全 文 ：银柴胡中豆甾７烯醇定性定量方法研究
李曼玲，康 琛，赵宇新
（中国中医科学院 中药研究所，北京 １００７００）
［收稿日期］ ２００７０５０９
［通讯作者］ 李曼玲，Ｔｅｌ：（０１０）６４０１４４１１２９３９
银柴胡为石竹科植物银柴胡 Ｓｔｅｌａｒｉａｄｉｃｈｏｔｏｍａ
Ｌ．ｖａｒ．ｌａｎｃｅｏｌａｔａＢｇｅ．的干燥根。到目前为止尚未
建立有效的质量评价方法，甾醇类成分在银柴胡中
含量相对较多［１］，有文献报道此类成分也是其除虚
热的主要活性物质［２］，所以对其中含量相对较高的
豆甾７烯醇进行了提取分离、制备、鉴别及含量测
定。从以往的文献报道来看，此类成分的含量测定
多采用薄层扫描法［３］。豆甾７烯醇紫外为末端吸
收，所以高效液相色谱方法选择了蒸发光散射检测
器做为检测手段，建立了ＨＰＬＣＥＬＳＤ的含量测定方
法。方法简便、准确，适合于银柴胡的质量控制。
１ 仪器与试药
ＨＰ１１００高效液相色谱仪，ＨＰ３３９５积分仪，Ａｌ
ｔｅｃｈ－５００型蒸发光散射检测器，ＨＧＡ－５０００空气发
生器，ＥＤＡＳ２９０薄层成像系统，ＫＱ－１００型超声波清
洗器（昆山市超声波仪器厂）。乙腈为色谱纯，甲醇为
优级纯，水为自制高纯水，其他试剂均为分析纯。
对照品豆甾７烯醇为自制，经熔点等理化常数
和ＩＲ，ＮＭＲ，ＵＶ，ＭＳ等光谱数据确定其结构为豆甾
７烯醇，经ＨＰＬＣＥＬＳＤ面积归一化法测得其纯度为
９８％以上，符合含量测定的要求。
银柴胡购自宁夏银川药材公司，经宁夏回族自
治区生药室王英华鉴定为石竹科植物银柴胡 Ｓ．ｄｉ
ｃｈｏｔｏｍａ的干燥根。银柴胡对照药材购自中国药品
生物制品检定所。
２ 方法与结果
２．１ 薄层色谱鉴别
取药材粉末１ｇ，加甲醇２０ｍＬ，超声处理４５ｍｉｎ，
滤过，滤液蒸干，用甲醇定容至１ｍＬ，作为样品溶液。
另取银柴胡对照药材粉末１ｇ，同法制备对照药材溶
液。另取豆甾７烯醇对照品，加甲醇制成 １ｍＬ·
ｍｇ－１的对照品溶液。吸取上述３种溶液各６μＬ，分
别点于同一硅胶Ｇ薄层板上，以苯醋酸乙酯（１０∶２）
为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（３６５ｎｍ）下
检视。样品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置
上，显相同的蓝色荧光斑点。喷以１０％硫酸乙醇液，
加热至斑点显色清晰。样品色谱中，在与对照品色谱
相应的位置上，显相同颜色的斑点。对所收集的１０
个市售药材进行了薄层鉴别，均检出相应成分。
２．２ 含量测定
２．２．１ 色谱条件 ＮｏｖａｐａｃｋＣ１８色谱柱（４６ｍｍ×
１５０ｍｍ，４μｍ），柱温４０℃；甲醇乙腈水甲酸三乙
胺（４７５∶４６∶６５∶０１∶０１）为流动相，流速１ｍＬ·
ｍｉｎ－１；蒸发光散射检测器检测，漂移管温度７５℃，
气体流速２６０ｍＬ·ｍｉｎ－１。理论板数按豆甾７烯
醇峰计算不低于２０００。见图１。
图１ 豆甾７烯醇ＨＰＬＣ图
１豆甾７烯醇
２．２．２ 样品溶液的制备 取粉碎的样品约１ｇ，精密
称定，置５０ｍＬ锥形瓶中，精密加入甲醇２０ｍＬ，称重，
超声处理（功率２５０Ｗ，频率２０ｋＨｚ）４５ｍｉｎ，取出，放至
室温，再称重，用甲醇补足失重，摇匀，滤过，即得。
２．２．３ 精密度试验 同一样品溶液连续进样５次，
峰面积的平均值为１６５３３４，ＲＳＤ１６％。
２．２．４ 线性关系考察 精密称取豆甾７烯醇对照
品，用甲醇溶解，配制成００１７４ｍｇ·ｍＬ－１豆甾７烯
醇的对照品溶液。分别进样４，８，１２，１６，２０μＬ，以
豆甾７烯醇进样量的常用对数值为自变量，以峰面
积的常用对数值为因变量，求得回归方程 Ｙ＝
１２４０９Ｘ＋５９５７２，ｒ＝０９９９７。在００７０～０３４８μｇ
进样量与峰面积呈线性，采用外标两点法定量。
２．２．５ 稳定性试验 取样品溶液，分别于０，１，３，５，
１０ｈ进样分析，测定峰面积的平均值为１６５４５３，ＲＳＤ
１５％。结果表明，样品中的豆甾７烯醇在１０ｈ内稳
定，可以满足实验要求。
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第３３卷第７期
２００８年４月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ ７
Ａｐｒｉｌ，２００８
２．２．６ 重复性试验 取一批样品进行５次测定，计
算测定结果的平均值为００２０％，ＲＳＤ２７％。
２．２．７ 加样回收试验 称取已知含量的样品５份，
分别加入豆甾７烯醇对照品，依样品溶液制备方法操
作，结果见表１。
表１ 豆甾７烯醇加样回收试验
称样量／ｍｇ 样品中量／ｍｇ 测定量／ｍｇ回收率／％平均值／％ＲＳＤ／％
５００７ ０１００１ ０２０４５ １０００
５０１２ ０１００２ ０２０４２ ９９６
５１４５ ０１０２９ ０２１２９ １０５４ １０１９ ３０
５３５３ ０１０７１ ０２１６７ １０４９
５０２１ ０１００４ ０２０４２ ９９４
注：加入量均为０１０４４ｍｇ
２．２．８ 样品含量测定 按上述方法，分别对１０个不
同市售的银柴胡药材中的豆甾７烯醇的含量进行测
定。由外标两点法计算即得。结果见表２。
表２ 银柴胡样品测定结果
样品来源 质量分数／％ 样品来源 质量分数／％
宁夏银川 ００２０ 陕西西安 ００１２
安徽合肥 ００２７ 广东广州 ００２５
江苏扬州 ００２１ 甘肃西和 ００２６
四川荷花池 ００３０ 北京东城 ００１７
河南南阳 ００２４ 内蒙古赤峰 ００１９
３ 结果与讨论
３．１ 提取溶媒的选择
根据豆甾７烯醇的性质，选择了甲醇、９５％乙醇、
无水乙醇、丙酮、醋酸乙酯、氯仿等溶媒进行了提取，最
后均挥干溶剂，用甲醇转溶至２０ｍＬ量瓶中，作为供试
品溶液，对不同溶媒对测定结果的影响进行了考察，试
验结果表明，使用甲醇作为提取溶媒，提取效果较好，
所以选择甲醇作为供试品溶液制备的提取溶媒。
３．２ 提取方法的选择
使用甲醇作为提取溶媒，分别对超声、回流、冷
浸不同的提取方法进行了考察。结果表明，使用超
声波处理的方法制备供试品溶液，可以获得最佳的
提取效果，故选择超声提取法作为供试品溶液的提
取方法。
３．３ 提取时间的选择
使用甲醇作为提取溶媒，用超声处理作为提取
方法，分别对超声处理３０，４５，６０ｍｉｎ进行了考察。
结果表明，使用甲醇作为提取溶媒，采用超声提取
法，提取４５ｍｉｎ可获得最佳的提取效果，供试品制
备确定超声处理时间为４５ｍｉｎ。
３．４ 溶媒用量的选择
用甲醇作为提取溶媒，分别加入甲醇２０，３０，４０ｍＬ
进行提取，超声处理４５ｍｉｎ，考察不同溶媒用量对测定
结果的影响。结果表明，取药材１ｇ时使用４０ｍＬ甲
醇，峰面积值最大，但进行含量测定时经过取对数后，
与２０ｍＬ时没有差别，所以将甲醇用量确定为２０ｍＬ。
３．５ 由于对照品豆甾７烯醇紫外为末端吸收，且
未见文献报道豆甾７烯醇高效液相含量测定方法，
所以本文采用蒸发光散射检测器检测，并建立了相
应的含量测定条件，本方法快速、准确、可行。
［参考文献］
［１］ 王英华，邢世瑞，刘明生等．野生银柴胡甾醇类成分研究［Ｊ］．
沈阳药学院学报，１９９３，１０（２）：１３４．
［２］ 陈 功．银柴胡的生长期限和药理作用的关系［Ｊ］．内蒙古药
学，１９９１，１０（３４）：３６．
［３］ 徐秀珍，王英华，伊桂兰．小叶黑柴胡中甾醇类成分的定量分
析［Ｊ］．宁夏医学院学报，２０００，２２（６）：４０４．
［责任编辑 王亚君］
［收稿日期］ ２００７０５３０
［基金项目］ 国家自然科学基金项目（３０７７２７３０）
［通讯作者］ 郭巧生，Ｔｅｌ：（０２５）８４３９６５９１，Ｅｍａｉｌ：ｇｑｓ＠ｎｊａｕ．
ｅｄｕ．ｃｎ
水分胁迫对夏枯草幼苗保护酶活性和渗透调节物质的影响
周黎君，郭巧生，胡 君，陈 月
（南京农业大学 中药材研究所，江苏 南京 ２１００９５）
夏枯草 Ｐｒｕｎｅｌａｖｕｌｇａｒｉｓ为唇形科夏枯草属植
物，以干燥果穗入药。《中国药典》历版均有收载，
有清火，明目，散结，消肿等功效［１］。主产于江苏，
浙江，安徽，河南等地，喜温和湿润气候，能耐严
·７３８·
第３３卷第７期
２００８年４月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ ７
Ａｐｒｉｌ，２００８