全 文 ：ｂｕｆｅｒｓｏｌｕｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＴｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｃｕｒｃｕｍｉｎｂｙＨＰＬＣｗｈｅｎａｄｄｅｄｃｕｒｃｕｍｉｎ，ｄｅｍｅｔｈｏｘｙｃｕｒｃｕｍｉｎａｎｄｂｉｓｄｅｍｅ
ｔｈｏｘｙｃｕｒｃｕｍｉｎｉｎｔｏｔｈｅｂｕｆｅｒｓｏｌｕｔｉｏｎｔｈｅｅｑｕａｔｉｏｎｏｆｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅｓｅｑｕｅｎｃｅｏｆｓｔａｂｉｌｉｔｙａｒｅｂｉｓｄｅｍｅｔｈｏｘｙ
ｃｕｒｃｕｍｉｎ≥ｄｅｍｅｔｈｏｘｙｃｕｒｃｕｍｉｎ≥ｃｕｒｃｕｍｉｎａｔｔｈｅｓａｍｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｄｅｍｅｔｈｏｘｙｃｕｒｃｕｍｉｎｃａｎｓｔａｂｉｌｉｚｅｃｕｒｃｕｍｉｎｍｏｒｅ
ｓｔｒｏｎｇｔｈａｎｔｈｅｏｔｈｅｒｓ．Ｔｈｅｄｅｍｅｔｈｏｘｙｃｕｒｃｕｍｉｎｉｓａｎａｔｕｒｅｓｔａｂｉｌｉｚｉｎｇａｇｅｎｔｆｏｒｃｕｒｃｕｍｉｎ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｃｕｒｃｕｍｉｎ；ｄｅｍｅｔｈｏｘｙｃｕｒｃｕｍｉｎ；ｂｉｓｄｅｍｅｔｈｏｘｙｃｕｒｃｕｍｉｎ；ｓｔａｂｉｌｉｔｙ；ＨＰＬＣ
［责任编辑 鲍 雷］
［收稿日期］ ２００８０３１８
［基金项目］ 国家自然科学基金项目（３０６７２５８５）
［通讯作者］ 张玉杰，Ｔｅｌ：（０１０）８４７３８６１８，Ｆａｘ：（０１０）８４７３８６
１１，Ｅｍａｉｌ：ｚｈｙｊ２２７＠１２６．ｃｏｍ
黄连吴茱萸药对配伍变化对黄连生物碱煎出
及其对大鼠小肠吸收的影响
孙万晶１，张玉杰１，姚 南２，姜 昊１，汪 祺１
（１．北京中医药大学 中药学院，北京 １００１０２；
２．兰州大学 第一医院，甘肃 兰州 ７３００００）
［摘要］ 目的：研究吴茱萸对黄连生物碱成分煎出和的大鼠小肠吸收的影响，探讨黄连吴茱萸药对配伍的机
理。方法：以ＨＰＬＣ测定黄连生物碱成分含量，采用大鼠非翻转肠囊实验和翻转肠囊实验，考察吴茱萸对黄连生物
碱小肠吸收和转运的影响。结果：随吴茱萸配伍比例的增加黄连煎液中生物碱成分含量呈下降的趋势，黄连配伍
吴茱萸后可使小肠吸收黄连生物碱作用得到改善，当黄连与吴茱萸配比为６∶１时，黄连生物碱成分的小肠吸收最
为明显。结论：黄连吴茱萸配比为６∶１时，吴茱萸促进黄连生物碱的小肠吸收最强，小肠吸收是黄连吴茱萸配伍作
用的重要环节。
［关键词］ 黄连吴茱萸药对配伍；小肠吸收；黄连生物碱
［中图分类号］Ｒ２８４．１ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）２２２６１４０３
黄连为常用中药，历代多以药对配伍形式入药。
黄连配伍吴茱萸以左金丸（６∶１）最为著名，二药一
主一辅，一寒一热，相反相成，以黄连为主，主要用于
去肝火，用治肝火盛之胁痛、呕吐吞酸诸症。现代研
究表明左金丸中生物碱是其发挥治疗作用的主要活
性部位［１］，目前的研究多集中在配伍对黄连、吴茱
萸生物碱含量及药效的影响［２４］，尚未见到有关配伍
后体内相互作用方面的研究报道。已有研究表明黄
连中的小檗碱及其衍生物是肠道 Ｐ糖蛋白的底物，
其口服生物利用度低下的原因主要与肠道 Ｐ糖蛋
白外排作用有关［５］。因此，作者试图通过二者在肠
道内吸收可能存在的相互作用，探讨黄连与吴茱萸
配伍的机理。
１ 材料
美国 Ａｇｉｌｅｎｔ１１００高效液相色谱仪，包括四元
梯度洗脱系统，ＤＡＤ检测器，Ａｇｉｌｅｎｔ色谱工作站；
ＥＲ－１８２Ａ型精密电子天平（日本 Ａ＆Ｄ公司）；Ｔ－
５００型电子天平（常熟双杰测试仪器厂）；ＣＵ４２０型
电热恒温水箱（上海一恒科学仪器有限公司）。黄
连、吴茱萸药材饮片为市售，经北京中医药大学中药
学院中药生药系张贵君教授鉴定分别为毛茛科植物
黄连ＣｏｐｔｉｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓＦｒａｎｃｈＬ．的干燥根茎和芸香科
植物吴茱萸Ｅｖｏｄｉａｒｕｔａｅｃａｒｐａ（Ｊｕｓｓ．）Ｂｅｎｔｈ．的干燥
将近成熟果实；小檗碱、巴马丁对照品（中国药品生
物制品检定所，批号分别为１１０７１３２２００２１８，１１０７３２
２００４０６，供含量测定用）。乙腈为色谱纯，水为超纯
水，其他试剂均为分析纯。
ＳＤ大鼠，雄性，（２５０±２０）ｇ（北京维通利华实
验动物技术有限公司），动物饲养生产合格证号
ＳＣＸＫ（京）２００２００３。
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第３３卷第２２期
２００８年１１月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ ２２
Ｎｏｖｅｍｂｅｒ，２００８
２ 方法
色谱条件 ＭｅｒｃｋＰｕｒｏｓｐｈｅｒｓｔａｒ，Ｃ１８色谱柱（４６
ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）；流动相乙腈水磷酸二氢钾
十二烷基磺酸钠（１００∶１００∶０６８∶０３４）；流速 ０８
ｍＬ·ｍｉｎ－１；柱温３０℃；检测波长３４６ｎｍ。
供试溶液的制备 分别按不同量黄连吴茱萸比
例（６∶０，６∶１，６∶２，６∶３，６∶６）称取黄连、吴茱萸药材
饮片，加８倍量水浸泡３０ｍｉｎ，煎煮６０ｍｉｎ，趁热滤
过，滤液加水定容至１００ｍＬ量瓶内，作为不同比例
煎煮液。另外取５ｍＬ煎煮液分别加入 Ｒｉｎｇｅｒ＇ｓ液
稀释至１０ｍＬ量瓶中作为黄连吴茱萸供试液（以下
分别简称为黄连对照、黄吴６１、黄吴６２、黄吴６３、
黄吴６６）。
黄连生物碱大鼠小肠转运实验［６］实验前将雄
性ＳＤ大鼠（２５０±１０）ｇ禁食２４ｈ，待用时将大鼠脱
颈椎处死，打开腹腔，从 Ｔｒｅｉｔｚ韧带以下５ｃｍ取小
肠肠段４０ｃｍ，取出后用 Ｒｉｎｇｅｒ＇ｓ液洗净小肠黏膜
侧，直至无污物，将其剪成５ｃｍ的肠段，备用。将上
述小肠段的一端结扎，根据实验设计，肠囊内注入
０４ｍＬ各供试药液，将其浸泡于２０ｍＬＲｉｎｇｅｒ＇ｓ液
中，将其置于３７℃恒温水浴中，分别在不同时间点
（３０，６０，９０，１２０，１５０ｍｉｎ）于肠囊外取样０３ｍＬ，然
后补充０３ｍＬ空白 Ｒｉｎｇｅｒ＇ｓ液，所取样品置 ＥＰ管
中，按前述色谱条件，进样测定，记录各黄连生物碱
的峰面积，按外标法计算小檗碱和巴马丁含量（因
未能购得黄连碱对照品，黄连碱色谱峰根据文献资
料进行定性，黄连碱含量直接采用色谱峰面积计
算）。
数据处理 吸收速率的计算，将测得的各时间
点肠囊外渗透液中黄连生物碱浓度Ｃ（或面积Ａ）与
时间ｔ进行线性回归，求得供试液中黄连各生物碱
的肠囊吸收速率（Ｋ）。
３ 结果
３．１ 黄连吴茱萸配伍对黄连生物碱成分煎出量的
影响 分别对不同配伍比例黄连吴茱萸供试液中小
檗碱、巴马丁、黄连碱进行含量测定，结果见表１。
３．２ 吴茱萸对黄连生物碱小肠转运的影响 测定
不同比例供试液在不同时间点肠囊外介质中小檗
碱、巴马丁及黄连碱的浓度，绘制肠囊转运曲线，结
果吴茱萸对黄连中小檗碱、巴马丁及黄连碱小肠转
运影响的时间过程分别见图１～３。以上述不同时
间点肠囊外介质中小檗碱在 ｔ时间浓度与时间 ｔ进
表１ 黄连吴茱萸配伍对黄连生物碱成分煎出量的影响
供试液
小檗碱
／ｇ·Ｌ－１
巴马丁
／ｇ·Ｌ－１
黄连碱
／Ａ·μＬ－１
黄连对照 ０８５５１ ０１３５１ ３８６００
黄吴６１ ０４８８５ ００７６２ ２４０７５
黄吴６２ ０３４０５ ００５１９ １７６６０
黄吴６３ ０３８０９ ００５７４ １８２９０
黄吴６６ ０２９４８ ００４７４ １２２８０
行线性回归，得方程 Ｃ＝Ａ＋Ｋｔ，可以求得不同配比
供试液中小檗碱、巴马丁及黄连碱的肠囊吸收速率
（Ｋ）。结果见表２～４。
图１ 吴茱萸对黄连中小檗碱小肠转运影响
的时间过程（ｎ＝４）
图２ 吴茱萸对黄连中巴马丁小肠转运影响的
时间过程（ｎ＝４）
图３ 吴茱萸对黄连中黄连碱小肠转运影响的时间过程
（ｎ＝４）
４ 讨论
本实验首先考察黄连吴茱萸配伍对黄连生物碱
成分煎出量的影响，试验结果表明：随吴茱萸在配伍
比例中的增加，黄连生物碱成分含量有下降的趋势；
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第３３卷第２２期
２００８年１１月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ ２２
Ｎｏｖｅｍｂｅｒ，２００８
表２ 吴茱萸对黄连中小檗碱小肠转运速率（Ｋ）的影响
（ｎ＝４）
供试液 Ｋ／μｇ·ｍＬ－１·ｍｉｎ－１
黄连对照 ００４８９±００２３９
黄吴６１ ００６３２±００１８５
黄吴６２ ００１２６±０００５５
黄吴６３ ００２１９±０００５３
黄吴６６ ００１２５±０００５２
表３ 吴茱萸对黄连中巴马丁小肠转运速率（Ｋ）的影响
（ｎ＝４）
供试液 Ｋ／μｇ·ｍＬ－１·ｍｉｎ－１
黄连对照 ０００７１±０００２７
黄吴６１ ０００８３±０００１８
黄吴６２ ０００２１±００００７
黄吴６３ ０００３３±００００６
黄吴６６ ０００２４±００００７
表４ 吴茱萸对黄连中黄连碱肠道转运速率（Ｋ）的影响
（ｎ＝４）
供试液 Ｋ／Ａ·ｍＬ－１·ｍｉｎ－１
黄连对照 １３４２９７±８５５３５
黄吴６１ ２１８４８０±６３３２９
黄吴６２ ４３８００±１８８０９
黄吴６３ ７６９００±１４２０７
黄吴６６ ５３６８３±１６４６６
配比时小檗碱、巴马丁、黄连碱的小肠吸收浓度和吸
收速率高于其他各组。通过以上２个实验可见：尽
管黄连生物碱化学成分含量随吴茱萸配比增加有下
降趋势，但其小肠转运浓度和转运速率却是（６∶１）
组最高，这一结论与左金丸的药效实验结果比较吻
合［１］，说明左金丸中黄连、吴茱萸的配伍比例具有
合理性。因此初步推断：黄连吴茱萸配伍原理可能
在于小肠吸收层面，吴茱萸在黄连吴茱萸６∶１时促
进了黄连生物碱的小肠吸收，而且，在此比例时有利
于黄连生物碱的煎出。
［参考文献］
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验研究［Ｊ］．四川生理科学杂志，２００１，２３（３）：１２７．
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［３］ 李盛青，黄兆胜，粱进权，等．黄连与吴茱萸的不同配伍比例对
热证大鼠ＩＬ２６，ＩＬ２８和ＴＳＨ的影响［Ｊ］．广西中医药，２００１，２４
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［４］ 王浴铭，张君增，朱风云，等．黄连配伍吴茱萸对黄连中主要化
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ｔｒａｎｓｐｏｒｔｏｆｂｅｒｂｅｒｉｎｅａｃｒｏｓｓＣａｃｏ２ｃｅｌｍｏｎｏｌａｙｅｒｓ［Ｊ］．ＪＰｈａｒｍ
Ｓｃｉ，２００２，９１（１２）：２６１４．
［６］ ＨＧ沃格尔，ＷＨ沃格尔．药理学实验指南———新药发现和药
理学评价［Ｍ］．北京：科学出版社，２００１：６６１．
Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｎｒａｔｉｎｔｅｓｔｉｎａｌａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｏｆｈｕａｎｇｌｉａｎａｌｋａｌｉｓａｆｔｅｒｍａｔｃｈｐａｉｒｏｆ
ｈｕａｎｇｌｉａｎｗｕｚｈｕｙｕ
ＳＵＮＷａｎｊｉｎｇ，ＺＨＡＮＧＹｕｊｉｅ，ＹＡＯＮａｎ，ＪＩＡＮＧＨａｏ，ＷＡＮＧＱｉ
（１．ＳｃｈｏｏｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａｌＭｅｄｉｃａ，ＢｅｉｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００１０２，Ｃｈｉｎａ；
２．ＦｉｒｓｔＨｏｓｐｉｔａｌ，ＬａｎｚｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｌａｎｚｈｏｕ７３００００，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｒｅｓｅａｒｃｈｅｆｅｃｔｏｆＷｕｚｈｕｙｕｏｎＨｕａｎｇｌｉａｎｉｎｔｅｓｔｉｎａｌａｂｓｏｒｐｔｉｏｎａｎｄｔｏｐｒｏｖｉｄｅｓｏｍｅｂａｓｉｃｐｒｉｎｃｉｐｌｅｏｆ
ｍａｔｃｈｐａｉｒｏｆｈｕａｎｇｌｉａｎｒｏｕｇｕｉ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｈｅｒａｔｅｖｅｒｔｅｄｇｕｔｓａｃｍｅｔｈｏｄａｓｗｅｌａｓｎｏｎｅｖｅｒｔｅｄｇｕｔｓａｃｍｅｔｈｏｄｗａｓａｐｐｌｉｅｄｔｏｉｎｖｅｓｔｉ
ｇａｔｅｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆＷｕｚｈｕｙｕｏｎＨｕａｎｇｌｉａｎｉｎｔｅｓｔｉｎａｌａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｅａｃｈａｌｋａｌｉｓｉｎＨｕａｎｇｌｉａｎｗａｓｄｅｃｒｅａｓｉｎｇ
ｗｉｔｈｔｈｅｃｏｍｐｔｉｂａｌｅｒａｔｉｏｎｉｎｃｒｅａｓｅ，ａｎｄｔｈｅｉｎｔｅｓｔｉｎａｌａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｈａｄｂｅｅｎｉｍｐｒｏｖｅｄｉｎｓｏｍｅｄｅｇｒｅｅ．ＴｈｅｉｎｔｅｓｔｉｎａｌａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｏｆＨｕａｎ
ｇｌｉａｎａｌｋａｌｉｓｒｅａｃｈｅｄｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔｌｅｖｅｌｗｈｅｎｍａｔｃｈｐａｉｒｒａｔｉｏｎｏｆｈｕａｎｇＬｉａｎｒｏｕｇｕｉｗａｓ６∶１．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｃｈｅｍｉｃａｌｒｅａｃｔｉｏｎｉｎｔｈｅ
ｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｉｎｔｅｓｔｉｎａｌａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｏｆｈｕａｎｇｌｉａｎａｌｋａｌｉｓｗｅｒｅｔｈｅｋｅｙｆａｃｔｏｒｓｏｆｍａｔｃｈｐａｉｒｏｆｈｕａｎｇｌｉａｎｗｕｚｈｕｙｕ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｍａｔｃｈｐａｉｒｏｆｈｕａｎｇｌｉａｎｗｕｚｈｕｙｕ；ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ；ｈｕａｎｇｌｉａｎａｌｋａｌｉｓ
［责任编辑 鲍 雷］
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第３３卷第２２期
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ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
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Ｎｏｖｅｍｂｅｒ，２００８