全 文 ：用多指标活动水平的正交设计法
对苏长史茱萸汤提取工艺进行优选
林 青 o邱德文 o林亚平
k贵阳中医学院 o贵阳 贵州 xxsssul
≈摘要 目的 }应用多指标活动水平的正交实验设计 o探讨苏长史茱萸汤的提取工艺 ∀方法 }以吴茱萸碱 !吴
茱萸次碱 !黄酮类成分 !总有机酸提取率为指标 o运用活动水平的正交设计考察提取溶媒乙醇的浓度 !提取方法 !提
取时间 !溶媒用量等因素在苏长史茱萸汤提取中的最佳工艺条件 ∀结果 }苏长史茱萸汤提取工艺为 }xs h乙醇 o用
量 tw qu{y #®ªp t药材 o热浸法kzs ε l o提取 tu «∀结论 }多指标活动水平的正交实验设计优选的苏长史茱萸汤的
提取工艺条件合理 !可靠 !科学 ∀
≈关键词 苏长史茱萸汤 ~茱萸汤 ~正交设计法 ~吴茱萸 ~木瓜
≈中图分类号 u{v qy ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukussulsv2st{u2sv
茱萸汤出自唐#孙思邈5备急千金要方6卷七k风
毒脚气l o由于引自苏长史方 o又称/苏长史茱萸汤0 o
由吴茱萸和木瓜这对药对组成 o临床上为急救方 o用
于/脚气入腹困闷欲死0 ∀经查阅文献和实际研究发
现 o吴茱萸在心血管系统和消化系统有较明确的药
理作用 o木瓜在消化系统作用较为明显 ~两药配伍煎
煮时 o化学成分产生量变≈t ∀吴茱萸和木瓜以 yΒt
应用 o镇痛 !抗炎作用较为显著≈u o能够明显地对抗
小鼠冰醋酸及热板致痛作用 o减少扭体次数 o提高小
鼠痛阀值 o并能够对抗二甲苯及角叉菜胶所引起的
急性炎症反应 ~以地奥心血康胶囊作为阳性对照药
进行麻醉猫的血流动力学的影响及心肌缺血的实验
研究发现 o吴茱萸及茱萸汤均能改善麻醉猫的血流
动力学指标 o降低血压 o减慢心率 o减少心输出量 o具
有一定的保护心肌缺血的作用≈v ∀吴茱萸及茱萸汤
抗心肌缺血作用与地奥心血康比无显著差异 ∀茱萸
汤在现代临床上用于防治冠心病心绞痛 ∀
为将传统汤剂改制成适合现代临床使用的剂
型 o并控制新制剂的质量 o我们通过多指标活动水平
的正交实验设计≈w o对苏长史茱萸汤的提取工艺进
行了实验研究 o并确定影响提取工艺的显著性因素 o
结果满意 ∀
≈收稿日期 usss2s|2ux
≈基金项目 贵州省教委 t||z年重点课题
≈通讯作者 电话 }ksusl{yx|tuvv2v{yx ∞2°¤¬¯}¯¬± ¬´±ª« ¶²2
«∏q¦²°
1 材料和仪器
药材吴茱萸和木瓜分别购自贵阳市药材市场和
济仁堂药店 o经中药鉴定教研室刘凡副教授 !董丽莎
副教授鉴定 o吴茱萸为芸香科吴茱萸属植物吴茱萸
Εϖοδια ρυταεχαρπα k∏¶¶ql
¨ ±·«q的干燥近成熟果
实 o木瓜为蔷薇科植物贴梗海棠 Χηαενοµελεσ
σπεχιοσαο k≥º¨¨·l ¤®¤¬的干燥近成熟果实 ∀
色谱纯试剂 }乙腈 !甲醇 ~分析纯试剂 }无水乙
醇 !甲醇 !四氢呋喃 !冰醋酸 !枸橼酸 !酚酞 !亚硝酸
钠 !硝酸铝 !氢氧化钠 ~化学纯试剂 }|x h乙醇 o三重
亚沸水 ~吴茱萸碱 !吴茱萸次碱 !芦丁购自中国药品
生物制品检定所 o氯氟舒松购自天津药业有限公司 ∀
贝克曼高效液相色谱仪 o贝克曼 ⁄2zs紫外2可
见光分光光度计 ∀
2 方法与结果
2 q1 用正交设计法对提取工艺进行优选
根据吴茱萸和木瓜药材的性质 !所选指标成分
的性质以及生产的要求 o我们选择不同浓度的乙醇
为提取溶媒 o选定提取溶媒含醇量 !提取方法 !提取
时间 !溶媒用量为考察因素 o以吴茱萸碱和吴茱萸次
碱 !总有机酸 !黄酮类成分的含量为考察指标 o选用
|kvwl正交表进行实验 o见表 tk溶媒用量为提取 t
®ª药材所用量l ∀
2 q2 测定方法
2 q2 q1 吴茱萸碱 !吴茱萸次碱含量 取吴茱萸 !木
瓜 !茱萸汤提取物适量于 ts °容量瓶中 o加入氯
#u{t#
第 uz卷第 v期
ussu年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²qv
¤µ¦«qoussu
表 t 实验因素水平表
试验号
Α含醇量
s
xs %
{s %
Β提取方法
热浸
渗漉
超声
Χ提取时间
短
中
长
∆ 溶媒用量
少量
中量
大量
t tks otss ε l tk热浸l tkt «l tk w qzyu l
u tks ous ε l uk渗漉l uktu «l ukv{ qs|x l
v tks ous ε l vk超声l vkys °¬±l vktw qu{y l
w ukxs ozs ε l tk热浸l uky «l vktw qu{yl
x ukxs ous ε l uk渗漉l vkuw «l tkt| qsw{ l
y ukxs ous ε l vk超声l tktx °¬±l uk| qxuy l
z vk{s oxs ε l tk热浸l vktu «l uk| qxuy l
{ vk{s ous ε l uk渗漉l tky «l vkxz qtwv l
| vk{s ous ε l vk超声l ukvs °¬±l tk w qzyu l
氟舒松内标液 t qs °o用该样品提取浓度的乙醇定
容至刻度 o摇匀 o微孔滤膜ks qwx Λ°l过滤 o采用高效
液相色谱法测定≈x ∀ ⁄≥ 柱 w qy °° ≅ uxs °°kx
Λ° l o流动相乙腈2水2四氢呋喃2冰醋酸kw{ΒxuΒtΒ
s qsxl o流速为 t qu °#°¬±p t o检测波长为 uux ±° ∀
u种生物碱标准曲线 }吴茱萸碱 Ψ s . styt n
ty .vsv{ Χ, ρ s .|||{ ,吴茱萸次碱 Ψ s .ssuw n
{ .||s| Χ, ρ s q|||{ o在 s qssu ∗ s qs{ °ª#°p t线
性关系良好 ∀方法精密度 }吴茱萸碱 ≥⁄ u qx{ h o
吴茱萸次碱 ≥⁄ v q|v h ∀方法稳定性 }吴茱萸碱
和吴茱萸次碱的样品供试溶液在至少 t|w «内稳
定 o吴茱萸碱 ≥⁄ w q|v h o吴茱萸碱 ≥⁄
w quy h ∀方法回收率 }吴茱萸碱为 |y qtz h o ≥⁄
t qvv h o吴茱萸次碱为 |{ qus h o ≥⁄ w qxy h ∀样
品测定结果见表 u !表 w ∀
2 q2 q2 总有机酸含量 取吴茱萸 !木瓜 !茱萸汤提
取物适量 o加蒸馏水适量 !酚酞指示液 v滴 o用 s qst
°²¯#pt氢氧化钠溶液滴定至终点 o每 t °氢氧化
钠溶液相当于 s qysuz °ª枸橼酸≈y ∀方法回收率为
|y q|v h o ≥⁄ s q|s h ∀测定结果见表 u !表 w ∀
2 q2 q3 黄酮类成分含量 取吴茱萸 !木瓜 !茱萸汤
提取物适量 o按 t||x年版5中国药典6一部槐米项下
操作 o采用分光光度法测定≈y o以芦丁为对照品 o在
xsv ±° 波长处测定 ∀标准曲线为 }Α s .stxt n
ts .zywv Χ, ρ s q|||{ o在 s ∗ s qsw{ °ª#°p t线性
关系良好 ∀方法精密度 ≥⁄ s qty h ∀稳定性实
验 o该样品供试液在 xx °¬±内稳定 o ≥⁄ u qt| h ∀
方法回收率为 |{ qux h o ≥⁄ s qws h ∀样品测定结
果见表 u ∀
用以上方法测定吴茱萸药材各成分含量为每克
药材 }吴茱萸碱 u qvv|x °ªo吴茱萸次碱 u qvyu{ °ªo
总有机酸 u{ qsxsz °ªo黄酮类成分 ttz q|u|{ °ª~木
瓜药材各成分含量为每克药材 }总有机酸 ts{ q{zxz
°ªo黄酮类成分 ux qxtyu °ª∀
表 u 茱萸汤提取工艺的正交试验数据 h
实验号 吴茱萸碱 吴茱萸次碱 总有机酸 黄酮类
t v q|u x qus zu qv| xw qzt
u s s |y qxv ux qsz
v u qzz z qz| y{ qwz uv qux
w zz qwt zy qtx {| qsv || qtw
x xz qst xu qxu {t qu| |u qxz
y xz qs| yv qv| wu q{{ vx qxw
z z| qyt |{ qvu wt q|s yv qux
{ {{ qz{ |{ q|s y{ qzy wx qzz
| xs qtx xu qzu vw qy{ uu q|t
注 }≠ 每个数据为复方药材提取物 u次平行实验平均值 测
定不出以 s记
2 q3 数据处理
实验结果经直观分析和方差分析 o得到各个以
单一成分含量为指标优选的提取工艺 o见表 v o再用
综合平衡法进行全面分析 o得到以 w种成分含量为
指标优选的提取工艺 Αu Βt Χv ∆v o即 xs h 乙醇 o热
浸法kzs ε l o用量大k每公斤药材 tw qu{y l o提取
tu «∀
表 v 各指标实验结果以直观分析和方差分析
优选出的提取工艺
指标成分 优选出的提取工艺
吴茱萸碱 Αv ∆v Βt Χtt)
吴茱萸次碱 Αv ∆v Βt Χt
总有机酸 Βu Αt Χu ∆v
总黄酮 Βu Αt ∆t Χv
注 : ≠按因素对提取影响的显著性由大到小顺序排列 t)在以吴
茱萸碱成分转移率为指标时 , Χ因素对提取影响不显著
2 q4 验证实验
按优选工艺进行重复验证实验 o测定结果与理
论推测值对比 o见表 w ∀
表 w 茱萸汤验证实验结果
指标成分 样品含量r h 理论推测值r h
吴茱萸碱 zy qxx zx qwz
吴茱萸次碱 zv qyx zx qvv
总有机酸 zt quw yz qtz
总黄酮 |x qsw || qv|
注 }样品转移率为复方药材提取物 u次平行实验平均值 o理论推
测值为复方药材提取物的理论转移率
3 讨论
3 q1 按照优选出的提取条件经验证实验得到的提
#v{t#
第 uz卷第 v期
ussu年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²qv
¤µ¦«qoussu
取物 o测定各指标成分实际提取量 o与理论推测值提
取量对比发现 o茱萸汤指标成分实际提取的测定值
与理论推测值相差均小于 x h o即理论值与实际测
定值相差不超过 x h o因此认为所优选的提取工艺
比较可靠 ∀从实际提取率看 o复方的 w种指标均大
于 zs h o即按此工艺能将各种不同性质成分 zs h以
上提取出来 ~而汤剂k正交表的 t号实验l除了总有
机酸提取率较高达到了 zs h以上 o生物碱提取率均
低于 y h o黄酮类成分低于 xx h ∀因此 o按此优选的
提取工艺能将更多有效成分提取出来 o达到了优选
目的 ∀所考察的因素除提取时间对吴茱萸碱成分转
移率影响不显著外 o其余因素均为显著因素 ∀
3 q2 吴茱萸碱和吴茱萸次碱为吴茱萸所含主要生
物碱 o其化学 !药理研究进行得较充分 o有比较成熟
的含量测定方法 ∀在本实验测定中选择 °≤ 测定
吴茱萸碱和吴茱萸次碱含量 o测定结果准确 !稳定 !
可靠 o较之总生物碱的提取与测定 o简化了操作步
骤 o降低了误差 o可作为茱萸汤制剂的质量控制方法
之一 ∀ 5中国药典6规定木瓜药材的质量鉴定有/ ³
值为 v ∗ w0的要求 o推测木瓜的生理活性与其酸性
物质密切相关 o而其酸味主要来源于所含有机酸 o由
于有机酸已知和潜在的生理活性 o选择总有机酸为
测评指标是可行的 ∀黄酮类成分也为具有明显生理
活性的一类有机成分 ∀ 5中国药典6规定了以芦丁为
对照品的黄酮类成分的分光光度测定方法 ∀本实验
经过证实 o其显色反应在 xss ±°附近用分光光度法
测定无干扰 o可直接应用 o测定准确而稳定 o也可作
为茱萸汤的质量控制方法之一 ∀
目前 o普遍认为制剂以单一成分为质控指标存
在局限性 ∀以多指标控制和评价中药制剂质量 o是
保证制剂与药效统一的更合理方法 ∀将这 w个指标
用综合平衡法转化为单指标优选提取工艺和作为质
控标准 o更科学也较全面 ∀
3 q3 由于指标的增多 o实验次数大量增加 o选择活
动水平的正交设计安排实验 o以多指标综合平衡法
优选复方的提取工艺 o既具有均衡分散 !整齐可比的
正交性 o又灵活针对不同因素设置水平 o在减少实验
次数的同时 o还能与原汤剂的指标成分变化做对照 ∀
3 q4 总有机酸含量测定方法学研究中 o为避免提取
物本身的颜色对滴定终点的干扰 o将测定样品适当
稀释 o相应地将 s qt °²¯#pt氢氧化钠溶液滴定改为
用 s qst °²¯#pt氢氧化钠溶液滴定 o才取得样品测
定数据 ∀本法虽然简便 o误差却较大 o如果能以几个
主要有机酸成分取代总有机酸为指标可能更合理 ∀
≈参考文献
≈t 林 青 o付文卫 o李 江 q苏长史茱萸汤的复方化学研究 q贵阳
中医学院学报 ousss ouuktl }xz q
≈u 李 江 q茱萸汤不同比例配伍及各组方镇痛抗炎作用比较 q成
都中医药大学学报 ot||y ot|k增刊l }vt q
≈v 李 江 o邱德文 o隋艳华 q茱萸汤对猫急性实验性心肌缺血的保
护作用 q贵阳中医学院学报 ot||{ ouskvl }xv q
≈w 北京大学数学力学系概率统计组 q正交设计法 q石油化学工业
出版社 ot|zy qyt q
≈x 赵冬梅 o张 英 o毕开顺 q吴茱萸汤不同配伍情况下生物碱含量
的 °2°≤ 测定 q药物分析杂志 ot||| ot|ktl }ty q
≈y 薛玉梅 o黄 萍 o裴月梅 q木瓜中有机酸和黄酮类成分的含量
测定 q基层中药杂志 ot||w o{kwl }uz q
≈责任编辑 李 禾
维 ≤ 银翘片中维生素 ≤ 含量的
中红外漫反射光谱技术定量分析研究
程存归 o方克鸣
k浙江师范大学 生命与环境科学学院 o浙江 金华 vutsswl
≈摘要 目的 }建立维 ≤ 银翘片中维生素 ≤ 的含量的检测方法 ∀方法 }采用中红外漫反射定量分析技术 o测定
了维 ≤ 银翘片中维生素 ≤ 的含量 ∀结果 }可直接测定出样品中维生素 ≤ 的含量 o且吸收度与维生素 ≤ 的浓度成良
≈收稿日期 usst2s|2sx
≈通讯作者 电话 }ksxz|luvuy{uy
#w{t#
第 uz卷第 v期
ussu年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²qv
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