全 文 ：油茶树嫩枝挥发油皮肤毒理及其促透作用研究
龙正海１，杨再昌２，杨雄志１
（１．浙江医药高等专科学校，浙江 宁波３１５１００；２．贵州大学，贵州 贵阳 ５５０００３）
［摘要］ 目的：研究油茶树嫩枝挥发油的皮肤毒性及对尼群地平、黄芩苷、尼美舒利等药物的促透效果。方
法：通过活体大鼠皮肤毒理实验和离体小鼠皮肤渗透释药实验，评价皮肤毒性并测定不同浓度挥发油对尼群地平、
黄芩苷、尼美舒利的促透效果。结果：不同剂量挥发油均无皮肤刺激性、致敏性和急性毒性，对尼群地平、黄芩苷、
尼美舒利的透皮吸收促进效果明显，其作用接近或超过氮酮。结论：油茶树嫩枝挥发油无皮肤毒性，并具有明显的
透皮吸收促进作用。本实验的研究结果将为新型天然透皮促进剂的研究开发提供一定的科学依据。
［关键词］ 油茶树；挥发油；毒理；透皮促进作用；嫩枝；大鼠
［中图分类号］Ｒ２８５．５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００７）１７１７８００４
［收稿日期］ ２００７０１０５
［基金项目］ 浙江省教育厅科研项目（２００５０３２５）
［通讯作者］ 龙正海，Ｔｅｌ：（０５７４）８８２２２７９０，Ｅｍａｉｌ：ｌｏｎｇｚｈ＠
ｍａｉｌ．ｚｊｐｃ．ｎｅｔ．ｃｎ
山茶科山茶属植物油茶 Ｃａｍｅｌｉａｏｌｅｉｆｅｒａ，广泛
分布于全国各地，自然资源十分丰富，民间主要以根
和茶子饼入药，具有清热解毒、活血散瘀、止痛等功
效［１］。作者通过试验发现，油茶树嫩枝挥发油尚具
有抗菌和透皮促渗透作用，为了评价该挥发油对皮
肤的安全性，本研究对该挥发油的动物皮肤急性毒
性、刺激性和过敏性进行了初步研究。
另外，透皮给药系统作为一种无创伤性给药途
径，比传统给药方式具有明显的优势，有良好的应用
前景。选择恰当的透皮吸收促进剂，克服皮肤屏障，
促进药物透皮渗透，是透皮给药系统研究的关键问
题。据报道当归、丁香、枫香、高良姜、细辛、花椒等
中草药的挥发油均具有一定的促透效果［２］，说明植
物挥发油是透皮吸收促进剂的重要来源之一。鉴
此，作者研究了油茶树嫩枝挥发油对尼群地平、黄芩
苷、尼美舒利等药物透皮吸收的影响。
１ 材料
１．１ 动物
ＳＤ大鼠，雌雄各半，体重（２００±１５）ｇ；普通昆明种
小鼠，雌雄各半，体重约（２０±３）ｇ；购于贵阳医学院实
验动物中心，合格证号ＳＣＸＫ（黔）２００２００３，清洁级。
１．２ 药物
尼群地平 （批号 ０４０８０５）、黄芩苷 （批号
０４０４０７）、尼美舒利（批号０４１００３）均由 Ｓｉｇｍａ公司
提供；自制油茶树嫩枝挥发油按２００５年版《中国药
典》方法制备，用７０％乙醇稀释后备用；脱毛剂硫
化钠、氮酮、无水乙醇、２，４二硝基氯苯均为分析纯。
１．３ 仪器
ＨＰ－８４５３紫外可见分光光度计（惠普公司）；
改良Ｆｒａｎｚ扩散池（重庆玻璃仪器厂）；５０１型超级
恒温槽（上海市实验仪器厂）；ＪＢ－２型恒温磁力搅
拌器（上海雷磁仪器厂新泾分厂）。
２ 方法
２．１ 皮肤毒理实验
２．１．１ 皮肤急性毒性实验［３］ 取健康 ＳＤ大鼠４８
只，雌雄各半，随机分为挥发油１００％（Ａ组），６５％
（Ｂ组），４０％（Ｃ组）３个实验组和７０％乙醇溶液空
白组（Ｄ组）；３个实验组和空白组又各设完整皮肤
与破损皮肤２个组；每组大鼠６只。于给药前２４ｈ
用脱毛剂硫化钠将脊柱两侧毛脱掉约４０ｃｍ２，破损
皮肤组用灭菌针头划＃字，以渗血为度。实验当日将
挥发油均匀地涂敷于大鼠背部脱毛区，对照组涂敷
７０％乙醇溶液，用油纸、纱布复盖，胶布固定。在１，
２４，４８，７２ｈ至７ｄ后分别用温水清洗，除去药物或
稀释剂，观察并记录动物体重、皮肤毛发、眼和黏膜
变化，呼吸、中枢神经系统、四肢活动及其他中毒表
现，若遇有死亡动物应及时进行尸检和肉眼观察，当
有肉眼可见病变时，应进行病理组织学检查。
２．１．２ 皮肤刺激实验 取健康 ＳＤ大鼠４８只，按
２．１．１方法分组并同法处理后，在１，２４，４８，７２ｈ至
７ｄ后分别观察局部有无发生红斑和水肿反应以及
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恢复情况和时间。连续涂药７ｄ，并同法观察用药后
上述各时间段的皮肤反应。刺激指数用以下公式计
算。
刺激指数＝（红斑形成总分 ＋水肿形成总分）／动物总
数
２．１．３ 皮肤过敏实验 取健康 ＳＤ大鼠３０只，将
其背部脊柱两侧脱毛，每侧面积约３ｃｍ×３ｃｍ，观
察２４ｈ无刺激后，随机分为５组，每组６只，Ａ组给
１００％挥发油，Ｂ组给６５％挥发油，Ｃ组给４０％挥发
油，Ｄ组给７０％乙醇溶液（空白组），Ｅ组给阳性致
敏物２，４二硝基氯苯。
致敏接触：将挥发油均匀涂于大鼠左侧脱毛区，
持续６ｈ，第７，１４ｄ以同样方法重复一次，空白组与
阳性致敏组操作方法同前。
激发致敏：在末次给药后第１４ｄ，将挥发油涂于
右侧脱毛区。６ｈ后温水洗净受试物，即刻观察，然
后于２４，４８，７２ｈ再次观察皮肤致敏反应情况；空白
对照组与阳性致敏组方法同上。
２．１．４ 结果判断 挥发油急性毒性、皮肤刺激、皮
肤过敏实验的结果判断均按照文献［３，４］的具体方
法进行。
２．２ 透皮吸收实验
２．２．１ 皮肤制备 将普通昆明种小鼠分为挥发油
１％，２％，４％，６％ ４个实验组、阳性对照组（２％氮
酮）、空白对照组（７０％乙醇溶液）共 ６组，每组 ５
只，然后分别用２５％的戊巴比妥钠腹腔麻醉，用硫
化钠脱毛剂脱毛后用灭菌生理盐水清洗，取背部皮
肤，剔除皮下脂肪，制成直径２２ｍｍ的皮肤样本，夹
入Ｆｒａｎｚ扩散池，表皮面向供药池，接受液为３５％的
乙醇水溶液。
２．２．２ 标准曲线绘制 以吸光度（Ａ）对药物样品
浓度做线性回归，得直线方程。尼群地平的直线方
程Ａ＝００１９Ｃ＋００２７，ｒ＝０９９８，线性范围：２～３６
μｇ·ｍＬ－１。黄芩苷为 Ａ＝００３８Ｃ＋００４２，ｒ＝
０９９９，线性范围：４～２０μｇ·ｍＬ－１。尼美舒利为 Ａ
＝００２８Ｃ＋００１４，ｒ＝０９９８，线性范围：２～４８μｇ·
ｍＬ－１。
２．２．３ 渗透试验 在夹上皮肤的Ｆｒａｎｚ扩散池的接
受池中加入２０ｍＬ３５％乙醇水溶液，供药池中各加
入２０ｍＬ含１％，２％，４％，６％挥发油的乙醇水溶液，
置３７℃恒温水浴中，搅拌速度３００ｒ·ｍｉｎ－１，３ｍｉｎ
后在供药池中分别加入过量的受试药尼群地平、黄芩
苷和尼美舒利，定时从接受池取溶液４ｍＬ，同时补加
同体积新鲜的接受液，排除接受液中的气泡。取出的
溶液用紫外分光光度计测定吸收度，用直线方程求出
相应的药物浓度。同法以２％的氮酮溶液做阳性对
照，用３５％的乙醇水溶液做空白对照。
２．２．４ 数据处理 按下列公式计算单位面积累积
透过量（Ｑ）。
Ｑ＝
ρｎ×Ｖ０＋∑
ｎ－１
ｉ＝１
ρｉ×Ｖ
Ｓ
ρｎ为第 ｎ个取样点测得的药物质量浓度；ρｉ为
第ｉ个取样点测得的药物质量浓度；Ｓ为扩散面积；
Ｖ０为接受池中溶液的体积；Ｖ为取样体积。
３ 结果
３．１ 挥发油皮肤毒性研究
３．１．１ 对大鼠皮肤的急性毒性试验 在低、中、高
剂量应用时，挥发油对大鼠的行为活动、皮毛光泽
度、饮食、体重等均未造成任何影响；在观察期内未
出现任何急性毒性反应，无死亡现象。由此表明，该
挥发油在低、中、高剂量外用时对大鼠的完整皮肤和
破损皮肤均不引起急性毒性反应。
３．１．２ 对大鼠皮肤的刺激性试验 通过对各时间
点进行观察，未出现皮肤红斑和水肿反应，刺激指数
平均值小于规定的０５。其中２４ｈ后 Ａ组，Ｂ组，Ｃ
组的刺激指数分别为０２，０２，０１；而７２ｈ后观察
Ａ组，Ｂ组，Ｃ组的刺激指数均为０１。
皮肤刺激性实验表明，使用高、中、低剂量挥发
油，对大鼠完整皮肤和破损皮肤均未出现刺激反应。
３．１．３ 对大鼠皮肤的过敏性试验 研究表明：阳性
对照２，４二硝基氯苯组，动物皮肤受试区自激发给
药６ｈ后，有明显的红斑和水肿，致敏率为１００％，表
现为极度敏感性。而使用１００％，６５％，４０％油茶树
嫩枝挥发油时，大鼠皮肤受试区自激发给药６～７２ｈ
内未见红斑及水肿形成，与空白对照组无差异，对大
鼠皮肤未引起过敏反应。
３．２ 透皮吸收促进作用研究
以累积透过量Ｑ为纵坐标，时间 Ｔ为横坐标作
图，分别获得尼群地平、黄芩苷、尼美舒利小鼠皮肤
渗透曲线（ｎ＝５）。
３．２．１ 对尼群地平的促透效果 油茶树嫩枝挥发
油的含量为４％时，对尼群地平的透皮吸收有促进
作用，且比２％氮酮的效果好，２％和６％挥发油的促
渗透作用与２％的氮酮相当，结果如图１所示。
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图１ 尼群地平小鼠皮肤渗透曲线
３．２．２ 对黄芩苷的促透效果 挥发油对黄芩苷的
透皮吸收也有促进作用，以４％的效果较好，但效果
不如２％氮酮；其促透作用顺序为：２％氮酮 ＞４％挥
发油＞６％挥发油 ＞２％挥发油 ＞１％挥发油。结果
见图２。
图２ 黄芩苷小鼠皮肤渗透曲线
３．２．３ 对尼美舒利的促透效果 挥发油对尼美舒
利透皮吸收有一定促进作用，促透作用随浓度升高
而不断加强；而且４％和６％挥发油的促透效果均超
过２％氮酮。结果见图３。
图３ 尼美舒利小鼠皮肤渗透曲线
４ 讨论
油茶树在我国分布较广，资源极其丰富，活性成
分复杂［５］，作用广泛［６］。从油茶树修枝时产生的大
量嫩枝提取挥发油，不会造成资源破坏。离体小鼠
皮肤渗透释药实验研究表明，油茶树嫩枝挥发油对
尼群地平、尼美舒利以及黄芩苷等药物均具有一定
的透皮吸收促进作用，其效果超过或接近氮酮；活体
大鼠皮肤毒理实验表明，该挥发油无皮肤毒性，是一
种颇具开发价值的天然透皮促进剂。
另外，油茶树嫩枝挥发油含有 α萜品醇、芳樟
醇、Ｅ２癸烯醛、反式香叶醇、α紫罗兰醇，β紫罗
酮、萜品烯４醇、雪松醇等多种活性成分，并具有一
定的体内外抗菌活性［７］；在民间也常将油茶树嫩枝
点燃后置于刀面所得到的油状液体即挥发油，俗称
“刀烟”，用于治疗刀伤、烫伤、烧伤、急性炎症、牛皮
癣、皮肤癌等。由此认为，该挥发油还有望在刀伤、
烫伤、烧伤、皮肤炎症等的临床治疗方面发挥重要作
用。
［参考文献］
［１］ 全国中草药汇编编写组．全国中草药汇编［Ｍ］．下册．北京：人
民卫生出版社，２０００：３３９．
［２］ 王德仁，张荣泉．天然透皮促进剂的研究开发途径［Ｊ］．中药
材，２００２，２５（１０）：７５１．
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［５］ 李 斌，罗永明．山茶属植物化学成分及生物活性研究［Ｊ］．江
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［７］ 龙正海，杨再昌，杨雄志．油茶树嫩枝挥发油 ＧＣＭＳ分析及其
体内外抗菌活性研究［Ｊ］．食品与生物技术学报，２００７，２６（６）：
９０．
Ｓｔｕｄｙｏｎｓｋｉｎｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙａｎｄｐｅｎｅｔｒａｔｉｏｎｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔｏｆｓｋｉｎａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ
ｏｆｖｏｌａｔｉｌｅｏｉｌｅｘｔｒａｃｔｅｄｆｒｏｍｔｅｎｄｅｒｂｒａｎｃｈｅｒｓｏｆＣａｍｅｌｉａｏｌｅｉｆｅｒａ
ＬＯＮＧＺｈｅｎｇｈａｉ１，ＹＡＮＧＺａｉｃｈａｎｇ２，ＹＡＮＧＸｉｏｎｇｚｈｉ１
（１．ＺｈｅｊｉａｎｇＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＣｏｌｅｇｅ，Ｎｉｎｇｂｏ３１５１００，Ｃｈｉｎａ；２．ＧｕｉｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕｉｙａｎｇ５５０００３，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｔｏｘｉｃｉｔｙｏｎｓｋｉｎａｎｄｐｅｎｅｔｒａｔｉｏｎｅｆｅｃｔｏｆｖｏｌａｔｉｌｅｏｉｌｆｒｏｍｔｅｎｄｅｒｂｒａｎｃｈｅｒｓｏｆＣａｍｅｌｉａｏｌｅ
ｉｆｅｒａｏｎｎｉｔｒｅｎｄｉｐｉｎｅ，ｂａｉｃａｌｉｎ，ｎｉｍｅｓｕｌｉｄｅｆｏｒｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓｏｂｓｏｒｐｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ａｃｕｔｅｓｋｉｎｔｏｘｉｃｉｔｙ，ｉｒｉｔａｔｉｏｎａｎｄａｌｅｒｇｙｏｎｒａｔｓ
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ｗｅｒｅｔｅｓｔｅｄ，ａｎｄｍｏｕｓｅｓｋｉｎｉｎｖｉｔｒｏｗａｓａｐｐｌｉｅｄｆｏｒｓｔｕｄｙｉｎｇｔｈｅｅｆｅｃｔｓｏｆｄｉｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｖｏｌａｔｉｌｅｏｉｌｉｎｎｉｔｒｅｎｄｉｐｉｎｅ，ｂａｉｃａ
ｌｉｎ，ｎｉｍｅｓｕｌｉｄｅｏｎｄｒｕｇｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｄｉｆｅｒｅｎｔｄｏｓａｇｅｖｏｌａｔｉｌｅｏｉｌｈａｄｎｏａｃｕｔｅｔｏｘｉｃｉｔｙ，ｉｒｉｔａｔｉｏｎｏｒｈｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｅｅｆｅｃｔｓ．
Ｃｏｍｐａｒｅｄｔｏａｚｏｎｅ，ｍｏｒｅｐｏｗｅｒｆｕｌｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔｅｆｅｃｔｓｏｆｖｏｌａｔｉｌｅｏｉｌａｔｄｉｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｎｎｉｔｒｅｎｄｉｐｉｎｅ，ｂａｉｃａｌｉｎ，ｎｉｍｅｓｕｌｉｄｅ
ｗｅｒｅｖｅｒｙｏｂｖｉｏｕｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｉｓｐａｐｅｒｆｉｒｓｔｌｙｒｅｐｏｒｔｅｄｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｂｏｕｔｔｈｅｔｏｘｉｃｉｔｙｔｏｓｋｉｎａｎｄｐｅｎｅｔｒａｔｉｏｎｅｆｅｃｔｏｆ
ｖｏｌａｔｉｌｅｏｉｌｆｒｏｍｔｅｎｄｅｒｂｒａｎｃｈｅｓｏｆＣ．ｏｌｅｉｆｅｒａ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｃａｍｅｌｉａｏｌｅｉｆｅｒａ；ｖｏｌａｔｉｌｅｏｉｌ；ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ；ｐｅｎｅｔｒａｔｉｏｎｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔｏｆｓｋｉｎａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ；ｔｅｎｄｅｒｂｒａｎｃｈｅｒｓ；ｒａｔ
［责任编辑 古云侠］
［收稿日期］ ２００６１０２０
［基金项目］ 辽宁省教育厅资助课题（９９０２２１０６３）
［通讯作者］ 刘辉，Ｔｅｌ：（０４１１）８４７２００８３，Ｅｍａｉｌ：ｌｉｕｈｕｉ６０＠
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基于文献数据库分析中药特征与免疫效应的
关系及其数学模型的建立
李艳菊１，刘 辉１，王虹菲１，郭月秋２
（１．大连医科大学 临床免疫学教研室，辽宁 大连 １１６０２７；
２．大连市药品检验所 中药室，辽宁 大连 １１６０２１）
［摘要］ 目的：据已发表的有关中药免疫研究文献为研究基础，分析中药特征与免疫效应的关系并建立相应
的数学模型。方法：收集、筛选１９８０年以来国内公开发表的《中国药典》所载中药植物药免疫研究的文献，根据检
索结果统计不同生物分类、不同药性、药味、归经、不同入药部位的中药数量和其中具有免疫作用的中药味数；用多
元判别分析建立回归数学模型。结果：味辛的药物具有免疫作用的比例较低（Ｐ＜００５）；地下部分入药的中药具有
免疫作用的比例较高（Ｐ＜００５）；归心经、肾经的药物具有免疫作用的比例较高（Ｐ＜００５）；多元判别分析结果与
原判定结果符合率为７４７％。结论：中药的药味、药物归经及入药部位与免疫调节作用有关，以此为基础建立的数
学模型可以作为中药免疫药理研究的参考。
［关键词］ 中药；免疫药理；文献信息学
［中图分类号］Ｒ２８５．５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００７）１７１７８３０４
近年来，我国中药免疫学的研究工作取得了很大
的成绩，获得了大量科学数据及文献资料，是中药研究
的宝贵财富。但目前的研究大多局限于实验药理学的
方法，缺乏以中医理论为基础的系统地、规律性的研
究。因此有必要从已有的信息资源中对不同功效、不
同药性的药物的免疫作用进行分析，找出其中的规律
性，利用中医药的理论指导中药免疫药理的研究。作
者试图以已发表的有关中药免疫研究文献和中药的药
学特征为研究基础，对自１９８０年以来国内公开发表的，
在２００５年版《中国药典》所收载的４５７种植物类中药
的中药免疫研究文献进行分析，利用有关中药的中药
学特征建立了有免疫效应的中药预测和筛选的数学模
型，开辟免疫药物筛选的新思路和新途径。
１ 资料和方法
１．１ 中药免疫文献检索 利用中国生物医学文献
检索数据库（Ｃｂｍｄｉｓｃ）检索，检索词为该库中与免
疫有关的全部主题词，为了不遗漏文献，还对其中的
没有先组主题词的免疫方面的词汇进行自由词检
索，然后分别与药典中的中药进行匹配检索。检索
年限为１９８０年１月 ～２００６年５月。有效文献确认
标准为：①公开正式发表的有关药典中植物药的免
疫学研究的一次文献，综述性文献不计；② 选择采
用单味药物或药物成分进行免疫调节作用研究的文
献，组方和复方药物的文献不收录；③研究对象为实
验动物的全部收录，对中药临床治疗应用的文献，只
选择其中具有免疫实验数据的文献，对于通过临床
疗效推测其免疫作用的文献不予收录。
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