全 文 :粉防己碱逆转人乳腺癌
≤ƒ2z多药耐药细胞的抗凋亡作用
王金华 o叶祖光 o孙爱续 o薛宝云 o梁爱华 o李春英 o王 岚
k中国中医研究院 中药研究所 o北京 tsszssl
≈摘要 目的 }研究粉防己碱与长春新碱合用能否逆转人乳腺癌 ≤ƒ2z多药耐药细胞的抗凋亡作用 ∀方法 }
用荧光染料 ²¨ ¦«¶·vvvwu和碘化丙锭联染观察染色质凝集 o流式细胞术检测 t 亚峰 o× ∞法检测凋亡细胞 o
ƒ ∏¯²2v染色法测定细胞内游离钙 ∀结果 }抗肿瘤药物长春新碱处理 ≤ƒ2z敏感和耐药细胞后 uw «o可观察到 u种
类型的染色质凝集 ~但在耐药细胞中 o相同浓度处理下染色质凝集的细胞明显减少 ∀无明显细胞毒性的粉防己碱
kus Λ°²¯# p tl与长春新碱合用 o荧光显示法和 × ∞法均证实敏感和耐药的凋亡细胞明显增多 ∀粉防己碱与
长春新碱合用明显升高细胞内的游离钙含量 ∀结论 }粉防己碱能有效地逆转人乳腺癌 ≤ƒ2z细胞的抗凋亡作用 ∀
≈关键词 粉防己碱 ~长春新碱 ~多药耐药性 ~细胞凋亡 ~人乳腺癌 ≤ƒ2z细胞
≈中图分类号 u{x qx ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukussulst2sswy2sx
粉防己碱k× ·¨µ¤±§µ¬±¨ o × ·¨l是从中药粉防己
Στεπηανια τετρανδρα ≥ q ²²µ¨ 中提取的生物碱 o它
具有治疗高血压 !矽肺等活性 ∀我们的研究发现 }
× ·¨能高效地逆转人乳腺癌 ≤ƒ2z细胞的多药耐药
性≈t ∀众所周知 o肿瘤细胞多药耐药性的分子机制
十分复杂 o其中抗凋亡机制也起重要的作用≈u ∗ w o因
此 o× ·¨能否逆转耐药细胞的抗细胞凋亡是一个值
得深入研究的问题 ∀本文用多种检测细胞凋亡的指
标 o观察 × ·¨与抗肿瘤药物长春新碱 k ∂¬±¦µ¬¶·¬±¨ o
∂ ≤ l合用对人乳腺癌 ≤ƒ2z敏感和耐药细胞的影
响 o以证实粉防己碱能高效地增强长春新碱诱导凋
亡的活性 o从而逆转多药耐药细胞的抗凋亡作用 ∀
1 材料和方法
1 q1 药物 × ·¨购自浙江金华制药厂 o用少量 t
°²¯#pt ≤¯溶解后 o加 s q{ h生理盐水配制成 t
°°²¯#pt母液 ∀ ∂ ≤ 购自北京医科大学实验药
厂 o用 s q{ h的生理盐水配制成 t °°²¯#pt母液 o
以上药物使用时均用培养液稀释 ∀ ²¨ ¦«¶·vvvwu
和碘化丙锭k°µ²³¬§¬∏°¬²§¬§¨ o°l购自 ≥¬ª°¤公司 ∀
1 q2 细胞培养 人乳腺癌 ≤ƒ2z细胞及耐阿霉素
的 ≤ƒ2z细胞k ≤ƒ2zr⁄²¬l由美国国立癌症研究
院 ⁄µ¨±±¨ ·« ≤²º¤±馈赠 o用含 ts h胎牛血清
≈收稿日期 usst2su2s|
≈基金项目 国家自然科学基金资助项目 k ||zzs|txl
≈作者通讯 电话 }kstslywstwwtt2u{|x
k¼¦¯²±¨ l的 ° tyws培养液k
≤ l在 vz ε o
x h ≤ u的条件下培养 ∀
1 q3 荧光显示法观察染色质凝集 采用 ⁄荧光
染料 ²¨ ¦«¶·vvvwu和 °联染技术≈x o细胞传于 tu
孔板中 ouw «后加药 o药物处理后 uw «o用胰酶 n
∞⁄× 分离仍贴壁的细胞 o合并收集悬浮和消化的
细胞 o加 ²¨ ¦«¶·vvvwu及 °vz ε !染色 ts °¬±后 o
紫外光激发 o荧光显微镜下统计结果 o每种样品至
少统计 txs个细胞以上 o同时拍摄药物处理后的凋
亡细胞图像 ∀实验至少重复 u次 o结果以二类染色
质凝集的细胞数占总细胞数的百分比表示 ∀
1 q4 流式细胞术检测凋亡细胞≈x 细胞经药物处
理一定时间后 o胰酶 n ∞⁄× 消化细胞 ozs h乙醇
固定细胞 uw «以上 ∀上机测定前 o加 tss Λª#°p t
酶 ovz ε 消化 vs °¬±o°xs Λª#°p t染色 o用
流式细胞仪 ƒ≤≥wus 测定 o结果经计算机软件处
理 o计算出凋亡细胞的百分比 ∀
1 q5 细胞内游离钙变化的测定 用特异结合钙的
荧光染料 ƒ ∏¯²2v染色进行 o该染料购自
¬²2 ¤§∀对
数生长期的细胞 x ≅ tsx 个r孔传于 y孔板中 ouw «
后加药处理 tu «∀用胰酶 n ∞⁄× 消化细胞 o用
≥≥缓冲液洗 t次 ∀加分散剂制备 ƒ ∏¯²2v染液ku
Λ°²¯#ptl ovz ε 避光染色 vs °¬±∀离心去染液 ow
ε 避光保存 ∀细胞经 wss目的尼龙网过滤后 o用双
波长流式细胞仪k∞°≤≥ ÷o ≤ ×∞ 公司l测
#yw#
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²qt
¤±qoussu
定 o在 xtx ±°处收集绿色荧光 o并用计算机软件对
结果进行处理 ∀
1 q6 × ∞法检测细胞凋亡 对数生长期的细
胞 tsy个r瓶传于大方瓶中 ouw «后加药处理 uw «o
收集细胞 o新鲜配制 w h 多聚甲醛 o室温固定 vs
°¬±~用 s qt °²¯#pt的柠檬酸钠 zs ε 处理 vs °¬±~
然后用 xs Λ的 × ∞显色液 vz ε 温育 t «o用
°
≥洗去染液后 o样品 w ε 避光保存在 °
≥中 ∀流
式细胞仪 ƒ≤≥wus 测定 o结果经计算机软件处理 o
计算出凋亡细胞的百分比 ∀
1 q7 统计处理 用 τ检验比较组间差异 ∀
2 结果
2 q1 × ·¨增强 ∂ ≤ 诱导 ≤ƒ2z敏感和耐药细胞的
染色质凝集 ∂ ≤ x Λ°²¯#p t单独作用敏感细胞 o
{u h 的细胞出现线状凝集的染色质k °¤l o仅
{ qy h的细胞为点状凝集的染色质k°lk图 t和
表 tl ~相同浓度的 ∂ ≤ 处理耐药细胞 o这 u种染色
质凝集类型的细胞明显减少 o有意思的是高浓度
∂ ≤ xs Λ°²¯#pt处理耐药细胞 o点状染色质凝集
的细胞明显增加 ∀以上结果说明耐药细胞不仅对
∂ ≤ 有交叉耐药性 o在细胞凋亡方面也有明显的差
别 ∀× ·¨与 ∂ ≤ 合用处理敏感和耐药细胞 o明显地
增加凋亡的百分率k表 tl o × ·¨单独处理对凋亡影
响不明显 ∀在敏感细胞中 o× ·¨us Λ°²¯#pt与 ∂ ≤
s qx Λ°²¯#pt合用 o使凋亡百分率从 ∂ ≤ 单独作用
的 v qz h增加到 uu h ∀在耐药细胞中 o× ·¨us Λ°²¯#
pt与 ∂ ≤ x Λ°²¯#p t合用 o仅点状染色质凝集的
细胞明显增加 o而线状染色质凝集的细胞未见明显
增加 o从该结果也可以看出耐药细胞凋亡过程中染
色质凝集方式的明显变化 ∀
表 t 粉防己碱与长春新碱合用对人乳腺癌 ≤ƒ2z敏感和耐药细胞染色质凝集的影响k ξ ? σ, ν yl
组别
≤ƒ2z敏感细胞
剂量 Λ°²¯#p t °¤ °
药物
≤ƒ2z耐药细胞
剂量 Λ°²¯#p t °¤ °
对照组 s s q{ ? s q| s s qy ? s qz
× ·¨ us s t qs ? s q|tl × ·¨ us s u qs ? s qwtl
∂ ≤ s qx wu qx ? x qt v qz ? t qw ∂ ≤ s qx t qs ? s q{ u qu ? t qu
∂ ≤ x {u qs ? u qy { qy ? v qw ∂ ≤ x y qy ? u qx x q{ ? u q|
∂ ≤ xs vt qx ? v qx uz q{ ? w qs
× ·¨n ∂ ≤ us n s qx xv q{ ? w qx uu qs ? v qvul × ·¨n ∂ ≤ us n x y q{ ? t qv uw qv ? v qvul
注 }与对照组比较 tl Π s qsx 与单独 ∂ ≤ 比较 ul Π s qst
图 t 长春新碱引起 ≤ƒ2z敏感和耐药细胞染色质凝集的图象
q敏感细胞对照组
q∂ ≤ x Λ°²¯#p t处理后 uw «的敏感细胞 ≤ q耐药细胞对照组
⁄q∂ ≤ x Λ°²¯#p t处理后 uw «的耐药细胞 放大倍数 owss ÷
2 q2 流式细胞术检测 ∂ ≤ 所诱导的凋亡 凋亡的
细胞由于固定和后续的 °
≥处理过程中 o部分染色
质逸出细胞外 o可被流式细胞术检测到 o在组方图上
表现为低于 t期的亚峰≈y ∀从图 u可以看到 }∂ ≤
#zw#
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∂ ²¯ quz o²qt
¤±qoussu
明显地阻断敏感细胞于 u 期 o但凋亡细胞增加不
明显 o即使用高浓度 xs Λ°²¯#pt处理 o也仅检测到
tz h的凋亡细胞 ∀相同浓度的 ∂ ≤ 处理耐药细胞 o
x Λ°²¯#p t对细胞周期没有影响 o在 xs Λ°²¯#pt的
高浓度下 o尽管明显地阻断耐药细胞于 u 期 o但
凋亡细胞增加不明显 o凋亡细胞仅为 | h ∀本检测方
法明显逊于荧光显示法 o未检测出 ∂ ≤ 所引起的凋
亡 ∀
图 u 流式细胞术检测长春新碱引起的 ≤ƒ2z敏感 o
o≤ o⁄l和耐药k∞oƒ o ol细胞株凋亡
o∞ q对照组
o≤ o⁄q∂ ≤ x ots oxs Λ°²¯#p t分别处理敏感细胞 uw «
ƒ o o q∂ ≤ x !ts !xs Λ°²¯#p t分别处理耐药细胞 uw «
2 q3 × ∞法检测到 × ·¨增加 ∂ ≤ 引起的凋亡
用 × ∞法也检测到 × ·¨明显地增加 ∂ ≤ 引
起的凋亡百分率 ∀ × ·¨us Λ°²¯ # pt与 ∂ ≤ s qx
Λ°²¯#pt合用处理敏感细胞 o凋亡百分率为 ww h o
比 ∂ ≤ x Λ°²¯#p t单独处理的凋亡百分率高 tz h
k图 vl ∀ × ·¨us Λ°²¯#p t与 ∂ ≤ x Λ°²¯#pt合用
处理耐药细胞 o凋亡百分率为 t| h o该值比单用
∂ ≤ 高 y h ∀由于 ≤ƒ2z细胞本身自发荧光较强 o
使用本法检测凋亡细胞的效果也不甚理想 ∀敏感细
胞中较高的凋亡百分率 o可能部分细胞为线状染色
质凝集的细胞 ∀
图 v × ∞法检测粉防己碱增强长春新碱诱导的 ≤ƒ2z敏感和耐药细胞凋亡
q敏感 ≤ƒ2z细胞对照组
q∂ ≤ x Λ°²¯#p t处理敏感细胞 uw « ≤ q× ·¨us Λ°²¯#p t n ∂ ≤ s qx Λ°²¯#p t处理敏感细胞 uw «
⁄q耐药细胞 o对照组 ∞q∂ ≤ x Λ°²¯#p t处理耐药细胞 uw « ƒ q× ·¨usΛ°²¯#p t n ∂ ≤ x Λ°²¯#p t处理耐药细胞 uw «
#{w#
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∂ ²¯ quz o²qt
¤±qoussu
2 q4 × ·¨与 ∂ ≤ 合用增加细胞内游离钙的含量
在细胞凋亡过程中 o细胞内的游离钙逐步升高 ∀ × ·¨
与 ∂ ≤ 合用处理敏感和耐药细胞 o也明显地增加
细胞内游离钙的含量k表 ul ∀ × ·¨us Λ°²¯ #pt n
∂ ≤ s qx Λ°²¯#pt处理 ≤ƒ2z敏感细胞 tu «~使
细胞内的游离钙比对照组增加 t qx 倍 o而 × ·¨us
Λ°²¯#p t n ∂ ≤ x Λ°²¯#pt处理 ≤ƒ2z耐药细胞
tu «o使细胞内的游离钙比对照组增加 u qy倍 ∀单
独的 × ·¨也能增加细胞内游离钙的含量k结果未显
示l ∀值得注意的是由于耐药细胞对 ƒ ∏¯²2v有外排
作用≈z o细胞内 ƒ ∏¯²2v的荧光强度比敏感细胞低大
约 v倍 ∀
表 u 粉防己碱与长春新碱合用对人乳腺癌
≤ƒ2z敏感和耐药细胞内游离钙的影响k ξ ? σl
细胞 处理组 相对荧光强度
敏感细胞 对照 v qx{ ? s qt|
∂ ≤ n × ·¨ x qxu ? s qt|tl
耐药细胞 对照 t qtw ? s quv
∂ ≤ n × ·¨ u q|{ ? s quwtl
注 }与对照组比较 tl Π s qst
3 讨论
本文通过荧光显示法 o×∏±¨ ¯法和细胞内游离钙
等多种方法 o证实粉防己碱不仅高效地逆转人乳腺
癌 ≤ƒ2z多药耐药细胞的抗凋亡作用 o还具有增强
长春新碱诱导敏感细胞凋亡的活性 ∀我们过去的实
验也证明 o粉防己碱不仅逆转耐药癌细胞的耐药性 o
而且还能增强敏感癌细胞对化疗药k长春新碱或阿
霉素l的敏感性≈t ∀至于粉防己碱逆转抗细胞凋亡
作用的分子机制 o我们正从细胞内蛋白激酶 ≤ 的活
性变化 !°§µ2t基因表达等方面加以探讨 ∀
本文采用的检测凋亡的技术 o以荧光显示法和
×∏±¨ ¯法最为可靠 ∀荧光显示法简单 !实验时间短 !
费用低 o同时能区别坏死细胞和有丝分裂细胞 ∀
×∏±¨ ¯法也十分灵敏 o若细胞本身自发荧光较强 o显
然会降低检出率 ∀本文采用流式细胞术检测到的凋
亡结果不理想 o可能与 ∂ ≤ 的作用特点和人乳腺
癌 ≤ƒ2z细胞的特性有关 o∂ ≤ 引起 ≤ƒ2z凋亡
时 o染色质凝集点少 o较大 o部分染色质就不能逸出
细胞外 ~而 ≤ƒ2z细胞是一种难以用流式细胞术 !
⁄梯带法检测凋亡的细胞≈{ ∀
≈参考文献
≈t 叶祖光 o孙爱续 o李兰芳 o等 q汉防己甲素对阿霉素或长春新碱
耐药株人癌细胞的逆转抗药性作用 q中国中药杂志 ot||y out
kyl }vy| q
≈u ≥°¼·« o µ¤¶²√¶®¬¶∞o≥∏··²± ∂ o ·¨¤¯ q × «¨ ⁄µ∏ª ∞©©¯∏¬
°µ²·¨¬±o §§¬·¬²±¤¯ ¼¯ °µ²·¨¦·¶ ⁄µ∏ª2µ¨¶¬¶·¤±· ×∏°²µ ≤¨¯ ¶¯ ©µ²°
∏¯·¬³¯¨ ƒ²µ°¶²© ≤¤¶³¤¶¨2§¨ ³¨ ±§¨ ±·³²³·²¶¬¶q °µ²¦ ¤·¯ ¦¤§
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¨∏®¨ °¬¤ |vz ≤¨¯ ¶¯q ∞¬³ ≤¨¯¯ ¶¨ot||w outxktl }t|| q
≈x 叶祖光 o王金华 o梁爱华 o等 q粉防己碱 !甲基莲心碱和蝙蝠葛碱
逆转长春新碱诱导的人乳腺癌 ≤ƒ2z耐药细胞凋亡 q药学学
报 ousst ovykul }|y q
≈y ⁄¤µ½¼±®¬¨ º¬¦½ o
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Ρεϖερσαλ οφ Αντι2αποπτοτιχ Αχτιον βψ Τετρανδρινειν Ηυµ αν Βρεαστ Χαρχινοµ α
Μυλτιδρυγ p ρεσισταντ ΜΧΦ2z Χελλσ
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ¶·∏§¼ º«¨·«¨µ·«¨ ¤±·¬p ¤³²³·²·¬¦¤¦·¬²±¬¶µ¨√ µ¨¶¨§¥¼ ·¨·µ¤±§µ¬±¨ ¬± ¤¦²°¥¬±¤·¬²± º¬·«√¬±¦µ¬¶·¬±¨
¬± «∏°¤± ¥µ¨¤¶·¦¤µ¦¬±²°¤ ≤ƒ2z °∏¯·¬§µ∏ª2µ¨¶¬¶·¤±·¦¨¯¯¶q Μετηοδ : ≤«µ²°¤·¬±¦²±§¨ ±¶¤·¬²± º¤¶²¥¶¨µ√ §¨¥¼ ¦²2¶·¤¬±¬±ª²©©¯∏²µ¨¶2
¦¨±·§¼¨ ¶²¨ ¦«¶·vvvwu ¤±§³µ²³¬§¬∏°¬²§¬§¨ ~¤±§t ¶∏¥2³¨ ¤® º¤¶§¨·¨¦·¨§¥¼ ©¯²º ¦¼·²° ·¨µ¼ q³²³·²·¬¦¦¨¯¯¶º µ¨¨ §¨·¨¦·¨§ º¬·«
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× ∞° ·¨«²§q≤¨¯ ∏¯¯¤µ©µ¨¨¦¤u n º¤¶§¨·¨µ°¬±¨ § º¬·« ƒ ∏¯²2v ¶·¤¬±¬±ª ° ·¨«²§q Ρεσυλτ : × º²·¼³¨¶²©¦«µ²°¤·¬±¦²±§¨ ±2
¶¤·¬²± º µ¨¨ ²¥¶¨µ√ §¨¤©·¨µ·«¨ ¶¨±¶¬·¬√¨¤±§§µ∏ª2µ¨¶¬¶·¤±· ≤ƒ2z ¦¨¯¯¶º µ¨¨ ·µ¨¤·¨§ º¬·«¤± ¤±·¬·∏°²µ§µ∏ª√¬±2
¦µ¬¶·¬±¨ x Λ°²¯ #p t©²µuw «q ׫¨ ±∏°¥¨µ²© ¦¨¯¯ º¬·«¦«µ²°¤·¬± ¦²±§¨ ±¶¤·¬²± º¤¶²¥√¬²∏¶¯¼ µ¨§∏¦¨§¬± ·«¨
§µ∏ª2µ¨¶¬¶·¤±·¦¨¯¯¶·µ¨¤·¨§ º¬·«·«¨ ¶¤°¨¦²±¦¨±·µ¤·¬²± ²© √¬±¦µ¬¶·¬±¨ o¤¶¦²°³¤µ¨§ º¬·«·«¨ ¶¨±¶¬·¬√¨ ≤ƒ2z
¦¨¯¯¶q ׫¨ ±∏°¥¨µ²©·«¨ ¤³²³·²·¬¦¦¨¯¯¶ º¤¶¬±¦µ¨¤¶¨§¥¼ ¤¦²°¥¬±¤·¬²± ²© ±²±2¦¼·²·²¬¬¦·¨·µ¤±§µ¬±¨ us Λ°²¯#
pt ¤±§√¬±¦µ¬¶·¬±¨ ¬± ¥²·«·«¨ ¶¨±¶¬·¬√¨¤±§§µ∏ª2µ¨¶¬¶·¤±·¦¨¯¯¶o º«¬¦« º¤¶¦²±©¬µ° §¨ º¬·«©¯∏²µ¨¶¦¨±·¬±§¬¦¤2
·¬²± ¤±§× ∞° ·¨«²§q׫¨ ¬±¦µ¨ ° ±¨·²©¬±·µ²¦¨¯¯∏¯¤µ©µ¨¨≤¤u n ¯¨ √¨¯ ¬±·«¨ ¦¨¯¯¶·µ¨¤·¨§ º¬·«·¨·µ¤±§µ¬±¨ ¬±
¤¦²°¥¬±¤·¬²± ²©√¬±¦µ¬¶·¬±¨ º¤¶§¨·¨¦·¨§ º¬·« ƒ ∏¯²2v ¶·¤¬±¬±ª ° ·¨«²§qΧονχλυσιον : ׫¨ ¤±·¬2¤³²³·²·¬¦¤¦·¬²± ²©
«∏°¤± ¥µ¨¤¶·¦¤µ¦¬±²°¤ ≤ƒ2z ¦¨¯¯¶¦¤± ¥¨ ©¨©¨ ¦·¬√¨¯¼ µ¨√ µ¨¶¨§¥¼ ·¨·µ¤±§µ¬±¨ q
[ Κεψ ωορδσ] ·¨·µ¤±§µ¬±¨ ~√¬±¦µ¬¶·¬±¨ ~ °∏¯·¬§µ∏ªµ¨¶¬¶·¤±¦¨ ~¤³²³·²¶¬¶~«∏°¤± ¥µ¨¤¶·¦¤µ¦¬±²°¤ ≤ƒ2z ¦¨¯¯¶
≈责任编辑 方文贤
当归补血汤促进造血功能的成分及其作用的研究
宁 炼 o陈长勋 o金若敏 o吴耀平 o张海贵 o孙成立 o宋纯清 o胡之璧
k上海中医药大学 o上海 usssvul
≈摘要 目的 }探讨当归补血汤不同的组分或成分对血虚模型小鼠造血功能的作用及其机理 ∀方法 }采用整
体实验法 ! × × 比色法 !v 2ק 参入法 !半固体造血细胞集落形成技术等 o测定血虚小鼠外周血象 !骨髓有核细胞
数和造血干r祖细胞集落水平 ∀结果 }当归补血汤的多糖与非多糖组分均有补血作用 o多糖组分作用较强 o尤以当
归多糖的作用更为显著 ∀非多糖组分中以阿魏酸作用最强 o黄芪异黄酮等也有一定的作用 ∀以上各成分可在不同
的作用环节上促进造血细胞的形成 ∀结论 }当归补血汤通过多成分 !多环节改善血虚动物的造血功能 ∀
≈关键词 当归补血汤 ~造血功能 ~成分 ~作用机理
≈中图分类号 u{x qx ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukussulst2ssxs2sw
当归补血汤为临床常用补血基本方之一 ∀本方
现代主要用于治疗贫血 !白细胞减少症 !对抗放化疗
副作用等 ∀我们曾证明当归补血汤对改进的血虚动
物模型的造血功能有明显的促进作用≈t ∀为探讨当
归补血汤改善造血系统功能的物质基础及作用环
节 o本文进一步对该方中的多糖与非多糖部分中不
同成分的药理作用进行研究 ∀
1 实验材料
1 q1 受试药物 当归补血汤多糖组分 !当归补血汤
非多糖组分 !黄芪多糖 !黄芪甲苷 !黄芪异黄酮 !黄芪
异黄烷 !黄芪皂苷 !当归多糖 !阿魏酸 }由上海中医药
大学中药研究所宋纯清教授提供 o临用时各以
≈收稿日期 usst2su2sx
≈基金项目 /九五0国家攀登项目k|{°⁄s|l
≈作者通讯 电话 }ksutlxwuvuu|s ∞2°¤¬¯}¯¬²±¬±ª ·¨¤¦«¨µq
¦²°
t qx h二甲亚砜生理盐水溶液配制成所需浓度 ∀
1 q2 试剂 环磷酰胺k≤ ≠l }上海华联制药有限公
司产品 ~乙酰苯肼 k °l }上海试剂三厂产品 ~
× × }华美生物工程公司产品 ~¦ ° o¦ ° 试剂
盒 }由上海中医药大学同位素室提供 ∀
1 q3 主要仪器 • ¨¯ ¶¯¦¤±2 u 自动酶标仪 o
≥|{ss液闪计数仪 o¬¶¨2§u倒置显微镜 ∀
1 q4 动物 昆明种小鼠 o雌雄皆用 o体重 t{ ∗ uu ªo
清洁级 o由上海中医药大学实验动物中心提供 ∀
≤ 小鼠 !
¤¯¥r¦小鼠 o雌雄皆用 o体重 t{ ∗ uu ªo清
洁级 o均由中国科学院实验动物中心提供 ∀
2 方法与结果
2 q1 多糖与非多糖组分对血虚动物造血功能的影
响
2 q1 q1 对血虚小鼠≈t 外周血象的影响 取昆明种
小鼠 o随机分为正常组 !模型组 !当归补血汤非多糖
#sx#
第 uz卷第 t期
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∂ ²¯ quz o²qt
¤±qoussu