全 文 ：ｈｉｇｈｅｓｔａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｏｆｓｔｅｍｓ＆ｌｅａｖｅｓ；６５２ｍｇ·ｄ－１ｔｈｅ０６ｍｉｌｉｏｎｒｏｏｔｓ／ｈｍ２ａｎｄ２４０ｋｇ·ｈｍ－２ｒｅａｃｈｅｄｔｈｅｈｅａｖｉｅｓｔｓｉｎｇｌｅｆｒｅｓｈｒｏｏｔ．Ｔｈｅ
ｒｅｓｕｌｔｓｃｏｕｌｄｂｅｕｓｅｄｆｏｒｔｈｅｃｕｌｔｉｖａｔｉｎｇ，ｆｅｒｔｉｌｉｚｉｎｇａｎｄｐｒａｃｔｉｃｉｎｇＳＯＰｏｆＣ．ｐｉｌｏｓｕｌａ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｃｏｄｎｏｐｓｉｓｐｉｌｏｓｕｌａ；ｄｙｎａｍｉｃｃｈａｎｇｅｓ；ｄｉｆｅｒｅｎｔｇｒｏｗｔｈｓｔａｇｅｓ；ｃｕｌｔｉｖａｔｉｎｇｄｅｎｓｉｔｙ；ｆｅｒｔｉｌｉｚｉｎｇｗｅｉｇｈｔ
［责任编辑 张宁宁］
［收稿日期］ ２００５０３１１
［基金项目］ 国家创新药物和中药现代化资助项目
（２００２ＡＡ２Ｚ３２２５）
［通讯作者］ 王智民，Ｔｅｌ：（０１０）８４０１４１２８，Ｅｍａｉｌ：ｚｈｉｍｉｎ ｗａｎｇ
＠１６３ｎｅｔ
ＨＰＬＣ测定筋骨草中乙酰哈巴苷的含量
岳党昆，丁广治，王维皓，王智民，李建荣，仝 燕
（中国中医科学院 中药研究所，北京 １００７００）
［摘要］ 目的：建立筋骨草中乙酰哈巴苷的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ
ＬｕｎａＣ１８柱（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）；流动相乙腈水（１５：８５）；流速１０ｍＬ·ｍｉｎ
－１，检测波长１９７ｎｍ。结果：乙酰哈巴
苷含量测定的线性范围为０６～３６μｇ（ｒ＝０９９９３），平均加样回收率为９９１％，ＲＳＤ为２５％。结论：不同产地的筋
骨草中乙酰哈巴苷的含量为０４０％～６３９％；本法简便，灵敏准确，可用于筋骨草的质量控制。
［关键词］ 筋骨草；乙酰哈巴苷；ＨＰＬＣ
［中图分类号］Ｒ２８４１ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００６）０４０２８９０２
筋骨草为唇形科植物筋骨草属金疮小草 Ａｊｕｇａ
ｄｅｃｕｍｂｅｎｓＴｈｕｎｂ的全草，筋骨草又名活血草、散血
草、苦地胆等，分布于我国的长江以南各省区，全草
可供药用。我国南方民间用于治疗痈疽疗疮、火眼、
乳痈、鼻衄、咽喉炎、肠胃炎、急性结膜炎、烫伤、狗咬
伤、毒蛇咬伤以及外伤出血等症［１］。现代药理研究
证明［２］，筋骨草具有收缩血管、抑菌，抗肿瘤等活性。
其主要有效成分为环烯醚萜类，而乙酰哈巴苷是其
中含量较高且有明显抗病毒、抗肿瘤活性的成分之
一［２４］。有关筋骨草药材质量控制的研究报道很少，
只有邱志国等［５］于 １９９７年对筋骨草中蜕皮激素类
物质进行了 ＨＰＬＣ分析，这远远不能反映筋骨草药
材的内在质量。因此选择以乙酰哈巴苷为指标，研
究其药材的质量，并建立了分离效果好、专属性强、
灵敏度高的高效液相色谱的含量测定方法。
１ 仪器与试药
ＷＡＴＥＲＳ６００型高效液相色谱仪，９９６型检测
器；乙酰哈巴苷对照品：由本实验室自制，纯度
９８％；筋骨草药材购于福建、江苏、江西，由中国中医
科学院中药研究所何希荣主管药师鉴定；试剂均为
色谱纯。
２ 方法与结果
２１ 色谱条件 ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＬｕｎａＣ１８柱（４６ｍｍ×
２５０ｍｍ，５μｍ），流动相乙腈水（１５∶８５）；流速１０ｍＬ
·ｍｉｎ－１；检测波长１９７ｎｍ。
２２ 检测波长的设定 精确称取乙酰哈巴苷对照
品５ｍｇ于１００ｍＬ量瓶中，加甲醇溶解至刻度，以甲
醇为空白，在波长１９０～４００ｎｍ扫描得到吸收光谱，
在１９７ｎｍ处有最大吸收，故选择 １９７ｎｍ为乙酰哈
巴苷含量测定的检测波长。
２３ 对照品溶液的制备 精密称取乙酰哈巴苷对
照品７５ｍｇ，加甲醇定容至 ２５ｍＬ，摇匀，制成每 １
ｍＬ含０３ｍｇ的对照品溶液。
图１ 对照品、样品ＨＰＬＣ图
Ａ对照品；Ｂ样品；１乙酰哈巴苷
２４ 供试品溶液的制备 取筋骨草细粉（４０目）
·９８２·
第３１卷第４期
２００６年２月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ３１，Ｉｓｓｕｅ ４
Ｆｅｂｒｕａｒｙ，２００６
０５ｇ，精密称量，置锥形瓶中，精密加 ２０％乙醇 ３０
ｍＬ，密塞，称重，超声处理 ３０ｍｉｎ，放冷，称重，用
２０％乙醇补足减失的重量，摇匀，用０４５μｍ滤膜滤
过，取续滤液作为供试品溶液。
２４ 标准曲线制备 准确吸取乙酰哈巴苷对照品
溶液２，４，６，８，１０，１２μＬ，以峰面积 Ａ对进样量Ｃ进
行线性回归，得方程 Ａ＝１９２４×１０５Ｃ＋１８９０×１０３，
ｒ＝０９９９３，结果表明乙酰哈巴苷在０６～３６μｇ线
性关系良好。
２５ 精密度试验 对同一样品溶液进样 ５次，每
次进样１０μＬ，乙酰哈巴苷峰面积的 ＲＳＤ为０４８％，
表明精密度良好。
２６ 稳定性试验 取样品溶液每隔 ２５ｈ进样 １
次，连续测定 ５次，乙酰哈巴苷峰面积的 ＲＳＤ为
０３７％，表明样品中乙酰哈巴苷在１０ｈ内稳定。
２７ 重复性试验 取同一批筋骨草样品，按照２３
项下方法制备供试品溶液 ５份，测定乙酰哈巴苷的
含量，ＲＳＤ为１７％。表明重复性良好。
２８ 加样回收试验 精密称取已知含量的同一样
品５份，分别加入一定量的乙酰哈巴苷，按照样品制
备方法及测试条件测试，计算回收率，结果见表１。
表１ 乙酰哈巴苷加样回收率
样品中含量
／ｍｇ
加入量
／ｍｇ
测得量
／ｍｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
２．４９ ２．４１ ４．９８ １０３．３
２．５８ ２．５７ ５．１２ ９８．８
２．８０ ２．５９ ５．３１ ９６．９ ９９．１ ２．５
２．４９ ２．７１ ５．１７ ９８．９
２．７６ ２．６２ ５．３２ ９７．７
２９ 样品测定 按上述色谱条件分别进对照品溶
液和供试品溶液，用外标一点法计算，测定样品的含
量，结果见表 ２。福建夏季采收的筋骨草的不同部
位花、枝叶和根茎中乙酰哈巴苷的平均含量分别为
１３２，２１４，１３９ｍｇ·ｇ－１。
表２ 样品中乙酰哈巴苷的测定（ｎ＝２）
样品来源 含量／ｍｇ·ｇ－１
福建秋季采收 ８．５８
福建春季采收 １７．７
福建夏季采收 １６．１
江苏春季采收 ３．９７
江西春季采收 ６３．９
３ 讨论
分别比较了甲醇，９５％乙醇，水以及不同浓度的
乙醇等溶剂的提取效果，结果表明，２０％乙醇为溶剂
对于有效成分的提取率最高。从样品测定结果可以
看出，筋骨草的全草均含乙酰哈巴苷，可全草入药；
且采收的不同季节和产地对药材中的含量影响明
显，选择合适季节和产地的药材非常重要。
［参考文献］
［１］ 福建省医药研究所．福建药物志．第一册．福州：福建人民出
版社，１９７９．４１０．
［２］ ＭｉｄｏｒｉＴａｋａｓａｋｉ，ＨａｒｕｋｕｎｉＴｏｋｕｄａ，ＨｏｙｏｋｕＮｉｓｈｉｎｏ，ｅｔａｌ．Ｃａｎｃｅｒ
ｃｈｅｍｏｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅａｇｅｎｔｓ（ａｎｔｉｔｕｍｏｒｐｒｏｍｏｔｅｒｓ）ｆｒｏｍＡｊｕｇａｄｅｃｕｍｂｅｎｓ．
ＪＮａｔＰｒｏｄ，１９９９，６２（７）：９７２．
［３］ ＭｉｄｏｒｉＴａｋａｓａｋｉ，ＩｓａｏＹａｍａｕｃｈｉ，ＭｉｔｓｕｍａｓａＨａｒｕｎａ，ｅｔａｌ．Ｎｅｗｇｌｙ
ｃｏｓｉｄｅｓｆｒｏｍＡｊｕｇａｄｅｃｕｍｂｅｎｓ．ＪＮａｔＰｒｏｄ，１９９８，６１：１１０５．
［４］ ＹｏｓｈｉｏＴａｋｅｄａ，ＳａｔｏｍｉＴｓｕｃｈｉｄａ，ＴｅｔｓｕｒｏＦｕｊｉｔａ．Ｆｏｕｒｎｅｗｉｒｉｄｏｉｄ
ｇｌｕｃｏｓｉｄｅｐｃｏｕｍａｒｏｙｌｅｓｔｅｒｓｆｒｏｍＡｊｕｇａｄｅｃｕｍｂｅｎｓ．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，
１９８７，６（８）：２３０３．
［５］ 邱志国，迟德富．两种筋骨草中蜕皮激素类物质的分析．东北
林业大学学报，１９９７，２５（５）：８５．
ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆａｃｅｔｙｌｈａｒｐａｇｉｄｅｉｎＡｊｕｇａｄｅｃｕｍｂｅｎｓｂｙＨＰＬＣ
ＹＵＥＤａｎｇｋｕｎ，ＤＩＮＧＧｕａｎｇｚｈｉ，ＷＡＮＧＷｅｉｈａｏ，ＷＡＮＧＺｈｉｍｉｎ，ＬＩＪｉａｎｒｏｎｇ，ＴＯＮＧＹａｎ
（ＩｎｓｔｉｔｕｅｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ，ＣｈｉｎａＡｃａｄｅｍｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００７００，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｍｅｔｈｏｄｏｆｔｈｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆａｃｅｔｙｌｈａｒｐａｇｉｄｅｉｎＡｊｕｇａｄｅｃｕｍｂｅｎｓ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｈｅ
ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗｅｒｅａｓｆｏｌｏｗｓ：ａＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＬｕｎａＣ１８ｃｏｌｕｍｎｗａｓｕｓｅｄ，ｔｈｅｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｗａｓｃｏｍｐｏｓｅｄｏｆａｃｅｔｏｎｔｒｉｌｅｗａｔｅｒ
（１５∶８５），ｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｗａｓ１０ｍＬ·ｍｉｎ－１ａｎｄｔｈｅＵＶａｂｓｏｒｂａｎｃｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｓｓｅｔａｔ１９７ｎｍ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｌｉｎｅａｒｉｔｙｏｆａｃｅｔｙｌｈａｒｐａｇｉｄｅｗａｓｉｎ
ｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ０６３６μｇ（ｒ＝０９９９３），ａｎｄｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｙａｎｄＲＳＤｗｅｒｅ９９１３％ａｎｄ２４８％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｃｏｎ
ｔｅｎｔｓｏｆａｃｅｔｙｌｈａｒｐａｇｉｄｅｒａｎｇｅｄ０４０％６３９％ｉｎＡ．ｄｅｃｕｍｂｅｎｓ．Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｗａｓｓｉｍｐｌｅ，ａｃｃｕｒａｔｅａｎｄｓｅｎｓｉｔｉｖｅ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ａｊｕｇａｄｅｃｕｍｂｅｎｓ；ａｃｅｔｙｌｈａｒｐａｇｉｄｅ；ＨＰＬＣ
［责任编辑 张宁宁］
·０９２·
第３１卷第４期
２００６年２月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ３１，Ｉｓｓｕｅ ４
Ｆｅｂｒｕａｒｙ，２００６