０９２１ ０９３３ ０８７８ ０９３３ １０００
难，而３０％甲醇超声提取效果最好。
利用ＤＡＤ二级管阵列检测器的全波长扫描功
能对供试液的最大吸收波长进行选择，并在二维图
谱中选择了 ２２０，２４５，２５４，２６０，２７０，２８０，２８９，３００，
３１０ｎｍ９个波长进行测定。结果表明，在波长２６０
ｎｍ时出现的色谱峰多且吸收强。故选择２６０ｎｍ作
为半夏ＨＰＬＣ指纹图谱的检测波长。
本研究参照原国家药品监督管理局颁布的关于
“中药注射剂指纹图谱研究的技术要求（暂行）”，采
用ＨＰＬＣ法对半夏药材的指纹图谱进行了研究。结
果表明，所建立的方法操作简单、重复性好，为半夏
药材的质量评价提供了参考。
从不同产地的半夏药材的指纹图谱中可以看
出，虽然都出现了相应的特征性成分峰，但峰面积不
相同，不同产地的药材的指纹图谱有一定的差异。
这说明坏境因子对药材质量会产生一定的影响，这
为以后研究环境因子与药材质量相关性提供了一定
的参考基础。
［参考文献］
［１］ 中国药典［Ｓ］．一部．２００５：８９．
［２］ 赵 岚．半夏培养物与人工栽培半夏生物碱类成分对比分析
［Ｊ］．中国中药杂志，１９９０，１５（３）：１８．
［３］ 楼之岑，秦 波．常用中药材品种整理和质量研究（北方篇）［Ｍ］．
北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，１９９５：９．
［４］ 赵 杨，靳凤云，伍 庆，等．高效液相色谱法测定贵州不同产
地半夏药材中鸟苷和腺苷的含量［Ｊ］．时珍国医国药，２００７，１８
（１）：２３．
［５］ 师健友，周 立，王 敏，等．半夏药材生品及其炮制品指纹图
谱的比较研究［Ｊ］．现代生物医学研究进展，２００７，７（３）：３７０．
［６］ 徐文豪，薛 智，马建民．冬虫夏草的水溶性成分—核苷类化
合物的研究［Ｊ］．中药通报，１９８８，１３（４）：２２６．
［责任编辑 王亚君］
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