全 文 ：双龙胶囊对哮喘大鼠肺功能的影响及其作用机制
张建军 t3 o王莲芸 u o阳志晖 t o王林元 t o乔中东 u o李 伟 t o
王景霞 t o庄 伟 t o洪巧瑜 t
ktq北京中医药大学 o北京 tsssu|~ uq上海交通大学 o上海 usssuxl
≈摘要   目的 }探讨双龙胶囊对哮喘大鼠的肺功能的影响及双龙胶囊治疗支气管哮喘的作用机制 ∀方法 }用
卵蛋白建立大鼠哮喘模型 o实验组给予双龙胶囊 o再以卵蛋白作为抗原攻击激发气道高反应性后 o测定大鼠肺功能
的变化 o收集支气管肺泡灌洗液 k…„ƒl进行白细胞分类计数 o并做肺组织病理切片观察 o用流式细胞仪测定脾脏
≤⁄wn及 ≤⁄{n淋巴细胞阳性百分率 ∀结果 }双龙胶囊可明显降低哮喘大鼠 °∞ƒoƒ √¨ s1uoƒ √¨ s1urƒ∂ ≤o降低哮喘大
鼠 …„ƒ中嗜酸性粒细胞含量 o肺组织病理切片观察可见双龙胶囊可抑制炎性细胞渗出 o双龙胶囊还可降低脾脏中
≤⁄wn o≤⁄{n含量 ∀结论 }双龙胶囊可明显抑制哮喘大鼠气道高反应 o改善呼吸功能 o其作用机制可能与双龙胶囊
抑制炎性细胞渗出 o减轻气道炎症并参与机体免疫调节有关 ∀
≈关键词   支气管哮喘 ~气道反应性 ~≤⁄wn o≤⁄{n ~双龙胶囊
≈中图分类号   • u{xqx ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlsu2stuy2sx
≈收稿日期   ussy2sv2uv
≈通讯作者   3 张建军 oר¯}kstslywu{y||vo∞2°¤¬¯}½¼¯ ¤¥us{ƒ
tyvq¦²°
支气管哮喘是由多种细胞 k如嗜酸性粒细胞 !
肥大细胞 !×淋巴细胞 !中性粒细胞 !气道上皮细胞
等 l和细胞组分 k¦¨¯¯∏¯¤µ¨¯ °¨ ±¨·¶l参与的气道慢性
炎症性疾患 ∀这种慢性炎症导致气道高反应性的增
加 o通常出现广泛多变的可逆性气流受限 o并引起反
复发作性的喘息 !气急 !胸闷或咳嗽等症状 o常在夜
间和 k或 l清晨发作 !加剧 o多数患者可自行缓解或
经治疗缓解 ≈t  ∀哮喘的临床诊断除采用一般体征
观察外常采用一些试验来辅助诊断 o如气道反应性
测定 k支气管激发试验 lo支气管舒张试验等 o本实
验参照气道反应性测定方法 o以 s1u秒呼出容积
kƒ √¨ s1ulo最大呼出量 k°∞ƒlo第 s1u秒用力呼出
容积占用力肺活量比率 kh lkƒ √¨ s1urƒ∂ ≤ l等参数
为指标观察哮喘模型大鼠肺功能改变情况及药物对
其的影响 ∀双龙胶囊 k≥l是根据文献报道的多年
临床经验方 ≈u 在中医药理论指导下吸收现代研究
成果 o进一步组方优化并自行研制的中药新制剂 o以
炙麻黄 !地龙 !穿山龙 !五味子 !黄芩 !黄芪等为主要
成分 o具有疏风解表 o清肺化痰 o降气平喘之功效 o可
用于支气管哮喘发作期 ∀本实验通过建立大鼠哮喘
动物模型 o观察双龙胶囊对哮喘大鼠肺功能的影响 o
并探讨作用机制 o为双龙胶囊治疗哮喘提供实验依
据 ∀
1 材料
1q1 动物 ≥⁄大鼠 o雄性 o体重 tws ∗ tys ªo由北
京维通利华公司提供 o动物合格证号 ≥≤÷Žk京
ussu2sssvl∀
1q2 药品与试剂 抗大鼠荧光标记单克隆抗体
≤⁄wk °∞lo ≤⁄{ k ° µ¨¦³lo同型对照抗大鼠 ŒªŠt
k°∞loŒªŠt k° µ¨¦³lo溶血素 k均购于美国 …⁄公
司 lo卵蛋白 k≥¬ª°¤公司 l~百日咳杆菌疫苗 k北京市
生物制品研究所 l~氢氧化铝 k市售分析纯 l~地塞米
松 ks1zx °ªr片 o天津力生制药股份有限公司 o批号
swstsswlo双龙胶囊 k穿山龙 !黄芪 !黄芩 !炙麻黄 !
地龙 !五味子等 o北京中医药大学基础医学院临床中
药室制备 l∀
1q3 仪器 • ∞ p ≥vsus动物呼吸机 o• ∞≥tsvs信号
调理器 k北京贝兰博科技有限公司 loƒ„≤≥≤¤¯¬¥∏µo
流氏细胞仪 k美国 …⁄公司 lowx ¦° ≅ wx ¦° ≅ vx ¦°
雾化箱 k自制 lo≠ ≤ p ≠{ss医用雾化器 k北京亚都科
技股份有限公司 l∀
2 方法
2q1 哮喘模型的制备及分组 分哮喘模型组 !正常
组 !阳性组 !双龙胶囊高 !中 !低剂量组 y组 ∀参考文
献 ≈v 并进行改进 o除正常组外 o各组大鼠每只隔天腹
#yut#
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ussz年 t月
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ u
¤±∏¤µ¼o ussz
腔注射 t °抗原液 k含有卵蛋白 tss °ª!氢氧化铝
tss °ªo百日咳杆菌疫苗 x ≅ ts|个 l致敏 o正常组腹腔
注射等量生理盐水 ∀致敏 tw §后 o给药治疗 o阳性组
按 s1u °ª# ®ªpt # §pt灌胃地塞米松 o双龙胶囊高 !
中 !低剂量组分别按生药量 y1vsov1txot1x{ ª# ®ªpt
# §pt k相当于临床人用量的 twozov1x倍 l灌胃双龙
胶囊水溶液 o给药 t «后 o以 th卵蛋白雾化吸入 us
°¬±激发引喘 o给药和激发引喘连续 tw §∀
2q2 大鼠肺功能测定 末次引喘 s1x «后 o大鼠用
uxh乌拉坦 w °# ®ªpt腹腔注射麻醉 o行气管插管
后 o上动物呼吸机 o经信号调理器处理后 o采用 „±¬2
• ¶¨动物肺功能分析系统分析 o测定用力肺活量
kƒ∂ ≤los1u秒呼出容积 kƒ √¨ s1ulo最大呼出量
k°∞ƒlo计算第 s1u秒用力呼出容积占用力肺活量
比率 kƒ √¨ s1urƒ∂ ≤oh l∀
2q3 支气管肺泡灌洗液白细胞计数 致敏大鼠末
次引喘后腹主动脉取血处死 o即刻用 °…≥缓冲液 {
°分 u次进行支气管肺泡灌洗 o回收 …„ƒo回收率
达 |sh以上 ∀以 t xss µ°¬±pt ow ε 离心 ts °¬±o弃
去上清液 o沉淀用 tss ˏ°…≥溶解 o取 us ˏ混悬
液涂片 o• µ¬ª«2Š¬°¶¤染色后进行白细胞分类计数 o
结果用 ≥°≥≥tsqs软件进行方差 k„‘’∂ „l分析 ∀
2q4 脾脏 ×淋巴细胞亚群测定 大鼠取血处死后
取脾脏 o将脾脏制成 t ≅ tsy个 r°的脾细胞悬液 o
检测时每个标本分两管 o在各加入 xs ˏ细胞悬液
后 o一管加入 ≤⁄wk°∞l和 ≤⁄{k° µ¨¦³lo另一管加入
ŒªŠt k°∞l及 ŒªŠt k° µ¨¦³lo每种抗体均加入 ts ˏo
振荡混匀 o避光室温孵育 tx °¬±o加入 t °溶血素 o
避光孵育 ts °¬±o加入 t °°…≥ot sss µ# °¬±pt离
心 x °¬±o弃去上清液 o加入 vss ˏ°…≥o上机测定 o
每管收集 x万个细胞并分析 ≤⁄w及 ≤⁄{阳性细胞
比率 kh lo结果统计应用 ≤¨¯¯´ ∏¨ ¶·软件 ∀
2q5 大鼠肺组织病理学检查 大鼠处死后取右肺
叶 o置于 tsh 甲醛固定 o常规石腊包埋 o切片厚 x
Λ°o‹∞染色 o显微镜下观察并摄影 ∀
3 结果
3q1 一般情况观察 大鼠经 th的卵蛋白激发后 o
哮喘模型组大鼠在雾化激发过程中均可出现烦躁不
安 !呼吸增快 !咳嗽 !竖毛 o腹肌收缩 !四肢瘫软 o行动
迟滞或俯伏不动 o反应迟钝等症状 o严重者可见呼吸
急促 o呼吸节律不整 o轻度紫绀 o长期激发后体重减
轻 o毛色失去光泽 o反应迟钝 ∀双龙胶囊和地塞米松
用药组给药 o上述症状均可获得不同程度的改善 ∀
3q2 大鼠肺功能测定及药物的影响 肺功能测定
结果显示与正常组相比 o哮喘模型组最大呼出量
k°∞ƒlos1u秒呼出容积 kƒ √¨ s1ulo第 s1u秒用力呼
出容积占用力肺活量比率 kƒ √¨ s1urƒ∂ ≤ l显著降
低 o地塞米松组与双龙胶囊各剂量组均可明显升高
°∞ƒoƒ √¨ s1uoƒ √¨ s1urƒ∂ ≤kΠ  s1stlo其中双龙胶
囊中剂量组 kv1tx ª# ®ªpt # §pt l与地塞米松组无
组间差异 k表 tl∀
3q3 肺泡灌洗液 k…„ƒl中白细胞分类计数及药物
表 t 双龙胶囊对大鼠肺功能的影响结果 kcξ ? σl
组别 ν 剂量 rª# ®ªpt ƒ √¨ s1u °∞ƒ ƒ √¨ s1urƒ∂ ≤
正常 tu p y1{z ? s1vutl wy1v{ ? u1w{ul {t1wx ? w1|ytl
模型 ts p x1{{ ? s1yzvl v|1|x ? x1sxvl yv1uy ? z1{zvl
地塞米松 tv s1u ≅ tspv y1{s ? s1wutl wy1uv ? v1uxul {s1{w ? w1uw
tu t1x{ y1w{ ? s1wutl wv1|t ? v1wxul zv1sx ? w1xxtovl
双龙胶囊 tu v1tx y1zw ? s1vwtl wx1|s ? u1ztul zy1zx ? x1{wtl
| y1vs y1v{ ? s1yuuowl ww1ww ? w1tuwl zw1wt ? {1sztowl
注 }与模型组比 tl Π  s1stoul Π  s1sx~与地塞米松组比 vl Π  s1stowl Π  s1sx
的影响 结果显示哮喘模型组 …„ƒ中嗜酸性粒细
胞 kuy1xyh l与正常组 ktu1ssh l相比显著升高 o给
药地塞米松和双龙胶囊后 o嗜酸性粒细胞数目降低 o
其中地塞米松组及双龙胶囊中 !高剂量组与模型组
比差异显著 kΠ  s1stlo双龙胶囊各剂量组呈一定
量效关系 o中剂量组作用力度最大 o与地塞米松组相
比二者组间差异不明显 k表 ul∀哮喘模型组与正常
组相比中性粒细胞略有增加 o淋巴细胞略有减少 o但
差异不明显 o而哮喘模型组与正常组相比肥大细胞
明显减少 kΠ  s1stl∀说明哮喘模型成功 o双龙胶
囊具有地塞米松样的抑制由卵蛋白诱导的嗜酸性粒
细胞渗出作用 ∀
3q4 脾脏 ×淋巴细胞亚群测定 与正常组相比 o模
型组脾淋巴细胞 ≤⁄wn o≤⁄{n水平均显著升高 o给
地塞米松和双龙胶囊后均可降低 o而 ≤⁄wn r≤⁄{n
各组均没有明显差异 k表 vl∀
#zut#
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表 u 双龙胶囊对肺泡灌洗液 k…„ƒl中白细胞分类计数的影响结果 kcξ ? σ, ν € |l h
组别 剂量 rª# ®ªpt 嗜酸性粒细胞 中性粒细胞 淋巴细胞 巨噬细胞
正常 p tu1ss ? x1|wtl t|1v| ? u1zw ux1|w ? y1y| wu1yt ? {1xvtl
模型 p uy1xy ? w1{v uu1xy ? v1tu ut1xy ? x1zs u|1vv ? x1vv
地塞米松 s1u ≅ tspv tv1zs ? w1yutl ts1|x ? w1uztl vu1|x ? x1xvtl wu1ws ? x1||tl
双龙胶囊 t1x{ uv1ux ? y1zx ut1ww ? x1uu uz1xs ? {1us uz1ux ? w1vu
v1tx t{1zx ? y1sztl tx1xs ? v1wxtl vv1xs ? w1{ytl vu1vt ? {1|s
y1vs t|1v| ? x1uytl uu1tz ? v1yy u{1yz ? z1tyul u{1yz ? y1xz
注 }与模型组比 tl Π  s1stoul Π  s1sxk表 v同 l
表 v 哮喘大鼠脾淋巴细胞亚群变化 kcξ ? σ, ν € yl h
组别
剂量
rª# ®ªpt ≤⁄w
n ≤⁄{n ≤⁄wn r≤⁄{n
正常 p t{1vu ? v1xttl {1u{ ? v1xwtl u1xx ? t1swtl
模型 p uz1sz ? z1xu uw1v| ? u1|x t1tv ? s1vy
地塞米松 s1u ≅ tspv uv1xt ? x1wt ty1|z ? u1s{tl t1v{ ? s1uw
双龙胶囊 t1x{ tx1y| ? u1z|tl tt1wz ? u1sutl t1ws ? s1vs
v1tx t{1{x ? y1{xul tw1zw ? y1w{tl t1v{ ? s1xw
y1vs tz1ys ? v1v{tl tu1w{ ? u1tvtl t1xx ? s1y{
3q5 肺病理形态学观察 哮喘模型组大鼠细支气
管和小血管的管壁增厚 o周围组织疏松有明显水肿 o
肺泡壁中嗜酸性粒细胞浸润明显增多 o黏膜上皮脱
落 ~地塞米松组及双龙胶囊各剂量组大鼠肺内损伤
明显轻于哮喘组 o炎症细胞浸润程度也减轻 o可以抑
制炎性细胞浸润 k图 tl∀可见所建哮喘模型具有明
显的哮喘肺组织病理改变特征 o双龙胶囊可以抑制
炎性细胞渗出 ∀
图 t 大鼠肺组织病理图
„q模型组大鼠肺组织细支气管上皮脱落 o管壁黏膜增厚 o水肿 o高倍镜下 k ≅ wssl可见大量炎性细胞渗出 ~ …q正常组大鼠肺组织细支气管周
围未见水肿及炎性细胞渗出 ~ ≤q地塞米松治疗后大鼠肺组织细支气管管壁薄 o上皮皱折减少 o炎性细胞渗出减少 ~ ⁄q双龙胶囊治疗后大鼠肺
组织细支气管炎性渗出减少
4 讨论
4q1 支气管哮喘属中医的哮证 o喘证 o咳嗽 o肺胀等
范畴 ∀本制剂处方中炙麻黄辛温 o主入肺经 o具有发
散风寒 o宣肺利窍 o止咳平喘的功效 ~穿山龙味苦性
平 o归肝 !肺经 o具化痰止咳的功效 ~地龙味咸性寒 o
归肝 !脾 !膀胱经 o具有通络平喘的功效 ~五味子酸甘
性温 o归肺 !心 !肾经 o具有敛肺气止咳平喘的功效 ∀
黄芩苦寒 o归肺 !胆 !脾 !大肠 !小肠经 o具有清热燥
湿 o泻火解毒的功效 ~黄芪甘温 o归肺 !脾经 o具补气
固表的功效 ∀诸药配伍 o具有疏风解痉 o清肺化痰 o
降气平喘的功能 ∀本实验亦表明 o以该处方为基础
的双龙胶囊对哮喘模型动物有较好的治疗作用 o肺
功能各参数明显改善 ∀
4q2 如仅采用临床上 ƒ∞∂ to°∞ƒ反应的主要是大
气道的病变的 u项指标容易造成假阳性 ≈wox  ∀以往
评价动物模型的方法多采用测定肺呼气阻力 o吸气
阻力 o潮气量 o肺顺应性等指标 ≈yoz  o不能完全反应
哮喘发作时气道病变情况 o故本实验根据临床支气
管哮喘防治指南 ≈t 中诊断标准选用 ƒ √¨ s1uo°∞ƒo
ƒ √¨ s1urƒ∂ ≤等参数为指标观察哮喘模型大鼠肺功
#{ut#
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能改变情况更为科学 ∀本实验中致敏大鼠经抗原激
发后引发哮喘 o呼气流量 kƒ √¨ s1uo°∞ƒl降低 oƒ √¨
s1urƒ∂ ≤亦降低 ∀实验大鼠哮喘模型组此 v项指标
明显降低 kΠ  s1stlo符合哮喘发作期可逆性气流
受限及气道高反应典型特征 ∀本实验观察到双龙胶
囊各剂量均可显著抑制哮喘大鼠气道高反应 o改善
肺功能 o与地塞米松组相比 o双龙胶囊中剂量组的作
用力度与之相当 o二者间无显著差异 kΠ  s1sxlo故
值得进一步深入研究和开发 ∀
4q3 哮喘大鼠 …„ƒ中嗜酸性粒细胞的比率明显
升高 o肺病理切片也可见细支气管壁黏膜水肿 !增
厚 o肺泡及细支气管中有大量炎性细胞浸润 o双龙胶
囊及地塞米松均可明显减少嗜酸性粒细胞的渗出 o
因此双龙胶囊作用机制之一可能与抑制炎症细胞的
渗出 o减少炎症介质的释放有关 ∀
4q4 哮喘的表现型对于 ≤⁄wn o≤⁄{n报道呈多样
性 o有研究报道哮喘发作期患者中 ≤⁄wn ×细胞和
≤⁄{n ×细胞过度增殖 ≈{o|  o无论外源性还是内源性
哮喘患者外周血 ≤⁄wn ×均增多 o但是外源性哮喘
患者 ≤⁄{n细胞减少 o而内源性哮喘患者 ≤⁄{n增
高 ≈ts  o还有报道哮喘患者 …„ƒ中 ≤⁄wn细胞增多 o
≤⁄{n细胞减少 ≈tt  ∀本实验中模型组大鼠脾脏细胞
≤⁄wn o≤⁄{n细胞较正常组显著增多 o由于 ≤⁄{n过
度增多 ≤⁄wn r≤⁄{n减少 o存在严重失衡 o哮喘机体
处于免疫功能紊乱状态 o双龙胶囊可显著性减少
≤⁄wn o≤⁄{n细胞 o≤⁄w n r≤⁄{n亦有所增加 o实验中
虽然给药组 ≤⁄wn r≤⁄{n没有统计学意义 o这可能
是给药治疗时间较短所致 o但分析数据可发现 o给药
后该值变化趋势趋向于正常组方向 o说明双龙胶囊
的另一作用机制可能是通过调节免疫功能紊乱 o使
其恢复正常而达到平喘作用 ∀此外 o对于哮喘大鼠
≤⁄wn r≤⁄{n降低的原因 o还有待于进一步深入研究
各相关的细胞因子变化情况及相互关系 o分析哮喘
发作及双龙胶囊作用机制 ∀
≈致谢   首都医科大学附属朝阳医院 o北京呼吸疾病
研究所庞宝森主任在肺功能测定方面给予了大力支持 ∀
≈参考文献  
≈t  支气管哮喘防治指南 q中华医学会呼吸病学分会哮喘学组 ≈ q中
华结核和呼吸杂志 oussvouykvl}tvuq
≈u  王莲芸 o杨平常 o王长生 q脱敏疗法加调免 Œ号对支气管哮喘免疫
指标的影响 ≈ q湖南中医杂志 ot||yotukul}wyq
≈v  吕国平 o崔德健 o郭英江 o等 q介绍一种建立大鼠哮喘模型的实验
方法 ≈ q中华结核和呼吸杂志 ot||xot{kyl}vzzq
≈w  Ž∏º¤±²Žo …²¶®¨ ± ≤ ‹o °¤µ¨ ° ⁄o ·¨¤¯q ≥°¤¯¯¤¬µº¤¼¶§¬° ±¨¶¬²±¶
¬± ¤¶·«°¤¤±§¬± ¦«µ²±¬¦²¥¶·µ∏¦·¬√¨ ³∏¯°²±¤µ¼ §¬¶¨¤¶¨≈ q „° • √¨
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≈x  …²¶®¨ ± ≤ ‹o • ¬ªª¶… • o °¤µ¨ ° ⁄o ·¨¤¯q ≥°¤¯¯¤¬µº¤¼ §¬° ±¨¶¬²±¶
¬± ¶°²®¨ µ¶º¬·«²¥¶·µ∏¦·¬²±·²¤¬µ©¯²º≈ q „° • √¨ • ¶¨³¬µ⁄¬¶ot||so
twukvl}xyvq
≈y  潘慧云 o朱元珏 o王曾礼 q大鼠支气管哮喘模型的建立及其肺功能
的改变 ≈ q汕头大学医学院学报 ot||{ott}tsq
≈z  王忆勤 o李福凤 o李斌芳 o等 q不同治疗对哮喘模型大鼠气道顺应
性和肺病理变化的影响 ≈ q上海中医药杂志 oussuotu}vtq
≈{  ≥«¬²·¤≠o „µ¬®¬·¤‹o ‹²µ¬·¤‘o ·¨¤¯qŒ±·µ¤¦¨¯¯∏¯¤µŒ2x ¤±§×2¯¼°2
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≈ts  „µ±²¯§ ∂ o …¤¯®²º ≥o ≥·¤¤·¶• o ·¨¤¯q Œ±¦µ¨¤¶¨ ¬± ³¨ µ©²µ¬±2³²¶¬·¬√¨
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≈tt  Žµ∏ª‘o ∞µ³¨ ±¥¨ ¦® ∂ o …¤¯®¨ Žo ·¨¤¯q °µ²©¬¯¨ ²©…µ²±¦«²¤¯√ ²¨2
¤¯µ¤√¤ª¨ 2⁄ µ¨¬√ §¨≤⁄wn o ≤⁄{n o ¤±§× ¦¨¯¯¶¬± ³¨ ²³¯¨º¬·«¤¶·«2
°¤¤©·¨µ¶¨ª° ±¨·¤¯ ¤¯¯¨µª¨ ± ¦«¤¯¯¨ ±ª¨ ≈ 1„° • ¶¨³¬µ≤¨¯¯ ²¯ …¬2
²¯o usstouxktl}tuxq
Εφφεχτσανδ µ εχηανισµ οφ Σηυανγλονγ χαπσυλε
ον λυνγ φυνχτιον οφ αστηµ ατιχ ρατσ
‹„‘Š ¬¤±2­∏±t o • „‘Š ¬¤±2¼∏±u o ≠ „‘Š «¬2«∏¬t o • „‘Š ¬±2¼∏¤±t o ±¬Œ„’ «²±ª2§²±ªu o Œ• ¬¨t o
• „‘Š ¬±ª2¬¬¤t o ‹˜„‘Š • ¬¨t o ‹ ’‘Š ±¬¤²2¼∏t
(t. Βειϕινγ Υνϖερσιτψ οφΧηινεσε Μεδιχινε, Βειϕινγ tsssu|, Χηινα;
u. Σηανγηαι ϑιαοτονγ Υνιϖερσιτψ, Σηανγηαι usssux, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ¶·∏§¼ ·«¨ ©¨©¨¦·¶¤±§° ¦¨«¤±¬¶° ²©≥«∏¤±ª¯²±ªk≥l ¦¤³¶∏¯¨²± ²√¤¯¥∏°¬±2¶¨±¶¬·¬½¨ §¤¶·«°¤¬± µ¤·¶
#|ut#
第 vu卷第 u期
ussz年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ u
¤±∏¤µ¼o ussz
¤±§·² √¨¤¯∏¤·¨·«¨ ¬µ° ¦¨«¤±¬¶°q Μετηοδ : „©·¨µµ¤·¶º µ¨¨ ¶¨±¶¬·¬½¨ §¥¼ ²√¤¯¥∏°¬± ¤±§¦«¤¯¯¨ ±ª¨ §¥¼ ·«¨ ¤±·¬ª¨ ±o ¥µ²±¦«¬¤¯ ³µ²√²¦¤2
·¬²± ·¨¶·¶º µ¨¨ ³¨ µ©²µ° §¨·² §¨ ·¨µ°¬±¨¤¬µº¤¼ «¼³¨ µµ¨¶³²±¶¬√ ±¨ ¶¨¶q …µ²±¦«²¤¯√ ²¨¯¤µ¯¤√¤ª¨ ©¯∏¬§k…„ƒl º µ¨¨ ³µ¨³¤µ¨§©²µ§¬©©¨µ¨±·¬¤¯
º«¬·¨ ¦¨¯¯ ¦²∏±·¶¤±§«¬¶·²¯²ª¬¦¤¯ √¨¤¯∏¤·¬²± ²© ∏¯±ª·¬¶¶∏¨ º µ¨¨ ³¨ µ©²µ° §¨q ≤⁄wn ¤±§≤⁄{n × 2¯ ¼°³«²¦¼·¨¶¬± ¶³¯¨¨ ± ·¬¶¶∏¨ ¶º µ¨¨ ¦¤¯2
¦∏¯¤·¨§¥¼ ∏¶¬±ª¤ ©¯²º ¦¼·²° ·¨¨µq Ρ εσυλτ: ≥¦¤³¶∏¯¨ ¦²∏¯§ ²¥√¬²∏¶¯¼ ¬±«¬¥¬·¤¬µº¤¼ «¼³¨ µ¨¶³²±¶¬√ ±¨ ¶¨¶²©¤¶·«°¤·¬¦µ¤·¶¤±§ §¨ 2
¦µ¨¤¶¨§·«¨ ±∏°¥¨ µ²© ²¨¶¬±²³«¬¯¶¬± …„ƒq ׫¨ ³¨ µ¦¨±·¤ª¨ ¶²©≤⁄wn ¤±§≤⁄{n º µ¨¨ µ¨§∏¦¨§¥¼ ≥¦¤³¶∏¯¨¤¶º¨¯ q¯ Χονχλυσιον: ≥
¦¤³¶∏¯¨«¤¶§¬¶·¬±¦··«¨ µ¤³¼ ©¨©¨¦·¶²± ¤¶·«°¤·¬¦µ¤·¶³µ²¥¤¥¯¼ ¥¼ ¬±«¬¥¬·¬±ª¤¬µº¤¼ ¬±©¯¤°°¤·¬²± ¤±§³¤µ·¬¦¬³¤·¬±ª¬± ¬°°∏±¬·¼ °²§∏¯¤2
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[ Κεψ ωορδσ] ¤¶·«°¤~ ¤¬µº¤¼ «¼³¨ µµ¨¶³²±¶¬√ ±¨ ¶¨¶~ ≤⁄wn o ≤⁄{n ~ ≥¦¤³¶∏¯¨
≈责任编辑 刘  
≈收稿日期   ussy2st2us
≈基金项目   重庆市重大科技专项资助项目 k渝科发计字
ussw2uz号 l
≈通讯作者   3 李惠芝 oר¯}ksuvly{w{xzuzoƒ¤¬}ksuvly{w{x2
vz{o∞2°¤¯}½²±ª¼¬±ƒ ¶²«∏q¦²°
茅莓提取物对大鼠局灶性脑缺血再灌注神经细胞
凋亡及其相关蛋白表达的影响
王继生 o李惠芝 3 o邱宗荫 o夏永鹏 o任凌燕
k重庆医科大学 药学院 o重庆 wssstyl
≈摘要   目的 }探讨茅莓提取物 k• °l对缺血性脑损伤的神经保护机制 ∀方法 }采用大鼠大脑中动脉阻塞造成
局灶性脑缺血 u «再灌注 uw «模型 oט‘∞标记和免疫组化的方法观察茅莓提取物 xots ª# ®ªpt ¬ª对神经细胞凋
亡数目及其相关蛋白 …¦¯2uo…¤¬表达的变化 ∀结果 }茅莓提取物 xots ª# ®ªpt显著抑制神经细胞凋亡 o增加 …¦¯2u
阳性细胞的表达 o降低 …¤¬阳性细胞的表达 o…¦¯2ur…¤¬的表达比例增加 ∀结论 }茅莓提取物抗凋亡机制可能与增加
…¦¯2u阳性细胞的表达 o降低 …¤¬阳性细胞的表达 o提高 …¦¯2ur…¤¬有关 ∀
≈关键词   脑缺血 r再灌注 ~茅莓提取物 ~细胞凋亡 ~…¦¯2u~…¤¬~…¦¯2ur…¤¬
≈中图分类号   • u{xqx ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlsu2stvs2sv
茅莓为蔷薇科植物茅莓 Ρυβυσ παρϖιφλολιυσq的
茎叶 ∀ 5本草拾遗 6记载 o具有止血活血 !散瘀定痛 !
清热解毒之功效 o可内服 !外敷 ∀以往用于治疗吐
血 !跌打刀伤 !产后瘀滞腹痛 !痢疾 !痔疮 !疥疮等 o民
间还用其根治疗女性月经过多症 ≈t  ∀已有研究表
明茅莓提取物对脑缺血有很好的保护作用 ∀其作用
机制可能与 ‹≥°zs表达增加有关 ≈u  o本实验采用大
鼠局灶性脑缺血再灌注模型 o观察茅莓提取物脑缺
血神经细胞凋亡及其相关蛋白表达的影响 o探讨对
缺血性脑损伤的神经保护机制 ∀
1 材料和方法
1q1 药品和试剂 茅莓提取物 k• °o重庆医科大学
药物分析实验室 l∀ ט‘∞试剂盒 k美国 • ²¦«¨ 公
司 l~…¦¯2uo…¤¬抗血清 o≥„…≤o⁄„…显色试剂盒 k北
京中杉 l~其他试剂均为国产 „• 纯 ∀
1q2 动物 ≥⁄大鼠 o雄性 o体重 kvss ? usl ªo购于
第三军医大学大坪医院动物中心 o合格证号 ≥≤÷Ž
k渝 lussussvo清洁级 ∀
1q3 大鼠局灶性脑缺血模型 k „≤’l制备 按  ¤¨
²±ª¤≈v 略有改进 o将大鼠用 v1xh水合氯醛 ts °#
®ªpt腹腔注射麻醉 o仰位固定后手术 o制成右侧大脑中
动脉脑缺血模型∀大鼠在手术后约 s1x «清醒 o观察其
神经功能缺失症状 o并进行评分 ∀以动物清醒后爬行
时向左转圈 k追尾现象 lo严重时向左跌倒 o提尾时左前
肢内收屈曲为入选标准 ∀假手术组除不插线外 o其余
步骤同上 o缺血 u «后拔掉线栓 o再灌注 uw «∀
1q4 分组及给药方法 实验动物随机分为 w组 }模
型组 o假手术组 o • ° xots ª# ®ªpt处理组 o各给药组
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第 vu卷第 u期
ussz年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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