免费文献传递   相关文献

Effect of Shenwu Capsule on the peripheral blood lymphocyte DNA of rat model induced by β-amyloid injection

参乌胶囊对β-淀粉样蛋白大鼠模型外周血淋巴细胞DNA的影响



全 文 :参乌胶囊对 Β2淀粉样蛋白大鼠模型
外周血淋巴细胞 ⁄‘„的影响
王 辉 o李 林 3 o叶翠飞 o张 兰
k首都医科大学 宣武医院 药理研究室 北京脑老化重点实验室 o北京 tsssxvl
≈摘要  目的 }观察中药新复方参乌胶囊对 Β2淀粉样蛋白海马内注射大鼠模型外周血淋巴细胞 ⁄‘„损伤和血清
脂质过氧化物丙二醛k⁄„l 水平的影响 ∀方法 }大鼠单侧k左侧l海马内注射 „ Βux p vxz§后 o利用单细胞电泳结合激光
共聚焦显微技术对外周血淋巴细胞 ⁄‘„图象进行分析 o通过硫代巴比妥酸法检测血清 ⁄„含量 ∀结果 }参乌胶囊灌
胃给药 u周能够明显降低彗星样淋巴细胞的比率 !尾长和尾距 o降低血清 ⁄„水平 o保护淋巴细胞 ⁄‘„免受氧化损
伤的影响 ∀结论 }参乌胶囊对外周血淋巴细胞 ⁄‘„具有保护作用 ∀
≈关键词  中药复方 ~„¯ ½«¨¬° µ¨病 ~Β2淀粉样蛋白 ~淋巴细胞 ⁄‘„ ~脂质过氧化
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswlsu2stzy2sv
参乌胶囊是由本室自行研制的中药新复方 o由
制首乌 !人参 !葛根等 y味纯中药组成 o具有补肾健
脾 !豁痰开窍 !活血化瘀之功效 ∀以往的实验表明 o
它能改善 w种痴呆模型的学习记忆能力 o促进多种
神经营养因子及其受体的表达 o抑制脑组织自由基
增多及脂质过氧化形成 o抑制神经细胞内钙超载
等≈t p z  ∀近年来有资料表明 o老年大鼠外周血淋巴
细胞的结构和功能均有改变 o外周血彗星样淋巴细
胞出现率增高 o淋巴细胞 ⁄‘„有一定损伤≈{  ∀笔者
采用 „ Βux p vx海马内注射大鼠模型 o发现大鼠脑内胶
质细胞活化 !炎性因子kŒ2tΒ和 בƒΑl含量增多 !以
及海马神经元损伤 o参乌胶囊可减轻模型组的上述
变化k另文发表l ∀为进一步了解此模型外周血的变
化 o本研究检测了 „Β模型大鼠外周血淋巴细胞 ⁄‘„
的损伤情况及血清过氧化脂质含量 o并观察了参乌
胶囊对上述改变的影响 ∀这对研究神经退行性疾病
的发病机理以及观察药物疗效均有重要意义 ∀
1 材料与方法
1 q1 实验材料
1 q1 q1 动物 雄性 ≥⁄大鼠 o体重 uvs ∗ uzs ªo≥°ƒ
≈收稿日期  ussv2sw2us
≈基 金 项 目   国 家 重 点 基 础 研 究 发 展 计 划 / |zv 0 项 目
kŠussssxzstsl ~北京市重点科技实验室项目k|xt{syssl ~北京市科技
项目k|xuyst{ssl ~北京市中医药重点学科项目kusstl ~北京市自然科
学基金项目kzsvustvl
≈通讯作者  3 李林 oר¯ }kstslyvstvvxx2u{{y
级 o购自北京维通利华实验动物技术有限公司k许可
证编号 }≥≤ ≅ Žµ2⁄’2sss{l ∀
1 q1 q2 药品与试剂 参乌胶囊由制首乌 !人参 !葛
根等 y味中药制成 o由本室自行研制 o委托北京第四
制药厂加工 o批号 |{sxtx o每克干粉含生药 y qux ª∀
Β淀粉样蛋白ux p vxkΒ2¤°¼¯²¬§ux p vx o „Βux p vxl !二甲基
亚砜k§¬°¤·«¼¯ ¶∏¯©²¬¬§¨ o⁄≥’l均为 ≥¬ª°¤公司产品 ∀
1 q1 q3 主要仪器 脑立体定位仪k日本 ≥„ׄŠ„≠„
公司 ≥‘p u‘型l o激光扫描共聚焦显微镜k美国 …¬²
p •¤§公司 o • ≤ p tsuw型l o电泳仪k美国 …¬²p •¤§
公司 o°²º µ¨°„≤ uss 型l o荧光倒置显微镜k日本
‘¬®²±公司 o×∞p vss型l ∀
1 q2 实验方法
1 q2 q1 动物模型制作 参照 Š¬²√¤±±¨ ¯¯¬≈| 等的方法
略改进 ∀将 t °ª „Βux p vx肽段溶于 uss ˏ灭菌蒸馏
水中 o浓度为 x ª#pt ∀vz ε 孵育 z §o使其聚集 !老
化 ∀大鼠海马定位 }前囟后 v qs °° o中缝旁开 u qs
°° o硬膜下 u q| °°∀钻开颅骨 o用微量进样器缓慢
注入 „Β u ˏ o留针 x °¬±∀本研究采用单侧k左侧l
海马注射 „Β∀
1 q2 q2 分组及给药 分为 6 组 o每组 ts只 ∀假手
术组 }清水灌胃 t周后 o左侧海马内注入生理盐水 u
ˏo术后继续灌胃清水 t周 ~模型组和用药组灌胃 t
周后 o左侧海马内注入 „Βts Λªo术后继续灌胃 t周 ~
模型组给予清水 o参乌胶囊小 !中 !大剂量组分别为
s qwx os q| ot q{ ª#®ªpt ∀
#yzt#
第 u|卷第 u期
ussw年 u月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ u
ƒ ¥¨µ∏¤µ¼oussw
1 q3 指标测定
1 q3 q1 淋巴细胞的分离与保存 参照 ׬¦¨≈ts 的方
法略加改进 ∀取大鼠血 w °otΒu比例用 • °Œtyws
稀释后 o加入盛有 t qx °淋巴细胞分离液的试管
中 ot xss µ#°¬±pt离心 tx °¬±o吸取中间白色的淋巴
细胞层 ∀ • °Œ tyws 洗 o淋巴细胞重悬液k含 {s h
• °Œtyws ots h 胎牛血清 ots h ⁄≥’ l调整细胞浓
度为 t ≅ ts|#pt op zs ε 冻存 ∀
1 q3 q2 单细胞电泳 参照 ≥¬±ª«≈tt 和安文林≈tu 等
的方法略加改进 ∀取 txs ˏ正常熔点琼脂糖kxx ?
ul ε 加在磨毛的玻璃片上 o制成底层胶 ∀取 xs ˏ
低熔点琼脂糖kvz ε l与等体积的淋巴细胞悬液混
匀 o迅速铺于底层胶上 o用盖玻片压平 ∀将制成的胶
板放于盛有裂解液的平皿中 ow ε 裂解 ys °¬±∀取出
胶板 o放入盛有缓冲液的电泳槽中 ow ε o放置 us
°¬±∀vx ∂ ovss °„电泳 ws °¬±后 o将胶板放入平皿
中 o中和液中和 u次 o每次 ts °¬±kw ε l ∀然后用 x
°ª#pt的 °Œ在暗处染色 ws °¬±∀用封口膜盖住kw
ε l ∀最后 o将胶板放入预冷的蒸馏水中漂洗 x °¬±∀
1 q3 q3 激光扫描共聚焦图象的采集和分析 参照
安文林等的方法≈tu 进行 ∀放大 uss倍后采集的图象
用于计数淋巴细胞的慧尾出现率 o放大 wss倍的图
象用于测量分析 ∀
1 q3 q4 大鼠外周血清 ⁄„检测 参照张其兰≈tv  !
刘汇波≈x 等方法 ∀样品中加入 truw °²¯ 的 ‹u≥’w w
°ots h的磷钨酸进行搅拌 o室温放置 x °¬±ov sss µ
#°¬±pt os ∗ w ε 离心 ts °¬±o弃上清 o倒控 t °¬±∀分
别加入生理盐水 !s qsx °²¯#pt ‹≤¯ !硫代巴比妥酸 o
加塞混匀 o置沸水浴 t «后冷却 o离心 u sssµ#°¬±pt o
xvu ±°测吸收度kΑl ∀计算公式 }
⁄„浓度 €样品 Αr标准溶液 Α≅ v qvv Λ°²¯#pt
1 q4 统计分析
数据以 ξ ? σ表示 o组间显著性检验用 τ检验 ∀
Π s qsx有统计学意义 ∀
2 结果
2 q1 参乌胶囊对 „Β模型大鼠外周血淋巴细胞 ⁄‘„
损伤的影响
采用彗星样细胞出现率k记数一定量细胞中彗
星样细胞所占的比率l !彗星样淋巴细胞尾长k彗星
电泳方向上的最大长度l和尾距k尾部 ⁄‘„ 占总
⁄‘„的百分比与头尾部中心间距的乘积l作为损伤
的指标 o彗星样细胞出现率越高 o淋巴细胞尾长和
尾距越长 o说明淋巴细胞 ⁄‘„损伤越严重 ∀
本研究结果发现 o与假手术组相比 o„Β模型组
外周血彗星样淋巴细胞出现率明显增多 o尾长和尾
距显著延长 ~参乌胶囊灌胃给药 u周能明显减少彗
星样淋巴细胞出现率 o降低彗星样淋巴细胞尾长和
尾距 o差异具有显著性意义k见表 t oul ∀
表 t 参乌胶囊对 „Β模型大鼠外周
血彗星样淋巴细胞出现率的影响k ξ ? σl
组别
剂量
rª#®ªpt
ν 彗星样淋巴细胞出现率r h
假手术组 s x t{ qt{ ? u qtwtl
„Β模型组 s x |v qwv ? v qxu
参乌胶囊 s qwx z ys qut ? t qyutl
s q| y xy qzx ? v qwstl
t q{ y wu q|{ ? t qyztl
消炎痛组 u qx y w| qxu ? t qvwtl
注 } tl与 „Β模型组相比 oΠ s qstk表 u ov同l
表 u 参乌胶囊对 „Β模型大鼠外周
血淋巴细胞尾长和尾距的影响k ξ ? σ l
组别
剂量
rª#®ªpt
ν 淋巴细胞尾长rΛ°
淋巴细胞尾距
假手术组 s x ux q|w ? t qyvtl v qxy ? s qy{tl
„Β模型组 s x ys qxw ? v q{{ uu qsw ? t qvx
参乌胶囊 s qwx z wu qvt ? u qvztl tt qvw ? t qtutl
s q| y v| qx{ ? t qx|tl tu qyv ? u qxwtl
t q{ y vt qx ? u qv{tl z quu ? t qvstl
消炎痛组 u qx y u{ q{u ? u q{ttl y qw| ? s qzxtl
2 q2 参乌胶囊对 „Β模型大鼠外周血清 ⁄„ 含量
的影响
通过检测外周血 ⁄„含量 o发现 „Β模型组含
量比假手术组明显增高 o参乌胶囊给药组 ⁄„含量
与模型组相比有所减少k见表 vl ∀
表 v 参乌胶囊对 „Β模型大鼠外周
血清 ⁄„含量的影响k ξ ? σl
组别
剂量
rª#®ªpt
ν
⁄„
rΛ°²¯#pt
假手术组 s x w qxz ? t quttl
„Β模型组 s x { qst ? t qts
参乌胶囊 s qwx z x qus ? t q|uul
s q| y x qtw ? t q||
t q{ y x qys ? u quu
消炎痛组 u qx y z q{t ? v qvz
注 } ul与 „Β模型组相比 oΠ s qsx
3 讨论
笔者曾采用 „Βux p vx海马内注射大鼠模型 o观察
了大鼠脑内炎性因子含量 !胶质细胞和海马神经元
#zzt#
第 u|卷第 u期
ussw年 u月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ u
ƒ ¥¨µ∏¤µ¼oussw
的形态改变 ∀发现该模型海马内小胶质细胞和星形
胶质细胞处于活化状态 oŒ2tΒ和 בƒΑ含量明显增
高 o神经元严重损伤 ∀而中药新复方参乌胶囊能够
显著降低海马内 Œ2tΒ和 בƒΑ含量 o抑制胶质细胞
的活化状态 o保护神经元免受炎症反应的损伤 o具有
调节免疫的作用 ∀但 „⁄脑内的病变是一个渐进的
过程 o目前对 „⁄的临床诊断主要通过认知量表和
神经影像检查≈tw  o而外周血是非常方便得到的 o如
果能够检测出 „⁄病人外周血中的某种显著性变
化 o将对 „⁄的早期诊断和治疗有很大的帮助 ∀因
此笔者选择了代表外周免疫系统的淋巴细胞 o检测
了 „Β模型大鼠外周血淋巴细胞 ⁄‘„ 损伤情况 o发
现彗星样淋巴细胞增多 o淋巴细胞尾长和尾距明显
变长 o表明淋巴细胞 ⁄‘„断裂为小碎片增多 ∀有资
料表明 o自由基水平升高是导致细胞 ⁄‘„断裂的一
个重要原因 o⁄‘„ 断裂会导致基因转录 !翻译的异
常 o引起细胞功能和结构的改变 o细胞死亡或凋
亡≈tx oty  ∀笔者同时也检测了外周血中 ⁄„的水平 o
发现此模型血清中 ⁄„ 水平是升高的 ∀由此推断
可能是自由基增多引起了淋巴细胞 ⁄‘„ 的损伤 ∀
此模型外周血中 ⁄„水平增高的机理尚不清楚 o有
待于进一步研究 ∀
本研究发现参乌胶囊灌胃给药降低了 „Β模型
大鼠外周血中 ⁄„含量 o降低了彗星样淋巴细胞比
例 o减轻了淋巴细胞的损伤程度 ∀以往的研究表明 o
参乌胶囊无论在体内还是体外都具有很强的抑制脂
质过氧化的作用 o提示它可能具有清除自由基的作
用 ∀结合上述实验 o笔者认为参乌胶囊能够抑制 Β2
淀粉样肽所致的大鼠脑内炎症损伤和外周血淋巴细
胞的氧化损伤 o具有一定的调节免疫和抗氧化作用 o
对于神经退行性疾病可能具有较好的预防和治疗作
用 o有着良好的开发和应用前景 ∀
≈参考文献 
≈t  李 林 o李 斌 o叶翠飞 o等 q中药复方 |yu胶囊对老年大鼠学
习记忆功能及兴奋性的影响 q中国老年学杂志 ousss ous }vyw q
≈u  李海玲 o李 林 q中药复方 |yu胶囊对老年大鼠大脑皮层胆碱
乙酰基转移酶和乙酰胆碱酯酶活性的影响 q首都医科大学学
报 ousss out }t|s q
≈v  张 兰 o李 林 o李 斌 o等 q中药复方 |yu胶囊对老年大鼠海
马区神经生长因子及其受体表达的影响 q中国自然医学杂志 o
usss ou }t q
≈w  李 斌 o李 林 o王育琴 o等 q中药复方 |yu对基底前脑损毁大
鼠学习记忆及兴奋性的影响 q中国新药杂志 ousss o|kttl }zxx q
≈x  刘汇波 o李 斌 o李 林 q神健胶囊对 ∆2半乳糖致衰老模型小
鼠的作用 q中国新药杂志 ousss o|kttl }uvy q
≈y  刘汇波 o李 林 o叶翠飞 q中药复方 |yu胶囊对血管性痴呆模型
大鼠的作用 q中国自然医学杂志 ousss oukvl }tvy q
≈z  张 兰 o李 林 o李 斌 o等 q中药参乌胶囊对老年大鼠学习记
忆及海马组织学的影响 q中国康复理论与实践 oussu o{k|l }
xty q
≈{  安文林 o李 斌 o叶翠飞 o等 q不同年龄组大鼠淋巴细胞 ⁄‘„的
断裂损伤 q中国老年医学杂志 ousss ot|kwl }tvz q
≈|  Š¬²√¤±±¨ ¯¯¬o≥¦¤¯¬≤ oƒ¤∏¶¶²±¨ 2°¨ ¯¯ ª¨µ¬±¬ ≥ o ετ αλq²±ª2·¨µ°
¦«¤±ª¨¶¬±·«¨ ¤ªªµ¨ª¤·¬²±¶·¤·¨¤±§·²¬¬¦ ©¨©¨¦·¶²©„Β¬±­¨¦·¨§¬±·²·«¨
µ¤·¥µ¤¬±q Νευροσχιενχε ot||{ o{z }vw| q
≈ts  ׬¦¨ • • o≥·µ¤∏¶¶Š ‹ o°¨ ·¨µ¶ • ° q‹¬ª«§²¶¨ ¦²°¥¬±¤·¬²± ¤¯®¼¯¤·2
¬±ª¤ª¨ ±·¶º¬·«¤∏·²¯²ª²∏¶¥²±¨ 2°¤µµ²º ¶∏³³²µ·¬± ³¤·¬¨±·¶º¬·«¥µ¨¤¶·
¦¤±¦¨µ}³µ¨ ¬¯°¬±¤µ¼ ¤¶¶¨¶¶° ±¨·²© ⁄‘„ ⁄¤°¤ª¨ ¬±¬±§¬√¬§∏¤¯ ³¨µ¬³«2
µ¨¤¯ ¥¯²²§ ¼¯°³«²¦¼·¨¶∏¶¬±ª·«¨ ¶¬±ª¯¨¦¨¯¯ ª¨¯ ¨¯ ¦¨·µ²³«²µ¨¶¬¶¤¶¶¤¼q
Μυτατ Ρεσot||u ouzt }tst q
≈tt  ≥¬±ª« ‘° o ¦¦²¼  × o׬¦¨ ° • o ετ αλq„ ¶¬°³¯¨¦¨¯¯ µ¨¶¨¤µ¦«©²µ
²∏¤±·¬·¤·¬²± ²© ²¯º ¯¨ √¨ ¶¯²© ⁄‘„ §¤°¤ª¨ ¬±¬±§¬√¬§∏¯ q Εξπ Χελλ Ρεσo
t|{{ otzx }t{w q
≈tu  安文林 o李 林 o李 斌 o等 q中药复方 |yu胶囊对老年大鼠外
周血淋巴细胞 ⁄‘„损伤的影响 q中国自然医学杂志 ot||| ot }
y q
≈tv  陈 奇 q中药药理研究方法学 q北京 }人民卫生出版社 ot||v q
|ws q
≈tw  ≤²µ¨¼2…¯²²° o׫¤¯ oŠ¤¯¤¶®² ⁄oετ αλq⁄¬¤ª±²¶¬¶¤±§ √¨¤¯∏¤·¬²±
²©§¨ ° ±¨·¬¤q Νευολογψot||x owx }utt q
≈tx  °¨ µ¨½ ≤ • o²³¨½ ×  o ≤¤§¨±¤¶≥ o ετ αλq ׫¨ µ¤·¨ ²©©µ¨¨µ¤§¬¦¤¯
³µ²§∏¦·¬²± ¤¶¤§¨·¨µ°¬±¤·¬²± ²©·«¨ µ¤·¨ ²©¤ª¬±ª} √¨¬§¨±¦¨ ©µ²° ·«¨
¦²°³¤µ¤·¬√¨ ¤³³µ²¤¦«q ϑ Χοµπ Πηψσιολot||{ oty{ }tw| q
≈ty  ≥¬°²±¬¤± ‘„ o≤²¼¯¨× q ’¬¬§¤·¬√¨¶·µ¨¶¶¬± ±¨ ∏µ²§¨ª¨ ±¨ µ¤·¬√¨ §¬¶2
¤¨¶¨¶q Αννυ Ρεϖ Πηαρµαχολ Τοξιχαλot||y ovy }{v q
Εφφεχτ οφ Σηενωυ Χαπσυλε ον τηε περιπηεραλ βλοοδ λψµ πηοχψτε
∆ΝΑ οφ ρατ µ οδελινδυχεδ βψ Β2αµψλοιδ ινϕεχτιον
• „‘Š ‹∏¬oŒ¬±o ≠∞ ≤∏¬2©¨¬o‹„‘Š ¤±
k ∆επαρτµεντ οφ Πηαρµαχολογψ, Ξυανωυ Ηοσπιταλ οφ Χαπιταλ Υνιϖερσιτψ οφ
#{zt#
第 u|卷第 u期
ussw年 u月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ u
ƒ ¥¨µ∏¤µ¼oussw
Μεδιχαλ Σχιενχεσ , Βειϕινγ Κεψ Λαβορατορψφορ Βραιν Αγινγ , Βειϕινγ , tsssxv , Χηιναl
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨·«¨ ©¨©¨¦·²©·«¨ ±¨ º ×µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨ ≤²°³²∏±§≥«¨ ±º∏ ≤¤³¶∏¯¨²±·«¨ §¤°¤ª¨ ²© ¼¯°³«²2
¦¼·¨ ⁄‘„ ¤±§ ¬¯³¬§³¨µ²¬¬§¤·¬²±¬± ³¨µ¬³«¨µ¤¯ ¥¯²²§²©µ¤·¶¬±§∏¦¨§¥¼ Β2¤°¼¯²¬§¬±­¨¦·¬²±q Μετηοδ : ׫¨ ¤±¬°¤¯ °²§¨¯ º¤¶°¤§¨ ¥¼¬±­¨¦·¬²±
²©Β2¤°¼¯²¬§uxp vx¬±·²«¬³³²¦¤°³∏¶²©µ¤·¶q⁄‘„ §¤°¤ª¨ ²© ¼¯°³«²¦¼·¨¶º¤¶° ¤¨¶∏µ¨§¥¼·«¨ ¶¬±ª¯¨¦¨¯¯ ª¨¯ ¨¯ ¦¨·µ²³«²µ¨¶¬¶k≥≤Š∞l ¦²°¥¬±¨ §
º¬·«·«¨ ¤¯¶¨µ¶¦¤±±¬±ª¦²±©²¦¤¯ °¬¦µ²¶¦²³¼ k≥≤ l q׫¨ ¦²±·¨±·²©°¤¯²±§¬¤¯§¨«¼§¨ k⁄„l º¤¶§¨·¨µ°¬±¨ §¥¼ ׅ„ ¤¶¶¤¼qΡεσυλτ : ≥«¨ ±º∏
≤¤³¶∏¯¨§¨¦µ¨¤¶¨§·«¨ µ¤·¨ ²©·«¨ ¦²° ·¨2¯¬®¨ ¦¨¯¯ o¦²° ·¨2¯¬®¨ ¦¨¯¯ ¯¨ ±ª«k×≤l o¤±§·¤¬¯ °²° ±¨·kאl ²© ¼¯°³«²¦¼·¨¶¬± ³¨µ¬³«¨µ¤¯ ¥¯²²§²©
°²§¨¯µ¤·¶q≥«¨ ±º∏≤¤³¶∏¯¨¤¯¶² §¨ ¦¯¬±¨ §·«¨ ⁄„ ¦²±·¨±·¬± ¶¨µ∏° ²© „Β °²§¨¯µ¤·¶qΧονχλυσιον : ≥«¨ ±º∏≤¤³¶∏¯¨«¤¶³µ²·¨¦·¬√¨ ©¨©¨¦·²±
³¨µ¬³«¨µ¤¯ ¥¯²²§ ¼¯°³«²¦¼·¨ ⁄‘„ q
[ Κεψ ωορδσ] ×µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨ ≤²°³²∏±§~ „¯ ½«¨¬° µ¨. ¶§¬¶¨¤¶¨ ~Β2¤°¼¯²¬§~ ¼¯°³«²¦¼·¨ ⁄‘„ ~ ¬¯³¬§³¨µ²¬¬§¤·¬²±
≈责任编辑 古云侠 
水杉总黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用
王 芳t 3 o余恩欣u o刘惟莞v
kt q武汉大学 人民医院 药学部 o湖北 武汉 wvssys ~
u q湖北省药品检验所药理室 o湖北 武汉 wvssyw ~v q武汉大学 医学院 药理教研室 o湖北 武汉 wvssztl
≈摘要  目的 }观察水杉总黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用 ∀方法 }凝闭大鼠双侧椎动脉 w ∗ x «后 o夹
闭颈总动脉 vs °¬±o再灌注 |s °¬±o造成大鼠脑缺血再灌注损伤模型 o观察水杉总黄酮对脑组织中生化指标及脑电图
的影响 ∀结果 }缺血再灌注造成脑组织严重损伤 o脑组织中水 o‘¤n o ≤¤un含量及丙二醛k ⁄„l含量较对照组明显增
高 o而超氧化物歧化酶k≥’⁄l活力较对照组降低 o并伴有脑电图异常和脑组织结构病理性改变 ∀夹闭颈总动脉前 vs
°¬±¬³ux ∗ tss °ª#®ªp t水杉总黄酮能降低脑组织中水 o‘¤n o≤¤un含量及 ⁄„含量 o并提高 ≥’⁄活力 o对组织学检查及
脑电图也有所改善 ∀结论 }水杉总黄酮对脑缺血再灌注损伤具有保护作用 ∀
≈关键词  水杉总黄酮 ~脑缺血 ~再灌注损伤 ~≤¤un超载 ~超氧化物歧化酶
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswlsu2stz|2sv
近年来 o水杉作为一种药用资源开始受到重视 o
水杉总黄酮k·²·¤¯ ©¯¤√²±¨ ¶²© °¨ ·¤¶¨ ∏´²¶¬¤o׃l是从
杉科植物水杉k°¨ ·¤¶¨ ∏´²¶¬¤l叶中提得的有效成分 o
研究发现具有抗心律失常和抗心肌缺血 o抑制肥厚
心肌 ≤¤u n超载作用≈t ou  ∀已有研究显示 o脑缺血再
灌注损伤与细胞内 ≤¤u n超载 o氧自由基异常产生有
关≈v  ∀本实验旨在观察 ׃ 对急性脑缺血再灌注
损伤大鼠的保护作用 o并初步探讨其作用机制 o以期
对水杉的开发和临床应用提供实验依据 ∀
1 材料与方法
1 q1 药物及试剂 ׃ 是从杉科植物水杉叶中提
取的总黄酮k含量为 vu h l o由中国科学院武汉植物
≈收稿日期  ussv2sx2ts
≈通讯作者  3王芳 oר¯ }ksuzl{{swt|tt2{tyw o∞2°¤¬¯}¼∏±¬¤±¯¬±ƒ
¶²«∏q¦²°
研究所提供 o临用前以 x h 聚乙二醇配制成不同浓
度 ∀银杏叶提取物kª¬±®ª² ¥¬¯²¥¤ ¬¨·µ¤¦·o∞Š¥l o含银
杏黄酮 u| q{ h o银杏苦内酯 z qv h o购自四川广松制
药有限公司 ∀超氧化物歧化酶 k≥’⁄l !丙二醛
k⁄„l试剂盒购自南京建成生物制剂研究所 o批号
usstsvtt ∀
1 q2 实验动物 雄性 ≥⁄大鼠 o体重 uxs ∗ u{s ªo由
武汉大学医学院实验动物中心提供 ∀
1 q3 仪器 „„ p yzs原子分光光度计 o•  p yuss
型多道生理记录仪 o日本岛津公司 ∀
1 q4 模型的建立与给药 大鼠 50 只 o随机分为 x
组 o每组 ts只 }假手术组 ox h 聚乙二醇溶剂对照组 o
∞Š¥组 o׃ u个剂量组 ∀四血管结扎全脑缺血模
型的制备参考文献≈w  ∀大鼠 ¬³水合氯醛 wss °ª#
®ªpt后 o固定于立体定位仪 o电烧灼凝闭两侧椎动
#|zt#
第 u|卷第 u期
ussw年 u月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ u
ƒ ¥¨µ∏¤µ¼oussw