全 文 ：鲜半夏中抑制肿瘤坏死因子α产生的活性成分
韩美华１，杨秀伟１，钟国跃２，张　明２
（１．北京大学 药学院 天然药物学系 天然药物及仿生药物国家重点实验室，北京１０００８３；
２．重庆市中药研究院，重庆 ４０００６５）
［摘要］　目的：研究半夏Ｐｉｎｅｌｉａｔｅｒｎａｔａ鲜块茎中的生物活性成分，为其质量评价提供科学依据。方法：采用
多种柱色谱方法进行分离纯化，根据理化性质和谱学方法鉴定其结构。利用微孔板紫外吸收比色法，体外测定化
合物对脂多糖（ＬＰＳ）刺激的小鼠腹腔巨噬细胞产生肿瘤坏死因子ＴＮＦα的抑制作用。结果：从半夏鲜块茎中分离
得到９个化合物，分别鉴定为反式对香豆醇（１），３，４二羟基桂皮醇（２），阿魏酸（３），落叶松脂醇（４），赤式１（４
羟基３甲氧基苯基）２｛２，６二甲氧基４［１（Ｅ）丙稀３醇］苯氧基｝丙烷１，３二醇（５），去氢二松柏醇（６），异落
叶松脂醇（７），４羟苯丙烯基ＯβＤ吡喃葡糖苷（８）和松柏苷（９）。化合物１，２，３，８和９在１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１浓度对
ＬＰＳ刺激的小鼠腹腔巨噬细胞产生ＴＮＦα的抑制作用分别为２４１％，５７６％，４０２％，８２７％和６２０％。结论：化
合物１，２和４～８系首次从半夏属植物分离得到，化合物９系首次从半夏分离得到。化合物１，２，８和９为苯丙素类
化合物，化合物４～７为木脂素类化合物。半夏的抗炎作用可能与化合物１，２，３，８和９有关。
［关键词］　半夏；鲜块茎；化学成分；苯丙素；木脂素；肿瘤坏死因子α
［中图分类号］Ｒ２８４．１　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００１５３０２（２００７）１７００５
［收稿日期］　２００７０４１７
［基金项目］　国家“十五”科技攻关项目（９９９２９０１０２Ａ）；国
家计委“现代中药”项目（［２００２］２３２３）
［通讯作者］　杨秀伟，Ｔｅｌ：（０１０）８２８０５１０６，Ｅｍａｉｌ：ｘｗｙａｎｇ＠
ｂｊｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
　　半夏Ｐｉｎｅｌｉａｔｅｒｎａｔａ（Ｔｈｕｎｂ．）Ｂｒｅｉｔ．为天南星
科Ａｒａｃｅａｅ植物，主产于四川、湖北、辽宁等地，其块
茎为《中国药典》记载的法定中药。半夏药用最早
记载于《神农本草经》，其味辛、性温，有毒，具有燥
湿化痰、降逆止呕、消痞散结之功；用于痰多咳嗽、痰
饮眩悸、风痰眩晕、痰厥头痛、呕吐反胃、头晕不眠等
症，生用外消痈肿［１］。有关半夏化学成分的研究，
已有挥发油、生物碱、黄酮、多糖［２］、脑苷［３］、甾类［４］
和苯丙素［５］等报道。
本项研究以重庆市“国家中药半夏ＧＡＰ种植基
地”栽培的半夏为实验材料，分离并鉴定了９个化
合物，根据其理化性质和谱学数据分析，分别鉴定为
反式对香豆醇（１），３，４二羟基桂皮醇（２），阿魏酸
（３），落叶松脂醇（４），赤式１（４羟基３甲氧基苯
基）２｛２，６二甲氧基４［１（Ｅ）丙稀３醇］苯氧
基｝丙烷１，３二醇（５），去氢二松柏醇（６），异落叶
松脂醇（７），４羟苯丙烯基ＯβＤ吡喃葡糖苷（８）和
松柏苷（９）。化合物１，２和４～８系首次从半夏属
植物分离得到，化合物 ９系首次从半夏分离得到。
化合物１，２，８和９为苯丙素类化合物，化合物４～７
为木脂素类化合物。其结构如图１。
巨噬细胞是重要的抗炎免疫细胞，它在非特异性
免疫、体液免疫以及肿瘤免疫等方面起着重要作用。
巨噬细胞分泌的细胞因子主要有肿瘤坏死因子α
（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒα，ＴＮＦα）等。本项研究采用对
ＴＮＦα高度敏感的小鼠成纤维细胞株Ｌ９２９细胞生物
活性测定法检测上述部分化合物对脂多糖（ＬＰＳ）刺
激的小鼠腹腔巨噬细胞产生 ＴＮＦα的抑制作用，测
定时在培养的Ｌ９２９细胞中加入过量的放线菌素Ｄ抑
制Ｌ９２９细胞的有丝分裂，然后加入受试化合物。
初步的构效关系研究表明：与化合物１比较，化
合物２，８和９分子结构中结合多个羟基，极性较强，
抑制率较高；与化合物３比较，虽然羧基极性亦较
强，但糖苷化的效果更好；酚羟基甲醚化后使活性降
低；与化合物９比较，侧链糖苷化（如化合物８）的效
果比母核糖苷化的效果好；与化合物１比较，母核中
羟基越多（如化合物２）效果越好。Ｚｈｕａｎｇ等［６］报
道了桂皮酰酯衍生物与巨噬细胞游走抑制因子
（ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｍｉｇｒａｔｉｏｎｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｆａｃｔｏｒ，ＭＩＦ）的相互
作用。这些研究结果提示巨噬细胞可能是苯丙素类
化合物抗炎作用的靶点之一。
·５５７１·
第３２卷第１７期
２００７年９月
　　　　　　　　　
　　　 中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
　　　　　　　
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ　１７
Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００７
图１　化合物１～９的化学结构
１　仪器、试剂和材料
ＸＴ４Ａ型显微熔点测定仪 （温度计未校正）；
Ｐｅｒｋｉｎ－Ｅｌｍｅｒ２４３Ｂ型旋光仪；ＶａｒｉａｎＣａｒｙ３００ＵＶ
－ＶＩＳ型紫外光谱仪；ＶａｒｉａｎＩＮＯＶＡ５００型核磁共
振波谱仪（ＴＭＳ为内标）；ＦｉｎｎｉｇａｎＴＲＡＣＥ２０００ＧＣ
－ＭＳ型质谱仪；ＭＤＳＳＣＩＥＸＡＰＩＱＳＴＡＲ型飞行时
间质谱仪（ＥＳＩ－ＴＯＦ－ＭＳ）；日产 ＢＩＯ－ＲＡＤＭｏｄｅｌ
４５０型酶标仪；柱色谱用硅胶（２００～３００目）及薄层
色谱硅胶ＧＦ２５４均为青岛海洋化工厂产品；Ｓｅｐｈｅｄ
ａｘＬＨ－２０（２５～１００μ）购自 Ｐｈａｒｍａｃｉａ公司；其余
试剂均为分析纯或色谱纯。脂多糖（ＬＰＳ）购自 Ｐｒｏ
ｍｅｇａ公司；胎牛血清（ＦＣＳ）为 Ｈｙｃｌｏｎ产品；ＲＰＭＩ
１６４０培养基为 Ｇｉｂｃｏ产品；巯基乙醇酸钠为 Ｄｉｆｏｃｏ
产品；放线菌素Ｄ和四甲基偶氮唑蓝（ＭＴＴ）为 Ｓｉｇ
ｍａ产品；二甲基亚砜购自北京化工厂；４８和９６孔
培养板购自Ｃｏｓｔａｒ公司。
半夏新鲜块茎于２００３年１１月采自重庆市“国
家中药半夏 ＧＡＰ种植基地”，经重庆市中药研究院
钟国跃研究员鉴定为半夏属植物半夏 Ｐ．ｔｅｒｎａｔａ的
块茎。凭证标本（２００３１１２０）存北京大学药学院天
然药物及仿生药物国家重点实验室。
２　动物和细胞株
Ｃ５７ＢＬ６Ｊ小鼠，雄性，体重１６～１８ｇ，购于中国
医学科学院实验动物中心。小鼠成纤维细胞株
Ｌ９２９细胞由中国医学科学院、中国协和医科大学药
物研究所药理室提供。
３　提取与分离
取新鲜半夏块茎研碎，取２７ｋｇ用５倍量体积
的７０％乙醇回流提取５次，第１次提取２ｈ，以后每
次提取１ｈ；合并提取液、冷却，滤去淀粉，上清液经
减压蒸发回收乙醇，得流浸膏 １０５５ｋｇ（收率
３９１％）。然后用２５００ｍＬ水溶解浸膏，依次用等
体积醋酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别萃取５
次，合并萃取液，减压蒸干，得醋酸乙酯萃取物１２７ｇ
（０４７％），正丁醇萃取物１２６ｇ（０４６％）和水层残
留物７１０ｇ（２６３％）。
取醋酸乙酯萃取物１２７０ｇ，进行硅胶柱色谱分
离，石油醚醋酸乙酯（２０∶１～１０∶１～２∶１）和氯仿甲醇
（５０∶１～２５∶１～１０∶１～１∶１）梯度洗脱，共得到８个组
分。依次经硅胶和 ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ－２０柱色谱分离纯
化，从组分２得到化合物１（３００ｍｇ）；从组分３得到
化合物２（４８０ｍｇ）；从组分４得到化合物３（６３０
ｍｇ）和４（１３１ｍｇ）；从组分６得到化合物５（９４
ｍｇ），６（３６ｍｇ）和７（２０ｍｇ）；从组分７得到化合物
８（２００ｍｇ）；从组分８得到化合物９（６５０ｍｇ）。
４　结构鉴定
化合物１　白色固体。鉴定为反式对香豆醇
［（Ｅ）ｐｃｏｕｍａｒｙｌａｌｃｏｈｏｌ］，见文献［５］。
化合物２　白色固体。鉴定为３，４二羟基桂皮
醇（３，４ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｃｉｎｎａｍｙｌａｌｃｏｈｏｌ），见文献［５］。
化合物３　白色固体；ＥＩＭＳｍ／ｚ：１９４［Ｍ］＋；其
谱学数据与对照品阿魏酸一致，故鉴定为阿魏酸
·６５７１·
第３２卷第１７期
２００７年９月
　　　　　　　　　
　　　 中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
　　　　　　　
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ　１７
Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００７
（ｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄ）。
化合物 ４　白色无定形粉末（ＣＨＣｌ３ＭｅＯＨ），
ｍｐ１６２～１６４℃；［α］２５Ｄ －１２（ｃ１３１，Ｍｅ２ＣＯ）；ＥＩＭＳ
ｍ／ｚ：３６０［Ｍ］＋；１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：６８６
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５Ｈｚ，Ｈ２），６８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８０Ｈｚ，Ｈ
５），６８０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５，８０Ｈｚ，Ｈ６），４７９（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝６５Ｈｚ，Ｈ７），２４１（１Ｈ，ｂｒｑ，Ｊ＝７０Ｈｚ，Ｈ
８），３７７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６０，１１０Ｈｚ，Ｈａ９），３９１（１Ｈ，
ｄｄ，Ｊ＝７０，１１０Ｈｚ，Ｈｂ９），６６９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５Ｈｚ，
Ｈ２′），６８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８０Ｈｚ，Ｈ５′），６７０（１Ｈ，ｄｄ，
Ｊ＝１５，８０Ｈｚ，Ｈ６′），２５５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０５，１３５
Ｈｚ，Ｈａ７′），２９１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５０，１３５Ｈｚ，Ｈｂ７′），
２７３（ｍ，Ｈ８′），３７５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６０，９０Ｈｚ，Ｈβ
９′），４０５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６５，９０Ｈｚ，Ｈα９′），３８９
（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ），３８７（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ）；１３ＣＮＭＲ（１２５
ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１３４７（Ｃ１），１０８３（Ｃ２），１４６６（Ｃ
３），１４５０（Ｃ４），１１４２（Ｃ５），１１８７（Ｃ６），８２８（Ｃ
７），５２６（Ｃ８），６０９（Ｃ９），１３２３（Ｃ１′），１１１２（Ｃ
２′），１４６５（Ｃ３′），１４４０（Ｃ４′），１１４４（Ｃ５′），
１２１２（Ｃ６′），３３３（Ｃ７′），４２４（Ｃ８′），７２９（Ｃ
９′），５５９（ＯＭｅ×２）。其谱学数据与文献［７］一
致，故鉴定为落叶松脂素（ｌａｒｉｃｉｒｅｓｉｎｏｌ）。
化合物 ５　无色油状物；［α］２５Ｄ －８５（ｃ０９４，
ＭｅＯＨ）；ＥＳＩＴＯＦＭＳｍ／ｚ：４２９［Ｍ＋Ｎａ］＋；１ＨＮＭＲ
（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：６９６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２０Ｈｚ，Ｈ２′），
６８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８０Ｈｚ，Ｈ５′），６７５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２０，
８０Ｈｚ，Ｈ６′），６６７（２Ｈ，ｓ，Ｈ２，Ｈ６），６５７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝
１６０Ｈｚ，Ｈ７），６３３（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝６０，６０Ｈｚ，Ｈ８），
５６４（１Ｈ，ｂｒｓ，ＯＨ），５００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３５Ｈｚ，Ｈ７′），
４３４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５５Ｈｚ，Ｈ９），４１５（１Ｈ，ｍ，Ｈ８′），
４０８（１Ｈ，ｂｒｓ，ＯＨ），３９２（１Ｈ，ｍ，Ｈａ９′），３５０（１Ｈ，
ｄｌｉｋｅ，Ｈｂ９′），３８９（９Ｈ，ｓ，ＯＭｅ）；
１３ＣＮＭＲ（１２５
ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１３３４（Ｃ１），１０３５（Ｃ２），１５３３（Ｃ
３），１３４８（Ｃ４），１５３３（Ｃ５），１０３５（Ｃ６），１３０６（Ｃ
７），１２８８（Ｃ８），６３４（Ｃ９），１３１２（Ｃ１′），１０８３（Ｃ
２′），１４６６（Ｃ３′），１４４８（Ｃ４′），１１４２（Ｃ５′），１１８７
（Ｃ６′），７２５（Ｃ７′），８７１（Ｃ８′），６０５（Ｃ９′），５６１
（ＯＭｅ），５６０（ＯＭｅ）。其谱学数据与文献［８，９］一致，
故鉴定为赤式愈创木基甘油βＯ４′芥子醚（ｅｒｙｔｈｒｏ
ｇｕａｉａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌβＯ４′ｓｉｎａｐｙｌｅｔｈｅｒ）。
化合物 ６　白色无定形粉末；［α］２５Ｄ ＋１１
（ｃ０３６，ＭｅＯＨ）；ＥＳＩＴＯＦＭＳｍ／ｚ：３５９［Ｍ＋Ｈ］＋；
１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：６９５（２Ｈ，ｓ，Ｈ２，Ｈ６），
６９２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２０Ｈｚ，Ｈ２′），６８２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２０，
８０Ｈｚ，Ｈ６′），６７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８０Ｈｚ，Ｈ５′），６５３
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６０Ｈｚ，Ｈ７），６２２（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝６５，１６０
Ｈｚ，Ｈ８），５５１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６５Ｈｚ，Ｈ７′），４１９（２Ｈ，
ｄｄ，Ｊ＝１５，６０Ｈｚ，Ｈ９），３４８（１Ｈ，ｂｒｄｄｄ，Ｈ８′），
３７３３８５（２Ｈ，ｍ，Ｈ９′），３８１（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ），３８７
（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ）；１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：１３０３
（Ｃ１），１１２１（Ｃ２），１４５５（Ｃ３），１４９３（Ｃ４），１３２６
（Ｃ５），１１６３（Ｃ６），１３２０（Ｃ７），１２７５（Ｃ８），６３９
（Ｃ９），１３４６（Ｃ１′），１１０５（Ｃ２′），１４９１（Ｃ３′），
１４７６（Ｃ４′），１１６２（Ｃ５′），１１９８（Ｃ６′），８９３（Ｃ
７′），５５２（Ｃ８′），６４９（Ｃ９′），５６４（ＯＭｅ），５６８
（ＯＭｅ）。其谱学数据与文献［８，９］一致，故鉴定为去
氢二松柏醇（ｄｅｈｙｄｒｏｄｉｃｏｎｉｆｅｒｙｌａｌｃｏｈｏｌ）。
化合物 ７　淡黄色针晶（ＣＨＣｌ３ＭｅＯＨ），ｍｐ
１５５～１５７；［α］２５Ｄ －２０℃（ｃ０２０，ＭｅＯＨ）；ＥＳＩＴＯＦ
ＭＳｍ／ｚ：３８３［Ｍ ＋Ｎａ］＋；１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，
ＣＤ３ＯＤ）δ：６７３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８０Ｈｚ，Ｈ５），６６７（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝１５Ｈｚ，Ｈ２），６６５（１Ｈ，ｓ，Ｈ５′），６６１（１Ｈ，
ｄｄ，Ｊ＝２０，８０Ｈｚ，Ｈ６），６１７（１Ｈ，ｓ，Ｈ２′），３８１
（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ），３７７（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ），３７９（２Ｈ，ｍ，Ｈ
９′），３６７（２Ｈ，ｍ，Ｈ９），３３３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６０Ｈｚ，Ｈ
７），２７７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７５Ｈｚ，Ｈ７′），１９９（１Ｈ，ｍ，Ｈ
８′），１７５（１Ｈ，ｍ，Ｈ８）；１３ ＣＮＭＲ（１２５ ＭＨｚ，
ＣＤ３ＯＤ）δ：１３４２（Ｃ１），１１３８（Ｃ２），１４７２（Ｃ３），
１４５１（Ｃ４），１１６０（Ｃ５），１２３２（Ｃ６），４８０（Ｃ７），
４８０（Ｃ８），６２２（Ｃ９），１２９０（Ｃ１′），１１２４（Ｃ
２′），１４９０（Ｃ３′），１４６０（Ｃ４′），１１７４（Ｃ５′），
１３８６（Ｃ６′），３３６（Ｃ７′），４００（Ｃ８′），６６０（Ｃ
９′），５６３（ＯＭｅ），５６４（ＯＭｅ）。其谱学数据与文献
［７］一致，故鉴定为异落叶松脂素（ｉｓｏｌａｒｉｃｉｒｅｓｉｎｏｌ）。
化合物８　白色固体。鉴定为 ４羟苯丙烯基
ＯβＤ吡喃葡糖苷（ｓａｃｈａｌｉｓｉｄｅ１），见文献［５］。
化合物９　白色针晶，ｍｐ１８５℃，［α］２５Ｄ －６６９
（ｃ１０，ＭｅＯＨ）。鉴定为松柏苷（ｃｏｎｉｆｅｒｉｎ），见文献
［５］。
５　生物活性鉴定
５．１　受试样品的配制和给药剂量　受试样品用
ＤＭＳＯ配成０１ｍｏｌ·Ｌ－１的储存液，使用时用磷酸
缓冲液（ＰＢＳ）稀释。受试样品浓度为 １０－５ｍｏｌ·
·７５７１·
第３２卷第１７期
２００７年９月
　　　　　　　　　
　　　 中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
　　　　　　　
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ　１７
Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００７
Ｌ－１。
５．２　巯基乙醇酸钠诱导的小鼠腹腔巨噬细胞的获
得与培养　给Ｃ５７ＢＬ６Ｊ小鼠每只腹腔注射４％巯基
乙醇酸钠溶液（提前１个月以上配制，灭菌后室温
避光保存）１ｍＬ。注射后第４天将小鼠断头处死，
放尽血液，于７５％乙醇中浸泡１～２ｍｉｎ。腹腔注射
ＤＨａｎｋ’ｓ生理缓冲液６～８ｍＬ，充分按摩后缓缓吸
出腹腔中液体，再重复冲洗腹腔 １次，合并细胞悬
液。在１０００ｒ·ｍｉｎ－１条件下离心５ｍｉｎ，小心倾去
上清。冰冷的 ＲＰＭＩ１６４０培养基洗涤１次，计数细
胞。细胞用ＲＰＭＩ１６４０培养基重悬，将细胞密度调
整为１×１０６个／ｍＬ，接种于４８孔（每孔０５ｍＬ）细
胞板中，在３７℃，５％ ＣＯ２贴壁培养２ｈ。倾去培养
基，用ＤＨａｎｋ’ｓ生理缓冲液冲洗２次，除去未贴壁
细胞，每孔加入含有不同药物（终浓度为１０－５ｍｏｌ·
Ｌ－１）和刺激剂 ＬＰＳ（５μｇ·ｍＬ－１）的５％新生牛血
清的ＲＰＭＩ１６４０培养基培养２４ｈ。收集上清，测定
ＴＮＦα的含量。
５．３　Ｌ９２９细胞结晶紫染色法测定ＴＮＦα　Ｌ９２９细
胞长满单层后，用０２５％胰酶消化，重悬细胞于含
１０％ 小牛血清的ＲＰＭＩ１６４０培养液中，细胞计数后
调细胞密度为１×１０５个／ｍＬ，接种到９６孔平底培养
板中，每孔２００μＬ，设３个复孔，在３７℃，５％ ＣＯ２条
件下培养２４ｈ；弃上清，每孔加入含０５μｇ·ｍＬ－１
放线菌素Ｄ的培养液１００μＬ，ＲＰＭＩ１６４０培养基或
待测样品１００μＬ，设３个复孔，在３７℃，５％ ＣＯ２条
件下培养 ２０ｈ后弃上清，每孔加入 ＭＴＴ（５ｍｇ·
ｍＬ－１）２０μＬ，继续培养４ｈ后每孔加入１００μＬＤＭ
ＳＯ裂解１０ｍｉｎ，待细胞完全融解后置于酶标仪中
５７０ｎｍ处测定 Ａ值。以 ＲＰＭＩ１６４０培养液孔为对
照，以细胞毒百分率表示样品所含 ＴＮＦα的含量。
细胞毒百分率 ＝（１－样品吸光度值／对照吸光度
值）×１００％。
５．４　统计学分析　各组数据用 珋ｘ±ｓ（ｎ＝３）表示，
组间分析用ｔ检验进行统计学处理。见表１。
结果表明，受试化合物 １，２，３，８和 ９在 １０－５
ｍｏｌ·Ｌ－１浓度对ＬＰＳ刺激的小鼠腹腔巨噬细胞产生
ＴＮＦα的抑制作用分别为２４．１％，５７６％，４０２％，
８２７％和 ６２０％。ＬＰＳ刺激巨噬细胞产生大量
　　　
表１　半夏成分（１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１）
对小鼠腹腔巨噬细胞ＴＮＦα产生的影响（ｎ＝３）
组别 Ａ 抑制率／％
空白对照组 ０４４５±００１６ －
ＬＰＳ ０３１６±００１２１） －
ＬＰＳ＋１ ０３４７±００２３ ２４１
ＬＰＳ＋２ ０３９０±００２９２） ５７６
ＬＰＳ＋３ ０３６８±００２７２） ４０２
ＬＰＳ＋８ ０４２２±００６１２） ８２７
ＬＰＳ＋９ ０３９６±００３４２） ６２０
　　注：与空白组比较１）Ｐ＜０００１；与ＬＰＳ组比较２）Ｐ＜００５
ＴＮＦα，而受试化合物组则能明显降低ＴＮＦα含量，
表明降低 ＴＮＦα含量是上述受试化合物发挥抗炎
作用的一个重要机制。半夏的抗炎作用可能与此有
关。
［致谢］　中国医学科学院中国协和医科大学药物研究
所刘柏合博士在生物活性试验中给予帮助。
［参考文献］
［１］　江苏新医学院．中药大辞典［Ｍ］．上册．上海：上海人民出版
社，１９７７：７７５．
［２］　蔡世珍，邹忠梅，徐丽珍，等．半夏属药用植物的研究进展［Ｊ］．
国外医学·中医中药分册，２００４，２６（１）：１７．
［３］　ＣｈｅｎＪＨ，ＣｕｉＧＹ，ＬｉｕＪＹ，ｅｔａｌ．Ｐｉｎｅｌｏｓｉｄｅ，ａｎａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ
ｃｅｒｅｂｒｏｓｉｄｅｆｒｏｍＰｉｎｅｌｉａｔｅｒｎａｔａ［Ｊ］．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００３，６４：
９０３．
［４］　何　萍，李　帅，王素娟，等．半夏化学成分的研究［Ｊ］．中国中
药杂志，２００５，３０（９）：６７１．
［５］　ＨａｎＭＨ，ＹａｎｇＸＷ，ＺｈａｎｇＭ，ｅｔａｌ．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｓｔｕｄｉｅｓｏｎ
ｔｈｅｒｈｉｚｏｍｅｏｆＰｉｎｅｌｉａｔｅｒｎａｔａａｎｄｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｐｈｅｎｙｌｐｒｏ
ｐａｎｏｉｄｓｉｎｃｏｍｍｅｒｃｉａｌｐｉｎｅｌｉａｒｈｉｚｏｍｅｂｙｒｅｖｅｒｓｅｄｐｈａｓｅｈｉｇｈ
ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ［Ｊ］．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉａ，２００６，
６４（１１／１２）：６４７．
［６］　ＺｈｕａｎｇＳＬ，ＹｕＱＳ，ＺｏｕＪＷ，ｅｔａｌ．Ａｓｔｕｄｙｏｆｔｈｅｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｏｆ
ｃｉｎｎａｍａｔｅａｎａｌｏｇｕｅｓｗｉｔｈｍａｃｒｏｐｈａｇｅｍｉｇｒａｔｉｏｎｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｆａｃｔｏｒ
（ＭＩＦ）ａｎｄＰ１Ｇｍｕｔａｎｔｆｒｏｍｍｏｌｅｃｕｌａｒｄｙｎａｍｉｃｓｓｉｍｕｌａｔｉｏｎｓ［Ｊ］．
ＪＭｏｌＳｔｒｕｃｔ：Ｔｈｅｏｃｈｅｍ，２００６，７６３：９７．
［７］　杨秀伟．中药成分的吸收、分布、代谢、排泄、毒性与药效［Ｍ］．
上册．北京：中国医药科技出版社，２００６：３４０，３４５．
［８］　ＣｕｔｉｌｏＦ，Ｄ’ＡｂｒｏｓｃａＢ，ＤｅｌａｇｒｅｃａＭ，ｅｔａｌ．Ｌｉｇｎａｎｓａｎｄｎｅｏｌｉ
ｇｎａｎｓｆｒｏｍＢｒａｓｉｃａｆｒｕｔｉｃｕｌｏｓａ：ｅｆｅｃｔｓｏｎｓｅｅｄｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎａｎｄ
ｐｌａｎｔｇｒｏｗｔｈ［Ｊ］．ＪＡｇｒｉｃＦｏｏｄＣｈｅｍ，２００３，５１：６１６５．
［９］　ＤｅｙａｍａＴ，ＩｋａｗａＴ，ＫｉｔａｇａｗａＳ，ｅｔａｌ．ＴｈｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆＥｕ
ｃｏｍｍｉａｕｌｍｏｉｄｅｓＯＬＩＶ．ＶＩ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎｏｆａｎｅｗｓｅｓｑｕｉｌｉｇｎａｎａｎｄ
ｎｅｏｌｉｇｎａｎｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ［Ｊ］．ＣｈｅｍＰｈａｒｍＢｕｌ，１９８７，３５：１８０３．
·８５７１·
第３２卷第１７期
２００７年９月
　　　　　　　　　
　　　 中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
　　　　　　　
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ　１７
Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００７
ＢｉｏａｃｔｉｖｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇＴＮＦαｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｉｎｆｒｅｓｈｒｈｉｚｏｍｅ
ｏｆＰｉｎｅｌｉａｔｅｒｎａｔａ
ＨＡＮＭｅｉｈｕａ１，ＹＡＮＧＸｉｕｗｅｉ１，ＺＨＯＮＧＧｕｏｙｕｅ２，ＺＨＡＮＧＭｉｎｇ２
（１．ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＮａｔｕｒａｌａｎｄＢｉｏｍｉｍｅｔｉｃＤｒｕｇｓ，ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮａｔｕｒａｌＭｅｄｉｃｉｎｅ，
ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＰｅｋｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００８３，Ｃｈｉｎａ；
２．ＣｈｏｎｇｑｉｎｇＡｃａｄｅｍｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４０００６５，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｂｉｏａｃｔｉｖｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆｔｈｅｆｒｅｓｈｒｈｉｚｏｍｅｏｆＰｉｎｅｌｉａｔｅｒｎａｔａ，ａｎｄｐｒｏｖｉｄｅｔｈｅｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ
ｂａｓｉｓｆｏｒｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｖａｒｉｏｕｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏｓｅｐａｒａｔｅａｎｄｐｕｒｉｆｙｔｈｅｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ，ａｎｄ
ｔｈｅｉｒｃｈｅｍｉｃａｌｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｏｎｔｈｅｂａｓｉｓｏｆｐｈｙｓｉｃａｌｃｈｅｍｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓａｎｄｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｉｃａｎａｌｙｓｉｓ．Ｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｅｃｔｓ
ｏｆｔｈｅｉｓｏｌａｔｅｄｃｏｍｐｏｕｎｄｓｏｎｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ（ＴＮＦ）αｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｉｎｔｈｅｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓｏｆｍｉｃｅｓｔｉｍｕｌａｔｅｄｗｉｔｈｌｉｐｏｐｏ
ｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ（ＬＰＳ）ｗｅｒｅａｓｓａｙｅｄｉｎｖｉｔｒｏｂｙｍｉｃｒｏｐｌａｔｅｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃｍｅｔｈｏｄ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｎｉｎｅｃｏｍｐｏｕｎｄｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄａｓ
（Ｅ）ｐｃｏｕｍａｒｙｌａｌｃｏｈｏｌ（１），３，４ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｃｉｎｎａｍｙｌａｌｃｏｈｏｌ（２），ｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄ（３），ｌａｒｉｃｉｒｅｓｉｎｏｌ（４），ｅｒｙｔｈｒｏｇｕａｉａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌβＯ
４′ｓｉｎａｐｙｌｅｔｈｅｒ（５），ｄｅｈｙｄｒｏｄｉｃｏｎｉｆｅｒｙｌａｌｃｏｈｏｌ（６），ｉｓｏｌａｒｉｃｉｒｅｓｉｎｏｌ（７），ｓａｃｈａｌｉｓｉｄｅ１（８）ａｎｄｃｏｎｉｆｅｒｉｎ（９）．Ｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｅｃｔ
ｏｆｃｏｍｐｏｕｎｄｓ１，２，３，８，ａｎｄ９ｗｅｒｅ２４１％，５７６％，４０２％，８２７％，ａｎｄ６２０％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｇａｉｎｓｔｔｈｅＴＮＦαｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｉｎ
ｔｈｅｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓｏｆｍｉｃｅｓｔｉｍｕｌａｔｅｄｗｉｔｈＬＰＳａｔａｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１ｉｎｖｉｔｒｏ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｃｏｍｐｏｕｎｄｓ１，
２ａｎｄ４８ｆｒｏｍｇｅｎｅｒａＰｉｎｅｌｉａＴｅｎ．ａｎｄｃｏｍｐｏｕｎｄ９ｆｒｏｍＰ．ｔｅｒｎａｔａｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｏｒｔｈｅｆｉｒｓｔｔｉｍｅ．Ｔｈｅｃｏｍｐｏｕｎｄｓ１，２，８ａｎｄ９
ｗｅｒｅｐｈｅｎｙｌｐｒｏｐａｎｏｉｄｓ，ａｎｄ４７ｗｅｒｅｌｉｇｎａｎｏｉｄｓ．ＴｈｅａｎｔｉｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｅｆｅｃｔｓｏｆｔｈｅｒｈｉｚｏｍｅｏｆＰ．ｔｅｒｎａｔａｍｉｇｈｔｒｅｌａｔｅａｔｔｈｅｌｅａｓｔｔｏ
ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ１，２，３，８ａｎｄ９．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　Ｐｉｎｅｌｉａｔｅｒｎａｔａ；ｆｒｅｓｈｒｈｉｚｏｍｅ；ｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔ；ｐｈｅｎｙｌｐｒｏｐａｎｏｉｄ；ｌｉｇｎａｎｏｉｄ；ＴＮＦα
［责任编辑　牛泽宇］
［收稿日期］　２００７０３１２
［通讯作者］　周欣，Ｔｅｌ：（０８５１）６６９００１８，Ｅｍａｉｌ：ａｌｉｃｅ９８００＠
ｓｉｎａ．ｃｏｍ
杏叶防风挥发油成分 ＳＰＭＥＧＣＭＳ分析
赵　超１，陈华国１，程　力２，周　欣１，杨再波３，张怡莎１
（１．贵州师范大学 天然药物质量控制研究中心，贵州 贵阳 ５５０００１；
２．贵阳中医学院 第二附属医院，贵州 贵阳 ５５０００２；
３．黔南民族师范学院 化学与化工系，贵州 都匀 ５５８０００）
［摘要］　目的：分析杏叶防风挥发油化学成分。方法：利用固相微萃取气相色谱质谱（ＳＰＭＥＧＣＭＳ）联用技
术对杏叶防风挥发油成分进行研究。结果：共鉴定出６５种化学成分，占挥发油总成分的９２１７％。结论：杏叶防风
挥发油主要化学成分是α姜烯（２４８２％），前盖介烯（１６２７％），β没药烯（４８２％），２异丙基５甲基９亚甲基二
环［４．４．０］萘烷１烯（４０３％），β倍半水芹烯（３９８％），反式β金合欢烯（３６８％），芳姜黄烯（３５４％）等。
［关键词］　杏叶防风；挥发油；固相微萃取；气相色谱质谱联用
［中图分类号］Ｒ２８４．１　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００１５３０２（２００７）１７１７５９０４
　　杏叶防风为伞形科杏叶防风 Ｐｉｍｐｉｎｅｌａｃａｎ
ｄｏｌｅａｎａＷｉｇｈｔｅｔＡｒｎ的全草，多年生草本植物，生于
路旁、林下、沟边、草坡或灌木丛中；分布于西南及广
·９５７１·
第３２卷第１７期
２００７年９月
　　　　　　　　　
　　　 中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
　　　　　　　
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ　１７
Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００７