全 文 :·研究论文·
桔梗种子品质检验及质量标准研究
郭巧生1,赵荣梅1,刘 丽1,董其亭2,付志文2
(1南京农业大学 中药材研究所,江苏 南京 210095;
2山东鼎立中药材科技有限公司,山东 淄博 255086)
[摘要] 目的:研究桔梗种子的检验方法和质量分级标准。方法:对不同产地,不同生长年限的桔梗种子的品
种品质和播种品质进行测定。结果与结论:测定了不同产地,不同生长年限的桔梗种子净度、千粒重、含水量、生活
力等,并据此初步制订了桔梗种子的质量分级标准。
[关键词] 桔梗;种子;品质检验;质量标准
[中图分类号]S567 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2007)05037705
[收稿日期] 20060628
[基金项目] 国家科技攻关计划项目(2001BA701A59)
[通讯作者] 郭巧生,Tel:(025)84396591,Email:gqs@herb
stimes.com
桔梗 Platycodongrandiflorum(Jacq.)A.DC.
为桔梗科植物,以其干燥根入药,味苦辛,性平,归肺
经;具宣肺,利咽,祛痰,排脓等功效,用于咳嗽痰多,
胸闷不畅,咽痛,音哑,痢疾腹痛等[1]。桔梗是一种
药食两用的常用大宗药材,市场需求量大,提高其产
量和质量对提高我国药农的收入和增加出口创汇都
具有重要促进作用。曾有桔梗种子萌发特性及促进
种子萌发方面的研究报道[2,3],但有关桔梗种子质
量标准方面的研究未见报道。作者通过对桔梗种子
净度、千粒重、含水量、生活力等主要品质检验指标
的研究,初步制订了桔梗种子的质量分级标准。
1 材料
实验所用桔梗种子为2004年10月采自山东等
地12个产区栽培居群,具体来源和编号见表1。经
作者鉴定,室温储藏备用。TTC、红墨水等,电热恒
温鼓风干燥箱(DHG-9030A型),SPX-250-GB
培养箱。
2 方法
2.1 净度
采用四分法。分别将已抽取的2份样品倒在光洁
的桌面上,把纯净种子、废种子和夹杂物分开。若样品
混有较大的或多量的杂物时,要在样品称重后,在分取
测定样品前进行必要的清理并称重。重复3次,余同。
表1 桔梗种子实验材料
编号 产地 生长年限
S41 山东淄博 1
S42 山东淄博 2
S43 山东淄博 3
S32 山东淄博 2
B1 安徽亳州 1
B2 安徽亳州 2
B3 安徽亳州 3
AT2 安徽太和 2
HX1 河南新乡 1
HT2 河南桐柏 2
HT1 河南桐柏 1
JJ2 江苏句容 2
种子净度(%)=100% -[废种子含量(%)+杂质含
量(%)]
2.2 千粒重
将全部纯净种子用四分法分成4份,从每份中
随机取250粒,共1000粒为1组。
2.3 含水量
105℃恒重法(标准法):此法又可分为整粒低
恒温和粉碎低恒温2种方法。前者称取05g整粒
种子直接用于含水量的测定,后者就是将待测种子
粉碎后进行含水量测定。
种子水分(%)=[(烘前试样重-烘后试样重)/烘前试
样重]×100%
135℃高温法:在135℃方法进行烘干测定,方
法同上。
2.4 生活力测定
实验材料为常温干燥下贮藏了近2个月的S42
样品。
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2.4.1 TTC法 TTC溶液的配制:用 pH65~70
的磷酸缓冲溶液将2,3,5氯化三苯基四氮唑(TTC)
分别配成05%,04%,03%,02%,01% 5种不
同质量分数的溶液,避光保存。
不同浸种时间的处理:分别浸种4,8,12,16,20,24,
28,32h。挑选相对饱满健全的种子(每处理3次重复,
每重复50粒,下同),用刀片纵切成两瓣,使胚1/2分,
取半粒放入装有05%TTC的小试管,分别放入25,30,
35℃的恒温培养箱中染色,染色时间为24h。
不同染色时间的处理:分别采用 4,8,12,16,
20,24,28,32h对桔梗种子进行浸泡。在25℃下进
行染色,时间分别为6,12,18,24,30h。
不同 TTC质量分数的处理:用 01%,02%,
03%,04%,05% 5个质量分数的TTC,对桔梗种
子采用浸种24h,35℃下染色16h。
生活力(%)=有生活力种子数/供试验种子数×100%
2.4.2 红墨水法 不同浸泡时间的处理:浸种时间
为12,16,20,24,28h。
不同染色温度和染色时间的处理:采用25,30,
35℃的染色温度,分别染色05,1,2h。
不同浓度红墨水的处理:用1%,2%,3%,4%,
5% 5个质量分数的红墨水,对桔梗种子采用浸种
28h,25℃下染色05h进行染色。
2.5 不同产地桔梗种子发芽率的比较实验
在桔梗种子适宜的发芽条件下[2],对不同产
地、不同生长年限桔梗种子的发芽率进行测定,确定
不同产地、不同生长年限的桔梗种子的发芽率。
3 结果与分析
3.1 不同产地桔梗种子净度分析
从表2可知,桔梗种子的净度大多在 90%以
上,但S43净度较低,为7249%,HT1的种子净度
最低,含砂石多,净度仅为3402%。
表2 不同产地桔梗种子净度
编号 净种子/g 重型混杂物/g 其他植物种子/g 特瘪及梗/g 原样重/g 分析后样品重/g 净度/% 误差/%
S41 1796 047 001 141 2000 1985 9048a 075
S42 1828 049 002 109 2000 1988 9195a 060
S43 1444 548 000 000 2000 1992 7249b 040
S32 1886 063 003 025 2000 1974 9554a 130
B1 1828 006 010 101 2000 1997 9154a 015
B2 1890 040 042 026 2000 1998 9460a 010
B3 1872 028 000 064 2000 1964 9532a 180
AT2 1784 010 001 186 2000 1981 9006a 095
HX1 1933 006 002 038 2000 1979 9768a 105
HT2 1850 019 006 103 2000 1978 9353a 110
HT1 677 1272 001 040 2000 1990 3402c 050
JJ2 1862 010 002 106 2000 1980 9404a 100
3.2 不同产地桔梗种子千粒重
从表3知桔梗种子的千粒重在087~121g。
表3 桔梗种子千粒重结果
编号 千粒重/g
S41 1067
S42 1016
S43 0872
S32 0927
B1 1086
B2 1016
B3 0995
AT2 1119
HX1 1074
HT2 1020
HT1 1105
JJ2 1202
3.3 不同产地桔梗种子含水量
由表4可知不同产地桔梗种子的含水量在
5%~15%,在 4种烘干方法中,以种子磨碎后在
(135±2)℃下烘干7h后测得含水率为最高;测得
不同产地桔梗种子含水量:粉碎高恒温 >整粒高恒
温>整粒低恒温>粉碎低恒温。因此桔梗种子含水
量可以采用磨碎种子、(135±2)℃烘干7h的条件
测定。
3.4 生活力测定
3.4.1 TTC法
3.4.1.1 不同浸种时间和染色温度对桔梗种子生
活力的影响 表5结果表明,在25℃染色下,在浸
种24h处理后的染色结果高于该温度下的其他浸
种处理;在30℃染色下,浸种20h处理后的染色结
果高于该温度下的其他浸种处理;在35℃染色下,
浸种16h处理后的染色结果高于该温度下的其他
浸种处理。在相同浸种时间下,35℃下染色后测得
的桔梗种子生活力结果高于在25,30℃下染色后测
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得的桔梗种子生活力结果。
表4 不同产地桔梗种子含水量 %
编号 整粒低恒温 整粒高恒温 粉碎低恒温 粉碎高恒温
S41 828 880 724 926
S42 742 956 672 1000
S43 1042 1102 782 1166
S32 900 932 728 958
B1 832 1260 720 1372
B2 632 940 616 1026
B3 762 792 594 866
AT2 950 1388 772 1460
HX1 936 956 622 972
HT2 838 862 622 898
HT1 836 838 608 862
JJ2 850 880 792 924
表5 不同浸种时间对桔梗种子生活力的影响 %
染色温度
/℃
浸种时间/h
12 16 20 24 28
25 6000aa 8067ba 8933ca 9133ca 7400aa
30 6767aa 7867ba 8133ba 7800ba 7600ba
35 8400aa 9600aa 9200aa 9267aa 8400aa
注:上标字母表示同一温度不同浸种时间下桔梗种子生活力测
定结果的比较(即横向数据间比较);下标字母表示同一浸种时间下
不同温度染色的生活力测定结果比较(即纵向数据间比较),在 α=
005水平下作显著性方差分析(表6~10同)
3.4.1.2 不同染色时间对桔梗种子生活力的影响
从表6可知,在其他因子保持一致的条件下,浸种
24h后的桔梗种子生活力测定结果高于其他处理
下的生活力测定结果,且在该浸种时间处理下,不同
染色时间处理后桔梗种子生活力测定结果间不存在
显著差异。在25℃染色温度下,桔梗种子生活力测
定的最佳条件为浸种24h,染色12h。
3.4.1.3 不同浓度TTC染色对桔梗种子生活力的
影响 表7结果表明,02% ~05%的 TTC染色处
表6 不同染色时间对桔梗种子生活力的影响 %
染色时间
/h
浸种时间/h
12 16 20 24 28
6 7333aa 7400aa 6933aa 8867ba 8333ba
12 7533abab 6733ba 7933bab 9000ca 8800ca
18 8067aab 8200ab 8333ab 8933ab 8600aa
24 8667ab 8267ab 7200ba 8933aa 8467aa
30 8600ab 7400ba 7067ba 8600aa 8400aa
理后桔梗种子的生活力测定结果间不存在显著差
异,采用05%TTC染色后桔梗种子生活力测定结
果最佳;随所用 TTC浓度的增加,桔梗种子的染色
效果更加明显。
表7 不同质量浓度TTC染色对桔梗种子
生活力的影响 %
TTC 生活力
01 8667a
02 9067ab
03 9400b
04 9467b
05 9600b
3.4.2 红墨水法
3.4.2.1 不同染色温度和浸种时间处理对桔梗种
子生活力的影响 从表8知,在3个不同的染色温
度下,生活力最佳结果都出现在染色05h,其中25
℃染色温度下,浸种28h、染色05h后的生活力测
定结果显著高于25℃染色温度下的其他处理;30
℃染色温度下,浸种20h或24h、染色05h后的生
活力测定结果显著高于该染色温度下的其他处理;
35℃染色温度下,浸种12h、染色05h后的生活力
测定结果显著高于该染色温度下的其他处理。
表8 不同染色温度和浸种时间处理对桔梗种子生活力的影响 %
染色温度
/℃
染色时间
/h
浸种时间/h
12 16 20 24 28
25 05 9533aa 9667aba 9667aba 9667aba 9800ba
10 9333abab 9133ab 9400abab 9533ba 9467bb
20 9267ab 8933bb 9133abb 9067abb 9200ac
30 05 9267aa 9467aa 9533aa 9533aa 9267aa
10 9267aa 9267aa 9267ab 9267aab 9467aa
20 8800aa 8800ab 9200ab 9067ab 9200aa
35 05 9733aa 9133ba 9467aa 9667aa 9667aa
10 9533aa 9267aa 9267aa 9267aa 9267ab
20 9133ab 8733aba 9000aa 8333bb 8600abc
3.4.2.2 不同浓度红墨水染色对桔梗种子生活力
的影响 从表9可知,浸种28h,25℃下染色05
h,采用不同浓度红墨水染色处理后,桔梗种子生活
力测定结果间不存在显著差异,采用1%红墨水染
色后测得的桔梗种子生活力最好。
综合实验结果发现:采用红墨水法测定桔梗种
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表9 不同质量分数红墨水染色处理对桔梗种子
生活力的影响 %
红墨水质量分数 生活力
1 9867a
2 9800a
3 9800a
4 9667a
5 9733a
子生活力的最佳条件为:浸种28h,1%红墨水在25
℃下染色05h。
3.5 不同产地桔梗种子发芽率比较
从表10可知,不同产地桔梗种子的发芽率间存
在显著差异。其中发芽率最高的是 S42,为
8367%,S32的发芽率最低,仅为267%。同产地
二年生的桔梗种子发芽率明显高于一年生的桔梗种
子发芽率,不同产地相同生长年限的桔梗种子发芽
率间存在较大差异。
表10 不同产地桔梗种子发芽率的比较 %
编号 发芽率
S41 3967d
S42 8367a
S43 3400de
S32 267f
B1 3033de
B2 4767c
B3 8267a
AT2 5800b
HX1 4833c
HT2 5167bc
HT1 3433de
JJ2 3233de
3.6 桔梗种子的质量分级标准的初步制订
依据测定结果,结合笔者业已报道的桔梗种子
发芽情况[2],初步制订桔梗种子质量分级标准,见
表11。
4 讨论
表11 桔梗种子质量分级标准
级别 净度/% 千粒重/g 生活力/% 含水量/% 发芽率/% 外形特征
一 ≥95 ≥11 ≥90 ≤90 ≥60 黑亮、饱满、有光泽,大小均匀,干燥,无杂质
二 90~95 1~11 80~90 90~110 40~60 较饱满、黑色、略有光泽,大小较均匀,有少许瘪粒及杂质
三 <90 <1 <80 110~150 <40 瘦、瘪、黄褐色,无光泽,大小不均匀,有瘪粒和杂质
4.1 桔梗种子生活力测定方法 种子生活力测定
的前处理:种子生活力测定需要一定时间的软化处
理。桔梗种子有一定的硬度,实验开始设计了浸种
4,8,32h。结果发现,浸种4,8h时,由于种子尚未
泡开,所以导致:一方面种子很难切开,另一方面染
色结果误差较大。浸种32h后种子的胚易脱落,不
利于检测。所以桔梗种子生活力测定前处理浸种时
间以12~28h为宜。
TTC法测定种子生活力是一种比较经典的方
法。是美国学者莱康(Lakon)1942年提出的[4]。该
法具有快速、经济、准确和应用广泛等特点[5]。利
用TTC法测定桔梗种子生活力时发现,染色温度对
桔梗种子生活力测定的结果影响最大,TTC浓度对
生活力测定结果影响较小。
红墨水法测定种子生活力是日常生活中的常用
方法。该法简单快速,经济却又不失准确性。利用
此法测定桔梗种子生活力发现,染色时间对桔梗种
子生活力测定结果影响最大,红墨水浓度对生活力
测定结果影响最小。
在种子生活力测定时,种子质量的优劣对生活
力测定结果有较大影响。从简化程序和实验成本的
角度,宜采用红墨水法。2种生活力测定方法均表
明:随染色温度的增加,达到最佳生活力测定结果所
需要的浸种时间缩短。
4.2 桔梗种子分级标准说明 作者曾对不同产地、
不同生长年限的桔梗种子发芽特性进行研究[2,3],
结果发现外形黑亮、饱满的桔梗种子的发芽率可以
达到 60%以上,但大部分桔梗种子的发芽率在
40%~60%。外形瘦、瘪、黄褐色的桔梗种子发芽率
更低,在 40%以下。对于采收不久的桔梗种子来
讲,生活力较高,一般都能达到80%以上,优良种子
的生活力可达90%以上。桔梗种子的净度一般在
90%左右,优良种子的净度在95%以上,较差则低
于90%,大部分桔梗种子的净度在90%~95%。大
部分桔梗种子的含水量处于5% ~15%,极少数含
水量低于 5%。综合上述因素,可将净度、饱满度
(千粒重)及生活力作为衡量桔梗种子分级标准的
主要依据,桔梗种子的外观色泽、发芽率及含水量可
作为衡量其分级标准的次要依据。
[参考文献]
[1] 中国药典[S].一部.2005:196.
[2] 郭巧生,赵荣梅,刘 丽,等.桔梗种子发芽特性的研究[J].中
国中药杂志,2006,31(11):879.
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ChinaJournalofChineseMateriaMedica
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[3] 赵荣梅,刘 丽,郭巧生外源物质对桔梗种子发芽的影响
[J].中国中药杂志,2006,31(12):966.
[4] 颜启传.种子检验的原理和技术[M].北京:农业出版社,
1992:297.
[5] 应叶青,申亚梅,李 浪.3种阔叶树种子生活力四唑法测定研
究[J].种子,2005,24(1):32.
StudyonseedqualitytestandqualitystandardofPlatycodongrandiflorum
GUOQiaosheng1,ZHAORongmei1,LIULi1,DONGQiting2,FUZhiwen2
(1InstituteofChineseMedicinalMaterials,NanjingAgriculturalUniversity,Nanjing210095,China;
2ShangdongDingliHerbalMedicineCo.Ltd.,Zibo255086,China)
[Abstract] Objective:Tostudyqualitytest,andestablishqualityclassificationstandardofPlatycodongrandiflorum.Method:
TheseedqualityandplantingqualityofPgrandiflorumfromdiferentproducingareasandindiferentgrowingyearsweremeasured.
ResultandConclusion:Therangeofseedpurity,weightper1000seeds,seedmoisturecontent,seedviabilityweredeterminedand
theprimaryseedqualityclassificationstandardwasestablished.
[Keywords] Platycodongrandiflorum;seed;charactertest;qualitystandard [责任编辑 张宁宁]
连翘质量变异研究
李卫建1,2,李先恩1,祁建军1
(1中国医学科学院 中国协和医科大学 药用植物研究所,北京 100094;
2农业部 环境保护科研监测所,天津 300191)
[摘要] 目的:研究不同产地和年份间连翘质量变异。方法:百粒法测定壳百果重,千粒法测定种子千粒重,
采用HPLC测定老翘和种子中有效成分的含量。结果:不同产地和年份间连翘的壳百果重、种子千粒重、种子和壳
中有效成分的含量存在显著的差异。结论:不同产地连翘质量不稳定。
[关键词] 连翘;百果重;千粒重;有效成分;产地;年份
[中图分类号]R282 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2007)05038104
[收稿日期] 20050712
[通讯作者] 李先恩,Tel:(010)62810019,Email:xianenli@
sina.com
连翘为木犀科 Oleaceae连翘属植物连翘 For
sythiasuspensa(Thunb)Vahl的干燥果实。连翘药
材来源以野生资源为主,生于海拔600~2000m的
半阴山坡或向阳山坡的疏灌木丛中,主要分布于山
西、河南、陕西3省,湖北、山东部分地区有少量分
布。本实验分别对不同产地和不同年份间连翘壳百
果重、种子千粒重和有效成分的含量变化进行研究,
为科学的评价和控制连翘药材质量提供理论依据。
1 材料和方法
根据资源调查情况,2003年采集不同产地连翘
样品共12份,2004年采集不同产地连翘样品共 9
份。采样方法是:选择连翘分布相对集中的区域作
为采样点,每个采样点采样连翘单株50株以上,采
集种子与连翘壳约1kg,3个重复。2003年与2004
年相同产地采样地点为同一居群。
壳百果重:将去除种子后的果壳充分混合均匀,
随机取出200个果壳(完整壳的一半)称重,重复3
次,计算平均值;种子千粒重:将种子充分混合,随机
取出1000粒称重,重复3次,计算平均值;有效成
分含量测定参考张文婷[1]的HPLC指纹图谱法。
2 结果与分析
21 连翘壳百果重比较 对2003年、2004年不同
产地间壳百果重进行比较表明(表 1),2003年 12
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