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HPLC测定毛茛属几种植物中小麦黄素的含量



全 文 :#研究报告 #
‹°≤测定毛茛属几种植物中小麦黄素的含量
董 南 3 o王海燕 o陈良龙 o罗兴发
k贵州大学 理学院 o贵州 贵阳 xxssuxl
≈收稿日期   ussy2s|2ut
≈通讯作者   3 董南 oר¯}ks{xtlvyust{yo∞2°¤¬¯}¶¦¬±§²±ªƒ
tyvq¦²°q¦±
毛茛属植物在系统分类上属于较为原始但又十
分重要的一类植物 ∀早在 5神农本草经 6中即记载有
石龙芮 Ρανυνχυλυσσχελερατυσ用于药用 o后来的本草纲
目中又收录了毛茛 Ρ . ϕαπονιχυσot||s年版 5中国药
典 6收录该属一种植物小毛茛 k猫爪草 lΡ . τερµ ατυσ∀
该属植物一般具小毒 o有清热解毒的功效 o在我国资
源非常丰富 o产量大 ≈t  ∀小麦黄素是多数毛茛属植物
中的有效成分之一 ≈u  o具有抗氧化 o抗癌作用 ≈v  ∀小
麦黄素的测定方法有高效液相色谱法 ≈w  o但对毛茛属
植物的研究多集中于血清学及核型研究等方面 o本研
究首次通过高效液相色谱法测定了猫爪草和贵州产
v种毛茛属植物石龙芮 !毛茛 !禺毛茛 Ρ . χαντονιενσισ
中小麦黄素的含量 o方法简便 o灵敏准确 ∀
1 仪器与试剂
岛津 ≤ p y„型高效液相色谱仪 ~小麦黄素对
照品 k昆明植物所提供 o经 ‹°≤ 法检测纯度为
|{1xyh l~毛茛 o禺毛茛采自贵阳市郊区和开阳县 o
石龙芮采自贵阳市郊区 o所有样品均采自 ussy年 x
月初 o猫爪草购于贵阳中医学院附属医院 o由中医学
院陈德媛研究员鉴定 ∀水为重蒸水 ~甲醇为色谱纯 o
其他试剂均为分析纯 ∀
2 方法与结果
2q1 色谱条件 ‹¼³¨ µ¶¬¯ ’⁄≥u柱 kw1y °° ≅ uss
°°ox Λ°l~流动相甲醇 2水 kysΒwsl~流速 s1{ °#
°¬±pt ~检测波长 vxu ±°~进样量 us ∏∀
2q2 对照品溶液的制备 精密称取小麦黄素对照
品 z1x °ªo加甲醇定容至 ux °o摇匀 o制成每 °
含 s1v °ª的对照品溶液 ∀
2q3 供试品溶液的制备 称取经 zs ε 恒温干燥过
t{目筛的毛茛粉末 u1s ªo精密称定 o加 zsh乙醇 ux
°回流提取 v次 o时间每次为 t «∀合并提取液在
旋转蒸发仪上浓缩约至 s¯ °o将残液转移至分液
漏斗中 o加石油醚萃取 v次弃去 ∀水层以乙酸乙酯
萃取 x次 o合并 x次萃取液 ∀回收溶剂 o残渣用甲醇
溶解并定容于 ts °量瓶中 ∀精密量取 t °置 x
°量瓶中 o用甲醇稀释至刻度 o摇匀 o转移至 ts °
离心管中 o离心 x °¬±o上清液过 s1wx Λ°滤膜 o取
续滤液备用 ∀样品 o对照品的色谱图参见图 t∀
图 t 样品 !对照品 ‹ °≤图
„q样品 ~…q对照品 ~tq小麦黄素
2q4 线性关系的考察 准确吸取小麦黄素对照品
溶液 s1suos1sxos1tos1xot1sou1s °置 ts °量
瓶中 o加入甲醇稀释到刻度 o摇匀 o在上述色谱条件
下分别进样 us ˏo以色谱峰面积 kΑl对质量浓度
kΧl进行线性回归 o得回归方程为 Α € ws st{Χ p
ux y||oρ€ s1||| w∀结果表明 o小麦黄素在 s1y ∗
ys Λª# °pt有良好的线性关系 ∀
2q5 精密度试验 对同一样品溶液进样 x次 o每次
us ˏo小麦黄素峰面积的 • ≥⁄为 t1vh ∀
2q6 稳定性试验 取同一样品溶液每隔 u «进样 t
次 o连续测定 x次 o小麦黄素峰面积的 • ≥⁄为
t1|h o表明在 { «内稳定 ∀
2q7 重复性试验 取同一批毛茛样品 o按照 2q3项
下方法制备供试品溶液 w份 o测定小麦黄素的含量
为 s1twt °ª# ªpt o• ≥⁄ u1|h ∀
2q8 加样回收率试验 精密称取已知含量的毛茛
样品 t1s ª共 y份 o分别精密加入精密配制的对照
品溶液 ks1v °ª# °pt luxsouxsouxsowssowssowss
ˏo按上述样品制备方法 o制备加样回收供试品溶
液 o测定质量分数 o计算回收率 o结果见表 t∀
#zuwu#
第 vu卷第 uu期
ussz年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ uu
‘²√ °¨¥¨ µo ussz
表 t 小麦黄素加样回收率
样品中含量
r°ª
加入量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
rh
平均值
rh
• ≥⁄
rh
s1twz s1szx s s1uu{ ts{1s
s1tvy s1szx s s1uts |{1z
s1twu s1szx s s1ut{ tst1v tsu1| v1vs1tv| s1tus s s1uyx tsx1s
s1twx s1tus s s1uyy tss1{
s1tv| s1tus s s1uyv tsv1v
2q9 样品测定 分别精密称取毛茛 !石龙芮 !禺毛
茛和猫爪草样品 u1s ªo按 2q3项下方法制备溶液后
进样分析 o按标准曲线计算小麦黄素的含量 o所得结
果见表 u∀
表 u 样品中小麦黄素的质量分数 kν € vl
样品 来源 部位 质量分数 r°ª# ªpt
毛茛 贵阳 全草 s1twy s
毛茛 开阳 全草 s1szt x
石龙芮 贵阳 全草 s1sus w
禺毛茛 贵阳 全草 s1sxt z
禺毛茛 开阳 全草 s1swz x
猫爪草 未知 块根 p
毛茛 贵阳 根 s1sxw s
毛茛 贵阳 茎 s1txv s
毛茛 贵阳 果 s1tzu s
禺毛茛 贵阳 根 p
禺毛茛 贵阳 茎 s1sxz {
禺毛茛 贵阳 果 s1sxt |
3 讨论
本实验分别考察了索氏提取 o水浴回流提取和
超声波提取 ∀超声提取法干扰峰较多 o影响小麦黄
素的测定 o索氏提取和水浴回流提取 o提取效率相
当 o但索氏提取耗时长 o故采用水浴回流提取 o并分
别用甲醇 o|xh乙醇 ozsh乙醇 owsh乙醇为提取溶
媒 o结果 zsh乙醇提取率最高 ∀同时比较了不同的
提取时间 uovoy «o虽然提取时间的延长小麦黄素的
含量会有所增加但会出现杂质峰的干扰 ∀因此确定
以 zsh乙醇回流提取 v次 o每次 t «∀
石油醚萃取层和水层的高效液相色谱分析不含
小麦黄素 o说明提取方法是可行的 ∀
结果表明 o不同种间小麦黄素含量差异明显 o其
中以毛茛的含量为高 o石龙芮含量很低 o猫爪草在本
实验方法中未检出小麦黄素 ∀对药材中不同部位的
检测表明小麦黄素主要集中在茎和果实中 ∀
≈参考文献  
≈t  王旭红 o秦民坚 o邓 霞 q毛茛属药用植物研究概况 ≈ q现代
中药研究与实践 oussvotzkyl}xzq
≈u  潘云雪 o周长新 o张水利 q扬子毛茛中的化学成分研究 ≈  q
≤«¬± °«¤µ°¤¦≥¦¬o usswotvkul}|uq
≈v  国家医药管理局中草药情报中心 q植物药有效成分手册 ≈   1
北京 }人民卫生出版社 ot|{y}tszvq
≈w  李兰芳 o张文彦 o张 魁 q不同生长期白羊草中总黄酮及小麦
黄素的含量测定 ≈ q中国中药杂志 ousssouxkxl}uzuq
≈责任编辑 张宁宁  
≈收稿日期   ussz2sz2tu
≈通讯作者   3 吴桂芳 oר¯}ks{xtlyvtzz{z
‹°≤测定康复灵中儿茶素与原儿茶素的含量
吴桂芳 t3 o章 欣 u o赵大江 u o葛文波 u
ktq贵州省药品检验所 o贵州 贵阳 xxsssw~
uq贵阳新天药业股份有限公司 o贵州 贵阳 xxsst{l
康复灵凝胶具有清热解毒 o燥湿杀虫 o收敛止
痒 ∀用于各种病因所致的阴道炎症 ∀由大黄 !儿茶 !
紫草 !冰片四味中药组成 o其中儿茶为豆科金合欢属
植物儿茶树 Αχαχια χατεχηυ kql• ¬¯¯§q的干枝加水
煎汁浓缩而成的干浸膏 ∀具有收湿敛疮 o生肌止血
等功效 ∀ ussx年版药典采用 ‹°≤对儿茶中儿茶
素 !原儿茶素的含量进行测定 o经方法学考察 o表明
该方法简捷快速 o稳定可靠 o专属性强 o可作为控制
康复灵凝胶质量的含量检测方法 ∀
1 仪器与试药
„ª¬¯¨ ±·ttss系列高效液相色谱仪 }包括 „ª¬¯¨ ±·
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第 vu卷第 uu期
ussz年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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