全 文 ：ＣｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｆｒｏｍｈｅｒｂｏｆＧｕｅｌｄｅｎｓｔａｅｄｔｉａｓｔｅｎｏｐｈｙｌａ
ＬＩＫｅ１，２，ＬＩＸｉａｏｍｉｎｇ１，ＷＡＮＧＢｉｎｇｕｉ１
（１．ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＭａｒｉｎｅＢｉｏｌｏｇｙ，ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＯｃｅａｎｏｌｏｇｙ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｑｉｎｇｄａｏ２６６０７１，Ｃｈｉｎａ；
２．ＧｒａｄｕａｔｅＳｃｈｏｏｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００３９，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆＧｕｅｌｄｅｎｓｔａｅｄｔｉａｓｔｅｎｏｐｈｙｌａ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｖａｒｉｏｕｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ
ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏｓｅｐａｒａｔｅａｎｄｐｕｒｉｆｙｔｈｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓａｎｄｓｔｒｕｃｔｕｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｗａｓｍａｉｎｌｙｂａｓｅｄｏｎｔｈｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｓｐｅｃｔｒｏ
ｓｃｏｐｉｃｄａｔａ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｓｅｖｅｎｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ２′，４，７ｔｒｉｈｙｄｒｏｘｙ４′ｍｅｔｈｏｘｙｉｓｏｆｌａｖａｎｓ（１），ｇｅｎｋｗａｎｉｎ（２），ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ（３），ｒｕ
ｔｉｎ（４），１２ｏｌｅａｎｅｎ３β，２２β，２４ｔｒｉｏｌ（５），ｂｅｔｕｌｉｎｉｃａｃｉｄ（６），ａｎｄ３，４ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｂｅｎｚｏｉｃａｃｉｄ（７）ｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ．
Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＡｌｔｈｅｓｅｃｏｍｐｏｕｎｄｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅｇｅｎｕｓＧｕｅｌｄｅｎｓｔａｅｄｔｉａｆｏｒｔｈｅｆｉｒｓｔｔｉｍｅ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　Ｇｕｅｌｄｅｎｓｔａｅｄｔｉａｓｔｅｎｏｐｈｙｌａ；Ｌｅｇｕｍｉｎｏｓａｅ；ｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ
［责任编辑　王亚君］
高效液相色谱同时测定荷叶药材及其生物碱部位中
４种生物碱的含量
王玉霞，刘　斌，石任兵
（北京中医药大学 中药学院，北京 １００１０２）
［摘要］　目的：建立测定荷叶药材及其生物碱部位中４种生物碱类成分２羟基１甲氧基阿朴啡、原荷叶碱、荷
叶碱和莲碱含量的高效液相色谱方法。方法：采用ＨｙｐｅｒｓｉｌＣ１８柱（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），以乙腈０１％三乙胺
水溶液为流动相，梯度洗脱，流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１，柱温３５℃，检测波长２７０ｎｍ。结果：２羟基１甲氧基阿朴啡、原
荷叶碱、荷叶碱和莲碱的线性范围分别为０１１０～０６５８μｇ（ｒ＝０９９９５），００２１～０１２６μｇ（ｒ＝０９９９５），０１０３～
０６１８μｇ（ｒ＝０９９９８），００８６～０５１４μｇ（ｒ＝０９９９５），荷叶生物碱部位平均加样回收率（ｎ＝６）分别为１０１５％，
９９１４％，９９２１％，９８４１％；荷叶药材平均加样回收率（ｎ＝６）分别为９９５３％，１００５％，９７５１％，１００１％。结论：３
批样品测定结果表明，该方法简便准确，可用于荷叶药材及其生物碱部位中４种生物碱类成分的含量测定。
［关键词］　荷叶；２羟基１甲氧基阿朴啡；原荷叶碱；荷叶碱；莲碱；ＨＰＬＣ；含量测定
［中图分类号］Ｒ２８４．１　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００１５３０２（２００８）１４１７１３０４
［收稿日期］　２００８０１０３
［基金项目］　国家“十一五”科技支撑计划（２００６ＢＡＩ０８Ｂ０３－０４）
［通讯作者］　刘斌，Ｔｅｌ：（０１０）８４７３８６２９，Ｅｍａｉｌ：ｌｉｕｂｉｎｙｎ６７＠
１６３．ｃｏｍ
　　荷叶Ｎｅｌｕｍｂｏｎｕｃｉｆｅｒａ是睡莲科莲属植物莲 Ｎ．
ｎｕｃｉｆｅｒａＧａｅｒｔｎ．的干燥叶，味苦、性平，归肝、脾、胃
经，具有清暑利湿、升发清阳、清心去热、止血利水的
功效［１］。现代研究表明，荷叶中生物碱类成分具有
降脂减肥、抑菌、抗病毒［２］等药理活性。为了进一
步开发利用荷叶中的生物碱类成分，作者根据该类
成分的理化性质，采用有机溶媒提取、离子交换树脂
法富集了荷叶生物碱部位，并以２羟基１甲氧基阿
朴啡、原荷叶碱、荷叶碱和莲碱为指标控制和评价荷
叶药材及其生物碱部位质量。
１　仪器与试药
Ｗａｔｅｒｓ１５２５型高效液相色谱仪，ＰＤＡ检测器，
Ｅｍｐｏｗｅｒ色谱工作站，２５μＬ可调进样器（美国 Ｗａ
ｔｅｒｓ公司）；ＳａｒｔｏｒｉｏｕｓＢＴ２５Ｓ型１／１０万电子分析天
平（北京赛多利斯仪器有限公司）；ＫＱ－５００ＤＥ超
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声波清洗器（昆山超声仪器有限公司）；Ｄ００１－ＣＣ
大孔阳离子交换树脂（南开大学化工厂，工业用，树
脂全交换量≥４１ｍｍｏＬ·ｇ－１）。
荷叶药材购自北京同仁堂医药集团北城批发
部，经北京中医药大学陈玉婷副教授鉴定为睡莲科
植物荷叶Ｎ．ｎｕｃｉｆｅｒａ的干燥叶。
对照品荷叶碱（批号１１１５６６２００４０２）购自中国
药品生物制品检定所；对照品２羟基１甲氧基阿朴
啡、原荷叶碱和莲碱，自制，经 ＭＳ，１ＨＮＭＲ，１３Ｃ
ＮＭＲ鉴定结构，ＨＰＬＣ检测，峰面积归一化法测定纯
度大于 ９８０％。乙腈（色谱纯，Ｓｉｇｍａａｌｄｒｉｃｈ公
司），屈臣氏纯净水，其他试剂均为分析纯。
２　方法与结果
２．１　对照品溶液的制备　分别精密称取２羟基１
甲氧基阿朴啡、原荷叶碱、荷叶碱和莲碱对照品适
量，加甲醇溶解，制成每１ｍＬ含２羟基１甲氧基阿
朴啡 ００５４８ｍｇ，原荷叶碱 ００１０５ｍｇ，荷叶碱
００５１５ｍｇ，莲碱００４２８ｍｇ的混合对照品溶液。
２．２　荷叶生物碱部位供试品溶液的制备　称取荷
叶药材适量，加１６倍９０％乙醇回流提取３次，每次
１５ｈ，合并３次提取液，减压回收溶剂至干，残留物
加药材质１０倍量体积１％盐酸超声分散（３０ｍｉｎ，功
率 ２５０Ｗ，１００ｋＨｚ），离心（３０ｍｉｎ，３０００ｒ·
ｍｉｎ－１），上清液备用，残渣再次同法处理。合并２次
上清液，加至已处理好的 Ｄ００１－ＣＣ大孔阳离子交
换树脂柱（树脂柱径高比１∶８），吸附流速１０ＢＶ·
ｈ－１，待树脂达到饱和吸附后，以５０％乙醇５ＢＶ洗
脱除杂，再用１％氨性乙醇洗脱（７０％乙醇）７ＢＶ，收
集氨性乙醇洗脱液，减压回收溶剂，残留物减压干
燥，得荷叶生物碱部位。精密称取荷叶生物碱部位
１４０ｍｇ，置５０ｍＬ量瓶中，加甲醇超声（２０ｍｉｎ，功
率２５０Ｗ，１００ｋＨｚ），放冷，定容至刻度，用０４５μｍ
滤膜滤过，即得。
２．３　荷叶药材供试品溶液的制备　精密称取荷叶
药材粉末（６０目）１０ｇ，置２５ｍＬ锥形瓶中，精密加
入氨水０５ｍＬ，氯仿２５ｍＬ，超声提取（３０ｍｉｎ，功率
２５０Ｗ，１００ｋＨｚ），放冷，滤过，滤渣用少量溶剂洗涤
２次，合并溶剂，蒸干，残渣用甲醇溶解并定容至２５
ｍＬ量瓶中，０４５μｍ滤膜滤过，即得。
２．４　色谱条件及系统适用性　色谱条件：Ｈｙｐｅｒｓｉｌ
Ｃ１８色谱柱（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）；流动相 乙腈
０１％三乙胺水溶液梯度洗脱（表１）；检测波长 ２７０
ｎｍ；流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１；柱温 ３５℃。对照品及样
品ＨＰＬＣ图见图１。
表１　流动相比例
ｔ／ｍｉｎ 水（０１％三乙胺）／％ 乙腈／％
０ ６２ ３８
１０ ６２ ３８
３５ ５０ ５０
Ａ．对照品；Ｂ．荷叶生物碱部位；Ｃ．荷叶药材；
１．２羟基１甲氧基阿朴啡；２．原荷叶碱；３．荷叶碱；４．莲碱
图１　对照品及样品ＨＰＬＣ图
２．５　线性关系试验　精密吸取２．１项下混合对照
品溶液各２，４，６，８，１０，１２μＬ注入液相色谱仪，测定
色谱峰峰面积。色谱峰峰面积（Ｙ）为纵坐标，以对
照品进样量（Ｘ）为横坐标，进行线性回归。得２羟
基１甲氧基阿朴啡、原荷叶碱、荷叶碱和莲碱回归
方程分别为 Ｙ＝３０１１８０９８Ｘ－１７３１７５，ｒ＝
０９９９５；Ｙ＝３４６５６０２０Ｘ－７４３６２，ｒ＝０９９９５；
Ｙ＝３８５８１９１１Ｘ－８８２６９，ｒ＝０９９９８；Ｙ＝
２７８３３３１５Ｘ－１７９６５７，ｒ＝０９９９５。表明２羟基
１甲氧基阿朴啡、原荷叶碱、荷叶碱和莲碱进样量分
别在０１１０～０６５８，００２１～０１２６，０１０３～０６１８，
００８６～０５１４μｇ与峰面积线性关系良好。
２．６　精密度试验　取２．２项下荷叶生物碱部位供
试品溶液，重复进样６次，测定２羟基１甲氧基阿
朴啡、原荷叶碱、荷叶碱和莲碱色谱峰峰面积，ＲＳＤ
分别为１５％，１１％，１１％和１５％（ｎ＝６），表明仪
器精密度良好。
２．７　稳定性试验　荷叶生物碱部位：取２．２项下荷
叶生物碱部位供试品溶液，分别于制备后０，２，４，６，
８，１０，１２ｈ进样，测定２羟基１甲氧基阿朴啡、原荷
叶碱、荷叶碱和莲碱色谱峰峰面积，ＲＳＤ分别为
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３３％，２０％，０９％和 １８％。表明供试品溶液在
１２ｈ内基本稳定。
荷叶药材：取２．３项下荷叶药材供试品溶液，分
别于制备后０，２，４，６，８，１０，１２ｈ进样，测定２羟基
１甲氧基阿朴啡、原荷叶碱、荷叶碱和莲碱色谱峰峰
面积，ＲＳＤ分别为１０％，１６％，２１％和１５％。表
明供试品溶液在１２ｈ内基本稳定。
２．８　重复性试验　荷叶生物碱部位：取同一批荷叶
生物碱部位６份，按２．４项下方法测定含量。计算
２羟基１甲氧基阿朴啡、原荷叶碱、荷叶碱和莲碱的
平均含量分别为９４４％（ＲＳＤ２３％），２２６％（ＲＳＤ
４３％），９１８％（ＲＳＤ３３％），７２３％（ＲＳＤ１３％）。
表明该方法重复性良好。
荷叶药材：取同一批荷叶药材６份，按２．４项下
方法测定含量。计算２羟基１甲氧基阿朴啡、原荷
叶碱、荷叶碱和莲碱的平均含量分别为 ００５３７％
（ＲＳＤ０６％），０００２８％（ＲＳＤ３０％），００６３１％
（ＲＳＤ１５％），００２８９％（ＲＳＤ２７％）。表明该方
法重复性良好。
２．９　回收率试验　荷叶生物碱部位：精密称取已知
含量的荷叶生物碱部位（２羟基１甲氧基阿朴啡、
原荷叶碱、荷叶碱和莲碱的质量分数分别为
９４４％，２２６％，９１８％和 ７２３％）６份，每份约 ７
ｍｇ，分别置５０ｍＬ量瓶中，分别精密加入２羟基１
甲氧基阿朴啡对照品溶液（０３３９ｍｇ·ｍＬ－１）、原荷
叶碱对照品溶液（００８１ｍｇ·ｍＬ－１），荷叶碱对照品
溶液（０３２９ｍｇ·ｍＬ－１），莲碱对照品溶液（０２６０
ｍｇ·ｍＬ－１）各２ｍＬ，按２．２项下方法制得供试品溶
液，分别精密吸取１０μＬ，注入液相色谱仪，测定各
色谱峰峰面积，计算２羟基１甲氧基阿朴啡、原荷
叶碱、荷叶碱和莲碱含量和回收率。２羟基１甲氧
基阿朴啡平均回收率为１０１５％，ＲＳＤ１９％；原荷
叶碱平均回收率为９９１４％，ＲＳＤ２１％；荷叶碱平
均回收率为９９２１％，ＲＳＤ１３％；莲碱平均回收率
为９８４１％，ＲＳＤ１５％。
荷叶药材：精密称取已知含量的荷叶药材粉末
（６０目）（２羟基１甲氧基阿朴啡、原荷叶碱、荷叶碱
和莲碱的含量分别为００５３７％，０００２８％，００６３
１％和００２８９％）６份，每份约０５ｇ，分别置２５ｍＬ
锥形瓶中，分别精密加入２羟基１甲氧基阿朴啡对
照品溶液（０２６９ｍｇ·ｍＬ－１）１０ｍＬ，原荷叶碱
（００２８４ｍｇ·ｍＬ－１）对照品溶液０５ｍＬ，荷叶碱对
照品溶液（０３１５ｍｇ·ｍＬ－１）１０ｍＬ，莲碱对照品溶
液（０２９０ｍｇ·ｍＬ－１）０５ｍＬ，按２．３项下方法制得
供试品溶液，分别精密吸取 ２０μＬ，注入液相色谱
仪，测定色谱峰峰面积，计算２羟基１甲氧基阿朴
啡、原荷叶碱、荷叶碱和莲碱含量和回收率。２羟
基１甲氧基阿朴啡平均回收率为 ９９５３％，ＲＳＤ
１２％；原荷叶碱平均回收率为 １００５％，ＲＳＤ
２０％；荷叶碱平均回收率为 ９７５１％，ＲＳＤ２０％，
莲碱平均回收率为１００１％，ＲＳＤ１４％。
２．１０　样品含量测定　荷叶生物碱部位：分别精密
称取３批荷叶生物碱部位各３份，每份约１４ｍｇ，按
２．２项下方法制备供试品溶液。分别精密吸取上述
供试品溶液１０μＬ，２羟基１甲氧基阿朴啡、原荷叶
碱、荷叶碱和莲碱混合对照品溶液５μＬ，注入液相
色谱仪，测定色谱峰峰面积，外标一点法计算含量。
结果见表２。
表２　荷叶生物碱部位含量测定（ｎ＝３） ％　
Ｎｏ．
２羟基１甲氧基阿朴啡
质量分数 ＲＳＤ
原荷叶碱
质量分数 ＲＳＤ
荷叶碱
质量分数 ＲＳＤ
莲碱
质量分数 ＲＳＤ
１ ９０５ １２ １８４ ２２ ８９８ １３ ６９９ １０
２ ９４９ １９ ２１４ １６ ９３９ １９ ７２５ １８
３ ９６４ ２１ ２１５ １９ ９６６ １２ ７３１ １６
　　荷叶药材：分别精密称取制备荷叶生物碱部位
的３批荷叶药材粉末（６０目）各３份，每份约１０ｇ，
置２５ｍＬ锥形瓶中，按２．３项下方法制备供试品溶
液。分别精密吸取上述供试品溶液２０μＬ，２羟基
１甲氧基阿朴啡、原荷叶碱、荷叶碱和莲碱混合对照
品溶液５μＬ，注入液相色谱仪，测定色谱峰峰面积，
外标一点法计算含量。结果见表３。
３　讨论
荷叶生物碱类成分作为荷叶中一类重要活性物
质，具有较强的药理活性［３］。为了有效开发利用该
类成分，作者对荷叶生物碱部位的制备工艺进行了
研究（专利申请号２００７１０１２２６４４８），并进行了３批
工艺验证试验。３批荷叶生物碱部位的收率分别为
０４４％，０４２％，０４３％，以荷叶碱为对照，采用溴甲
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　　 表３　荷叶药材含量测定（ｎ＝３） ％　
Ｎｏ．
２羟基１甲氧基阿朴啡
质量分数 ＲＳＤ
原荷叶碱
质量分数 ＲＳＤ
荷叶碱
质量分数 ＲＳＤ
莲碱
质量分数 ＲＳＤ
１ ００６０６ １９ ０００２６ ２２ ００５６８ ２７ ００２７８ １９
２ ００５２６ ２２ ０００２７ ２２ ００５１３ １１ ００２６２ １０
３ ００６５８ １５ ０００２７ ３７ ００６２３ １７ ００２８７ １９
酚绿酸性染料比色法测定总生物碱含量分别达到
５６０６％，５７５２％，５８６７％，满足中药有效部位的要
求。３批荷叶生物碱部位样品的制备和含量测定结
果表明，荷叶生物碱部位制备工艺合理、稳定、有效、
可行。
色谱条件考察　检测波长选择：通过 ＰＤＡ检测
器选取不同波长条件进行对比，发现２羟基１甲氧
基阿朴啡、原荷叶碱、荷叶碱和莲碱均在２７０ｎｍ检
测波长下有最大吸收，并且干扰峰少。因此本研究
选择２７０ｎｍ作为检测波长。
流动相选择　通过比较乙腈水、乙腈０１％三
乙胺水溶液洗脱系统，发现后者能良好改善色谱峰
拖尾现象，对各成分的分离好，为了缩短分析时间，
采用梯度洗脱方式，并对洗脱条件进行了优选，最终
确定流动相为乙腈水（０１％三乙胺）梯度洗脱
（０～１０ｍｉｎ，３８∶６２；１０～１５ｍｉｎ，３８∶６２～０∶５０）。
荷叶药材提取方法考察　通过考察甲醇、氨性
氯仿对４种生物碱提取效率的影响，结果表明氨性
氯仿提取率高；在此基础上进一步考察超声、回流对
提取结果的影响，两种方法无显著性差异，故选择氨
性氯仿超声提取，并对提取溶剂用量（２０，２５，３０倍）
及提取时间（２０，３０，４０ｍｉｎ）进行了考察，确定溶剂
用量为２５倍，提取时间为３０ｍｉｎ。
本研究首次建立了荷叶药材和荷叶生物碱部位
中２羟基１甲氧基阿朴啡、原荷叶碱、荷叶碱和莲
碱的ＨＰＬＣ含量测定方法，并对３批荷叶药材和由
该３批药材制备得到的相应３批荷叶生物碱部位进
行了含量测定。测定结果表明，该方法操作简便，测
定结果准确、稳定，重复性好，是控制荷叶药材及其
生物碱部位和提取物质量的一种有效方法。
［参考文献］
［１］　中国药典．一部［Ｓ］．２００５：１９５．
［２］　肖桂青，卢向阳，田　云，等．荷叶生物碱类成分的研究进展
［Ｊ］．化学与生物工程，２００６，２３（５）：１．
［３］　刘淑萍，樊淑彦，候海妮，等．荷叶化学成分及药理作用研究进
展［Ｊ］．河北医科大学学报，２００５，２５（４）：２５５．
ＨＰＬＣｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆ２ｈｙｄｒｏｘｙ１ｍｅｔｈｏｘｙａｐｏｒｐｈｉｎｅ，ｐｒｏｎｕｃｉｆｅｒｉｎｅ，
ｎｕｃｉｆｅｒｉｎｅａｎｄｒｏｅｍｅｒｉｎｅｉｎＮｅｌｕｍｂｏｎｕｃｉｆｅｒａａｎｄｉｔｓａｌｋａｌｏｉｄｆｒａｃｔｉｏｎ
ＷＡＮＧＹｕｘｉａ，ＬＩＵＢｉｎ，ＳＨＩＲｅｎｂｉｎｇ
（ＢｅｉｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００１０２，Ｃｈｉｎａ）
　　［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｎＨＰＬＣｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｆｏｕｒａｌｋａｌｏｉｄｓ，ｉ．ｅ．２ｈｙｄｒｏｘｙ１ｍｅｔｈｏｘｙａｐｏｒ
ｐｈｉｎｅ，ｐｒｏｎｕｃｉｆｅｒｉｎｅ，ｎｕｃｉｆｅｒｉｎｅａｎｄｒｏｅｍｅｒｉｎｅ，ｉｎＮｅｌｕｍｂｏｎｕｃｉｆｅｒａａｎｄｉｔｓａｌｋａｌｏｉｄｆｒａｃｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｗａｓｃａｒｉｅｄ
ｏｕｔａｔ３５℃ ｏｎａＨｙｐｅｒｓｉｌＣ１８ｃｏｌｕｍｎ（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），ｅｌｕｔｉｎｇｗｉｔｈａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅｗａｔｅｒｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ０１％ ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅａｓ
ｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｓｉｎｇｒａｄｉｅｎｔｍｏｄｅ．Ｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｗａｓ１０ｍＬ·ｍｉｎ－１ａｎｄｄｅｔｅｃｔｉｏｎａｔｔｈｅｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｗａｓｓｅｔａｔ２７０ｎｍ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅ
ｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｓｏｆ２ｈｙｄｒｏｘｙ１ｍｅｔｈｏｘｙａｐｏｒｐｈｉｎｅ，ｐｒｏｎｕｃｉｆｅｒｉｎｅ，ｎｕｃｉｆｅｒｉｎｅａｎｄｒｏｅｍｅｒｉｎｅｗｅｒｅ０１１００６５８μｇ（ｒ＝０９９９５），００２１０
０１２６μｇ（ｒ＝０９９９５），０１０３０６１８μｇ（ｒ＝０９９９８），００８５６０５１４μｇ（ｒ＝０９９９５），ｗｉｔｈｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ（ｎ＝６）
ｗｅｒｅ１０１５％，９９１４％，９９２１％ ａｎｄ９８４１％ ｆｏｒｔｈｅａｌｋａｌｏｉｄｆｒａｃｔｉｏｎｏｆＮ．ｎｕｃｉｆｅｒａａｎｄ９９５３％，１００５％，９７５１％ ａｎｄ
１００１％ ｆｏｒＮ．ｎｕｃｉｆｅｒａｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｒｅｓｕｌｔｓｏｆｔｈｅｔｈｒｅｅｂａｔｃｈｅｓｏｆｓａｍｐｌｅｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｍｅｔｈｏｄ
ｗａｓｅａｓｙａｎｄａｃｃｕｒａｔｅｗｈｉｃｈｃｏｕｌｄｂｅｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｆｏｕｒｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｉｎＮ．ｎｕｃｉｆｅｒａａｎｄｉｔｓａｌｋａｌｏｉｄｆｒａｃｔｉｏｎ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　Ｎｅｌｕｍｂｏｎｕｃｉｆｅｒａ；２ｈｙｄｒｏｘｙ１ｍｅｔｈｏｘｙａｐｏｒｐｈｉｎｅ；ｐｒｏｎｕｃｉｆｅｒｉｎｅ；ｎｕｃｉｆｅｒｉｎｅ；ｒｏｅｍｅｒｉｎｅ；ＨＰＬＣ；ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ
ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ［责任编辑　王亚君］
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第３３卷第１４期
２００８年７月
　　　　　　　　　
　　　 中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
　　　　　　　
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ　１４
Ｊｕｌｙ，２００８