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Studyfunctionofendophyticfungusinparasitismprocessofmistleto
DINGZhishan,JIANGFusheng,JINBo,XULi,CHENNipi,LVGuiyuan
(ZhejiangTraditionChineseMedicalColege,Hangzhou310053,China)
[Abstract] Objective:ToresearchthefunctionofendophytesofmistletoeinparasitismprocessofmistletoeinPterocarya
stenoptera.Method:Endophytesfromeightdiferentpartsofthemistletoewereseparatedbyexplantculture,andfurtherscreenedby
diferentCMCplatescultureandDNSmethodtogetcelulasehighproductivestrains.Thedistributionoftheendophyticfungusparasit
izedinmistletoewerepreparedandstainedtodemonstratebyhistologicalsectionoftheintumescentiapartoftheP.stenoptera.Re
sult:Thehistologicalsectionindicatedthataboundentofhyphasmaweredistributedaroundthehaustoriumofthemistletoe.Eighty
threestrainsofendophyticfunguswereseparated,38ofthemwereabletodegradecelulose,19strainsshowedhighcelulaseactivity
and10ofwhichwereseparatedfromtheparasiticposition.Conclusion:Endophyticfungusofmistletoecansecretecelulaseandassist
thehaustoriumofmistletoetobreakthroughthecelwalsaswelasintercelularspacetissuesoftheP.stenoptera,thus,theendophyt
icfungusplaysanimportantroleintheparasitismprocessofmistletoinPstenoptera.
[Keywords] mistletoe;endophyticfungus;parasitism;celulase [责任编辑 张宁宁]
[收稿日期] 20061128
[基金项目] 国家中医药管理局项目(2004ZX061);国家科技
支撑计划课题(2006BAI06A1109);重庆市巫溪县远帆药业公司合
作研究项目
[通讯作者] 孙年喜,Tel:(023)89029062,Email:sunnx2008
@163.com
川党参种子发芽检验规程的研究
孙年喜,彭 锐,李隆云,钟国跃
(重庆市中药研究院,重庆 400065)
[摘要] 目的:探讨温度、光照、发芽床等因素对川党参种子发芽的影响。方法:常规发芽试验方法进行试验。
结果与结论:川党参种子发芽最适温度为25℃,需光照,发芽床选纸上或纸间均可,发芽初次计数时间为置床后第
10天,末次计数时间为置床后第18天。以赤霉素处理可显著提高川党参种子的发芽率。
[关键词] 川党参;种子;发芽
[中图分类号]S567 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2008)11124603
川党参CodonopsistangshenOliv.为桔梗科多年
生草本植物,以根入药,其性味甘平、无毒,为药食两
用药材,有补中益气、生津止渴等功效,主治脾胃虚
弱,中气不足,肺气亏虚,热病伤津,气短口渴,血虚
萎黄,头晕心慌等症[1],是我国常用的中药材,在东
南亚则被做为保健食品使用。野生党参主要分布于
黑龙江、吉林、辽宁、山西、陕西、甘肃、宁夏、四川等
省区,近年来因掠夺式的采挖,野生党参资源迅猛减
少,故人工栽培党参具有很好的市场前景[2]。党参
栽培中使用播种育苗,两年生党参的新鲜种子发芽
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中 国 中 药 杂 志
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率较高,隔年种子丧失发芽能力,不宜使用[3],故对
川党参种子的发芽特性进行研究,以确定其最适发
芽条件,为规范党参种子市场,增补国家及国际标准
提供参考。
1 材料
川党参C.tangshen种子由重庆市中药研究院
生药室提供,为2005年采自巫溪的川党参种子,赤
霉素处理所用种子为采自武隆仙女山的种子。实验
于2006年3~5月在重庆市中药研究院生药实验室
进行。
发芽箱为MGC-250光照培养箱,发芽盒用培
养皿及平底烧杯(高8cm),砂子为过20目筛的细
砂,清水冲洗后,130℃高温烘2h。
2 方法
以下实验方法主要参考《国际种子检验规
程》[4]。
2.1 发芽温度的设定 试验设置10,15,20,25,30
℃恒温及15/25℃,20/30℃变温处理,变温采用高
温8h,光照,低温16h,黑暗。每个处理300~400
粒种子,3~4次重复。发芽床采用3层湿润滤纸,
试验过程中保持滤纸湿润,每天记录种子的发芽数。
2.2 发芽床的设定 选择 20℃,同时用纸上
(TP)、纸间(BP)、砂上(TS)、砂间(S)进行发芽试
验,光照培养,试验中保持发芽床湿润。
纸上是在培养皿中铺3层湿润的滤纸,后置种;
纸间是在培养皿中铺3层湿润滤纸,置种后,再在种
子上铺1层湿润滤纸;砂上是在平底烧杯中铺3cm
厚的湿砂(砂水比为4∶1),后置种;砂间是在平底烧
杯中铺3cm厚的湿砂(砂水比为4∶1),置种,再盖
上1薄层湿润的细砂。
2.3 发芽光照的选择 选择10,25,30℃,纸床进
行光照与黑暗对照发芽。
2.4 发芽计数时间的设定 根据适宜发芽条件下
的发芽表现,确定初次计数和末次计数时间。以首
次达到50%以上发芽率的天数为初次计数时间,以
种子萌发达到最高时,以后再无萌发种子出现时的
天数为末次计数时间。
2.5 赤霉素处理川党参种子 以赤霉素浸种培养,
分别以蒸馏水,400,800mg·L-1的赤霉素浸种4h,
冲洗后晾干水分,置纸床培养,以蒸馏水湿润发芽
床;另取以蒸馏水浸后的晾干种子置床,并以 200
mg·L-1的赤霉素湿润发芽床,以上培养条件均为
20℃,光照。
2.6 种子及幼苗观察 种子外形及大小用显微镜
进行观察。在发芽期间,注意观察种苗发育过程,按
照国际种子检验协会(1993)的《种苗评定手册》对
川党参进行评价和归类。
2.7 统计 发芽率以最终达到的正常幼苗百分率
计。发芽指数(GI)以下列公式进行计算:
GI=∑(Gt/Dt),(Gt为在发芽后 t日的发芽数,Dt为相
应的发芽天数)。
3 结果与分析
3.1 最适温度条件的选择 就发芽率而言,川党参
种子在15℃下发芽率最高,为633%,其次为15/
25℃变温,为 593%,25℃为 570%,20℃为
561%。方差分析结果表明,以上温度处理之间差
异不显著,而显著高于10,30及20/30℃的温度处
理。参考发芽指数,则以 25℃发芽指数最高,为
3599,且显著高于其他温度处理,15,20,15/25℃
变温下的发芽指数分别为 2569,2877,2672,相
互间差异不显著。综合来看,川党参种子在25℃发
芽率高,发芽快(表1)。
表1 温度对川党参种子发芽的影响(纸上,光照)
处理温度/℃ 发芽率/% 发芽指数
10 387b 836a
15 633d 2569cd
20 561cd 2877d
25 570cd 3599e
30 280a 1816b
15/25 593d 2672cd
20/30 470bc 2210bc
3.2 最适发芽床的选择 不同发芽床之间发芽率
及发芽指数间存在显著差异。纸上和纸间的发芽率
分别为561%,570%,显著高于砂上和砂间的,其
中砂间作为发芽床时没有种子发芽。纸上和纸间发
芽率和发芽指数无显著差异,两者均适宜作为川党
参种子的发芽床(表2)。
表2 发芽床对川党参种子发芽的影响(20℃,光照)
处理 发芽率/% 发芽指数
纸上TP 561c 2877c
纸间BP 570c 2726c
砂上TS 331b 2030b
砂间S 0a 0a
3.3 光照条件的选择 以纸上作为发芽床,10℃
光照下川党参种子的发芽率为387%,黑暗条件下
的发芽率为70%,25℃光照下发芽率为570%,
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黑暗下发芽率为 157%,30℃光照下发芽率为
280%,黑暗下发芽率为86%,3个温度下光暗处
理间均达到极显著差异,因此可看出川党参种子对
光敏感,适宜在一定光照条件下发芽。
3.4 赤霉素处理对川党参种子发芽率的影响 以
赤霉素GA3处理川党参种子能显著提高种子的发芽
率,其中以200mg·L-1GA3浸润发芽床的效果最
佳,显著高于其他处理发芽率,经此处理的发芽率达
到843%,发芽指数为4420,800mg·L-1GA3浸
种处理发芽率为563%,发芽指数为2958,而以水
浸4h的发芽率仅为 210%,发芽指数为 938。
800mg·L-1GA3浸种处理的发芽率显著高于400
mg·L-1GA3处理410%的发芽率(表3)。
表3 赤霉素处理对川党参种子发芽率的影响(20℃,光照)
GA3/mg·L-1 发芽率/% 发芽指数
0 210a 938a
200 843d 4420d
400 410b 2115b
800 563c 2985c
对经 GA3处理的种子发芽后移入土中生长,经
观察不同浓度处理的种子苗期均能正常生长。
3.5 种子外形及大小测定 川党参种子为卵状椭
圆形,表面深棕褐色或浅棕色,有光泽。
从用于发芽试验的种子中随机抽取50粒,测定
川党参种子大小,种子长度为113~160mm,宽度
为060~079mm,平均长为 133mm,平均宽为
069mm。
根据对川党参种子发芽及种苗的观察,可以把
它归为《种苗评定与种子活力测定方法手册》中的
A2.1.1.2类,即川党参属子叶出土的双子叶植物。
3.6 发芽检验计数时间的确定 川党参种子在25
℃及纸床,光照下培养,第10天正常幼苗的发芽率
达到初次计数时间,第22天达到发芽高峰,以后再
无发芽,而从第18天到第22天的种子发芽极少,不
到2%,故为缩短发芽时间,可到第18天结束发芽
试验。
4 结果与讨论
进行发芽检验时,必须要在最短的时间内看到
种子的最大发芽潜力。研究结果表明,川党参种子
适宜发芽的温度范围较广,15~25℃及15/25℃变
温均能达到很高的发芽率,而以25℃为最适发芽温
度,此温度下发芽率高且快;川党参种子发芽床选择
纸上或纸间均可;光照下发芽率极显著高于黑暗条
件下的发芽率。川党参种子发芽初次计数时间为置
床后第10天,末次计数为置床后第18天。
用赤霉素处理能显著提高川党参种子的发芽
率,且处理后发出的幼苗能正常生长,试验中以200
mg·L-1的赤霉素湿润发芽床和800mg·L-1浸种4
h的效果最好。因为只是初步试验 GA3在处理川党
参种子上的作用,对于最佳浸泡时间及浸种浓度还
需做进一步研究。试验表明用赤霉素处理能显著提
高川党参种子的发芽率,且处理后发出的幼苗能正
常生长,故生产上可采用赤霉素浸种处理,以提高川
党参种子的发芽率。
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StudyonseedgerminationtestingstandardizationofCodonopsistangshen
SUNNianxi,PENGRui,LILongyun,ZHONGGuoyue
(ChongqingAcademyofChineseMateria,Chongqing400065,China)
[Abstract] Objective:Tostudytheinfluenceofdiferentfactors(temperature,lightandgerminatingbeds)onseedgermina
tionofCodonopsistangshen.Method:Thegeneralgerminationmethodwasapplied.Resultandconclusion:Theoptimumseedgermina
tionconditionsofC.tangshenwereasfolows:temperature25℃,light,germinatingbedstopofpaper(TP)orbetweenofpaper
(BP).Thefirstseedling-countingtimewasthe10thdayafterbeginningthetest;thefinaltimewasthe18thday.Thetestalsoshowed
thatgibberelinnotablyincreasedtheseedgerminationrateofC.tangshen.
[Keywords] Codonopsistangshen;seed;germination [责任编辑 张宁宁]
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