全 文 ：山楂炮制前后有机酸含量的变化
杨 滨 3 o李 化 o赵宇新 o李曼玲
k中国中医研究院 中药研究所 o北京 tsszssl
≈摘要  目的 }对山楂炮制前后有机酸含量的变化进行研究 ∀方法 }应用中和滴定法 o高效液相色谱法对山楂
炮制前后饮片中总有机酸 !枸橼酸 !苹果酸 !熊果酸及齐墩果酸的含量进行测定 ∀结果 }苹果酸在 s1u{ ∗ |1su Λªo进
样量与峰面积具有良好线性 o回归方程为 Ψ€ u vww1z n w| vs|1y Ξ oρ€ s1||| { ∀齐墩果酸在 s1w|{ ∗ u1w{ Λªo熊果酸
在 s1vw{ ∗ t1zw Λªo峰面积的对数与进样量的对数具有良好的线性 o回归方程分别为 Ψ€ t1www z Ξ n x1{uv y oρ€
s1||| { ~Ψ€ t1vyu { Ξ n x1|xs { oρ€ s1||| { ∀结论 }山楂炮制后 o其水溶性有机酸含量变化较大 o保留率约为 zs h o
脂溶性三萜酸含量基本上无变化 ∀
≈关键词  山楂 ~炮制 ~有机酸含量变化
≈中图分类号  • u{v ~• u{w1t ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswltt2tsxz2sw
≈收稿日期  ussw2sv2tx
≈基金项目  国家/十五0科技攻关计划项目kusst…„zst„tt2sxl
≈通讯作者  3杨滨 oר¯ }kstslywstwwtt2u{w{ o∞2°¤¬¯}¼¥¬±°° ƒ
«²·°¤¬¯1¦²°
山楂为常用中药 o具消食健脾 o活血行气之功 ∀
5中国药典6usss年版收载的品种为山里红 Χραταε2
γυσ πιννατιφιδα …ª¨ 1 √¤µ1 µαϕορ ‘1∞1…µ1 和山楂 Χ1
πιννατιφιδα …ª¨ 1 o统称山楂 ∀临床上山楂常用炮制
品 o规格有生山楂 !炒山楂 !焦山楂和山楂炭等 ∀不
同炮制品的功效和应用亦不同 o如散瘀止痛用生品 o
消食化积用炒制品等 ∀现代研究表明 o山楂炮制后 o
其化学成分如总有机酸 !总黄酮 !磷脂和微量元素等
的含量均发生了变化 o从而改变了山楂的药理作用
和临床疗效 ∀
现代药理研究认为山楂中三萜酸有降血脂和降
压作用 o水溶性有机酸具有消食开胃的作用 ∀山楂
生品中有机酸含量较高 o对胃肠刺激作用大 o炮制后
则一定程度上降低了总有机酸的含量 o减少了对胃
肠的刺激作用 o保证了临床疗效的发挥≈t  ∀故此前
人的研究多集中在山楂炮制前后总有机酸的含量变
化上≈u2w  ∀usss年版5中国药典6即以中和滴定法测
定水溶性总有机酸的含量≈x  o作为山楂各饮片的质
量标准 ∀但山楂中既含有枸橼酸和苹果酸等水溶性
有机酸 o又含有熊果酸和齐墩果酸等脂溶性三萜酸 o
文献报道仅测定水溶性总有机酸的含量似不能完全
反映出山楂饮片的品质 ∀本研究建立了枸橼酸≈y  !
苹果酸 !熊果酸和齐墩果酸的 ‹°≤ 含量测定方法 o
明确了炮制前后山楂中这些有机酸的变化 ∀
1 药品与试剂
枸橼酸k批号 ||szsy o纯度 ∴||1{ h l与苹果酸
k批号 sts{s| o纯度 ∴||1x h l对照品购自北京市化
学试剂公司 ∀齐墩果酸k批号 szs|2|{sv o含量测定
用l !熊果酸k含量测定用l对照品购自中国药品生物
制品检定所 ∀所用试剂均为分析纯 o水为纯净水 ∀
生山楂饮片经本所谢宗万研究员鉴定为山里
红 Χ1 πιννατιφιδα √¤µ1 µαϕορ的成熟果实 ∀焦山楂饮
片为作者在中药饮片厂的中试产品 ∀
2 方法
211 总有机酸与枸橼酸含量的测定
参照 usss年版药典山楂条下含量测定方法 o对
山楂 !焦山楂样品中总有机酸含量进行测定 o样品中
枸橼酸含量测定见参考文献≈y  o结果见表 t ∀
212 苹果酸的含量测定
21211 仪器及色谱条件 高效液相色谱仪 }• ¤·¨µ¶
yss型四元液相色谱泵 ~||y型二极管阵列检测器 ~
¬¨±¬∏° ‹°≤图谱 usts色谱工作站 ∀色谱条件 }
²µ¥¤¬2¶¥≤t{色谱柱 ~流动相磷酸二氢铵2磷酸缓冲液
k³‹ v1sl ~流速 t1s °#°¬±pt ~检测波长 uts ±° ~柱
温 ux ε ∀见图 t ∀
21212 对照品及供试品溶液的制备 精密称定苹
果酸对照品适量 o以水溶解 o制成每 t °含苹果酸
s1w °ª的对照品溶液 ∀
取山楂饮片粉末k过 tss目筛l约 s1x ªo精密称
#zxst#
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1u| oŒ¶¶∏¨ tt
‘²√¨ °¥¨µoussw
图 t 柠檬酸 !苹果酸对照品及山楂饮片 ‹°≤图谱
„1 柠檬酸 !苹果对照品 ~…1生山楂 ~≤1焦山楂 ~
¤1苹果酸对照品 ~¥1 柠檬酸对照品
定 o置 xs °磨口锥形瓶中 o精确加入水 xs °o室温
放置 o不时振摇 ∀w «后滤过 o取续滤液 o过微孔滤膜
ks1wx Λ°l o制成供试品溶液 ∀
21213 线性关系考察 z个不同浓度的对照品溶
液 o在上述色谱条件下进样 o记录色谱图 ∀以对照品
浓度对峰面积积分值进行线性回归 o苹果酸的回归
方程 Ψ€ u vww1z n w| vs|1y Ξ oρ€ s1||| | ∀说明苹
果酸在 s1u{ ∗ |1su Λªo进样量与峰面积具有良好的
线性关系 ∀
21214 精密度试验 取对照品溶液重复进样 x次 o
苹果酸峰面积的 • ≥⁄值为 t1s h ∀
21215 稳定性试验 苹果酸对照品溶液在 y «内基
本稳定 o• ≥⁄为 t1u h ∀供试品溶液在 uw «内基本
稳定 o苹果酸 • ≥⁄为 t1u h ∀
21216 重复性试验 同一批山楂饮片k生山楂及焦
山楂l分别称取 x份 o精密称定 o按供试品溶液的制
备方法制备 o在上述的色谱条件下测定含量 o生山楂
和焦山楂中苹果酸 • ≥⁄分别为 u1| h和 t1z h ∀
21217 加样回收试验 分别称取已知含量的生山
楂样品 t ª≅ x份 o精密称定 o精密加入苹果酸对照
品适量 o按供试品溶液的制备方法制备 o在上述色谱
条件下测定 o按测定结果计算回收率 o苹果酸平均回
收率为 tsy1y h o• ≥⁄为 t1s h o结果见表 u ∀
21218 样品测定 分别取生山楂 !焦山楂样品 o精
密称定 o按供试品溶液的制备方法制备 o在上述的色
谱条件下测定 o结果见表 t ∀
213 熊果酸和齐墩果酸的含量测定
表 t 样品中有机酸含量的测定结果
样品名称 来源
有机酸含量r h
总有机酸 枸橼酸 苹果酸 熊果酸 齐墩果酸
山楂 产地山东 o亳州市售 x1wt w1uz s1xt s1ut s1swv
山楂 产地山东临朐 {1u| x1vt s1yu s1u| s1sys
山楂 产地山东费县米四乡 y1yu w1vw s1xs s1uw s1sxt
山楂 产地山东平邑 o亳州市售 y1v{ v1s| s1ws s1uw s1sxv
焦山楂 产地山东 o亳州市售 v1ystl t1||tl s1vttl s1uv s1swy
焦山楂 产地山东临朐 x1|wtl v1wstl s1wytl s1vx s1sy|
焦山楂 产地山东费县米四乡 w1zutl u1yytl s1vytl s1vu s1syx
焦山楂 产地山东平邑 o亳州市售 w1sutl t1{ttl s1uztl s1ux s1sxt
注 }tl为 v批中试产品的平均值
表 u 山楂中苹果酸加样回收率试验结果
样品含量
r˪
测得量
r˪
回收率
r h
平均值
r h
• ≥⁄
r h
t1tz u1wt tsx1t
t1tu u1v| tsz1y
t1tu u1vz tsx1| tsy1y t1ss
t1vu u1x{ tsy1{
t1uu u1w| tsz1y
注 }加入量均为 t1t{ Λª
21311 仪器及色谱条件 ‹°ttss 液相色谱仪 o
‹°vv|x积分仪 o„·¨¦« xss 蒸发光散射检测器 o
‹Š„ p xss空气发生器 ∀色谱条件 }Žµ²°¤¶¬≤t{色谱
柱kw1y °° ≅ uxs °° ox Λ° o北京仪器分析厂l o流动
相甲醇2水2冰醋酸kuysΒwsΒs1txl o柱温 ws ε o流速
s1y °#°¬±pt o∞≥⁄检测器 o漂移管温度 {x ε o空气
流 u1ys #°¬±pt ∀见图 u ∀
21312 对照品和供试品溶液的制备 分别精密称
取熊果酸 !齐墩果酸对照品适量 o加甲醇溶解 o制成
每 t °含熊果酸 y|1y Λª及齐墩果酸 ||1u Λª的对
照品溶液 ∀
取山楂饮片粉末k过 tss目筛l约 t1s ªo精密称
定 o精密加入甲醇 vs °o称定重量 o超声处理 vs
#{xst#
第 u|卷第 tt期
ussw年 tt月
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1u| oŒ¶¶∏¨ tt
‘²√¨ °¥¨µoussw
°¬±o放冷 o用甲醇补足减失的重量 o精密加入甲醇 us
°至总量为 xs °o摇匀 o滤过 o取续滤液过微孔滤
膜ks1wx Λ°l o制成供试品溶液 ∀
21313 线性关系考察 精密吸取上述对照品溶液
x ots otx ous oux ˏ注入液相色谱仪 o按上述色谱条件
测定峰面积 o以峰面积的对数为纵坐标 o进样量的
对数为横坐标 o绘制标准曲线 o熊果酸的回归方程
为 Ψ€ t1vyu { Ξ n x1|xs { o ρ€ s1||| { o齐墩果酸
的回归方程为 Ψ€ t1www z Ξ n x1{uv y o ρ€ s1||| { ∀
结果表明熊果酸在 s1vw{ ∗ t1zw Λªo齐墩果酸在
s1w|y ∗ u1w{ Λªo进样量的对数与峰面积的对数呈现
良好的线性关系 ∀
图 u 齐墩果酸 !熊果酸对照品及山楂饮片 ‹°≤ 图谱
„1齐墩果酸 !熊果酸对照品 ~…1 生山楂 ~≤1 焦山楂
¤1 齐墩果酸对照品 ~¥1 熊果酸对照品
21314 精密度试验 取山楂样品 t ªo精密称定 o按
供试品溶液的制备方法制备 o重复进样 x次 o在上述
色谱条件下测定 o熊果酸 • ≥⁄为 u1x h o齐墩果酸
• ≥⁄为 u1u h o结果表明该仪器的精密度良好 ∀
21315 稳定性试验 取同一供试品溶液分别在 s o
u ow otu ouw «进样 o在上述色谱条件下测定 o熊果酸
• ≥⁄为 v1u h o齐墩果酸 • ≥⁄为 v1s h o结果表明供
试品溶液在 uw «内稳定 ∀
21316 重复性试验 取山楂样品 t ªo共 x份 o分别
精密称定 o按供试品溶液的制备方法制备 o进样 o在
上述色谱条件下测定 o熊果酸 • ≥⁄为 v1w h o齐墩果
酸 • ≥⁄为 u1{ h o表明该方法的重现性良好 ∀
21317 加样回收率试验 分别称取已知含量的山
楂样品 s1x ª≅ x份 o精密称定 o精密加入混合对照品
溶液k齐墩果酸 s1sxy ª#pt o熊果酸 s1uvw ª#ptlx
°o再精密加入甲醇 ux °o称定重量 o按供试品溶
液的制备方法制备 o进样 o在上述色谱条件下进行测
定 o按测定结果计算回收率 o熊果酸的平均回收率为
||1v h o• ≥⁄为 s1|{ h o齐墩果酸的平均回收率为
tss1| h o• ≥⁄为 t1w h ∀结果见表 v ∀
表 v 山楂中熊果酸和齐墩果酸加样回收率实验结果
对照品
样品含量
r°ª
加入量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
r h
平均值
r h
• ≥⁄
r h
熊果酸 t1uyt t1tzs u1wu| ||1{ ||1v s1|{
t1u{w t1tzs u1wys tss1x
t1uxu t1tzs u1wtw ||1v
t1uy| t1tzs u1wty |{1s
t1u{y t1tzs u1wwt |{1z
齐墩果酸 s1uvu s1u{s s1xts ||1v tss1| t1w
s1uvy s1u{s s1xuu tsu1t
s1uvs s1u{s s1xtz tsu1x
s1uvw s1u{s s1xtz tst1t
s1uvz s1u{s s1xty ||1y
21318 样品测定 分别取生山楂 !焦山楂样品 o精
密称定 o按供试品溶液的制备方法制备 o在上述的色
谱条件下测定 o以外标两点法计算含量 o结果见表 t ∀
3 讨论
311 从表 t可见 o生山楂中 o水溶性有机酸的含量
较高 o为 x h ∗ | h ~脂溶性三萜酸的含量较低 o约为
s1v h ∀其中枸橼酸占水溶性有机酸总量的 ys h左
右 ~苹果酸占 s1t h左右 ~熊果酸占脂溶性有机酸总
量的 s1v h左右 o较齐墩果酸为高 ∀
312 以往研究者的研究结果表明 o山楂炮制成焦山
楂后 o其总有机酸含量下降 o但程度不一 ∀usss年版
药典中规定焦山楂总有机酸的保留率应不少于
{s h ≈x  ~但从文献报道来看 o实际情况往往达不到要
求 o以往的报道中 o焦山楂总有机酸含量的保留率为
wy1wu h ≈u  owu1z{ h ≈v 和 ts1yz h ≈w 等 ∀从本实验结
果看 o焦山楂水溶性总有机酸的保留率为 ys h左右 o
其中枸橼酸的保留率为 ys h左右 o苹果酸的保留率
为 zs h左右 ∀作者曾对枸橼酸的受热稳定性进行了
研究 o枸橼酸在 tys ∗ uss ε 正处于分解状态 o分解
程度为 ts h ∗ zw h ∀由此可以看出 o山楂中总有机
酸的含量极易受炮制温度的影响 o焦山楂中最佳的
总有机酸含量还有待进一步研究 ∀本实验中脂溶性
三萜酸熊果酸和齐墩果酸的含量在炮制前后基本上
无变化 o与文献报道一致≈z  ∀
313 文献报道中对于山楂中有机酸含量研究多见
于总酸测定 o用 ‹°≤进行单一成分含量测定报道并
不多见 o且分离效果都不是很好≈{2ts  ∀针对熊果酸
#|xst#
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ussw年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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和齐墩果酸在紫外仅有末端吸收的特性 o作者选择
了蒸发光散射检测器检测 ∀同时比较了不同提取溶
媒 !提取方法 !提取时间以及提取溶媒用量对所测有
机酸含量的影响 o确定了供试品液的制备方法 ∀本
研究所建立的测定山楂中枸橼酸 !苹果酸 !熊果酸和
齐墩果酸含量的 ‹°≤方法 o操作简单 !准确 o且重现
性好 o可以作为山楂饮片的质量控制方法 ∀
≈参考文献 
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≈u  黄显芬 1 炮制对山楂有机酸含量影响的探讨 1广西中医学院学
报 ousss otzktl }x|1
≈v  王 苹 o谢婉兰 1 山楂不同炮制品中枸橼酸含量考察 1中成药 o
t||v otxkxl }ut1
≈w  毛淑杰 o李铁林 1炮制对山楂中总黄酮及总有机酸含量的影响 1
中国中药杂志 ot|{| otwk|l }xvu1
≈x  中国药典 1 一部 1usss1uv1
≈y  杨 滨 o李 化 o汤树良 o等 1 高效液相色谱法测定山楂中枸橼
酸的含量 1 中国药学杂志 oussw ov|k|l }x{1
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中国中药杂志 ot|{| otwk{l }t{1
≈{  高光跃 o冯毓秀 o秦秀芹 1 山楂类果实的化学成分分析及其质
量评价 1药学学报 ot||x ovskul }tv{1
≈|  李海生 o吴贵华 1‹°≤法用于北山楂和云南山楂中主要有机酸
和维生素 ≤的分析比较 1中草药 ot||s outkwl }tv1
≈ts  郝润喜 o阎彩萍 o孙晓飞 o等 1 山楂中熊果酸的高效液相色谱分
析 1 药物分析杂志 ot||w otwkul }vs1
Χηανγεσιν λεϖελ οφ οργανιχ αχιδσιν Φρυχτυσ Χραταεγι αφτερ προχεσσινγ
≠„‘Š …¬±oŒ ‹∏¤o‹„’ ≠∏2¬¬±oŒ ¤±2¯¬±ª
kΙνστιτυτε οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα , Χηινα Αχαδεµψ οφ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε , Βειϕινγ tsszss , Χηιναl
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¦²°³¤µ¨ ¤±§¤±¤¯¼½¨ ·«¨ ²µª¤±¬¦¤¦¬§¶¯ √¨¨ ¯¬±©µ∏¬·²© Χραταεγυσ πιννατιφιδα √¤µ1 µαϕορ ¥¨©²µ¨ ¤±§¤©·¨µ³µ²¦¨¶¶2
¬±ª1 Μετηοδ : ׫¨ ¤°²∏±·²©·²·¤¯ ²µª¤±¬¦¤¦¬§¶¤±§¬±§¬√¬§∏¤¯ ¦¬·µ¬¦¤¦¬§o°¤¯¤·¨¤¦¬§o∏µ¶²¯¬¦¤¦¬§¤±§²¯ ¤¨±²¯¬¦¤¦¬§¬±©µ∏¬·²© Χ1 πιννατιφιδα √¤µ1
µαϕορ ¥¨©²µ¨ ¤±§¤©·¨µ³µ²¦¨¶¶¬±ªº¨ µ¨ §¨·¨µ°¬±¨ §¥¼ ³‹·¬·µ¤·¬²±¤±§‹°≤ ¤±¤¯¼¶¬¶1 Ρεσυλτ : Š²²§ ¬¯±¨ ¤µµ¨¯ ¤·¬²±¶«¬³¥¨·º¨ ±¨ ³¨¤®¤µ¨¤¤±§¤°²∏±·
º¤¶±²·¨§©²µs1u{ ∗ |1su Λª²© °¤¯¤·¨ ¤¦¬§oº¬·«¤¦²µµ¨¯ ¤·¬²±¦²¨©©¬¦¬¨±·²©s1||| {1 • ª¨µ¨¶¶¬²± ¨´∏¤·¬²± º¤¶Ψ€ uvw w1zn w| vs|1y Ξ1 Š²²§ ¬¯±2
¤¨µµ¨¯ ¤·¬²±¶«¬³¶¥¨·º¨ ±¨·«¨ ²¯ª¤µ¬·«° ²©³¨¤®¤µ¨¤¤±§¤°²∏±·º¨ µ¨ ±²·¨§©²µs1vw{ ∗ t1zw Λª²©∏µ¶²¯¬¦¤¦¬§¤±§s1w|{ ∗ u1w{ Λª²©²¯ ¤¨±²¯¬¦¤¦¬§o
º¬·«¤¦²µµ¨ ¤¯·¬²± ¦²¨©©¬¦¬¨±·²©s1||| {¬± ¤¨¦«¦¤¶¨1 • ª¨µ¨¶¶¬²± ¨´ ∏¤·¬²±¶º µ¨¨ Ψ€ t1vyu { Ξ n x1|xs { ¤±§ Ψ€ t1www z Ξ n x1{uv y oµ¨2
¶³¨¦·¬√¨ ¼¯1 Χονχλυσιον : ׫¨ ¬¯³¬§2¶²¯∏¥¯¨²µª¤±¬¦¤¦¬§¶°²¶·¯¼ µ¨°¤¬± º«¨µ¨¤¶²±¯¼ ¤¥²∏·zs h ²©·«¨ º¤·¨µ2¶²¯∏¥¯¨¤¦¬§¶µ¨°¤¬± ¤©·¨µ³µ²¦¨¶¶¬±ª
¬±©µ∏¬·²© Χ1 πιννατιφιδα √¤µ1 µαϕορ1
[ Κεψ ωορδσ] ƒµ∏¦·∏¶≤µ¤·¤¨ ª¬~³µ²¦¨¶¶¬±ª~¦«¤±ª¨¶¬±·«¨ ¯¨ √¨¯ ²©²µª¤±¬¦¤¦¬§¶
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