全 文 :近红外光谱法定量分析药对葛根丹参提取液中主要成分
李燕燕,边宝林,杨 健
(中国中医科学院 中药所,北京 100700)
[收稿日期] 20071122
[通讯作者] 边宝林,Tel:13146059587,Email:muzizhang
2006@163.com
药对葛根丹参源于《施今墨药对》,治疗冠心病
心绞痛。现代医学研究证明,葛根中的异黄酮类物
质特别是葛根素有明显扩冠状血管,改善正常和缺
血心肌代谢作用。丹参具有祛瘀止痛,活血通经之
功,能显著增加冠脉流量,其有效部位为脂溶性丹参
酮类和水溶性丹参酚酸类。在中药天然药物质量分
析领域,HPLC是常用含量测定方法,但此法分析时
间较长,不利于多成分快速测定,NIR光谱法是一种
新型的绿色分析技术,在农业食品、石油化工、制药
工业等领域得到了广泛应用。在中药材等天然药物
含量测定方面已经取得了一定的成果[14]。本实验
拟用近红外光谱技术同时测定药对葛根丹参提取物
中葛根素、丹酚酸B和丹参酮ⅡA的含量,尚未见相
关报道。采用偏最小二乘法建立了3个成分的定量
分析模型,取得满意的结果。
1 仪器和试剂
BrukerMPA近红外光谱仪(布鲁克仪器公司),
附带OPUS化学计量软件。药对葛根丹参合煎提取
物样品自制,并经过 HPLC精确定量。准确称取葛
根丹参提取物样品溶解于75%乙醇中,得到32个
校正集溶液和10个预测集溶液。其葛根素、丹酚酸
B、丹参酮ⅡA质量浓度范围分别为:00826~
16581,00996~09985,00028~00478g·
L-1。
2 方法
取上述溶液,选用光程为2mm的样品池,以空
池为参比。近红外光谱范围为 11000~4000
cm-1,扫描16次,分辨率为8cm-1,42个提取液样
本的近红外光谱吸收如图1所示。
3 结果与讨论
3.1 数据处理原理 PLS回归法是一个“全光谱方
法”,然而,有些情况下光谱噪声或样品中出现附加
图1 样品的近红外谱图
组分,PLS算法解析这些特性,从而使模型变坏,因
此要限定用于 PLS回归的频率范围。当将光谱限
定到几个吸收谱段时,07和10吸收单位(AU)之
间的谱段产生最佳结果。同时谱图应包括官能团的
频率范围。从图1提供信息,选择11992~399999
cm-1波段作为定标波长区域。
3.2 用偏最小二乘法建立定量分析的校正模型
对校正集中的32个样品,用最小二乘法分别建立了
葛根素、丹酚酸 B、丹参酮ⅡA的定量分析模型。建
模的统计结果如表1所示。
表1 建模的统计结果
成分 R2 RMSECV
葛根素 09677 008130
丹酚酸B 09886 002430
丹参酮ⅡA 09704 000164
3.3 用预测集样品对校正模型的检验 用校正集
中建立的葛根素、丹酚酸 B、丹参酮ⅡA的定量分析
模型,分别对预测集中的10个样品进行定量分析,
得到的预测统计结果如表2所示。预测集中10个
样品的真实值、预测值及相对误差如表3所示。
表2 预测统计结果
成分 R2 RMSEP
葛根素 09699 006080
丹酚酸B 09761 003130
丹参酮ⅡA 09683 000111
3.4 结论 使用近红外光谱和偏最小二乘法,同时
定量分析药对提取液中葛根素、丹酚酸 B、丹参酮ⅡA
·4912·
第33卷第17期
2008年9月
中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
Vol.33,Issue 17
September,2008
表3 10个预测集样品对校正模型的检验结果 g·L-1
序号
丹酚酸B
真实值 预测值 相对误差/%
丹参酮ⅡA
真实值 预测值 相对误差/%
葛根素
真实值 预测值 相对误差/%
1 03661 03725 -175 00158 00158 0 01757 01902 -825
2 05894 05799 144 00154 00149 325 00872 00855 195
3 07575 07544 041 00258 00249 349 03457 03649 -555
4 03596 03564 089 00260 00258 077 01639 01709 -427
5 06245 06215 048 00052 00050 385 06444 06478 -053
6 03742 03760 -048 00085 00092 -824 06034 06332 -494
7 09985 10095 110 00163 00166 -184 10856 11019 -150
8 04543 04565 -048 00149 00151 -134 09090 08823 295
9 05633 05500 236 00166 00172 -361 07859 07998 -177
10 08056 07904 189 00203 00213 -493 09876 09973 -098
的含量,得到校正集中的决定系数分别为09677,
09886,09704,校正标准偏差分别为 00813,
00243,000164;预测集的决定系数分别为0969
9,09761,09683,相对标准偏差分别为00683,
00313,000111。该方法在同时定量分析复方多
组分体系时,具有分析结果准确、简便、快速廉价、易
于推广使用等优点。但由于建立模型时样品数太
小,在增大样品代表性的基础上,其决定系数会更加
优化。
[参考文献]
[1] 芦永军,曲艳玲,曹志强,等.人参总糖的近红外光谱定量分析
[J].光谱学与光谱分析,2006,8(26):1457.
[2] 王 丽,何 鹰,邱招钗,等.光纤近红外光谱法在中草药分析
中的应用———甘草中甘草酸含量的测定[J].光谱学与光谱分
析,2005,9(25):1397.
[3] 谷筱玉,王日燕,徐可欣,等.冰片的近红外光谱法检测[J].光
谱学与光谱分析,2004,2(24):155.
[4] 瞿海斌,刘 全,程翼宇.近红外漫反射光谱法测定黄连浸膏
粉中生物碱含量[J].分析化学,2004,4(32):477.
[责任编辑 王亚君]
[收稿日期] 20070912
[通讯作者] 李曼玲,Tel:(010)640144112939
吴茱萸药材中绿原酸的含量测定
康 琛,李曼玲,殷文光,刘淑芝
(中国中医科学院 中药研究所,北京 100700)
吴茱萸为芸香科植物吴茱萸 Evdiarutaecarp
(Juss.)Benth.,石虎 E.rutaecarp(Juss.)Benth.
Var.oficinalis(Dode)Huang或疏毛吴茱萸 E.ru
taecarp(Juss.)Benth.Var.bodinieri(Dode)Huang
的干燥近成熟的果实。2005年版《中国药典》以吴
茱萸碱和吴茱萸次碱为对照品对吴茱萸药材进行鉴
别和含量测定,据报道吴茱萸碱和吴茱萸次碱为吴
茱萸药材的镇痛成分[12],近年来研究发现吴茱萸中
含有绿原酸成分[3]。本研究参考文献[4]建立了
吴茱萸中绿原酸高效液相含量测定方法。
1 仪器、试剂与药材
Waters高效液相色谱仪,四元泵,7725i手动进
样器,UV检测器及 Milennium32色谱工作站。甲醇
为优级纯,其他试剂均为分析纯,水为自制高纯水。
绿原酸对照品(批号07539910)购自中国药品生物
制品检定所。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 KromasilC18色谱柱(46mm×250
mm,5μm);流动相 甲醇水冰醋酸(15∶85∶55),
流速07mL·min-1。检测波长327nm。理论塔板
数按绿原酸峰计算不低于2000。
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第33卷第17期
2008年9月
中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
Vol.33,Issue 17
September,2008