全 文 ：·2490· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 17 期 2014 年 9 月

• 药理与临床 •
吴茱萸汤外翻肠囊吸收成分与原药中各成分相关关系研究
许永崧，潘学强，龚慕辛*，贺 蕊，卢旭然，尚雅文
首都医科大学中医药学院，北京 100069
摘 要：目的 研究吴茱萸汤中 9 种成分的量对其自身吸收进入外翻肠囊成分量的影响，以指导吴茱萸汤改善偏头痛模型鼠
指标的样品的调配。方法 采用大鼠外翻肠囊模型获取 10 种吴茱萸汤吸收样品，以 HPLC-DAD 对吴茱萸汤及外翻肠囊吸
收样品中 9 种成分进行定量、半定量，得到各成分在吴茱萸汤中的量以及在肠囊中的累积吸收量。用偏最小二乘回归法（partial
least squares regression，PLSR）对吴茱萸汤中各成分的量及总体吸收量进行相关分析。结果 在实验质量浓度范围内，柠檬
黄素-3-O-β-D-葡萄糖苷、人参皂苷 Rg1、6-姜辣素、吴茱萸苦素在吴茱萸汤中质量浓度越高，吸收入肠囊的总量越多；而人
参皂苷 Re、人参皂苷 Rb1、柠檬苦素、吴茱萸碱、吴茱萸次碱则相反。成分之间对吸收的相互影响关系十分复杂。结论 在
根据吸收谱-效相关分析结果调配吴茱萸汤样品时，应考虑成分吸收的相互影响关系以达到较佳疗效。
关键词：吴茱萸汤；外翻肠囊；吸收；偏最小二乘回归；相关分析
中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2014)17 - 2490 - 09
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2014.17.013
Correlation between absorption ingredients in Wuzhuyu Decoction and uptake
amount in everted intestinal sac
XU Yong-song, PAN Xue-qiang, GONG Mu-xin, HE Rui, LU Xu-ran, SHANG Ya-wen
Capital Medical University School of Traditional Chinese Medicine, Beijing 100069, China
Abstract: Objective To explore the influence of the contents of nine ingredients in Wuzhuyu decoction on its own uptake amount into
the everted intestinal sac, in order to blend Wuzhuyu decoction samples to improve the index of migraine model rats. Methods The
everted intestinal sac model was established to determine the absorption samples of 10 kinds of Wuzhuyu decoction. HPLC-DAD method
was used to analyze the contents of nine ingredients in Wuzhuyu decoction and absorption samples quantitatively and semi-quantitatively.
The partial least squares regression method was used to correlate the contents in the decoction and the total absorption quantity of nine
ingredients. Results In the experimental concentration range, the higher the concentration of limocitrin-3-O-β-D-glucoside, ginsenoside
Rg1, 6-gingerol, and ruteavin in the decoction were, the more they were absorbed into the intestine sac, while ginsenosides Re, Rb1,
limonin, evodiamine, and rutaecarpine were contrary. The interaction of different ingredients on each other’s absorption was complicated.
Conclusion The above relationship should be considered to obtain the satisfactory samples of Wuzhuyu decoction.
Key words: Wuzhuyu decoction; everted intestinal sac; absorption; partial least squares regression; correlation analysis

吴茱萸汤出自《伤寒论》，历代用其治疗虚寒性
偏头痛。前期研究采用分析外翻肠囊吸收成分与偏
头痛模型小鼠药效指标之间关系的吸收谱-效相关
方法，发现了影响药效指标的效应成分[1]，并拟以
此指导吴茱萸汤各成分的调配以达到更佳疗效。但
在比较吴茱萸汤吸收谱-效分析结果和药效的药物
谱-效分析结果时发现，少数成分在不同谱-效分析
中产生作用的结果相反，如在药物谱-效相关研究
中，吴茱萸碱的量越高，越有利于偏头痛模型组小
鼠脑组织 5-羟色胺（5-HT）量的升高，而在吸收谱-
效相关研究中则相反，即吸收量越高，越不利于
5-HT 量的改善[1]。考虑可能是吸收环节的影响，因
此本实验研究各成分质量浓度对其本身吸收入肠囊
量的影响，探究各成分间对吸收的相互影响，为吴

收稿日期：2014-01-07
基金项目：北京市教育委员会科技计划面上项目（SQKM201210025011）；首都中医药研究专项重点课题（13ZY02）
作者简介：许永崧，硕士研究生。Tel: 13501135486 E-mail: komatuxys@foxmail.com
*通信作者 龚慕辛，博士，博士生导师，从事中药复方物质基础研究。Tel: (010)83911632 E-mail: gongmuxin@126.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 17 期 2014 年 9 月 ·2491·

茱萸汤药效物质成分调配提供参考。
1 材料
1.1 仪器
ALC-M 组织-器官恒温水浴系统（上海奥尔科特
生物技术有限公司）；Agilent 1100 系列高效液相色
谱系统，Chemstation 色谱工作站，含四元泵、自动
进样器、DAD 检测器（Agilent 公司）；MG—2200
氮吹仪（EYELA公司）；3K15低温高速离心机（Sigma
公司）；DV215CD 电子分析天平（Sartorius 公司）；
KQ—250 超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公
司）；Thermo 超低温冰箱（Fisher公司，美国）；ALPHA
1—2 PLUS 冷冻干燥机（Christ，德国）；ZH—2 涡
旋混合器（天津药典标准仪器厂）；SY—601 超级恒
温水浴（天津市欧诺仪器仪表有限公司）。
1.2 药品与试剂
吴茱萸碱（批号 110801-200908，质量分数
99.7%）、吴茱萸次碱（批号 110801-201207，质量
分数 99.4%）、柠檬苦素（批号 110800-201205，质
量分数 88.5%）、人参皂苷 Rg1（批号 110703-201128，
质 量 分 数 93.4% ）、 人 参 皂 苷 Re （ 批 号
110754-201123，质量分数 89.1%）、人参皂苷 Rb1
（批号 110704-201223，质量分数 95.9%）、6-姜辣素
（批号 111833-201102，质量分数 98.6%），以上对照
品购自中国食品药品检定研究院；柠檬黄素 -
3-O-β-D-葡萄糖苷（自制，质量分数≥95%）；乙腈
（色谱纯）、甲醇（色谱纯）购自 Fisher 公司。
吴茱萸、人参、生姜、大枣等饮片均由首都医
科大学中医药学院中药资源教研室罗容副教授鉴
定，符合《中国药典》2010 年版各药项下规定。
1.3 实验动物
Wistar 大鼠，雄性，体质量（300±20）g，由
北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证
号 SCXK（京）2012-0001。
2 方法
2.1 吴茱萸汤样品溶液的制备
将吴茱萸汤组方各药味配伍，按照文献方法[2]
进行煎煮，药液减压浓缩并干燥成干膏，共煎煮 10
种汤（编号 1～10）以及各缺味阴性吴茱萸汤。
取吴茱萸汤干膏适量，精密称定（约相当于生
药量 3.5 g），加入分析甲醇 20 mL 超声 30 min，滤
过，滤液蒸干，残渣加色谱甲醇溶解，定容至 5 mL，
用 0.45 μm 针头滤器滤过，取 10 μL 进样，测定各
成分。
2.2 混合对照品溶液的制备
精密称取各对照品，用甲醇超声溶解，定容，
作为混合对照品母液。各对照品的质量浓度如下：
柠檬黄素-3-O-β-D-葡萄糖苷 0.152 mg/mL、人参皂
苷 Rg1 1.682 mg/mL、人参皂苷 Re 0.542 mg/mL、
人参皂苷Rb1 1.134 mg/mL、柠檬苦素1.846 mg/mL、
6-姜辣素 0.258 2 mg/mL、吴茱萸碱 0.092 mg/mL、
吴茱萸次碱 0.044 mg/mL。
2.3 Tyrode 缓冲液的配制
按照文献方法[3]配制。
2.4 色谱条件
Kromasil-C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），
甲醇-乙腈-水梯度洗脱（0～5 min，1∶16∶83；5～
10 min，1∶16∶83～1∶19∶80；10～45 min，1∶
19∶80～4∶19∶77；45～55 min，4∶19∶77～4∶
25∶71；55～65 min，4∶25∶71～4∶34∶62；65～
110 min，4∶34∶62），柱温 30 ℃，检测波长 203
nm，体积流量 1 mL/min，进样量 10 μL。
2.5 吴茱萸汤样品测定的方法学考察
2.5.1 专属性试验 比较混合对照品溶液、吴茱萸
汤样品溶液以及各缺味阴性样品溶液的色谱行为。
在“2.4”项色谱条件下，8 种对照品峰形良好，各
峰分离度高，各阴性对照液和吴茱萸汤中其他成分
对其无干扰，说明方法专属性较好，结果见图 1。


A-吴茱萸阴性对照液 B-人参阴性对照液 C-生姜阴性对照液 D-大
枣阴性对照液 E-吴茱萸汤 F-混合对照品 1-柠檬黄素-3-O-β-D-
葡萄糖苷 2-人参皂苷Rg1 3-人参皂苷Re 4-人参皂苷Rb1 5-柠檬
苦素 6-6-姜辣素 7-吴茱萸碱 8-吴茱萸次碱 9-吴茱萸苦素
A-Evodiae Rutaecarpae Fructus negative control solution B-ginseng
negative control solution C-Zingiberis Recens Rhizoma negative control
solution D-Jujubae Fructus negative control solution E-Wuzhuyu
decoction F-mixed solution of reference substances 1-limocitrin-3-O-
β-D-glucoside 2-ginsenoside Rg1 3-ginsenoside Re 4-ginsenoside
Rb1 5-limonin 6-6-gingerol 7-evodiamine 8-rutaecarpine 9-ruteavin
图 1 吴茱萸汤专属性 HPLC 图
Fig. 1 HPLC of specificity for Wuzhuyu Decoction
20 40 60 80 100 120
t / min
1 2
3
4
5
6
7 8
9 FE
D
C
B
A
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2.5.2 标准曲线的制备 取各对照品，按文献方法[1]
以甲醇配制成不同浓度的混合对照品溶液，用 0.45
μm针头滤器滤过，进样 10 μL。线性关系考察结果
见表 1。
2.5.3 精密度试验 精密吸取同一对照品溶液 10
μL，重复进样 6次，测定各成分，计算 RSD，结果
均小于 3%，符合分析要求。
2.5.4 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液 10
μL，分别于 0、3、6、9、12 h 进样，测定，计算
RSD，结果均小于 5%，说明在 12 h内样品稳定，
符合分析要求。
2.5.5 重复性试验 取3号汤的干膏6份，每份0.90
g，精密称定，按“2.1”项下方法制成供试品溶液，
进样 10 μL，测定，计算 RSD。结果均小于 5%，符
合分析要求。
2.5.6 加样回收率试验 取 3号汤的干膏 6份，每
份 0.45 g，精密称定，分别加入 8种对照品适量，
按“2.1”项下方法制成供试品溶液，进样 10 μL，
测定，计算回收率和 RSD。各成分回收率在
97.03%～104.7%，RSD均小于 5%，符合分析要求。
表 1 吴茱萸汤中 8种成分的线性关系考察
Table 1 Linear relationship of eight ingredients in Wuzhuyu Decoction
成分 回归方程 r 线性范围 / (μg·mL−1)
柠檬黄素-3-O-β-D-葡萄糖苷 Y＝33 742 X－95.59 0.999 5 19.00～152.00
人参皂苷 Rg1 Y＝2 737 X＋32.69 0.999 5 210.60～1 682.00
人参皂苷 Re Y＝2 999 X－10.01 0.999 5 67.90～542.00
人参皂苷 Rb1 Y＝2 460 X＋12.81 0.999 5 142.00～1 134.00
柠檬苦素 Y＝6 970 X－32.03 0.999 5 57.80～1 846.00
6-姜辣素 Y＝66 623 X－153.0 0.999 5 14.10～258.20
吴茱萸碱 Y＝41 984 X－18.26 0.999 5 11.50～92.00
吴茱萸次碱 Y＝75 447 X－65.67 0.999 5 5.50～44.00

2.6 外翻肠囊吸收样品溶液的制备
按文献方法[3]于给药后 15、30、45、60、90 min
（空肠），15、30、45、60、90、120 min（回肠）分
别取样，每次 200 μL，同时补充同体积 37 ℃预热
的台氏液。将空肠前 4个时间点样品混合，回肠前
5 个时间点样品混合，最后 1 个时间点样品单独放
置，−20 ℃保存。取样结束后，测量肠囊内剩余药
液体积。按文献方法[3]处理样品，冷冻干燥后甲醇
超声提取，离心后氮气吹干，以甲醇复溶后，取 20
μL进样，测定。
2.7 外翻肠囊吸收样品溶液测定[1]
外翻肠囊吸收样品的测定参考文献方法[1]，方
法专属性考察结果见图 2，线性关系考察结果见
表 2，准确度试验、精密度试验、稳定性试验、
萃取回收率试验，实验结果均符合生物样品分析
要求。
2.8 累积吸收量计算方法
药物累积吸收量按公式 Q＝C1×V1＋C2×0.1×
(V＋V2) / V计算，Q为空肠90 min内或回肠120 min
内药物的累积吸收量，C1为混合样品质量浓度，V1
为混合样品体积，C2为最后 1个时间点样品质量浓



a-空白 Tyrode 液 b-大枣阴性对照液 c-生姜阴性对照液 d-人
参阴性对照液 e-吴茱萸阴性对照液 f-吴茱萸汤 g-混合对照品
1-柠檬黄素-3-O-β-D-葡萄糖苷 2-人参皂苷 Rg1 3-人参皂苷 Re
4-人参皂苷 Rb1 5-柠檬苦素 6-6-姜辣素 7-吴茱萸碱 8-吴茱
萸次碱 9-吴茱萸苦素
a-blank Tyrode’s solution b-Jujubae Fructus control solution
c-Zingiberis Recens Rhizoma negative control solution d-ginseng
negative control solution e-Evodiae Rutaecarpae Fructus negative
control solution f-Wuzhuyu decoction g-mixed solution of reference
substances 1-limocitrin-3-O-β-D-glucoside 2-ginsenoside Rg1
3-ginsenoside Re 4-ginsenoside Rb1 5-limonin 6-6-gingerol
7-evodiamine 8-rutaecarpine 9-ruteavin
图 2 外翻肠囊吸收样品检测专属性 HPLC图
Fig. 2 HPLC of specificity for absorption samples in
everted intestinal sacs
20 40 60 80 100 120
t / min
2 1 3
4 5
6
7 8
9
g
f
e
d
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b
a

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度，V2 为肠囊内剩余药液体积，V 为每次取样体积
200 μL，肠囊总体吸收量为空肠与回肠吸收量之和。
3 结果与分析
3.1 10 种吴茱萸汤中各成分测定结果
结果见表 3。
3.2 10 种吴茱萸汤外翻肠囊样品累积吸收量比较
按照“2.8”中公式计算累积吸收量，结果见表
4。结果显示柠檬黄素-3-O-β-D-葡萄糖苷、人参皂
苷 Rg1、人参皂苷 Rb1、吴茱萸苦素、柠檬苦素及
6-姜辣素在不同质量浓度时均可进入空肠或回肠；
吴茱萸碱在 3 号汤组空肠和回肠中均未检出，在其
他汤组的空肠或回肠中检出；人参皂苷 Re 在 10 号
汤组空肠和回肠中均未检出；吴茱萸次碱仅在 1 号
汤组空肠及 2 号汤组回肠中检出。
表 2 吸收样品中 8 种成分的线性关系考察
Table 2 Linear relationship of eight ingredients in absorption samples
成分 回归方程 r 线性范围 / (μg·mL−1)
柠檬黄素-3-O-β-D-葡萄糖苷 Y＝54 891 X－219.6 0.999 5 11.98～65.00
人参皂苷 Rg1 Y＝4 231 X＋22.05 0.999 0 54.93～298.00
人参皂苷 Re Y＝5 812 X－45.89 0.999 5 44.97～244.00
人参皂苷 Rb1 Y＝5 170 X－33.91 0.999 5 52.35～284.00
柠檬苦素 Y＝12 427 X－8.325 0.999 5 30.97～168.00
6-姜辣素 Y＝17 436 X－159.0 0.999 5 5.53～30.00
吴茱萸碱 Y＝14 981 X－71.73 0.999 5 3.69～20.00
吴茱萸次碱 Y＝90 195 X－62.69 0.999 0 3.871～21.000
表 3 10 种吴茱萸汤中 9 种成分测定结果
Table 3 Detemination of nine ingredients in 10 kinds of Wuzhuyu Decoction
ρ / (mg·mL−1)
汤号 柠檬黄素-3-O-
β-D-葡萄糖苷 人参皂苷 Rg1 人参皂苷 Re 人参皂苷 Rb1 柠檬苦素 6-姜辣素 吴茱萸碱 吴茱萸次碱
吴茱萸苦素#
1 0.426 5 1.233 6 0.704 7 1.638 8 0.345 5 0.098 6 0.105 1 0.070 6 2 591.9
2 0.069 9 0.352 9 0.194 9 0.533 5 1.114 8 0.088 0 0.162 2 0.027 0 7 976.3
3 0.066 0 0.219 9 0.091 2 0.122 1 0.529 6 0.022 0 0.026 8 0.008 3 409.2
4 0.043 7 0.252 4 0.099 6 0.239 8 0.763 6 0.032 4 0.028 6 0.006 6 3 997.9
5 0.282 8 0.798 1 0.347 3 0.859 6 2.522 5 0.156 3 0.312 5 0.065 4 23 990.0
6 0.340 6 0.476 1 0.221 0 0.521 3 0.222 5 0.056 9 0.095 0 0.042 9 1 380.0
7 0.042 4 0.208 9 0.129 8 0.151 6 0.455 2 0.046 8 0.085 2 0.011 6 3 008.9
8 0.383 5 0.884 7 0.548 9 1.636 2 5.149 2 0.298 6 0.179 0 0.041 8 24 909.4
9 0.108 9 0.346 8 0.243 4 0.690 6 1.658 0 0.048 1 0.061 4 0.014 7 7 805.2
10 0.122 0 0.399 4 0.265 4 0.467 6 0.673 3 0.067 9 0.154 4 0.049 3 6 289.4
#经 LC-MS、HPLC-DAD 确定为吴茱萸苦素，因无对照品，以峰面积进行半定量（表 4 同）
#was identified as ruteavine with the method of LC-MS and HPLC-DAD, and the peak area was applied to semi-quantitative analysis for lacking substance
(The same in Table 4)
3.3 相关关系分析结果
吴茱萸汤中成分与外翻肠囊累积吸收量的偏
最小二乘回归（PLSR）结果见图 3。结果中相关系
数为正表示吴茱萸汤中成分的量越高外翻肠囊吸
收量（空肠、回肠、总体）越大，负数反之。
从结果可知，在空肠，柠檬黄素-3-O-β-D-葡
萄糖苷、人参皂苷 Rg1、吴茱萸苦素、柠檬苦素、
6-姜辣素在汤中的量越高，吸收入肠囊的量越大，
人参皂苷 Re、人参皂苷 Rb1、吴茱萸碱、吴茱萸
次碱反之。在回肠，柠檬黄素-3-O-β-D-葡萄糖苷、
人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Re、吴茱萸苦素、6-姜
辣素、吴茱萸碱在汤中的量越高，吸收入肠囊的
量越大，人参皂苷 Rb1、柠檬苦素、吴茱萸次碱反
之。就总体吸收量而言，柠檬黄素-3-O-β-D-葡萄
·2494· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 17 期 2014 年 9 月

表 4 10 种吴茱萸汤中 9 种成分的外翻肠囊吸收量 ( ± = 6x s , n )
Table 4 Absorption amounts of nine ingredients in 10 kinds of Wuzhuyu Decoction in everted intestinal sacs ( ± = 6x s , n )
Q / mg
汤号 柠檬黄素-3-O-
β-D-葡萄糖苷 人参皂苷 Rg1 人参皂苷 Re 人参皂苷 Rb1 柠檬苦素 6-姜辣素 吴茱萸碱 吴茱萸次碱
吴茱萸苦素
1 0.028 8±0.008 6 0.107 9±0.034 5 0.055 5±0.017 5 0.025 1±0.010 0 0.012 7±0.004 4 0.043 0±0.013 7 0.006 4±0.011 4 0.000 4±0.000 7 506.4±193.3
2 0.015 0±0.005 2 0.046 1±0.027 2 0.023 3±0.014 4 0.050 9±0.018 4 0.064 8±0.018 1 0.067 0±0.017 4 0 0 1 164.8±236.7
3 0.039 6±0.014 0 0.201 4±0.103 9 0.061 2±0.029 0 0.063 6±0.022 3 0.078 7±0.035 5 0.083 7±0.019 4 0 0 246.9± 98.1
4 0.020 3±0.006 7 0.015 8±0.026 1 0.007 7±0.018 8 0.110 1±0.075 6 0.057 7±0.021 3 0.131 5±0.040 5 0.024 7±0.026 8 0 1 097.4±183.4
5 0.032 5±0.007 3 0.036 7±0.015 7 0.016 0±0.007 4 0.040 0±0.026 9 0.054 1±0.009 3 0.050 5±0.007 8 0.008 4±0.006 7 0 860.7±296.9
6 0.030 3±0.018 1 0.066 1±0.012 3 0.031 9±0.007 6 0.496 0±0.036 7 0.008 6±0.001 6 0.026 9±0.005 1 0 0 262.9± 60.3
7 0.023 7±0.005 2 0.058 7±0.039 5 0.002 9±0.007 1 0.069 9±0.017 8 0.087 4±0.024 4 0.071 2±0.024 6 0.003 0±0.003 6 0 898.5±203.5
8 0.022 6±0.009 3 0.017 2±0.019 6 0.002 7±0.006 7 0.027 6±0.008 7 0.058 8±0.017 0 0.065 2±0.023 1 0 0 820.0±163.5
9 0.023 1±0.016 8 0.012 7±0.019 5 0.004 7±0.010 6 0.035 5±0.015 8 0.076 2±0.023 2 0.075 7±0.022 4 0.002 6±0.005 8 0 1 117.2±213.0
空肠
10 0.012 0±0.002 3 0.018 4±0.032 1 0 0.198 3±0.047 0 0.034 7±0.019 7 0.054 4±0.025 4 0.008 6±0.021 1 0 713.2±699.7
1 0.042 9±0.007 7 0.179 6±0.027 0 0.087 2±0.016 7 0.039 5±0.008 2 0.019 6±0.006 2 0.075 4±0.010 2 0 0 544.1± 95.4
2 0.017 7±0.004 2 0.086 1±0.042 0 0.048 0±0.015 7 0.051 2±0.016 6 0.094 2±0.026 6 0.092 6±0.017 5 0.005 8±0.013 0 0.000 9±0.002 0 1 445.2±441.4
3 0.030 9±0.007 9 0.288 9±0.071 6 0.064 6±0.017 5 0.073 3±0.033 9 0.076 0±0.017 8 0.101 4±0.023 1 0 0 437.7±169.7
4 0.040 8±0.012 9 0.016 7±0.040 8 0.007 8±0.019 1 0.082 2±0.028 0 0.135 7±0.045 3 0.207 1±0.057 5 0.004 1±0.010 1 0 1 407.2±491.2
5 0.043 5±0.006 0 0.054 0±0.049 6 0.017 1±0.010 1 0.052 5±0.027 7 0.077 3±0.016 5 0.081 7±0.017 3 0.017 6±0.009 9 0 1 192.6±326.7
6 0.024 6±0.003 7 0.077 7±0.008 5 0.037 9±0.004 1 0.032 9±0.015 6 0.010 6±0.003 1 0.034 2±0.003 5 0.001 6±0.002 5 0 369.3±116.0
7 0.032 9±0.011 6 0.092 4±0.067 2 0.036 2±0.033 3 0.086 4±0.023 9 0.112 5±0.029 2 0.088 6±0.024 6 0.024 7±0.016 3 0 982.4±210.0
8 0.034 3±0.008 0 0.049 7±0.029 7 0.026 2±0.021 2 0.044 2±0.019 5 0.083 1±0.021 0 0.087 4±0.031 7 0.004 8±0.008 0 0 1 245.4±195.9
9 0.036 3±0.015 4 0.106 6±0.071 0 0.058 2±0.028 3 0.096 0±0.054 5 0.162 9±0.056 7 0.144 3±0.039 5 0.010 5±0.016 8 0 1 643.2±285.7
回肠
10 0.008 6±0.002 7 0.028 3±0.047 6 0 0.145 9±0.096 2 0.035 7±0.013 3 0.040 8±0.034 8 0 0 931.1±543.7
1 0.071 7±0.014 1 0.287 5±0.045 8 0.142 7±0.026 6 0.064 6±0.017 9 0.032 2±0.010 3 0.118 4±0.021 8 0.006 4±0.011 4 0.000 4±0.000 7 1 050.5±158.8
2 0.032 7±0.010 1 0.132 2±0.070 7 0.071 2±0.032 1 0.102 1±0.038 6 0.159 0±0.055 2 0.159 6±0.045 6 0.005 8±0.011 9 0.000 9±0.001 8 2 610.0±720.0
3 0.070 6±0.012 7 0.490 3±0.138 5 0.125 8±0.030 9 0.137 0±0.036 1 0.154 7±0.034 9 0.185 1±0.029 5 0 0 684.6±193.0
4 0.061 1±0.018 3 0.032 5±0.041 4 0.015 5±0.024 0 0.192 3±0.084 0 0.193 5±0.056 9 0.338 6±0.090 4 0.028 8±0.024 6 0 2 504.6±542.6
5 0.076 0±0.009 3 0.090 7±0.058 9 0.033 2±0.016 5 0.092 5±0.031 1 0.131 4±0.011 6 0.132 2±0.024 1 0.026 0±0.014 7 0. 2 053.3±408.8
6 0.054 9±0.017 1 0.143 8±0.014 9 0.069 7±0.009 7 0.082 5±0.048 0 0.019 3±0.002 1 0.061 1±0.004 8 0.001 6±0.002 5 0 631.4±134.5
7 0.056 7±0.008 4 0.151 1±0.063 1 0.039 1±0.038 9 0.156 2±0.024 4 0.199 9±0.026 8 0.159 8±0.028 8 0.027 6±0.017 0 0 1 881.0±157.8
8 0.056 9±0.016 2 0.066 8±0.023 8 0.028 9±0.019 6 0.071 8±0.019 4 0.141 9±0.030 6 0.152 6±0.046 2 0.004 8±0.008 0 0 2 065.4±308.9
总体吸
收量
9 0.057 6±0.028 9 0.126 3±0.096 3 0.068 4±0.039 7 0.133 1±0.006 8 0.242 2±0.069 8 0.224 6±0.048 2 0.012 7±0.022 7 0 2 760.5±471.5
10 0.020 5±0.003 4 0.046 7±0.045 2 0 0.344 2±0.092 9 0.070 4±0.024 6 0.095 2±0.036 3 0.008 6±0.021 1 0 1 644.3±768.0


糖苷、人参皂苷 Rg1、6-姜辣素、吴茱萸苦素在汤
中的量越高，吸收入肠囊的量越大，人参皂苷 Re、
人参皂苷 Rb1、柠檬苦素、吴茱萸碱、吴茱萸次碱
反之。
4 讨论
4.1 柠檬黄素-3-O-β-D-葡萄糖苷和吴茱萸苦素
目前鲜有关于柠檬黄素-3-O-β-D-葡萄糖苷和
吴茱萸苦素口服吸收研究的报道。在本实验中，柠
檬黄素-3-O-β-D-葡萄糖苷（42.4～426.5 μg/mL）和
吴茱萸苦素在总体吸收量相关系数为正，推测其吸
收机制为被动扩散。
4.2 人参皂苷 Rg1
有文献报道[4]指出人参皂苷 Rg1 肠壁吸收机制
为被动扩散。龚慕辛等[3]研究发现，人参皂苷 Rg1
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45卷 第 17期 2014年 9月 ·2495·










1-柠檬黄素-3-O-β-D-葡萄糖苷 2-人参皂苷Rg1 3-人参皂苷Re 4-人参皂苷Rb1 5-柠檬苦素 6-6-姜辣素 7-吴茱萸碱 8-吴茱萸次碱 9-吴茱萸苦素
*代表该成分对相应成分影响正向作用排前 3位，#代表该成分对相应成分影响负向作用排前 3位
1-limocitrin-3-O-β-D-glucoside 2-ginsenoside Rg1 3-ginsenoside Re 4-ginsenoside Rb1 5-limonin 6-6-gingerol 7-evodiamine 8-rutaecarpine 9-ruteavin
*Top 3 positive effects on the corresponding components, # Top 3 negative effects on the corresponding components
图 3 吴茱萸汤 9种成分的量与肠囊吸收量的相关分析结果
Fig. 3 Related analysis of nine ingredients between Wuzhuyu Decoction and absorption amounts in everted intestinal sacs
在不同质量浓度（28.56、14.28、7.14 μg/mL）均可
进入肠囊，且给药质量浓度越大，人参皂苷 Rg1的吸
收量越大。但冯亮等[5]以大鼠在体肠循环实验研究人
参皂苷 Rg1的在体肠吸收动力学时发现，吸收速率常
数在低质量浓度（20 μg/mL）和中质量浓度（200
μg/mL）时相同，且大于高质量浓度（2 000 μg/mL）
时，认为其吸收机制可能存在主动转运或促进扩散。
本实验人参皂苷 Rg1（208.9～1 233.6 μg/mL）在总体
吸收量相关系数为正，说明人参皂苷 Rg1的肠吸收为
被动扩散。质量浓度不同是否对其吸收影响不同，其
单体和在复方中的吸收是否不同有待进一步证实。
有研究[4]表明人参皂苷 Rg1（75～750 μg/mL）
的吸收过程不受细胞膜外排载体的作用，不是 P-糖
蛋白（P-pg）的底物。但也有文献报道[6]指出，P-gp
抑制剂维拉帕米可增加人参皂苷 Rg1（100 μg/mL）
在鼠肺上皮细胞中的质量浓度，利用 Caco-2细胞模
型研究人参皂苷 Rg1对 P-gp 功能和表达的影响[7]，
发现高质量浓度（20 μg/mL）的人参皂苷 Rg1可通
过直接影响 P-gp外排作用而减少细胞内 P-gp底物
罗丹明-l23 的外排，增强罗丹明-l23 跨小肠上皮细
胞的转运；萨础拉等[8]以外翻肠囊模型研究三七皂
苷的吸收及 P-gp相互作用研究中发现人参皂苷Rg1
（300 μg/mL）具有明显的 P-gp底物转运特性及抑制
P-gp底物外排作用。以上研究说明人参皂苷 Rg1是
P-gp的底物，并抑制 P-gp。人参皂苷 Rg1是否通过
抑制 P-gp而增强自身的吸收，有待于进一步研究。
4.3 人参皂苷 Re
蒋杰等[9]发现人口服 300 mL生脉饮时，人参皂
苷 Re的药代动力学属于一级动力学吸收。水文波[10]
以外翻肠囊法研究三七提取物中 5种皂苷的小肠吸
收时也发现，人参皂苷 Re 的肠吸收属于一级动力
学过程，高质量浓度（0.31 μg/mL）给药时肠吸收
量明显增加。龚慕辛等[3]研究中同样发现人参皂苷
Re 的肠囊吸收量高质量浓度（147.8 μg/mL）＞中
质量浓度（73.9 μg/mL）＝低质量浓度（36.9 μg/mL）。
但从本实验的结果上看，人参皂苷 Re 在空肠及总
柠檬黄素-3-O-β-D-葡萄糖苷 人参皂苷 Rg1 人参皂苷 Re
人参皂苷 Rb1 柠檬苦素 6-姜辣素
吴茱萸次碱 吴茱萸苦素 吴茱萸碱
相
关
系
数

10.0
5.0
0.0
－5.0
－10.0

20.0
10.0
0.0
－10.0
－20.0
15.0
10.0
5.0
0.0
－5.0
－10.0
－15.0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 2 3 4 5 6 7 8 9
10.0
5.0
0.0
－5.0
－10.0
4.0
2.0
0.0
－2.0
－4.0
6.0
4.0
2.0
0.0
－2.0
－4.0
－6.0
10.0
5.0
0.0
－5.0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 2 3 4 5 6 7 8 9
15.0
10.0
5.0
0.0
－5.0
－10.0
－15.0
10.0
5.0
0.0
－5.0
－10.0

空肠
回肠
总体
1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 2 3 4 5 6 7 8 9
相
关
系
数

相
关
系
数

相
关
系
数

相
关
系
数

相
关
系
数

相
关
系
数

相
关
系
数

相
关
系
数

*
* **
**
*
* * ***
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·2496· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 17 期 2014 年 9 月

体吸收量的回归系数均为负值，在回肠的回归系数
为正值，但数值偏小，本实验中人参皂苷 Re 为
91.2～704.7 μg/mL，不排除有特殊吸收机制存在，
有待于进一步研究。
4.4 人参皂苷 Rb1
有文献报道[4]指出人参皂苷 Rb1 的肠壁吸收机
制为单纯的被动扩散，吸收过程不受细胞膜外排载
体的作用，而本研究结果有所不同，本实验中人参
皂苷 Rb1 质量浓度为 122.1～1 638.8 μg/mL，质量浓
度范围大，可能是研究结果不同的原因，不排除有
特殊吸收机制存在，有待于进一步研究。
有研究[8,11]表明人参皂苷 Rb1（30～300 μg/mL）
为 P-gp 的底物，能通过抑制 P-gp 的活性而提高人
参皂苷 Rb1的吸收。本实验结果似与上述结论不同，
有待进一步研究。
4.5 柠檬苦素
张秀云等[12]以原位肠灌流与 Caco-2 细胞研究
柠檬苦素的吸收机制时，发现原位灌流时浓度（4.0、
8.0、12.0 μg/mL）对柠檬苦素的吸收没有显著性影
响，在 Caco-2 细胞实验中发现当给药质量浓度大于
141.1 μg/mL 后，柠檬苦素的吸收存在饱和现象，
其吸收机制不是单纯扩散，可能为促进扩散。龚慕
辛等[3]的研究中发现，柠檬苦素在空肠肠囊吸收量
高质量浓度（480.9 μg/mL）＞中质量浓度（240.4
μg/mL）＞低质量浓度（120.2 μg/mL），而在回肠肠
囊吸收量为高质量浓度＞低质量浓度＞中质量浓
度，本实验汤中柠檬苦素的质量浓度为 222.5～
5 149.2 μg/mL，质量浓度范围大，可能是造成柠檬
苦素在空肠和回肠的吸收情况不同的原因。
有研究[12]认为 P-gp 抑制剂如维拉帕米能够显
著提高 Caco-2 细胞对柠檬苦素（141.1 μg/mL）的
吸收，柠檬苦素为 P-gp 的底物。另有文献报道[13]
指出柠檬苦素是一种强效 P-gp 抑制剂，在 9.4
μg/mL 时即可发挥作用，这可能是本研究发现柠檬
苦素能够促进人参皂苷 Rg1 吸收的原因。
4.6 6-姜辣素
龚慕辛等 [3]的研究中发现在不同质量浓度
（52.32、26.16、13.08 μg/mL）情况下其均能很快进
入肠囊，且随着给药浓度越大，肠囊的吸收量越大。
Nievergelt 等[14]以 Caco-2 细胞模型研究 6-姜辣素
（50 μg/mL）的吸收机制时发现为被动扩散，本实
验结果与其研究结果一致。
Nievergelt 等[14]还发现 6-姜辣素在浓度为 8.8
μg/mL 时，不管是单体还是混合物给药，对 P-gp
均不表现抑制作用，推测其不是 P-gp 的底物或者抑
制剂。但是，Zhang 等[15]同样以 Caco-2 细胞模型研
究 6-姜辣素的吸收机制时发现，6-姜辣素在 29.4、
73.6、147.2 μg/mL 时均对 P-gp 有抑制作用，这提
示药物的浓度不同，对 P-gp 的影响也有不同。本实
验吴茱萸汤中 6-姜辣素质量浓度为 22.0～298.6
μg/mL，推测对 P-gp 作用可能随浓度不同而不同，
这可能是 6-姜辣素对同为 P-gp 蛋白底物的柠檬苦
素、人参皂苷 Rg1 肠囊吸收影响不一致的原因。
4.7 吴茱萸碱
龚慕辛等[3]的研究发现，不同给药剂量、肠段
对吴茱萸碱的吸收有很大影响：吴茱萸碱高质量浓
度（626.4 μg/mL）时在空肠和回肠中均未检出，中
质量浓度（313.2 μg/mL）仅在空肠的 150 min 后检
出，而低质量浓度（156.6 μg/mL）却在 60 min 后
在空肠和回肠中均检出，表明给药浓度越高，越难
吸收，与本实验吴茱萸碱空肠的相关系数为负值相
符，推测其吸收机制不是被动扩散；而在回肠的相
关系数为正值，可能为被动吸收。本实验中吴茱萸
碱质量浓度为 26.8～312.5 μg/mL，范围较上述大，
可能是本实验结果与其结果有一定相似性而不完
全相同的原因。
Adams等[16]以CEM/ADR5000细胞研究吴茱萸
碱、吴茱萸次碱对 P-gp 的影响时发现，吴茱萸碱、
吴茱萸次碱对 P-gp 的作用很弱，且吴茱萸碱并不通
过 P-gp 转运。而在董宇等[17]的研究中同样发现吴
茱萸碱（15.2 μg/mL）的转运不受 P-gp 的影响。
4.8 吴茱萸次碱
裘国丽等[18]给健康兔 ig 吴茱萸提取物发现，吴
茱萸次碱（生药 15 g/kg）在动物体内的吸收有一个
滞后时间。龚慕辛等[3]研究也同样发现吴茱萸次碱
（392.4、196.2、98.1 μg/mL）的吸收滞后现象。本
实验中吴茱萸次碱（6.6～70.6 μg/mL）在空肠和回
肠仅检测出少量，原因可能为本实验肠囊最大吸收
时间为 120 min，吴茱萸次碱未能在此时间内被肠
囊有效吸收。董宇等[17]用肠外翻模型研究制吴茱
萸提取物不同剂量在大鼠不同肠段的体外肠吸收
特征时发现，吴茱萸次碱（9.6、19.2、57.6 μg/mL）
为零级吸收，在空肠和回肠为主动转运。但吴海[19]
以原位肠灌流模型研究吴茱萸次碱（3.72、7.1、
14.88 μg/mL）吸收机制时，其吸收呈一级速率过
程。是否是因为不同浓度造成结果差异，有待于进
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 17 期 2014 年 9 月 ·2497·

一步证实。
董宇等[17]用肠外翻模型研究制吴茱萸提取物
不同剂量及其与 P-gp 的关系时发现，吴茱萸次碱的
转运不受 P-gp 的影响。但吴海[19]以 Caco-2 模型研
究吸收机制时，吴茱萸次碱的平均表观渗透系数随
浓度（9、16、24 μg/mL）的增加而逐渐减低，推
测转运机制可能兼有载体介导和被动扩散。说明不
同质量浓度，对吴茱萸次碱的吸收有一定影响，而
在本实验中，吴茱萸次碱的质量浓度为 6.6～70.6
μg/mL，是否存在载体介导有待于进一步证实。
5 结论
外翻肠囊模型以其操作简单、快捷、重现性好
等成为研究药物肠吸收的常用体外模型。该模型保
持了良好的组织活性，吸收结果与人的吸收水平接
近；外翻肠囊模型中囊内药物只有吸收相，没有消
除相，只有药物的累积，而没有药物的代谢分布，
为寻找药物可吸收成分提供了方便。近年来有越来
越多的学者采用其进行中药单味药以及复方的吸
收研究。本课题组发现，辅以偏 PLSR 法进行结果
的相关分析，该模型还可用于研究复方中多种成分
在吸收过程中的相互影响。
PLSR 法是建立在主成分分析和主成分回归
基础上的一种多元数据分析方法，集多元线性回
归分析、典型相关分析和主成分分析的基本功能
为一体，可以提供一种“多对多”线性回归建模
的方法[20]，是谱效相关研究中的一种分析方法，
适用于自变量之间存在多重共线性或模型中样本
数小于自变量数目的情况[21]。其突出优点是以样
本总体对预测值的影响程度为考察对象，而不是
单个因素对预测值的影响程度，充分考虑了单个
因素间的综合作用对预测值的影响；在回归速率
上，其比一般的多元回归方法更快，对样本的要
求更加宽松[22]。
本实验以 9 种成分为观察指标，考察了各成分
量对自身肠囊吸收量的影响。结果为解释吸收谱-
效分析结果与药物谱-效分析部分结果相反提供了
依据，也提示复方多成分在吸收环节的复杂相互作
用可能与药物浓度有关。各成分对自身吸收影响的
机制，有可能与 P-gp 蛋白有关，仍需要进一步考察。
总之，本实验结果提示，在确定复方的有效成
分后，如要寻找各成分之间的最优量与配比，使之
达到较优疗效，还应考虑吸收环节作用，进行科学
的实验设计进行筛选。
参考文献
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效相关研究吴茱萸汤治疗偏头痛的药效物质 [J]. 中
国中药杂志, 2014, 39(1): 56-62.
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