全 文 ：的增殖 o对 Œ2u的生成也产生影响 ∀ °„⁄×≥ 能防
护 ≤ ≠ 所致免疫力低下的 ≤²±„诱导脾 × 细胞产生
Œ2u的反应 o可推测 °„⁄×≥能使 × 细胞增殖活化 o
使 Œ2u的分泌增多 ∀这可能是其提高机体免疫能
力的机理之一 ∀亦为黄花倒水莲的/补益气血0 !/健
脾0 !/补虚0等的补益功效提供了一定的实验依据 ∀
≈参考文献 
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民卫生出版社 ot|zx qzyx q
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≈责任编辑 方文贤 
淫羊藿黄酮磷脂复合物防治去势
大鼠骨丢失的实验研究
江永南t o莫红缨u o陈济民v
kt q广州铁路中心医院 o广东 广州 xtss{s ~
u q广州呼吸疾病研究所 o广东 广州 xtstus ~
v q沈阳药科大学 药剂教研室 o辽宁 沈阳 ttsstxl
≈摘要  目的 }观察淫羊藿黄酮磷脂复合物防治去势大鼠骨质疏松症模型骨丢失的药效 ∀方法 }w月龄 ≥⁄大
鼠背侧行完整双侧卵巢摘除术 o建立骨疏松模型 ~通过双能 ÷ 线扫描大鼠骨密度k… ⁄l ~放免法测定血清中雌二醇
k∞ul的含量 ~∞„≥„法测定血清中白介素2ykŒ2yl的含量 o比较 !确定淫羊藿黄酮磷脂复合物的药效 ∀结果 }高剂
量组 !尼尔雌醇组和假手术组的敏感区域k第 v腰椎 !股骨远端和胫骨的近端l的骨密度 !血清 ∞u 明显高于模型组
k Π s qstl o而血中 Œ2y的水平明显低于模型组k Π s qstl ∀结论 }运用 w月龄 ≥⁄雌性大鼠建立的骨质疏松模型
是可行的 o淫羊藿黄酮磷脂复合物可有效改善骨质疏松症大鼠的骨密度 o提高血中 ∞u o降低 Œ2y水平 ∀
≈关键词  淫羊藿黄酮 ~磷脂复合物 ~雌二醇 ~Œ2y ~药效学
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukussulsv2suut2sw
淫羊藿是传统补肾壮阳药 o主成分为黄酮 !淫羊
藿苷和多糖 ∀现代研究发现其具有抗骨质疏松作
用≈t  o免疫调节作用≈u  o心脑血管扩张作用≈v  o但其
主要成分淫羊藿苷的水溶性差 o生物利用度低≈w  ~国
外文献报道≈x  o天然活性成分与磷脂在一定条件下
进行复合 o得到天然活性成分磷脂复合物k³«¼·²
≈收稿日期  usst2s|2tv
≈基金项目  广州铁路k集团l公司科技开发项目kusss2v2uvl
≈通讯作者  电话 }ksuslytvuzsxz 传真 }ksuslytvuttzz ∞2
°¤¬¯}­¼±ut|yz ƒ tyv q±¨ ·
¶²° ¶¨或 ³«²¶³«²¯¬³¬§¦²°³¯ ¬¨l o其理化性质和生物
特性较原化合物均有不同程度的改变 o具有较强的
亲脂性 o可有效地提高天然活性成分在体内的吸收 o
显著地改变其生物有效性 ∀为验证工艺的可行性 o
本研究运用去卵巢大鼠造成的骨质疏松模型 o在单
一因素条件下比较不同剂量组的淫羊藿黄酮磷脂复
合物和尼尔雌醇对去势大鼠骨质疏松的防治作用 ∀
1 实验器材与材料
1 q1 实验动物
≥⁄雌性大鼠kuus ? usl ªkw月龄l o购自中山医
科大学实验动物中心 ∀
#tuu#
第 uz卷第 v期
ussu年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o‘²qv
¤µ¦«qoussu
1 q2 仪器
± ⁄•2wsss 型双能 ÷ 线骨密度测定仪 k美国
‹ ’’ŠŒ≤ 公司生产l o≥‘2y|x型智能放免 Χ测量仪
k上海核福光电仪器有限公司l o⁄⁄2≥冷冻离心机
k上海安亭科学仪器厂l o…×usss酶标仪k…¬²2פ®丹
麦 ƒ¬¶«¨µ2…¬²·¨¦«公司l ∀
1 q3 药品与试剂
淫羊藿黄酮磷脂复合物k∞ƒ⁄l由本院制剂室提
供 o分高 !中 !低 v个剂量组 o生药的浓度分别为 w ou o
t ª# °p t ~尼尔雌醇 k上海华联制药有限公司生
产 o规格 }u °ªr片l o使用前用蒸馏水配成混悬液
k浓度为 s qtyz °ª# °p tl ~∞u 放射免疫试剂盒
k ⁄≥2v|tss vµ§ Š ±¨¨ µ¤·¬²± ∞¶·µ¤§¬²¯ • Œ„ o美 国
⁄¶¯¤¥¶公司提供l ~水合氯醛k药用试剂l ~白介素2y
kŒ2yl试剂盒k第四军医大学免疫教研室l ∀
2 检测方法
2 q1 骨密度测定
进行双能 ÷ 线扫描前 o大鼠用新鲜配制的水合
氯醛kts h l腹腔注射k剂量按 s qsvx °#®ªp tl oy
°¬±后进入麻醉状态 o然后用 ± ⁄•2wsss 型双能 ÷
线骨密度测定仪对其进行全身骨扫描 ∀
2 q2 雌二醇含量测定
采用放射免疫法 o对两次所得血清样本的每一
样本均行雌二醇含量的测定 ∀操作方法 }„ q准备总
计管 !特异性结合品管 !标准品管 !质控品管及未知
物管 o分别标记 ~…q向相应试管中加入 uss ˏ标准
品 !质控品和未知物 o‘…≥管中加入 vss ˏ雌二醇
标准品ks ±ª#°p tl ~≤ q除 ‘≥…管及总计管外 o其
余试管中各加入 tss ˏ雌二醇抗血清 ~⁄q立即涡旋
所有试管 ~∞q所有试管在 u ∗ { ε 冷浴 w «~ƒ q每支
试管中加入 tss ˏtux Œ标记的雌二醇试剂 ∀立即涡
旋所有试管 ~Š q所有试管在 u ∗ { ε 冷浴 us ∗ uw «~
‹ q除总计管外 o所有试管中各加入 t °沉淀剂 o涡
旋 ∀室温放置 tx ∗ us °¬±∀Œq除总计管外 o所有试
管在 t xss µ#°¬±p t离心 tx ∗ us °¬±~q除总计管外 o
抽吸或倾注所有的试管 o同时用海面支架倒入放射
性废物接收器中 o在吸收材料中控干 tx ∗ vs ¶o然后
轻轻拭去附在边缘的水珠 o然后将试管直立 ∀如水
珠未完全擦干可产生错误结果或导致重现性差 ~Žq
计数 ∀
2 q3 Œ2y含量测定
原理 }采用两株识别不同表位的抗 Œ2y单克隆
抗体 o其中一株作为包被抗体 o以识别和结合待检标
本中的 Œ2y o另一株作为酶标抗体 o与结合于包被抗
体的 Œ2y的另一表位结合 o并催化底物显色 o根据
标准品吸收度k Αl绘制标准曲线 o在标准曲线上查
出待检标本中 Œ2y的含量 ∀
操作方法 } „ q包被 }将稀释好的包被抗体加入
∞Œ≥„板 otss ˏr孔 ow ε 放置 w{ «~…q加待检标
本 }洗涤液冲洗 ∞Œ≥„板 v次 o加待测样品 o阴性对
照及倍比稀释的标准品 otss ˏr孔 ovz ε 放置 t «
k标准品的稀释方法 }取 µ‹∏Œ2y o先用稀释液作 w
倍稀释 o再倍比稀释为以下浓度 }x qs ot qux os qyux o
s qvtu os qtxy os qsz{ ±ª#°p tl ~≤ q加酶标抗体 }洗
板 v次 o加入配制好的酶标抗体 otss ˏr孔 ovz ε o
t «~⁄q显色 }洗板 v次 o加入配好的 „…×≥显色剂 o
tss ˏr孔 o室温或 vz ε 显色 tx ∗ vs °¬±~∞q∞Œ≥„
读取仪测 wts ±° 处吸收度k Αl值 o绘制标准曲线和
测定的样品含量 ∀
3 实验方法与结果
3 q1 实验方法
3 q1 q1 分组 健康 w月龄雌性 ≥⁄大鼠 w{只 o体重
uss ∗ uws ªo随机分为 y 组k每组 { 只l }„ q假手术
组 o…q模型组 o≤ q∞ƒ⁄高剂量组 o⁄q∞ƒ⁄中剂量组 o
∞q∞ƒ⁄低剂量组 oƒ q尼尔雌醇阳性对照组 ∀
3 q1 q2 术前取血 造模手术前一天各组大鼠用毛
细吸管k用前浸 tss ˜#°p t的肝素钠 o{s ε 烘干l
行左侧眼球放血 t qx °o分离血清 op us ε 保存备
用 ∀
3 q1 q3 造模 ts h 水合氯醛溶液按 s qsvx °#
®ªp t腹腔注射 o麻醉成功后 o动物背部用电动推剪剃
毛 ou h碘酊消毒 o在无菌条件下手术 o„组大鼠行伪
手术 o背部切口 ∀切除少量脂肪组织后立即关闭 ~…o
≤ o⁄o∞oƒ各组大鼠均从背侧行完整双侧卵巢摘除
术 ∀术后的前 v天用青霉素抗感染 ∀
3 q1 q4 给药 术后第 u天开始给药 }„组和 …组用
生理盐水 s qsy °#®ªp t#§p t灌胃 ~≤ o⁄o∞组大鼠
分别用 ∞ƒ⁄ s qy °#®ªp t#§p t灌胃 o生药浓度分别
为w ou otª# °p t ~ƒ组大鼠用尼尔雌醇混悬液
s qsy °#®ªp t每周 t 次灌胃 o浓度为 s qtyz °ª#
°p tk按 t °ª#®ªp t计算l ∀
3 q1 q5 饲养 所有动物在同一条件下k室温 t{ ∗
ux ε l用普通鼠料定量饲养 |s §∀
3 q1 q6 指标测定 骨密度测定结果 o见表 t和图 t ∀
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∂ ²¯ quz o‘²qv
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雌二醇含量测定结果 o见表 t和图 u ∀Œ2y含量测
定得标准曲线 oŒ±Χ€ p u qzvv n tst qy Α ( Α表示吸
收度值l oρ € s q||uz ∀线性范围 }s qsz{ ∗ x qs ±ª#
°p t o样品的测定结果见表 t ∀
表 t 大鼠骨密度k… ⁄l !雌二醇k∞ul和白介素2ykŒ2yl测定结果k ξ ? σ, ν € zl
组别
∞ur³ª#°p t
手术前 手术后
Œ2yr³ª#°p t … ⁄rª#¦°p u
假手术组 tz qv ? w qu{yl vy qt ? x qvztl |z qv ? tw qvtl s qt|{z ? s qstwtl
模型组 t| qt ? w qzsyl | q{z ? t qxt uyz ? y{ qz s qtyuz ? s qstt
∞ƒ⁄高剂量组 t{ qs ? w qvyyl u{ qx ? x qz{t oul tsx ? us qu t oul s qt{vy ? s qss|st oul
∞ƒ⁄中剂量组 tz qy ? w qw|yl t| qv ? w qxutl tty ? ux qstl s qt{tz ? s qssyutl
∞ƒ⁄低剂量组 t{ q{ ? w q{yyl ts qx ? t qw|v owl tz{ ? yx qw t oxl s qtz|s ? s qsswxt ov oxl
尼尔雌醇组 t{ qx ? w q|tyl vs qt ? w qxwtl tsy ? ux qu tl s qt{xw ? s qss|{tl
注 }≠ …°⁄表示骨密度k即面密度l o是骨矿物盐k… ≤l含量与骨宽度k… • l之比  与模型组比较 tl Π s .st ≈ 与尼尔雌醇组比较
u) Ё s .sx v) Π s .st …与高剂量比较 w) Π s .st x) Π s .sx  各组间比较 y) Ё s qsx
图 t 大鼠骨密度扫描图
• t q第三腰椎 • u o• v q左右股骨头
• w o• x q左右股骨远端 • y o• z q左右胫骨近端
图 u 血浆中雌二醇的标准曲线
3 q2 实验结果
结果表明 }模型建立成功 o高剂量淫羊藿总黄酮
与对照药的药效无显著差异 o提示淫羊藿总黄酮有
效 ∀
4 讨论
性激素的变化在骨质疏松症的发病中起着重要
的作用≈y oz  o雌激素水平下降是导致绝经后骨质疏松
的重要发病原因 o大量的实验表明去除双侧卵巢大
鼠可引起骨量的降低 !骨形态学的改变 !激素水平的
变化等 ∀本研究中 o模型组动物造模 v个月后 o敏感
区域的骨密度k第 v腰椎 !股骨远端和胫骨的近端l
明显低于假手术组k Π  s qstl o同时模型组动物造
模 v个月时血清 ∞u 明显低于假手术组k Π s qstl o
充分表明本实验所造的绝经后骨质疏松动物模型成
功 o大鼠已出现肾虚骨衰征象 ∀
中医认为骨质疏松症属/骨痿0 !/骨痹0的范畴 o
认为肾虚 !脾虚 !血瘀为本病的病机 o中药淫羊藿黄
酮磷脂复合物通过补肾壮骨 o从而提高去势大鼠的
骨密度 o并能提高血清 ∞u 含量 o与模型组比较k Π
s qsxl o表明中药淫羊藿黄酮磷脂复合物对大鼠骨质
疏松是有效的 o而本药与活血健脾中药的组方有待
进一步研究 ∀
骨代谢是骨形成与骨吸收的动态平衡 ∀破骨细
胞与单核巨噬细胞有共同的起源 o其生长 !分化 !骨
吸收功能受到细胞因子的调节 o体内外实验证明 o白
介素2y有促进破骨细胞形成 o促进骨吸收的作用 ∀
雌激素可能通过白介素2y 为中介起抗骨质疏松作
用 ~雌激素在基因水平抑制白介素2y的表达 o从而防
止骨质丢失≈{  ∀本研究结果表明 }去势 ≥⁄大鼠模型
中尼尔雌醇和中药淫羊藿黄酮磷脂复合物的应用 o
可降低血中 Œ2y的水平 o这可能与淫羊藿黄酮的作
用有关 ∀目前 o植物性雌激素是抗骨质疏松药研究
的热点之一 o有黄酮k©¯¤√²±¨ ¶l !异黄酮k¬¶²©¯¤√²±¨ ¶l !
库玛斯坦k¦²∏° ¶¨·¤±¶l o抗骨质疏松药物依普拉芬
k¬³µ¬©¯¤√²±¨ l属异黄酮 ∀关于淫羊藿黄酮各成分的药
理作用有待运用细胞学方法做进一步的研究 ∀
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Εφφεχτσ οφ Επιµεδιυµ Τοταλ Φλαϖονοιδσ Πηψτοσοµεσ ον
Πρεϖεντινγ ανδ Τρεατινγ Βονε2λοσσ οφ Οϖαριεχτοµιζεδ Ρατσ
Œ„‘Š ≠²±ª2±¤±t o  ’ ‹²±ª2¼¬±ªu o≤ ‹∞‘¬2°¬±v
kt qŠ∏¤±ª½«²∏ • ¤¬¯º¤¼ ≤ ±¨·µ¤¯ ‹²¶³¬·¤¯ o Š∏¤±ª½«²∏ xtss{s oŠ∏¤±ª§²±ªo≤«¬±¤~
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ªµ²∏³±¬¯¨ ¶·µ¬²¯ ªµ²∏³¤±§±²µ°¤¯ ªµ²∏³¤µ¨ «¬ª«¨µ·«¤±·«²¶¨ ²© °²§¨¯ªµ²∏³k Π s qstl o º«¬¯¨ ·«¨¬µ¦²±·¨±·²©Œ2y ¬¶¤³³¤µ¨±·¯¼
²¯º µ¨·«¤±·«¤·²© °²§¨¯ªµ²∏³k Π s qstl qΧονχλυσιον : × «¨ ²¶·¨²³²µ²¶¬¶°²§¨¯ º¤¶ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨ §¶∏¦¦¨¶¶©∏¯ ¼¯ ¤±§·«¨ ∏¶¬±ª²© ∞ƒ° ¦¤±
¬°³µ²√¨·«¨ ¥²±¨ §¨ ±¶¬·¼ o ±¨«¤±¦¨ ∞u ¯¨ √¨¯ ¤±§§¨¦µ¨¤¶¨ ·«¨ Œ2y ¦²±¦¨±·µ¤·¬²±¬± ¶¨µ∏° q
[ Κεψ ωορδσ] ³¨¬° §¨¬∏° ©¯¤√²±¨ ~³«²¶³«²¯¬³¬§³«¼·²¶²° ¶¨~ ¶¨·µ¤§¬²¯ ~Œ2y ~³«¤µ°¤¦²¯²ª¬¦¯ ©¨©¨ ¦·
≈责任编辑 方文贤 
ussu国际骨质疏松高级研讨会通知
国家卫生部科教司 !中国科学技术发展基金会主办 o中国科学技术发展基会药学发展基金委员会 !中国科学技术发展基
金会骨疏松基金委员会 !中国药学发展奖康辰骨质疏松医药研究奖奖励工作委员会共同承办 o拟定于 ussu年 ts月 us ∗ uu日
在上海召开 ussu国际骨质疏松高级研讨会 ∀ts月 uu ∗ uv日同期举办全国第二届骨密度测量质量保证培训班 ∀届时将有来
自中国内地 !香港和台湾的知名院士 !教授和专家以及来自英国 !日本 !美国 !丹麦和澳大利亚等国家的 vss余位著名骨质疏松
领域的专家到会进行骨质疏松领域的最前沿的学术研讨 ∀
征文内容 }骨质疏松症的基础研究和药物研究 !骨质疏松的诊断 !骨质疏松症的临床研究 ∀大会将设/ ussu国际骨质疏松
优秀论文奖0 !/ ussu国际骨质疏松青年学者奖0 !/ 骨疏康优秀论文奖0 !/ Š∞2˜‘„• 优秀论文奖0 o奖金 v sss ∗ x sss元不
等 ∀
请寄 v sss ∗ x sss字的全文 o并附 {ss字的结构式中英文摘要各一份 ∀本次会议授予学分 y分 ∀详情可与大会秘书处联
络 o索取第二轮会议通知或登陆我们的网站 }ººº q¦²©q²µªq¦±∀
截稿日期 }ussu年 {月 t日
#wuu#
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