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Study on seed quality test and quality standard of Platycodon grandiflorum

桔梗种子品质检验及质量标准研究



全 文 :·研究论文·
桔梗种子品质检验及质量标准研究
郭巧生1,赵荣梅1,刘 丽1,董其亭2,付志文2
(1南京农业大学 中药材研究所,江苏 南京 210095;
2山东鼎立中药材科技有限公司,山东 淄博 255086)
[摘要] 目的:研究桔梗种子的检验方法和质量分级标准。方法:对不同产地,不同生长年限的桔梗种子的品
种品质和播种品质进行测定。结果与结论:测定了不同产地,不同生长年限的桔梗种子净度、千粒重、含水量、生活
力等,并据此初步制订了桔梗种子的质量分级标准。
[关键词] 桔梗;种子;品质检验;质量标准
[中图分类号]S567 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2007)05037705
[收稿日期] 20060628
[基金项目] 国家科技攻关计划项目(2001BA701A59)
[通讯作者] 郭巧生,Tel:(025)84396591,Email:gqs@herb
stimes.com
  桔梗 Platycodongrandiflorum(Jacq.)A.DC.
为桔梗科植物,以其干燥根入药,味苦辛,性平,归肺
经;具宣肺,利咽,祛痰,排脓等功效,用于咳嗽痰多,
胸闷不畅,咽痛,音哑,痢疾腹痛等[1]。桔梗是一种
药食两用的常用大宗药材,市场需求量大,提高其产
量和质量对提高我国药农的收入和增加出口创汇都
具有重要促进作用。曾有桔梗种子萌发特性及促进
种子萌发方面的研究报道[2,3],但有关桔梗种子质
量标准方面的研究未见报道。作者通过对桔梗种子
净度、千粒重、含水量、生活力等主要品质检验指标
的研究,初步制订了桔梗种子的质量分级标准。
1 材料
实验所用桔梗种子为2004年10月采自山东等
地12个产区栽培居群,具体来源和编号见表1。经
作者鉴定,室温储藏备用。TTC、红墨水等,电热恒
温鼓风干燥箱(DHG-9030A型),SPX-250-GB
培养箱。
2 方法
2.1 净度
采用四分法。分别将已抽取的2份样品倒在光洁
的桌面上,把纯净种子、废种子和夹杂物分开。若样品
混有较大的或多量的杂物时,要在样品称重后,在分取
测定样品前进行必要的清理并称重。重复3次,余同。
表1 桔梗种子实验材料
编号 产地 生长年限
S41 山东淄博 1
S42 山东淄博 2
S43 山东淄博 3
S32 山东淄博 2
B1 安徽亳州 1
B2 安徽亳州 2
B3 安徽亳州 3
AT2 安徽太和 2
HX1 河南新乡 1
HT2 河南桐柏 2
HT1 河南桐柏 1
JJ2 江苏句容 2
  种子净度(%)=100% -[废种子含量(%)+杂质含
量(%)]
2.2 千粒重
将全部纯净种子用四分法分成4份,从每份中
随机取250粒,共1000粒为1组。
2.3 含水量
105℃恒重法(标准法):此法又可分为整粒低
恒温和粉碎低恒温2种方法。前者称取05g整粒
种子直接用于含水量的测定,后者就是将待测种子
粉碎后进行含水量测定。
种子水分(%)=[(烘前试样重-烘后试样重)/烘前试
样重]×100%
135℃高温法:在135℃方法进行烘干测定,方
法同上。
2.4 生活力测定
实验材料为常温干燥下贮藏了近2个月的S42
样品。
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第32卷第5期
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2.4.1 TTC法 TTC溶液的配制:用 pH65~70
的磷酸缓冲溶液将2,3,5氯化三苯基四氮唑(TTC)
分别配成05%,04%,03%,02%,01% 5种不
同质量分数的溶液,避光保存。
不同浸种时间的处理:分别浸种4,8,12,16,20,24,
28,32h。挑选相对饱满健全的种子(每处理3次重复,
每重复50粒,下同),用刀片纵切成两瓣,使胚1/2分,
取半粒放入装有05%TTC的小试管,分别放入25,30,
35℃的恒温培养箱中染色,染色时间为24h。
不同染色时间的处理:分别采用 4,8,12,16,
20,24,28,32h对桔梗种子进行浸泡。在25℃下进
行染色,时间分别为6,12,18,24,30h。
不同 TTC质量分数的处理:用 01%,02%,
03%,04%,05% 5个质量分数的TTC,对桔梗种
子采用浸种24h,35℃下染色16h。
生活力(%)=有生活力种子数/供试验种子数×100%
2.4.2 红墨水法 不同浸泡时间的处理:浸种时间
为12,16,20,24,28h。
不同染色温度和染色时间的处理:采用25,30,
35℃的染色温度,分别染色05,1,2h。
不同浓度红墨水的处理:用1%,2%,3%,4%,
5% 5个质量分数的红墨水,对桔梗种子采用浸种
28h,25℃下染色05h进行染色。
2.5 不同产地桔梗种子发芽率的比较实验
在桔梗种子适宜的发芽条件下[2],对不同产
地、不同生长年限桔梗种子的发芽率进行测定,确定
不同产地、不同生长年限的桔梗种子的发芽率。
3 结果与分析
3.1 不同产地桔梗种子净度分析
从表2可知,桔梗种子的净度大多在 90%以
上,但S43净度较低,为7249%,HT1的种子净度
最低,含砂石多,净度仅为3402%。
表2 不同产地桔梗种子净度
编号 净种子/g 重型混杂物/g 其他植物种子/g 特瘪及梗/g 原样重/g 分析后样品重/g 净度/% 误差/%
S41 1796 047 001 141 2000 1985 9048a 075
S42 1828 049 002 109 2000 1988 9195a 060
S43 1444 548 000 000 2000 1992 7249b 040
S32 1886 063 003 025 2000 1974 9554a 130
B1 1828 006 010 101 2000 1997 9154a 015
B2 1890 040 042 026 2000 1998 9460a 010
B3 1872 028 000 064 2000 1964 9532a 180
AT2 1784 010 001 186 2000 1981 9006a 095
HX1 1933 006 002 038 2000 1979 9768a 105
HT2 1850 019 006 103 2000 1978 9353a 110
HT1 677 1272 001 040 2000 1990 3402c 050
JJ2 1862 010 002 106 2000 1980 9404a 100
3.2 不同产地桔梗种子千粒重
从表3知桔梗种子的千粒重在087~121g。
表3 桔梗种子千粒重结果
编号 千粒重/g
S41 1067
S42 1016
S43 0872
S32 0927
B1 1086
B2 1016
B3 0995
AT2 1119
HX1 1074
HT2 1020
HT1 1105
JJ2 1202
3.3 不同产地桔梗种子含水量
由表4可知不同产地桔梗种子的含水量在
5%~15%,在 4种烘干方法中,以种子磨碎后在
(135±2)℃下烘干7h后测得含水率为最高;测得
不同产地桔梗种子含水量:粉碎高恒温 >整粒高恒
温>整粒低恒温>粉碎低恒温。因此桔梗种子含水
量可以采用磨碎种子、(135±2)℃烘干7h的条件
测定。
3.4 生活力测定
3.4.1 TTC法
3.4.1.1 不同浸种时间和染色温度对桔梗种子生
活力的影响 表5结果表明,在25℃染色下,在浸
种24h处理后的染色结果高于该温度下的其他浸
种处理;在30℃染色下,浸种20h处理后的染色结
果高于该温度下的其他浸种处理;在35℃染色下,
浸种16h处理后的染色结果高于该温度下的其他
浸种处理。在相同浸种时间下,35℃下染色后测得
的桔梗种子生活力结果高于在25,30℃下染色后测
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得的桔梗种子生活力结果。
     表4 不同产地桔梗种子含水量     %
编号 整粒低恒温 整粒高恒温 粉碎低恒温 粉碎高恒温
S41 828 880 724 926
S42 742 956 672 1000
S43 1042 1102 782 1166
S32 900 932 728 958
B1 832 1260 720 1372
B2 632 940 616 1026
B3 762 792 594 866
AT2 950 1388 772 1460
HX1 936 956 622 972
HT2 838 862 622 898
HT1 836 838 608 862
JJ2 850 880 792 924
表5 不同浸种时间对桔梗种子生活力的影响 %
染色温度
/℃
浸种时间/h
12 16 20 24 28
25 6000aa 8067ba 8933ca 9133ca 7400aa
30 6767aa 7867ba 8133ba 7800ba 7600ba
35 8400aa 9600aa 9200aa 9267aa 8400aa
  注:上标字母表示同一温度不同浸种时间下桔梗种子生活力测
定结果的比较(即横向数据间比较);下标字母表示同一浸种时间下
不同温度染色的生活力测定结果比较(即纵向数据间比较),在 α=
005水平下作显著性方差分析(表6~10同)
3.4.1.2 不同染色时间对桔梗种子生活力的影响
 从表6可知,在其他因子保持一致的条件下,浸种
24h后的桔梗种子生活力测定结果高于其他处理
下的生活力测定结果,且在该浸种时间处理下,不同
染色时间处理后桔梗种子生活力测定结果间不存在
显著差异。在25℃染色温度下,桔梗种子生活力测
定的最佳条件为浸种24h,染色12h。
3.4.1.3 不同浓度TTC染色对桔梗种子生活力的
影响 表7结果表明,02% ~05%的 TTC染色处
  
 表6 不同染色时间对桔梗种子生活力的影响 %
染色时间
/h
浸种时间/h
12 16 20 24 28
6 7333aa 7400aa 6933aa 8867ba 8333ba
12 7533abab 6733ba 7933bab 9000ca 8800ca
18 8067aab 8200ab 8333ab 8933ab 8600aa
24 8667ab 8267ab 7200ba 8933aa 8467aa
30 8600ab 7400ba 7067ba 8600aa 8400aa
理后桔梗种子的生活力测定结果间不存在显著差
异,采用05%TTC染色后桔梗种子生活力测定结
果最佳;随所用 TTC浓度的增加,桔梗种子的染色
效果更加明显。
表7 不同质量浓度TTC染色对桔梗种子
生活力的影响 %
TTC 生活力
01 8667a
02 9067ab
03 9400b
04 9467b
05 9600b
3.4.2  红墨水法
3.4.2.1 不同染色温度和浸种时间处理对桔梗种
子生活力的影响  从表8知,在3个不同的染色温
度下,生活力最佳结果都出现在染色05h,其中25
℃染色温度下,浸种28h、染色05h后的生活力测
定结果显著高于25℃染色温度下的其他处理;30
℃染色温度下,浸种20h或24h、染色05h后的生
活力测定结果显著高于该染色温度下的其他处理;
35℃染色温度下,浸种12h、染色05h后的生活力
测定结果显著高于该染色温度下的其他处理。
表8 不同染色温度和浸种时间处理对桔梗种子生活力的影响 %
染色温度
/℃
染色时间
/h
浸种时间/h
12 16 20 24 28
25 05 9533aa 9667aba 9667aba 9667aba 9800ba
  10 9333abab 9133ab 9400abab 9533ba 9467bb
  20 9267ab 8933bb 9133abb 9067abb 9200ac
30 05 9267aa 9467aa 9533aa 9533aa 9267aa
  10 9267aa 9267aa 9267ab 9267aab 9467aa
  20 8800aa 8800ab 9200ab 9067ab 9200aa
35 05 9733aa 9133ba 9467aa 9667aa 9667aa
  10 9533aa 9267aa 9267aa 9267aa 9267ab
  20 9133ab 8733aba 9000aa 8333bb 8600abc
3.4.2.2 不同浓度红墨水染色对桔梗种子生活力
的影响 从表9可知,浸种28h,25℃下染色05
h,采用不同浓度红墨水染色处理后,桔梗种子生活
力测定结果间不存在显著差异,采用1%红墨水染
色后测得的桔梗种子生活力最好。
综合实验结果发现:采用红墨水法测定桔梗种
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  表9 不同质量分数红墨水染色处理对桔梗种子
生活力的影响 %
红墨水质量分数 生活力
1 9867a
2 9800a
3 9800a
4 9667a
5 9733a
子生活力的最佳条件为:浸种28h,1%红墨水在25
℃下染色05h。
3.5 不同产地桔梗种子发芽率比较
从表10可知,不同产地桔梗种子的发芽率间存
在显著差异。其中发芽率最高的是 S42,为
8367%,S32的发芽率最低,仅为267%。同产地
二年生的桔梗种子发芽率明显高于一年生的桔梗种
子发芽率,不同产地相同生长年限的桔梗种子发芽
率间存在较大差异。
    表10 不同产地桔梗种子发芽率的比较   %
编号 发芽率
S41 3967d
S42 8367a
S43 3400de
S32 267f
B1 3033de
B2 4767c
B3 8267a
AT2 5800b
HX1 4833c
HT2 5167bc
HT1 3433de
JJ2 3233de
3.6 桔梗种子的质量分级标准的初步制订
依据测定结果,结合笔者业已报道的桔梗种子
发芽情况[2],初步制订桔梗种子质量分级标准,见
表11。
4 讨论
表11 桔梗种子质量分级标准
级别 净度/% 千粒重/g 生活力/% 含水量/% 发芽率/% 外形特征
一 ≥95 ≥11 ≥90 ≤90 ≥60 黑亮、饱满、有光泽,大小均匀,干燥,无杂质
二 90~95 1~11 80~90 90~110 40~60 较饱满、黑色、略有光泽,大小较均匀,有少许瘪粒及杂质
三 <90 <1 <80 110~150 <40 瘦、瘪、黄褐色,无光泽,大小不均匀,有瘪粒和杂质
4.1 桔梗种子生活力测定方法 种子生活力测定
的前处理:种子生活力测定需要一定时间的软化处
理。桔梗种子有一定的硬度,实验开始设计了浸种
4,8,32h。结果发现,浸种4,8h时,由于种子尚未
泡开,所以导致:一方面种子很难切开,另一方面染
色结果误差较大。浸种32h后种子的胚易脱落,不
利于检测。所以桔梗种子生活力测定前处理浸种时
间以12~28h为宜。
TTC法测定种子生活力是一种比较经典的方
法。是美国学者莱康(Lakon)1942年提出的[4]。该
法具有快速、经济、准确和应用广泛等特点[5]。利
用TTC法测定桔梗种子生活力时发现,染色温度对
桔梗种子生活力测定的结果影响最大,TTC浓度对
生活力测定结果影响较小。
红墨水法测定种子生活力是日常生活中的常用
方法。该法简单快速,经济却又不失准确性。利用
此法测定桔梗种子生活力发现,染色时间对桔梗种
子生活力测定结果影响最大,红墨水浓度对生活力
测定结果影响最小。
在种子生活力测定时,种子质量的优劣对生活
力测定结果有较大影响。从简化程序和实验成本的
角度,宜采用红墨水法。2种生活力测定方法均表
明:随染色温度的增加,达到最佳生活力测定结果所
需要的浸种时间缩短。
4.2 桔梗种子分级标准说明 作者曾对不同产地、
不同生长年限的桔梗种子发芽特性进行研究[2,3],
结果发现外形黑亮、饱满的桔梗种子的发芽率可以
达到 60%以上,但大部分桔梗种子的发芽率在
40%~60%。外形瘦、瘪、黄褐色的桔梗种子发芽率
更低,在 40%以下。对于采收不久的桔梗种子来
讲,生活力较高,一般都能达到80%以上,优良种子
的生活力可达90%以上。桔梗种子的净度一般在
90%左右,优良种子的净度在95%以上,较差则低
于90%,大部分桔梗种子的净度在90%~95%。大
部分桔梗种子的含水量处于5% ~15%,极少数含
水量低于 5%。综合上述因素,可将净度、饱满度
(千粒重)及生活力作为衡量桔梗种子分级标准的
主要依据,桔梗种子的外观色泽、发芽率及含水量可
作为衡量其分级标准的次要依据。
[参考文献]
[1] 中国药典[S].一部.2005:196.
[2] 郭巧生,赵荣梅,刘 丽,等.桔梗种子发芽特性的研究[J].中
国中药杂志,2006,31(11):879.
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March,2007
[3] 赵荣梅,刘 丽,郭巧生外源物质对桔梗种子发芽的影响
[J].中国中药杂志,2006,31(12):966.
[4] 颜启传.种子检验的原理和技术[M].北京:农业出版社,
1992:297.
[5] 应叶青,申亚梅,李 浪.3种阔叶树种子生活力四唑法测定研
究[J].种子,2005,24(1):32.
StudyonseedqualitytestandqualitystandardofPlatycodongrandiflorum
GUOQiaosheng1,ZHAORongmei1,LIULi1,DONGQiting2,FUZhiwen2
(1InstituteofChineseMedicinalMaterials,NanjingAgriculturalUniversity,Nanjing210095,China;
2ShangdongDingliHerbalMedicineCo.Ltd.,Zibo255086,China)
[Abstract] Objective:Tostudyqualitytest,andestablishqualityclassificationstandardofPlatycodongrandiflorum.Method:
TheseedqualityandplantingqualityofPgrandiflorumfromdiferentproducingareasandindiferentgrowingyearsweremeasured.
ResultandConclusion:Therangeofseedpurity,weightper1000seeds,seedmoisturecontent,seedviabilityweredeterminedand
theprimaryseedqualityclassificationstandardwasestablished.
[Keywords] Platycodongrandiflorum;seed;charactertest;qualitystandard [责任编辑 张宁宁]
连翘质量变异研究
李卫建1,2,李先恩1,祁建军1
(1中国医学科学院 中国协和医科大学 药用植物研究所,北京 100094;
2农业部 环境保护科研监测所,天津 300191)
[摘要] 目的:研究不同产地和年份间连翘质量变异。方法:百粒法测定壳百果重,千粒法测定种子千粒重,
采用HPLC测定老翘和种子中有效成分的含量。结果:不同产地和年份间连翘的壳百果重、种子千粒重、种子和壳
中有效成分的含量存在显著的差异。结论:不同产地连翘质量不稳定。
[关键词] 连翘;百果重;千粒重;有效成分;产地;年份
[中图分类号]R282 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2007)05038104
[收稿日期] 20050712
[通讯作者] 李先恩,Tel:(010)62810019,Email:xianenli@
sina.com
  连翘为木犀科 Oleaceae连翘属植物连翘 For
sythiasuspensa(Thunb)Vahl的干燥果实。连翘药
材来源以野生资源为主,生于海拔600~2000m的
半阴山坡或向阳山坡的疏灌木丛中,主要分布于山
西、河南、陕西3省,湖北、山东部分地区有少量分
布。本实验分别对不同产地和不同年份间连翘壳百
果重、种子千粒重和有效成分的含量变化进行研究,
为科学的评价和控制连翘药材质量提供理论依据。
1 材料和方法
根据资源调查情况,2003年采集不同产地连翘
样品共12份,2004年采集不同产地连翘样品共 9
份。采样方法是:选择连翘分布相对集中的区域作
为采样点,每个采样点采样连翘单株50株以上,采
集种子与连翘壳约1kg,3个重复。2003年与2004
年相同产地采样地点为同一居群。
壳百果重:将去除种子后的果壳充分混合均匀,
随机取出200个果壳(完整壳的一半)称重,重复3
次,计算平均值;种子千粒重:将种子充分混合,随机
取出1000粒称重,重复3次,计算平均值;有效成
分含量测定参考张文婷[1]的HPLC指纹图谱法。
2 结果与分析
21 连翘壳百果重比较 对2003年、2004年不同
产地间壳百果重进行比较表明(表 1),2003年 12
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