全 文 :葛根素注射液对急性脑缺血模型大鼠
脑细胞损伤的保护作用
潘洪平 3 o杨嘉珍 o莫祥兰 o李吕力 o黄振录 o叶 劲 o黄 进
k广西壮族自治区人民医院 o广西 南宁 xvssutl
≈摘要 目的 }探讨葛根素注射液对急性脑缺血模型大鼠脑细胞损伤的保护作用 ∀方法 }采用闭夹大脑中动
脉造成局部脑缺血模型 o对实验标本作 ∞染色后观察其脑组织的病理学改变 ∀结果 }葛根素干预组死亡神经元数
明显少于单纯缺血组k Π s1sxl o同时脑水肿程度明显较轻 ∀结论 }葛根素对大鼠急性脑缺血损伤有保护作用 ∀
≈关键词 葛根素注射液 ~急性脑缺血模型 ~大鼠
≈中图分类号 u{x1x ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussxlsy2swxz2sv
≈收稿日期 ussw2s{2uy
≈基金项目 广西壮族自治区卫生厅医药卫生科研课题
kusstszul
≈通讯作者 3 潘洪平 oר¯ }kszztlu|u{{wu o∞2°¤¬¯}³«³t|y{
tuy q¦²°
葛根素是从豆科植物野葛 Πυεραρια λοβατα
k• ¬¯¯§l «º¬的干燥根中提纯分离得到的 {2Β2 ∆葡
萄吡喃糖2wχ oz2二羟基异黄酮 o具有扩张冠状动脉和
脑血管 o增加心 !脑血流量和降低心肌氧耗量 o调节
血管内皮细胞功能 o抗动脉粥样硬化 o抗氧化 !清除
自由基和抑制缺血再灌注损伤≈t !明显改善急性血
瘀模型大鼠的血液流变性≈u 等作用 o对急性心肌缺
血和脑缺血缺氧均有保护作用 ∀目前临床已广泛应
用于治疗高血压 !冠心病心绞痛 !心肌梗死 !视网膜
动静脉阻塞 !突发性耳聋和糖尿病≈v 等 ∀晚近有研
究报道葛根素对急性全脑缺血及烟熏所致的大鼠脑
细胞凋亡均有明显的抑制作用≈w ox o为进一步探讨
葛根素对脑缺血后脑细胞损伤的保护作用 o作者通
过闭夹大脑中动脉制作局部特定区域急性脑缺血大
鼠模型 o计算死亡神经细胞数 o观察死亡神经元的形
态学变化 ∀
1 材料和方法
111 药物试剂 葛根素注射液ku °Βtss °ªl为广
东燕塘生物化学药业有限公司产品 o批号 sttuttt ~
s1| h ¤≤¯ 由本院制剂室提供 o批号 svsvuyst ~ts h
水合氯醛溶液由本院制剂室提供 o批号 sus{uz ~
≥°zsktΒtssl试剂及免疫组化试剂盒均购于福州迈
新生物技术有限公司 ∀
112 动物 •¬¶·¤µ大鼠 o体重 txs ∗ uss ªo雌雄各
半 o购于广西壮族自治区药品检验所 o许可证号 }
≥≤÷桂 ussv2ssst ∀
113 仪器 ¯ ¼°³∏¶
≅ xs显微镜 o¨¬¦¤石蜡切片
机 ∀
114 方法 tu只大鼠随机分成单纯缺血组和葛根
素干预组 o每组 y只 ∀参考文献≈y 方法 o首先对大
鼠行 ts h水合氯醛麻醉k¬³ovxs °ª#®ªptl后 o以电
钻等器械小心撬开颅骨 o暴露并闭夹大脑中动脉造
成局部特定区域急性脑缺血模型 o每组大鼠进行左
右侧自身对照 o以闭夹大脑中动脉侧为缺血侧k实验
组l o另一侧不闭夹作为正常对照k对照组l ∀葛根素
干预组在缺血前 vs °¬±按 vs °ª#®ªpt行腹腔内注射
葛根素注射液 o单纯缺血组则按同样方法注射相同
容量的不含葛根素的注射用水 ∀所有标本均取材于
有代表性的相关区域 o并迅速经 w h中性甲醛固定 o
常规脱水 o石蜡包埋 o∞染色 ∀ ∞染色后以神经元
细胞出现核固缩r核碎裂r核溶解者判为神经元死
亡 o在每张切片中取 wss倍kws ≅ tsl光镜视野 o统计
死亡细胞占总细胞的百分比 o取其平均值 ∀
115 统计方法 实验数据输入计算机处理 o以 cξ ?
σ表示 o采用 ≥°≥≥统计软件对实验结果进行方差分
析及组间差异比较 ∀
2 结果
211 ∞染色结果 各组标本中神经细胞死亡情况
比较见表 t ∀
212 形态学观察结果 单纯缺血对照组及葛根素
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第 vs卷第 y期
ussx年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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¤µ¦«oussx
表 t 单纯缺血及葛根素干预后各组神经细胞
死亡情况比较kcξ ? σ, ν yl
组别 剂量r °ª#®ªpt 死亡神经细胞数
单纯缺血对照组 tw qtu ? v qv{
单纯缺血实验组 uz qtv ? x qs{tl
葛根素干预对照组 vs tw qxt ? u qt{
葛根素干预实验组 vs ut qu| ? u qx{u ovl
注 }与单纯缺血对照组比 tl Π s1st ~与葛根素干预对照组比 ul
Π s1st ~与单纯缺血实验组比 vl Π s1sx
干预对照组中各例偶见少许死亡的神经元 o脑组织
无明显水肿k图 tl o实验组中各病例可见散在性分
布的神经元死亡 o死亡的神经元绝大部分为锥体细
胞 o未见灶性死亡区 o脑水肿明显 o以单纯缺血组病
变更明显k图 u图 vl ∀
图 t 葛根素干预对照组 k∞ ≅ wssl
大脑皮质脑组织形态 o偶见少许死亡的神经元
图 u 葛根素干预实验组 k∞ ≅ wssl
脑组织形态学改变 o可见死亡神经元
图 v 单纯缺血实验组 k∞ ≅ wssl
脑组织形态学改变 o可见死亡神经元 o脑水肿明显
3 讨论
脑缺血所致的神经元损伤其生理病理过程复
杂 ∀由于脑缺血 o使神经细胞缺氧 o神经元对缺氧十
分敏感 ∀缺氧使细胞线粒体氧化磷酸化受抑制 o
×°生成减少 o钙泵等功能低下 o从而致细胞内
≤¤u n等物质积蓄 o氧自由基等活性氧类物质增多 o最
终导致脑细胞损伤 ∀
研究报道表明葛根素对损伤的神经细胞有保护
作用 o其机制与葛根素在机体缺血再灌注时通过抑
制细胞内 ≤¤u n的聚集 o减轻细胞损伤有关 ∀还可能
与葛根素通过上调
¦¯2u蛋白的表达 o下调
¤¬蛋白
的表达从而抑制神经细胞凋亡发挥神经元保护作用
等相关≈w ∀本研究结果显示 }葛根素干预组死亡神
经元数明显少于单纯缺血组k Π s1sxl o同时脑水
肿程度明显较轻 ∀这表明葛根素有明显减轻缺血性
大鼠脑细胞的损伤作用 o说明葛根素对神经细胞损
伤有保护作用 ∀
细胞凋亡是由体内外某些因素k生理性或轻微
病理性刺激因子l触发细胞内预存的死亡程序而导
致的细胞主动性死亡方式 o细胞坏死则是病理性刺
激因子k如缺氧 !中毒等l诱导发生的细胞被动性死
亡 o前者的死亡范围多表现为散在的单个细胞 o后者
则多为集聚的大片细胞 ∀但两者的死亡机制及形态
学表现上也有一些重叠之处 o如自由基在低浓度时
可诱导细胞凋亡 o而在高浓度时则诱导细胞坏死 ~核
固缩 !核碎裂和核染色质的边集除了是细胞坏死的
表现外 o还均见于细胞凋亡中 ∀本实验条件下 o仅进
行实验组间神经元的细胞损伤情况比较 o故以神经
元死亡k包括神经元坏死与凋亡l作为综合判定指
标 ∀至于葛根素注射液对本模型大鼠脑细胞损伤的
保护作用如何表现在对神经元坏死与凋亡的区别
上 o我们将在今后开展的相关基因水平实验中作进
一步研究探讨 ∀
最近研究发现 o热休克蛋白k≥°zsl是脑组织
缺血后内源性抗损伤机制中的重要物质之一 o其主
要功能是保护各种应激所致的细胞损伤≈z o{ ∀据此
认为 o药物有效诱导 ≥°zs高表达可以减轻脑缺血
所致的神经元损伤 ∀葛根素保护大鼠急性脑缺血损
伤是否与此作用相关有待作进一步研究 ∀
≈参考文献
≈t 潘洪平 q葛根总黄酮和葛根素的药理研究进展 q广西医学 o
ussv ouxktsl }t|wt q
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第 vs卷第 y期
ussx年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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≈u 潘洪平 o杨嘉珍 o李吕力 o等 q葛根素注射液对急性血瘀模型
大鼠血液流变性改善作用的实验研究 q中国中药杂志 oussv o
u{ktul }ttz{ q
≈v 潘洪平 q葛根 !牛磺酸及其复方制剂降血糖作用的研究进展 q
中成药 oussu ouwkvl }uut q
≈w 曹建忠 o刘书山 o杨光田 q鼠急性全脑缺血再灌注后葛根素对
海马 ≤t区
¦t2u !
¤¬表达的影响 q中国药理学通报 oussv o
t|kttl }tu{t q
≈x 李 华 o柳忠兰 q葛根素对烟熏大鼠脑细胞调亡及 ƒ¤¶蛋白表
达的影响 q中国神经免疫学和神经病学杂志 oussw ottktl }xz q
≈y 张均田 q现代药理实验方法学 q北京 }北京医科大学中国协和
医科大学联合出版社 ot||{ qtuwt q
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Προτεχτιον οφ πυεραριν ον τηε χερεβραλινϕυρψιν τηε ρατσ ωιτη αχυτελοχαλισχηεµια
°²±ª2³¬±ªo ≠ ¬¤2½«¨ ±o ÷¬¤±ª2¯ ¤±o∏2¯¬o «¨ ±2¯ ∏o≠∞ ¬±ªo ¬±
( Πεοπλε. σ Ηοσπιταλ οφ Γυανγξι Αυτονοµουσ Ρεγιον , Ναννινγ xvssut , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¶·∏§¼·«¨ ³µ²·¨¦·¬²± ²©³∏¨µ¤µ¬± ²±·«¨ ¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬±∏µ¼¬±·«¨ µ¤·¶º¬·«¤¦∏·¨ ²¯¦¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤q Μετηοδ : ¤·
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·²¬¼¯¬± ¤±§ ²¨¶¬±kk∞l q Ρεσυλτ : ׫¨ ±∏°¥¨µ²©§¬¨§±¨ ∏µ²±¶º µ¨¨ ¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ ¯¨ ¶¶¬± ³∏¨µ¤µ¬±2·µ¨¤·¨§µ¤·¶·«¤±¬±·«¨ µ¤·¶º¬·«¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬¶2
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¦«¨ °¬¦µ¤·¶qΧονχλυσιον : °∏¨µ¤µ¬± ¦¤± ³µ¨√ ±¨··«¨ ±¨ ∏µ²±©µ²° §¤°¤ª¨ ¬±§∏¦¨§¥¼ ¤¦∏·¨ ¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤q
[ Κεψ ωορδσ] ³∏¨µ¤µ¬±¬±¨¦·¬²±~¤¦∏·¨ ¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤ °²§¨¯~µ¤·
≈责任编辑 方文贤
≈收稿日期 ussw2tu2s{
≈通讯作者 3邹节明 oר¯ }kszzvlx{wux{{ o∞2°¤¬¯}¶¤±¬± ª¯1ª¬1¦±¬±©²1±¨ ·
脑脉泰胶囊对脑缺血再灌大鼠学习记忆功能及
脑组织乙酰胆碱含量的影响
王 征t o李运曼u o龚晓健u o林 军v o邹节明t 3
kt1 桂林三金药业股份有限公司 o广西 桂林 xwtssw ~
u1中国药科大学 生理教研室 o江苏 南京 utsss| ~
v1广西医科大学 药理教研室 o广西 南宁 xvssutl
≈摘要 目的 }探讨脑脉泰胶囊对血管性痴呆k∂ ⁄l大鼠学习记忆功能及脑组织乙酰胆碱k¦«l含量的影响 ∀
方法 }通过采用夹闭双侧颈总动脉 us °¬±o再灌 ts °¬±o再夹闭 us °¬±的方式制成大鼠 ∂ ⁄模型 o以水迷宫实验进行
学习记忆能力测试 ~通过采用四血管阻断再灌注法制成大鼠 ∂ ⁄模型 o以碱性羟胺法测定脑组织 ¦«含量 ~并观察
脑脉泰胶囊对模型大鼠翻正反射恢复时间的影响 ∀结果 }脑脉泰胶囊能明显提高模型大鼠的学习记忆成绩k Π
s1sx oΠ s1stl o明显提高脑组织 ¦«含量k Π s1sx oΠ s1stl o缩短模型大鼠翻正反射恢复时间k Π s1stl ∀结
论 }脑脉泰胶囊可能通过提高 ¦«含量而改善痴呆大鼠的学习记忆能力 ∀
≈关键词 脑脉泰胶囊 ~血管性痴呆 ~学习记忆 ~乙酰胆碱
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第 vs卷第 y期
ussx年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vs o¶¶∏¨ y
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