全 文 ：［２］ ＨａｎｏＹ，ＫｏｈｎｏＨ，ＩｔｏｈＭ，ｅｔａｌ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｏｆｔｈｒｅｅｎｅｗ２ａｒｌ
ｂｅｎｚｏｆｕｒａｎｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓｆｒｏｍｔｈｅＣｈｉｎｅｓｅｃｒｕｄｅｄｒｕｇＳａｎｇｂａｉｐｉ
［Ｊ］．ＣｈｅｍＰｈａｒｍＢｕｌ，１９８５，３３（１２）：５２９４．
［３］ ＦｕｋａｉＴ，ＨａｎｏＹ，ＨｉｒａｋｕｒａＫ，ｅｔａｌ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｏｆｔｗｏｎａｔｕｒａｌｈｙ
ｐｏｔｅｎｓｉｖｅｄｉｅｌｓａｌｄｅｒｔｙｐｅａｄｄｕｃｔｓ，ｍｕｌｂｅｒｏｆｕｒａｎｓＦａｎｄＧ，ｆｒｏｍ
ｔｈｅｃｕｌｔｉｖａｔｅｄｍｕｌｂｅｒｙｔｒｅｅ（ＭｏｒｕｓｌｈｏｕＫｏｉｄｚ）［Ｊ］．Ｃｈｅｍ
ＰｈａｒｍＢｕｌ，１９８５，（３３）：３１９５．
［４］ ＹｏｓｈｉｏＨ，ＫａｚｕｈｉｒｏＨ，ＴａｒｏＮ，ｅｔａｌ．Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｆｒｏｏｔｂａｒｋｏｆ
Ｍｏｒｕｓｌｈｏｕ１．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｏｆｔｗｏｎｅｗｄｉｅｌｓａｌｄｅｒｔｙｐｅａｄｄｕｃｔｓ，ｋｕ
ｗａｎｏｎｓＮａｎｄＯ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＭｅｄ，１９８４，（５０）：１２７．
［５］ 阮金兰，邹 健，蔡亚玲．菝葜的抗炎活性成分研究［Ｊ］．医药
导报，２００５，２４（８）：６７０．
［６］ ＢａｓｎｅｔＰ，ＫａｄｏｔａＳ，ＴｅｒａｓｈｉｍａＳ，ｅｔａｌ．Ｔｗｏｎｅｗ２ａｒｌｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ
ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓｆｒｏｍｈｙｐｏｇｌｙｃｅｍｉｃａｃｔｉｖｉｔｙｂｅａｒｉｎｇｆｒａｃｔｉｏｎｏｆＭｏｒｕｓｉｎ
ｓｉｇｎｉｓ［Ｊ］．ＣｈｅｍＰｈａｒｍＢｕｌ，１９９３，４１（７）：１２３８．
［７］ ＤｅｌｅＭＧ．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｂｅｔｗｅｅｎｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｓｉｎｃｅｌ
ｃｕｌｔｕｒｅａｎｄｉｎｗｈｏｌｅｐｌａｎｔｏｆＭａｃｌｕｒａｐｏｍｉｆｅｒａ［Ｊ］．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓ
ｔｒｙ，１９９５，３９（３）：５７５．
［８］ ＴａｋａｓｕｇｉＭ，ＭｕｎｏｚＬ，ＭａｓａｍｕｎｅＴ，ｅｔａｌ．Ｓｔｉｌｂｅｎｅｐｈｙｔｏａｌｅｘｉｎｓ
ｆｒｏｍｄｉｓｅａｓｅｄｍｕｌｂｅｒｙ［Ｊ］．ＣｈｅｍＬｅｔ，１９７８，８３（１１）：１２４１．
Ｓｔｕｄｙｏｆａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｐｈｅｎｏｌｉｃｃｏｍｐｏｕｎｄｓｆｒｏｍ
ｓｔｅｍｂａｒｋｓｏｆＭｏｒｕｓｙｕｎａｎｅｎｓｉｓ
ＣＵＩＸｉｑｉａｎｇ，ＷＡＮＧＨｏｎｇｑｉｎｇ，ＬＩＵＣｈａｏ，ＣＨＥＮＲｕｏｙｕｎ
（ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＢｉｏａｃｔｉｖｅＳｕｂｓｔａｎｃｅｓａｎｄＲｅｓｏｕｒｃｅｓＵｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎｅｓｅＨｅｒｂａｌＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆ
ＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓａｎｄＰｅｋｉｎｇＵｎｉｏｎＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｅｇｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００５０，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｓｔｕｄｙａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｐｈｅｎｏｌｉｃｃｏｍｐｏｕｎｄｓｆｒｏｍｓｔｅｍｂａｒｋｓｏｆＭｏｒｕｓｙｕｎａｎｅｎｓｉｓ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄ
ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｗｅｒｅｃａｒｉｅｄｏｕｔｂｙｓｉｌｉｃａｇｅｌ，ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ－２０ａｎｄＲＰ－１８ｃｏｌｕｍｎｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ．Ｔｈｅｃｈｅｍｉｃａｌｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｏｆｃｏｎｓｔｉｔｕ
ｅｎｔｓｗｅｒｅｅｌｕｃｉｄａｔｅｄｏｎｔｈｅｂａｓｉｓｏｆｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓａｎｄｓｐｅｃｔｒａｌｄａｔａ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｅｉｇｈｔｐｈｅｎｏｌｉｃｃｏｍｐｏｕｎｄｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄａｎｄ
ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄａｓ：ｍｕｌｂｅｒｏｆｕｒａｎＥ（１），ｍｕｌｂｅｒｏｆｕｒａｎＫ（２），ａｌｂａｎｏｌＢ（３），ｋｕｗａｎｏｎＨ（４），ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ（５），ｍｏｒａｃｉｎＭ（６），
ｍｏｒａｃｈａｌｃｏｎｅＡ（７），３′，５′，２，４ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｘｙ４（３ｍｅｔｈｙｌ１ｂｕｔｅｎｙｌ）ｓｔｉｌｂｅｎｅ（８）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ａｌｔｈｅｃｏｍｐｏｕｎｄｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄ
ｆｒｏｍｔｈｅｐｌａｎｔｆｏｒｔｈｅｆｉｒｓｔｔｉｍｅ，ａｎｄｃｏｍｐｏｕｎｄｓ２，３，６，８ｓｈｏｗｅｄｐｏｔｅｎｔａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｏｎａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｍｏｒｕｓｙｕｎａｎｅｎｓｉｓ；ａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｏｎａｃｔｉｖｉｔｙ；ｐｈｅｎｏｌｉｃ
［责任编辑 王亚君］
［收稿日期］ ２００７１０２２
［通讯作者］ 张辉，Ｔｅｌ：（０４３１）８６１７２０８０，Ｅｍａｉｌ：ｚｈａｎｇｈｕｉ＿８０８０＠１６３．ｃｏｍ
山梗菜生物碱类化合物的 ＥＳＩＭＳｎ研究
王秀丽，孙佳明，宋 洋，张 辉
（长春中医药大学 中医药与生物工程研发中心，吉林 长春 １３００１７）
［摘要］ 目的：对山梗菜中生物碱类化合物进行定性分析。方法：利用固相萃取技术（ＳＰＥ）、电喷雾多级串联
质谱技术（ＥＳＩＭＳｎ）对山梗菜中生物碱类化合物进行定性分析。结果：初步确定了山梗菜中的２个生物碱结构分
别是异山梗菜酮碱和８，１０二乙基山梗二酮，并根据其在正离子条件下表现出的特征质谱行为，提出了山梗菜中生
物碱类化合物可能的电喷雾质谱碎裂规律。结论：固相萃取技术、电喷雾多级串联质谱技术能够快速简便地对山
梗菜中生物碱类化合物进行定性分析。
［关键词］ 山梗菜；生物碱；固相萃取；电喷雾多级串联质谱
［中图分类号］Ｒ２８４．１ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）１３１５７２０３
·２７５１·
第３３卷第１３期
２００８年７月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １３
Ｊｕｌｙ，２００８
山梗菜是桔梗科 Ｃａｍｐａｎｕｌａｃｅａ半边莲属植物
山梗菜 ＬｏｂｅｌｉａｓｅｓｉｌｉｆｏｌｉａＬａｍｂ．的根或带根全草。
据《中华本草》［１］记载山梗菜有祛痰止咳、利尿消
肿、清热解毒功能。主治感冒发热、咳嗽痰喘、肝硬
化腹水、水肿、痈疽疔毒、蛇犬咬伤、蜂蜇。山梗菜为
半边莲属植物，其带根全草含有多种半边莲类生物
碱，具有中枢兴奋剂作用，是重要的神经胆碱受体激
动剂。生物碱对 ＰＨ值要求很高，极易吸附在硅胶
柱上，利用ＳＰＥ［２］柱能有效地除去杂质组分并浓缩
待测组分。电喷雾质谱技术以其灵敏度高、检测快
速和样品量少而成为植物粗提物中活性成分的快速
分析、鉴定的强有力手段［３］。本研究应用电喷雾多
级串联质谱（ＥＳＩＭＳｎ）技术研究山梗菜中的生物碱
类化合物，总结了它们的质谱碎裂规律。
１ 材料
质谱分析采用（Ａｇｉｌｅｎｔ１１００ｓｅｒｉｅｓ６３２０ｉｏｎ－
ｔｒａｐ，ＵＳＡ）电喷雾离子阱质谱。所用试剂均为分析
纯（北京化工厂）。ＡｇｅｌａＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓＣｌｅａｎｅｒｔＯＤＳ
－Ｎ－ＳＰＥ（Ｃ１８，未封端）；山梗菜药材采于延吉，经
长春中医药大学邓明鲁教授鉴定为Ｌ．ｓｅｓｉｌｉｆｏｌｉａ，标
本保存于本实验室。
２ 方法
２．１ 样品制备 粉碎干燥山梗菜的带根全草１０ｇ，
用１２０ｍＬ的甲醇回流提取２次，每次提取１ｈ。将
甲醇提取液过滤，合并滤液。减压回收甲醇溶液至
干。用０５％盐酸溶解过滤，三氯甲烷萃取３次，水
液用氨水调节至ｐＨ１２，醋酸乙酯［４］萃取３次，减压
回收醋酸乙酯溶液至干。甲醇溶解定容至１ｍＬ量
瓶中，取出０５ｍＬ上 ＳＰＥ小柱，分别用水、２０％甲
醇、５０％甲醇梯度洗脱。５０％甲醇洗脱部分过０４５
μｍ滤膜过滤，滤液用于电喷雾质谱分析。
２．２ 质谱分析条件 正离子模式，样品通过流动注
射泵进样，流速５μＬ·ｍｉｎ－１，干燥气温度３２５℃；
干燥气流量５０μＬ·ｍｉｎ－１；雾化气压强１５０ＭＰａ；
毛细管电压４ｋＶ。质量范围ｍ／ｚ５０～１２００，实验前
质量数经过校正。
３ 结果与讨论
对５０％甲醇洗脱部分进行了电喷雾质谱分析。
图１为正离子模式下５０％甲醇洗脱部分电喷雾一
级全扫描质谱图［５］。在电喷雾一级正离子质谱中，
山梗菜生物碱类化合物出现［Ｍ＋Ｈ］＋离子峰，经分
析确定，ｍ／ｚ３２２，２４０离子所对应化合物的分子量
分别为３２１和２３９。根据得到分子量的信息，可以
初步确定化合物１可能为异山梗菜酮碱，化合物２
可能为８，１０二乙基山梗二酮。
图１ 样品正离子模式的电喷雾全扫描质谱图
为进一步验证以上推论，选择 ｍ／ｚ２４０和 ３２２
离子峰进行串联质谱研究，并与相关文献对照［６，７］。
从图２，３可以看出，这两个化合物在多级串联
质谱中表现出一些相同的碎裂规律，主要表现为一
些特征的离子存在，如８２（哌啶基团），９６等。这些
特征离子的存在为有效鉴定哌啶生物碱类化合物提
供了重要的结构信息。化合物２正离子模式下多极
串联质谱如图２所示。
图２ ［Ｍ＋Ｈ］＋ｍ／ｚ３２２二级和三级质谱图
Ａ．二级；Ｂ．三级
化合物１ ＭＳＭＳ谱中产生了１个主要的碎
片离子ｍ／ｚ２０２，可能对应着丢失１２０（苯乙酮）中性
碎片，对ｍ／ｚ２０２，做了ＭＳ３，有２个主要的碎片离子
ｍ／ｚ９６和８２可能分别对应以下中性碎片丢失：１２０
（苯乙酮）和１０６。这些质谱碎裂特征与异山梗菜酮
碱的结构是相符的。裂解机理见图３。
化合物２ ＭＳＭＳ谱中产生了２个主要的碎
片离子 ｍ／ｚ１６８，１５４，可能对应着丢失以下的中性
碎片７２（２丁酮），８６。对 ＭＳ２中丰度最高的１６８，
做了 ＭＳ３，有两个主要的碎片离子 ｍ／ｚ９６和１１０，
可能分别对应以下中性碎片丢失：７２和 ５８（丙
醛）。对 ｍ／ｚ１５４做了 ＭＳ３，有１个主要的碎片离
子８２，可能丢失７２中性碎片。这些质谱碎裂特征
与８，１０二乙基山梗二酮的结构是相符的。裂解
机理见下图４，５。
·３７５１·
第３３卷第１３期
２００８年７月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １３
Ｊｕｌｙ，２００８
图３ ［Ｍ＋Ｈ］＋ｍ／ｚ２４０二级和三级质谱图
Ａ．二级；Ｂ［Ｍ＋Ｈ］＋ｍ／ｚ２４０～１６８三级；Ｃ．［Ｍ＋Ｈ］＋ｍ／ｚ２４０～１５４三级
图４ ｍ／ｚ３２２裂解图示
图５ ｍ／ｚ２４０裂解图示
采用电喷雾多级串联质谱技术分析了山梗菜生
物碱类化合物，根据它们在串联质谱中表现出与其
自身结构符合的特征质谱行为，通过与文献比较，可
以直接快速分析化合物的分子结构，虽然该方法不
能确定化合物的最终结构，但可为植物粗提物中化
学成分的快速分析、鉴定提供一种简单且有效的方
法，对化合物有效部位提取具有指导作用。
［参考文献］
［１］ 国家中医药管理局中华本草编委会．中华本草［Ｍ］．上海：上
海科学技术出版社，１９９９（７）：６２０．
［２］ 董学畅，张 莉，普继兰．固相萃取技术及其应用新进展［Ｊ］．
云南化工，２００４，３１（６）：２６．
［３］ 李 丽，刘春明，刘志强，等．肉苁蓉中苯乙醇苷类化合物的分
离提取及电喷雾质谱研究［Ｊ］．质谱学报，２００６，７（６）：２３２．
［４］ 喻朝阳，王晓琳．生物碱提取与纯化技术应用进展［Ｊ］．化工进
展，２００６，２５（３）：２５９．
［５］ 许庆轩，王 勇，刘志强，等．草乌中二萜类生物碱的电喷雾串
联质谱研究［Ｊ］．高等学校化学学报，２００５，２６（４）：６３８．
［６］ 张明哲，王景朝．江南山梗菜化学成分的研究［Ｊ］．植物学报，
１９９２，３４（１）：５８．
［７］ 张明哲，曹立伟．紫燕草化学成分的研究［Ｊ］．北京大学学报：
自然科学版，１９９１，２７（２）：２０５．
ＳｔｕｄｔｙｏｎａｌｋａｌｏｉｄｓｉｎＬｏｂｅｌｉａｓｅｓｓｉｌｉｆｏｌｉａｂｙＥＳＩＭＳｎ
ＷＡＮＧＸｉｕｌｉ，ＳＵＮＪｉａｍｉｎｇ，ＳＯＮＧＹａｎｇ，ＺＨＡＮＧＨｕｉ
（ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＣｅｎｔｅｒｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅａｎｄＢｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＣｈａｎｇｃｈｕｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆ
ＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ１３０１１７，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｍａｋｅｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｉｓｏｎａｌｋａｌｉｏｄｉｎＬｏｂｅｌｉａｓｅｓｉｌｉｆｏｌｉａ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＴｈｅＥＳＩＭＳｎｍｅｔｈｏｄｗａｓｕｓｅｄ
ｆｏｒｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｉｓ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＴｈｅｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｏｆｔｗｏａｌｋａｌｉｏｄｓｉｎｐｌａｎｔｅｘｔｒａｃｔｏｆＬ．ｓｅｓｉｌｉｆｏｌｉａｗｅｒｅｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｙａｎａｌｙｚｅｄａｎｄ
ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄａｓｎｏｒｌｏｂｅｌａｎｉｎｅａｎｄ８，１０ｄｉｅｔｈｙｌｏｂｅｌｉｄｉｏｎｅｂｙｅｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙｉｏｎｉｚａｔｉｏｎｍｕｌｔｉｓｔａｇｅｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙｉｎｐｏｓｉｔｉｖｅｍｏｄｅ．Ｔｈｅｎ
ｔｈｅｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｗｅｒｅｅｘｐｌｏｒｅｄ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＳＰＥａｎｄＥＳＩＭＳｎｃｏｕｌｄｓｉｍｐｌｙａｎｄｒａｐｉｄｌｙｐｒｏｖｉｄｅｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ
ｏｆａｌｋａｌｉｏｄｓｉｎＬ．ｓｅｓｉｌｉｆｏｌｉａ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｌｏｂｅｌｉａｓｅｓｉｌｉｆｏｌｉａ；ａｌｋａｌｉｏｄ；ＳＰＥ；ＥＳＩＭＳｎ
［责任编辑 王亚君］
·４７５１·
第３３卷第１３期
２００８年７月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １３
Ｊｕｌｙ，２００８