全 文 ：黄芪皂苷注射液指纹图谱的研究
管 佳 o毕志明 o李 萍 3
k中国药科大学 生药学教研室 o江苏 南京 utssv{l
≈摘要 目的 }建立黄芪皂苷类成分注射液k包括药材 !中间体及注射液制剂l的 °≤2∞≥⁄指纹图谱质量控
制方法 ∀方法 }ª¬¯¨ ±·²µ¥¤¬≥
2≤t{柱 o流动相为 水2
乙腈 o二元梯度洗脱 }tx h ∗ ys h
ks ∗ yx °¬±l o流速 s1{ °
#°¬±p t o蒸发光散射检测器 o漂移管温度 tsx ε o载气流速 u1z #°¬±p t ∀结果 }药材 !中间体 !注射液制剂中标定的
各共有峰相对保留时间的 ≥⁄值均小于 t1s h o单峰面积大于或等于 ts h峰的峰面积比值也比较稳定 o三者的图谱
间具有很好的相关性 ots批样品间具有很高的相似度 ∀结论 }本方法可作为黄芪皂苷注射液质量控制的依据 ∀
≈关键词 指纹图谱 ~黄芪皂苷 ~注射液
≈中图分类号 u{v1y ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussylts2s{sz2sv
≈收稿日期 ussw2tu2ut
≈基金项目 国家自然科学基金重大资助项目k|sus|swxl
≈通讯作者 3李萍 oר¯ }ksuxl{xvuuuxy o∞2°¤¬¯ }¯¬³¬±ª¯¬ ³∏¥2
¬¯¦t1³·1¶1¦±
黄芪皂苷为黄芪中的主要有效成分 o药理学实
验表明其具有抗血栓形成 !抗自由基损伤 !清除氧自
由基 !保护心肌细胞 o增强心肌活力等作用 ∀现市售
黄芪注射液多为黄芪提取物制成的粗提制剂 o本研
究中提取纯化了黄芪中皂苷活性部位 o精制成黄芪
皂苷注射液 ∀鉴于目前对黄芪制品中的黄芪甲苷的
检测多使用蒸发光散射检测器k∞≥⁄l o获得了较好
的效果≈t2v ~不少学者还对黄芪中黄酮类k主要是芒
柄花素 !毛蕊异黄酮等l !皂苷类成分k主要是黄芪皂
苷∂l o运用多种手段进行了指纹图谱的研究≈w2y ∀
本试验首次应用 °≤2∞≥⁄对黄芪皂苷注射液进
行了指纹图谱研究 o为规范黄芪皂苷注射液的生产 o
完善药品质量控制标准提供参考 ∀
1 仪器与试药
ª¬¯¨ ±·高效液相色谱仪kª¬¯¨ ±·ttss系列l o蒸
发光散射检测器k¯ ·¯¨¦«usssl o空气压缩机k天津蓝
珂科技实业公司l oª¬¯¨ ±·色谱数据工作站 ∀
黄芪甲苷对照品k中国药品生物制品检定所l ~
黄芪药材产于山西省浑源县 o经中国药科大学生药
学教研室李萍教授鉴定为蒙古黄芪 Αστραγαλυσ µεµ2
βραναχευσkƒ¬¶¦«1l
ª¨ √¤µ1 µονγηολιχυσk
ª¨ 1l ¶¬¤²~
黄芪总皂苷提取物k中间体l及注射液制剂k连云港
恒瑞医药有限公司l ∀乙腈k色谱纯 o美国 × §¨¬¤公
司l o超纯水 ∀
2 方法及结果
211 色谱条件 ª¬¯¨ ±·²µ¥¤¬ ≥
2≤t{色谱柱 kw1y
°° ≅ txs °° ox Λ°l o柱温 ux ε o流动相为 水2
乙腈 o二元梯度洗脱 tx h ∗ ys h
o洗脱时间 yx °¬±o
流速 s1{ °#°¬±pt o漂移管温度 tsx ε o载气流速
u1z #°¬±pt ∀
212 供试品的制备 药材样品处理 }取药材粉末
k过二号筛l约 t1x ªo精密称定 o置索氏提取器中 o加
甲醇适量 o回流 x «o放冷 o滤过 o滤液回收甲醇至干 o
残渣加水 ts °使溶解 o用水饱和的正丁醇振摇提
取 w次k每次 us °l o合并正丁醇提取液 o用氨试液
洗涤 u次k每次 us °l o弃取氨液 o正丁醇液蒸干 o残
渣用甲醇溶解并转移至 x °量瓶中 o加甲醇稀释至
刻度 o摇匀 os1wx Λ°的微孔滤膜滤过 o取续滤液 o即
得 ∀
中间体 }取总皂苷提取物约 us °ªo精密称定 o置
x °量瓶中 o加甲醇溶解并稀释至刻度 o摇匀 ∀用
s1wx Λ°的微孔滤膜滤过 o取续滤液 o即得 ∀
注射液 }精密吸取注射剂 tss °o水浴蒸干 o残
渣用甲醇溶解并定容至 x °量瓶中 o摇匀 o用 s1wx
Λ°的微孔滤膜滤过 o取续滤液即得 ∀
213 参照物 以指纹图谱中黄芪甲苷色谱峰k保
留时间约 wu °¬±l作为指纹图谱的参照峰 ∀
214 测定方法 进样量 us Λo分别注入液相色谱
仪 o记录 yx °¬±色谱图即得 ∀以黄芪甲苷的色谱峰
k¶l的保留时间和峰面积为 t o计算其他各峰的相对
#zs{#
第 vt卷第 ts期
ussy年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt o¶¶∏¨ ts
¤¼oussy
保留时间和相对峰面积比值 ∀
215 稳定性试验 取同一供试品溶液k药材 !中间
体 !注射液l o分别在 zu «内不同时间段进样 ∀结果
表明 o各色谱峰的相对保留时间和相对峰面积比值
的 ≥⁄值均小于 v1s h o供试品溶液至少在 zu «内
稳定 ∀
216 精密度试验 取同一供试品溶液k药材 !中间
体 !注射液l o连续进样 x次 ∀结果表明 o各色谱峰的
相对保留时间和单峰面积大于或等于 ts h峰的峰
面积比值 ≥⁄值均小于 v1s h o精密度良好 ∀
217 重复性试验 取同一批号的供试品 x份k药
材 !中间体 !注射液l o按供试品的制备和检测方法制
备供试品和进行检测 ∀结果表明 o各色谱峰的相对
保留时间和单峰面积大于或等于 ts h峰的峰面积
比值 ≥⁄值均小于 v1s h o重复性良好 ∀
218 相似度计算 使用了中药色谱指纹图谱相似
度评价系统 k中国药典委员会推荐l分别对药材 !
中间体和注射液各自不同批次的色谱数据及图谱进
行了相似度计算 o结果见表 t o可见药材 !中间体和
注射液不同批次间具有很高的相似度 ∀
表 t 药材 !中间体 !注射剂不同批次间的相似度
批号 药材 中间体 注射剂
t s q|| s q|| s q||
u t qss s q|| t qss
v s q|{ t qss t qss
w s q|| s q|| s q||
x t qss t qss s q||
y s q|{ s q|{ t qss
z s q|| s q|| s q||
{ s q|{ s q|| s q||
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ts s q|| s q|| s q||
3 讨论
311 黄芪注射液中主要含黄芪甲苷等皂苷类成分 o
此类成分为紫外末端吸收 o故本试验应用 ∞≥⁄∀在
指纹图谱中选取黄芪甲苷峰为内参照峰 o这样能同
时兼顾药材 !中间体和成品的对应性 ∀
312 图 t 为黄芪药材 !中间体 !注射液的 °≤2
∞≥⁄指纹图谱 ∀分别对 ts批黄芪药材 !ts批中间
体和 ts批注射液的指纹图谱进行比较 o依次标定的
共有峰分别有 ty个峰 !tt个峰和 x个峰 o各色谱峰
的相对保留时间的 ≥⁄均小于 t1s h o药材图谱中
单峰面积大于等于 ts h的共有峰k峰 tsl的相对峰
面积 ≥⁄小于 x1v h o峰¶为中间体 !注射液图谱中
单峰面积大于等于 ts h的峰 o各批次间该峰峰面积
≥⁄小于 w1x h ∀
图 t 黄芪 °≤指纹图谱
1 药材 ~
1 黄芪皂苷提取物 ~≤1 黄芪皂苷注射液 ~¶1 黄芪甲苷
313 注射剂 w个共有指纹峰kt ov o¶ow号峰l与药材
w个kz o{ o¶o|号峰l !中间体 w个kx o{ o¶o|号峰l共
有峰有对应关系 o中间体 z号峰与注射剂 u号峰相
对应 ∀即表明黄芪皂苷注射剂和中间体的特征峰在
原药材的指纹图谱中可以找到归属 o说明了原药材
中的某些特征峰在中间体的制备中因生产工艺的操
作而有规律的丢失 o某些色谱峰的含量则发生变化 o
主要成分黄芪甲苷含量有所增加 ∀由此可见 o黄芪
药材 !中间体和注射液指纹图谱之间具有较好的相
关性 ∀
314 对药材 !中间体和注射液各自不同批次的色谱
数据及图谱进行了相似度计算 o药材 !中间体和注射
液不同批次间的相似度均高于 s1|{ o表明本方法可
以作为质量评价的有效依据 ∀
315 药材 !中间体 !注射液的 °≤2∞≥⁄指纹图谱
检测结果表明 o共有峰面积比值及其差值 o非共有峰
总面积百分比均符合5中药注射剂指纹图谱的技术
要求k暂行l6的有关规定 o可作为该注射剂质量评价
的依据 ∀
≈参考文献
≈t 鄢立新 o唐卫文 o付铁军 o等 q不同厂家产黄芪注射液中黄芪
甲苷的含量考察 q中成药 oussw ouyk{l }yuy1
#{s{#
第 vt卷第 ts期
ussy年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt o¶¶∏¨ ts
¤¼oussy
≈u 赵灵芝 o朱丹妮 o严永清 q °≤2∞≥⁄法测定黄芪中黄芪甲
苷的含量 q药物分析杂志 ot||| okyl }wsv1
≈v 汪 红 o王 强 q °≤2∞≥⁄法测定黄芪及其注射液中黄芪
皂苷 · o ¶ o ´的含量 q中国药学杂志 oussu ovzkwl }u|{1
≈w 张子忠 o梁鑫淼 o张 青 o等 q黄芪特征组分的表征与识别 q
药学学报 ousst ovykzl }xuv1
≈x 徐 青 o王加宁 o肖红斌 o等 q黄芪药材的指纹图谱研究方法
的建立 q分析测试学报 oussu outkul }{|1
≈y 贾晓斌 o陈 彦 o蔡宝昌 o等 q黄芪皂苷类成分的 °≤指纹谱
研究 q中医药学刊 oussw ouuktul }uuuz1
Στυδψ ον φινγερπριντσ οφ αστραγαλοσιδεσινϕεχτιον βψ ΗΠΛΧ2ΕΛΣ∆
¬¤o
«¬2°¬±ªo °¬±ª
( ∆επαρτµεντ οφ Πηαρµαχογνοσψ, Χηινα Πηαρµαχευτιχαλ Υνιϖερσιτψ, Νανϕινγ utssv{ , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ §¨ √¨¯²³¤± °≤ ° ·¨«²§©²µ©¬±ª¨µ³µ¬±·§¨·¨µ°¬±¤·¬²± ²©·«¨ ¤¶·µ¤ª¤¯²¶¬§¨¶¬±¨¦·¬²±q Μετηοδ : ±¤¯¼¶¨¶
º µ¨¨ ¦¤µµ¬¨§²∏·¤·ux ε ²± ¤ ²µ¥¤¬≥
2≤t{ ¦²¯∏°± kw1y °° ≅ uxs °° ox Λ°l q ²¥¬¯¨ ³«¤¶¨ º¤¶º¤·¨µo¤±§
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°¬±p t q׫¨ §µ¬©··∏¥¨ ·¨°³¤µ¤·∏µ¨ ²©·«¨ ∞≥⁄ º¤¶tsx ε o¤±§ª¤¶©¯²ºµ¤·¨ º¤¶u1z #°¬±pt q Ρεσυλτ : ׫¨ ≥⁄²©µ¨ ¤¯·¬√¨µ¨·¨±·¬²±·¬°¨
²©·«¨ ¦²°°²± ³¨ ¤®¶¬±·«¨ ³¯¤±·°¤·¨µ¬¤¯ o·«¨ ¬¨·µ¤¦·¤±§·«¨ ¬±¨¦·¬²±©¬±ª¨µ³µ¬±·¶º¤¶¯¨ ¶¶·«¤± s qt h o¤±§·«¨µ¨ º¤¶ª²²§¶¬°¬¯¤µ¬·¼ ¤°²±ª
ts ¥¤·¦«¨¶²©¶¤°³¯ ¶¨q Χονχλυσιον : ׫¨ ° ·¨«²§º¤¶µ¨ ¬¯¤¥¯¨¤±§¶¬°³¯¨ º«¬¦«¦²∏¯§¥¨ ∏¶¨§©²µ ∏´¤¯¬·¼ ¦²±·µ²¯ ²©·«¨ ¬±¨¦·¬²±q
[ Κεψ ωορδσ] °≤ ©¬±ª¨µ³µ¬±·~¤¶·µ¤ª¤¯²¶¬§¨ ~¬±¨¦·¬²±
≈责任编辑 刘
≈收稿日期 ussw2tu2us
≈通讯作者 3 何国庆 oר¯ }ksxztl{y|zttyy o ∞2°¤¬¯} ª´ «¨
½∏1 §¨∏1¦±
啤酒花中黄酮成分提取工艺的优化研究
熊皓平t ou o何国庆t 3 o玄国东t o阮 晖t
kt1 浙江大学 生物系统工程与食品科学院 o浙江 杭州 vtssu| ~
u1 广东海洋大学 食品科技学院 o广东 湛江 xuwsuxl
≈摘要 目的 }对啤酒花黄酮类化合物的提取工艺进行优化研究 ∀方法 }用单因素试验分别对提取溶剂乙醇
含量 !料液比 !提取温度及提取时间进行研究 o在此基础上通过正交试验确定上述 w个因素的最佳组合 ∀结果 }优
化后啤酒花中黄酮的最大提取量为 z{ °ª#ªp t ∀结论 }啤酒花黄酮类化合物的适宜提取条件为乙醇含量 wx h !料液
比 tΒux !提取温度 ys ε !提取时间 |s °¬±∀
≈关键词 啤酒花 ~黄酮 ~提取工艺 ~中心组合设计
≈中图分类号 u{w1u ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussylts2s{s|2sv
啤酒花 Ηυµυνυσλυπυλυσ 1 是桑科 草属多年
生草质蔓生藤本植物 o其雌性球穗花序简称酒花≈t ∀
干燥的雌性酒花用于酿制啤酒 o能赋予啤酒特有的
香味 !爽快的苦味 o并能增加啤酒的防腐能力和非生
物稳定性 ∀酒花还是一种药用植物 o国外将其用于
治疗癔病 !失眠等 o5中国药典6t|zz年版上记载酒
花的乙醇浸膏用于治疗肺结核病和麻风病等症≈u ∀
啤酒花含黄酮苷 !黄酮醇及异戊二烯基查儿
酮≈v ∀前二者广泛存在于植物界 o后者由酒花的蛇
麻腺分泌≈w o能抑制癌细胞的体外扩增≈x !骨质增
生≈y !甘油二酯酰基转移酶的活性≈z o并有抗菌≈{ 及
雌性激素样功能≈| ∀
#|s{#
第 vt卷第 ts期
ussy年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt o¶¶∏¨ ts
¤¼oussy