全 文 ：注射用辛芍 k冻干粉针 l指纹图谱研究
苏 红 o王爱民 o王永林 3 o兰燕宇 o何 迅 o李勇军
k贵阳医学院 药学院 o贵州 贵阳 xxssswl
≈摘要   目的 }采用 • °2‹ °≤建立注射用辛芍 k冻干粉针 l的指纹图谱测定方法 ∀方法 }采用 ⁄¬¤°²±¶¬¯ ≤t{色
谱柱 o{sh乙腈 2sqth磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱 o流速 t1s °# °¬±pt o柱温 ws ε o检测波长为 uvs ±°∀结
果 }在相同色谱条件下获得药材 !中间体和制剂的各色谱峰分离较好 o建立了注射用辛芍的 ‹ °≤对照指纹图谱 o
标注了制剂中的 {个共有指纹峰 o制剂与药材 !中间体的指纹图谱有良好的相关性 ots批样品相似度大于 s1|zo达
到指纹图谱的技术要求 ∀结论 }该方法准确 !重复性好 o可作为注射用辛芍 k冻干粉针 l质量控制的重要依据之一 ∀
≈关键词   注射用辛芍 k冻干粉针 l~指纹图谱 ~质量控制
≈中图分类号   • u{wqt ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszltx2txtx2sv
≈收稿日期   ussz2st2ts
≈基金项目   贵州省中药现代化科技产业开发基金项目 k黔科
合农字 ≈ussx xsstsuo≈ussy xswu号 l
≈通讯作者   3 王永林 oר¯}ks{xtly|s{{||o ∞2°¤¬¯}ª¼º¼¯ ƒ
°¦q §¨∏q¦±
注射用辛芍 k冻干粉针 l是在贵州民族用药的
基础上由灯盏细辛和赤芍经现代制备工艺研制的中
药新药 o具有活血化瘀 o通经活络之功能 ∀临床用于
中风瘀血阻络证 ∀化学成分研究结果表明本品主要
含黄酮类 !单萜类和酚酸类化合物 o经药效学实验该
类化合物为主要有效成分 ≈tou  ∀为有效控制本品的
质量 o保证临床用药安全有效 o作者根据 /中药注射
剂指纹图谱研究的技术要求 k暂行 l0≈v  o采用 ‹°≤
对制剂的指纹图谱进行了研究 o建立了注射用辛芍
指纹图谱检测标准 o实验方法的精确度 !稳定性和重
复性良好 o操作简便易行 o并采用国家药典委员会
/中药色谱指纹图谱相似度评价系统 kussw„版 l0
软件建立了注射用辛芍 k冻干粉针 l共有模式 o对 ts
批制剂指纹图谱进行相似度评价 o同时对药材 !中间
体和制剂的相关性进行了研究 o以期对制剂的质量
提供有效的控制方法 ∀
1 仪器与试剂
岛津 ≤ p ts„√³高效液相色谱仪系列 k≤ p
ts„×√³二元高压梯度泵 o≥°⁄ pts„√³紫外检测器 o
zzux¬手动进样阀 lo×≤ p tss色谱柱恒温箱 k天津
特纳科技公司 lo•  p usts色谱工作站 k广西南
宁威玛龙色谱科技有限公司 l~贝克曼高效液相色
谱黄金系统 k二元 tux高压梯度泵 oty{阵列二极管
检测器 ovuŽ¤µ¤·¨色谱工作站 lo„¯¯·¨¦«色谱柱恒温
箱 ∀灯盏细辛 Εριγερον βεϖισχαπυσk∂ ¤±·ql ‹¤±§q p
 ¤½½q≈w  k产地 }贵州雷县 oy ∗ |月采收 o贵阳医学院
药物研究所生药学研究室龙庆德副教授鉴定 l~赤
芍 k产地 }四川绵阳 o采收期 { ∗ |月 l∀注射用辛芍
k冻干纷针 lo批号 ‘⁄≤ 2xo‘⁄≤ 2yo‘⁄≤ 2{o‘⁄≤ 2|o
‘⁄≤ 2tso ‘⁄≤ 2tvo ‘⁄≤ 2two usswsxtso usswsxt{o
usswsxusk贵阳医学院药物研究开发中心研制 l∀
野黄芩苷对照品 k中国药品生物制品检定所 o供含
量测定用 o批号 tts{wu2usswsvlo乙腈 k色谱纯 l!乙
醇 !甲醇 !磷酸等均为分析纯 ∀
2 方法及结果
2q1 色谱条件及色谱适用性试验
迪马 ⁄¬¤°²±¶¬¯≤t{色谱柱 kw1y °° ≅ uxs °°ox
Λ°l~流动相 „ {sh乙腈 2… s1th磷酸溶液 o梯度洗
脱 }s ∗ ys °¬±otxh ∗ xyh „~流速 t1s °# °¬±pt ~
柱温 ws ε ~检测波长 uvs ±°~进样量 x ˏ~理论板
数按野黄芩苷峰计算不低于 wx sss∀
2q2 对照品溶液制备
称取野黄芩苷对照品适量 o加甲醇制成每 t °
含 s1tx °ª的溶液 o摇匀 o即得 ∀
2q3 供试品溶液制备
取本品适量 o加水溶解 o配制成每 t °含 t °ª
的样品溶液 o摇匀 o即得 ∀
2q4 方法学考察
2q4q1 精密度试验 取供试品溶液 o在上述色谱条
#xtxt#
第 vu卷第 tx期
ussz年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ tx
„∏ª∏¶·o ussz
件下重复进样 x次 o检测指纹图谱 ∀结果表明各共
有峰的相对保留时间比值和峰面积的比值基本一
致 o各峰保留时间比值的 • ≥⁄为 s1t{h ∗ s1xth o
峰面积比值的 • ≥⁄为 s1v{h ∗ u1yh o符合指纹图
的技术要求 ∀
2q4q2 稳定性试验 取供试品溶液 o室温下放置 o
分别在 souowo{ouw «检测指纹图谱 ∀结果显示 o样
品在 uw «内各色谱峰的保留时间比值的 • ≥⁄为
s1tth ∗ t1th o峰面积比值的 • ≥⁄为 s1{zh ∗
u1sh o符合指纹图技术要求 ∀
2q4q3 重复性试验 分别精密称取同一批号制剂
x份 o按供试品溶液制备方法制备供试品溶液 o分别
进样 o检测指纹图谱 ∀结果表明各共有峰的相对保
留时间比值和峰面积的比值基本一致 o保留时间比
值的 • ≥⁄为 s1szh ∗ s1vxh o峰面积比值的 • ≥⁄
为 t1wh ∗ u1|h o符合指纹图的技术要求 ∀
2q5 样品测定
精密吸取供试品溶液和对照品溶液各 x ˏo分
别注入液相色谱仪 o测定 ∀记录 ys °¬±的色谱图 o
测定结果见图 tou∀以野黄芩苷色谱峰 k≥峰 l的保
留时间及峰面积为 to计算各指纹峰的相对保留时
间及峰面积比值 o峰面积大于 xh的峰面积比值见
表 to非共有指纹峰面积在 t1vsh ∗ u1|vh o共有峰
的峰号 k相对保留时间 l t ks1t{{l~u ks1yswl~v
ks1yzwl~ w k s1|v| l~ ≥ k t1sss l~ x k t1s|z l~ y
kt1uusl~zkt1{swl∀
图 t 野黄芩苷 ‹ °≤图
图 u 注射用辛芍 k冻干纷针 l‹ °≤指纹图谱
2q6 指纹图谱相似度的测定
采用中国药典委员会组织编制的 /中药色谱指纹
图谱相似度评价系统 kussw„版 l0软件 ≈x  o以 ts批制
剂平均数生成的共有模式指纹图谱为对照 o各批制剂
指纹图谱与其所得的共有模式图谱相似度分别为
表 t ts批制剂单峰面积大于 xh的峰面积比值
峰号 r批号 t u v ≥ x
‘⁄≤ 2x s1x{x s1uus s1{vy t1sss s1yts
‘⁄≤ 2y s1ysy s1utv s1{su t1sss s1yyy
‘⁄≤ 2{ s1ywx s1txy s1zxx t1sss s1xx{
‘⁄≤ 2| s1xyt s1utv s1{tv t1sss s1xzy
‘⁄≤ 2ts s1w{v s1t{t s1zsw t1sss s1ztw
‘⁄≤ 2tv s1w|t s1t{y s1zsz t1sss s1w{v
‘⁄≤ 2tw s1xvs s1tx{ s1zxy t1sss s1xwz
usswsxts s1xyw s1uus s1{vy t1sss s1xyu
usswsxt{ s1xtz s1ust s1zyt t1sss s1w|{
usswsxus s1xwt s1utu s1z|w t1sss s1xvx
平均值 s1xxu s1t|y s1zzy t1sss s1xzx
注 }‘⁄≤为注射用辛芍 k冻干粉针 l
s1|zxo s1|z{o s1||zo s1||to s1|{yo s1||uo s1|{zo
s1||wos1|z|os1|{wo结果显示均在 s1|z以上 o见图 v∀
图 v ts批号制剂 ‹ °≤相似度评价图谱
2q7 相关性研究
在相同色谱条件下对药材 !中间体和制剂进行指
纹图谱检测 o药材经适当的方法提取后的 ‹°≤谱图
中的色谱峰比制剂中多 o半成品与制剂的指纹图谱接
近 ∀制剂指纹图谱中各特征峰均可在药材和中间体
中得到追踪 o结果表明 o制剂与药材 !中间体指纹图谱
有良好的相关性 o见表 uo图 w ∗ z∀
表 u 制剂 !半成品 !药材相关性对应表
样品
制剂峰号
药材 !半成品与制剂相关的指纹峰号
t u v w ≥ x y z
灯盏细辛药材 ≥ y
灯盏细辛半成品 ≥ u
赤芍药材 u v ≥ z | ts
赤芍半成品 t u ≥ v x {
图 w 灯盏细辛药材对照指纹图谱
图 x 赤芍药材对照指纹图谱
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第 vu卷第 tx期
ussz年 {月
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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图 y 灯盏细辛半成品对照指纹图谱
图 z 赤芍半成品对照指纹图谱
3 讨论
3q1 实验中采用了 Žµ²°¤¶¬¯ ≤t{ kx1s °° ≅ uss
°°ox Λ°o大连依利特 lo‹¼³¨ µ¶¬¯≤t{ kx1s °° ≅ uxs
°°ox Λ°大连依利特 loŒ± µ¨¶¬¯ ≤t{ kw1y °° ≅ uxs
°°ox Λ°o日本 Š≥¦¬¨±¦¨¶Œ±¦ql和 ⁄¬¤°²±¶¬¯ ≤t{
kx1s °° ≅ uxs °°ox Λ°o迪马公司 l色谱柱 o结果
以 ⁄¬¤°²±¶¬¯≤t{色谱柱的分离效果较好 o指纹峰型
基本一致 o因此最终选择了 ⁄¬¤°²±¶¬¯ ≤t{柱 ∀柱温
的选择方面 o同时比较了 vsovxowsowx ε 的柱温对
色谱分离的影响 o结果柱温为 ws ε 时既能保证色谱
的分离度 o同时能缩短分离时间和降低柱压 o故确定
柱温为 ws ε ∀
3q2 试验采用了甲醇 2sth磷酸溶液 o乙腈 2四氢呋
喃 2s1th磷酸溶液 !乙腈 2s1th 磷酸溶液等多种流

动相系统梯度洗脱 o结果以乙腈 2s1th磷酸溶液梯
度洗脱的色谱条件可同时检测灯盏细辛 !赤芍药材
以及半成品和成品的指纹图谱 o上述样品在该流动
相条件下所得的色谱分离较好 !基线平稳 o特征性指
纹峰表达明显 ∀
3q3 通过对制剂指纹图谱检测 o在一定的积分阈值
条件下 otouovowo≥oxoyoz号峰均在 ts批制剂色谱
中出现 o故规定此 {个色谱峰为其共有峰 o单峰面积
大于 xh的共有指纹峰的峰号为 touovo≥ox号峰 o
其中野黄芩苷峰面积最大和最稳定 o规定为 ≥峰 ∀
3q4 采用阵列二极管检测器对药材 !中间体和制剂
的指纹图谱检测波长进行了选择 o结果表明检测波
长在 uvs ±°时 o药材 !中间体及制剂的信息量较大 o
能兼顾各成分色谱峰的丰度 !分离度和基线等 ∀
≈参考文献  
≈t  郑尚珍 o王定勇 o刘武霞 o等 q荭草中黄酮类化合物 ≈ q西北师
范大学学报 k自然科学版 lot|||ovxkwl}vzq
≈u  阴 健 o郭力弓 q中药现代研究与临床应用 ktl≈   q北京 }学
苑出版社 ot||v}vxuq
≈v  国家药品监督管理局 q国药管注 ≈usss vw{号 }关于印发 5中
药注射剂指纹图谱的技术要求 k暂行 l6的通知 qusss}{q
≈w  贵州省药品监督管理局 q贵州省中药材 !民族药材质量标准
≈≥ q贵阳 }贵州科技出版社 oussv}tzuq
≈x  国家药典委员会 q中药色谱指纹图谱相似度评价系统 kussw„l
≈≥ qusswq
≈y  刘 瑞 o刘志刚 o李 磊 o等 q复方大青叶注射液 ‹°≤指纹图
谱研究 ≈ q中国中药杂志 oussyovtktvl}tsx|q
Στυδψ ον Ρ Π2ΗΠΛΧ φινγερπριντ οφ Ξινσηαο ινϕεχτιον
≥˜ ‹²±ªo • „‘Š „¬2°¬±o • „‘Š ≠²±ª2¯¬±o „‘≠¤±2¼∏o ‹∞ ÷∏±o Œ≠²±ª2­∏±
(Σχηοολοφ Πηαρµ αχψ, Γυιψανγ ΜεδιχαλΧολλεγε, Γυιψανγ xxsssw, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶¨·¤¥¯¬¶«·«¨ ©¬±ª¨ µ³µ¬±·§¨ ·¨¦·¬±ª¶·¤±§¤µ§²©÷¬±¶«¤² Œ±­¨¦·¬²± ¥¼ µ¨√ µ¨¶¨§³«¤¶¨ «¬ª« ³¨ µ©²µ°¤±¦¨
¬¯´∏¬§¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¼q Μετηοδ : ׫¨ ¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¬¦¦²±§¬·¬²±¶º µ¨¨ ¤¶©²¯ ²¯º¶} ¤± ⁄¬¤°²±¶¬¯ ≤t{ ¦²¯∏°± º¤¶∏¶¨§o ·«¨ °²¥¬¯¨
³«¤¶¨ º¤¶¦²°³²¶¨§²©{sh ¤¦¨·²±·µ¬¯¨ ¤±§s1th ³«²¶³«²µ¬¦¤¦¬§º¬·«ªµ¤§¬¨±·¨ ∏¯·¬²±o ·«¨ ©¯²º µ¤·¨t1s °°¬±pt o ¦²¯∏°± ·¨°³¨ µ2
¤·∏µ¨ º¤¶ws ε ¤±§·«¨ ˜∂ ¤¥¶²µ¥¤±¦¨ §¨ ·¨¦·¬²± º¤¶¶¨·¤·uvs ±°q Ρ εσυλτ: „ ¶·¤±§¤µ§‹°≤ ©¬±ª¨ µ³µ¬±·³µ²¦¨§∏µ¨ º¤¶§¨ √¨¯²³¨ §©²µ
÷¬±¶«¤² Œ±­¨¦·¬²±o º¬·«{ ¦²°°²± ³¨ ¤®¶q ˜±§¨ µ·«¨ ¶¤°¨¶¨¯¨ ¦·¨§¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¬¦¦²±§¬·¬²±¶o ·«¨ ‹ °≤ ©¬±ª¨ µ³µ¬±·¶²©µ¤º §µ∏ª¶¤±§
·«¨ ¬µ¬±·¨µ° §¨¬¤·¨o ©¬±¬¶«¨ §³µ²§∏¦·¶º µ¨¨ ²¥·¤¬± §¨º¬·«ª²²§¶¨³¤µ¤·¬²± ¤±§¦²µµ¨ ¤¯·¬²± k±² ¯¨ ¶¶·«¤± s1|zl ¤¦¦²µ§¬±ª·²·«¨ ·¨¦«±¬¦¤¯
µ¨ ∏´¬µ¨° ±¨·¶²©©¬±ª¨ µ³µ¬±·²± Œ±­¨¦·¬²± ²©≤«¬± ¶¨¨ ·µ¤§¬·¬²±¤¯ ° §¨¬¦¬± q¨ Χονχλυσιον: ׫¬¶° ·¨«²§º¤¶¤¦¦∏µ¤·¨o µ¨³¨ ¤·¤¥¯¨¤±§¦¤± ¥¨
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[ Κεψ ωορδσ] ÷¬±¶«¤²¬±­¨¦·¬²±~ ©¬±ª¨ µ³µ¬±·~ ∏´¤¯¬·¼ ¦²±·µ²¯
≈责任编辑 鲍 雷  
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