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Absorption and transportation of flavonoids in Herb Epimedii across Caco-2 monolayer model

Caco-2细胞单层研究淫羊藿黄酮类成分的吸收转运



全 文 :确定了采用硫酸铵梯度法结合 p H 梯度法制备粉防
己碱阿霉素脂质体。
稳定性的检查是脂质体制备中质量控制的重要
环节。该实验对复合脂质体稳定性进行了一系列的
检查。发现用硫酸铵梯度法结合 p H 梯度法制备的
粉防己碱阿霉素脂质体需要在 4 ℃充氮气保存下 ,
药物的渗漏率、粒径的大小变化和磷脂含量的变化
最小。在后续的实验中 ,提高复合脂质体稳定性是
重要的研究工作之一。
体外释药实验表明脂质体中的药物在 24 h 内
几乎全部释放 ,而游离的药物在 8 h 内就已经释放
完全 ,证明了脂质体具有较好的缓释作用 ,原因可能
与药物被脂质体包裹后形成了难溶盐很难透过脂质
体膜有关。此外 ,药物与脂质膜结合力大小也可能
会对缓释作用产生一定的影响。
本实验通过对粉防己碱阿霉素复方脂质体的工
艺优化、稳定性及释放度试验 ,表明了将两种药物同
时包封于同一脂质体的可能 ,为下一步粉防己碱阿
霉素复方脂质体逆转乳腺癌耐阿霉素细胞 MCF27/
DOX 最佳比例试验提供参考。
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Caco22 细胞单层研究淫羊藿黄酮类成分的吸收转运
陈  彦1 ,贾晓斌1 , HU Ming2 3 
(1. 江苏省中医药研究院 ,江苏省现代中药制剂工程技术研究中心 ,江苏 南京  210028 ;
2. University of Houston , Houston 77030 , USA)
摘  要 :目的  研究淫羊藿黄酮类成分在 Caco22 细胞模型中的吸收转运。方法  采用超高压液相法测定药物浓
度 ,计算表观渗透系数 ( Papp) ,研究淫羊藿黄酮 5 个主要成分淫羊藿苷、朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿定 C、宝藿苷 Ⅰ在
Caco22 细胞模型中的双向转运。结果  淫羊藿苷、朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿定 C 的吸收渗透系数 ( PAB ) 较小 ,分别
为 5191 ×10 - 7 、3122 ×10 - 7 、2176 ×10 - 7 、4123 ×10 - 7 cm/ s ,宝藿苷 Ⅰ相对较大 ,为 1146 ×10 - 6 cm/ s ;5 个化合物的
分泌渗透系数 ( PBA )都比其相应的吸收渗透系数要大 ,其中宝藿苷 Ⅰ的分泌渗透系数是其吸收渗透系数的 918 倍。
结论  淫羊藿黄酮类成分的肠道吸收较差 ,可能存在肠道转运蛋白的外排机制 ,其中三糖苷 (朝藿定 A、朝藿定 B、
朝藿定 C)的吸收要小于二糖苷 (淫羊藿苷) ,二糖苷的吸收要小于单糖苷 (宝藿苷 Ⅰ) 。
关键词 :淫羊藿黄酮 ;Caco22 细胞单层模型 ;淫羊藿苷 ;渗透系数
中图分类号 :R286102    文献标识码 :A    文章编号 :025322670 (2009) 0220220205
Absorption and transportation of flavonoids in Herb Epimedii across Caco22 monolayer model
CH EN Yan1 , J IA Xiao2bin1 , HU Ming2
(1. J iangsu Provincial Academy of Traditional Chinese Medicine , J iangsu Engineering and Technology
Research Center for Modern Chinese Pharmaceutical Preparation , Nanjing 210028 , China ;
2. University of Houston , Houston 77030 , USA)
Abstract : Objective  To st udy t he absorption and t ransportation of flavonoids in Herb Epi medi i by
using Caco22 monolayer model . Methods  Caco22 cell monolayer model was used to st udy the bi2direction
t ransport of icariin , epimedin A , epimedin B , epimedin C , and baohuoside Ⅰ. The concent ration of t he
five flavonoids in cell cult ure medium was measured by U PL C and t he apparent permeability coefficient s
( Papp) were calculated. Results  The absorptive permeability coefficient s ( PAB ) of icariin , epimedin A ,
epimedin B , epimedin C , and baohuoside Ⅰwere 5191 ×10 - 7 , 3122 ×10 - 7 , 2176 ×10 - 7 , 4123 ×10 - 7 , and
·022· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs  第 40 卷第 2 期 2009 年 2 月
3 收稿日期 :2008204203   
基金项目 :国家自然科学基金资助项目 (30572372)
作者简介 :陈 彦 (1968 —) ,女 ,江苏南京人 ,副研究员 ,博士 ,江苏大学硕士生导师 ,中华中医药学会炮制分会委员 ,美国休斯顿大学高
级访问学者 ,主要从事中药制剂学研究 ,特别在中药多组分离子剂型 ,如中药滴丸、多组分微丸、复方微乳等研究领域。
Tel : (025) 85608672  E2mail : ychen202 @yahoo. com. cn
1146 ×10 - 6 cm/ s , respectively. Except baohuoside Ⅰ, t he ot her four flavonodes had lower permeabilities ,
and t he secretive permeabilities ( PBA ) of all t he flavonoids were larger t han their absorptive permeabilities.
Among t hem , t he PBA of baohuoside Ⅰwas 918 times as much as the PAB . Conclusion  The result s sug2
gest t hat the intestinal absorption of t he five flavonoids is lower , which might have efflux mechanism by
t ransporters , and the absorption of monloglycoside (e. g. baohuoside Ⅰ) is bet ter t han t hat of diglycoside
(e. g. icariin) and t riglycoside (e. g. epimedin A , epimedin B , and epimedin C) .
Key words : flavonoids in Herb Epi medi i ; Caco22 cell monolayer model ; icariin ; permeability coeffi2
cient s
  淫羊藿为我国传统的补益中药 ,始载于《神农本
草经》,并记载于历代本草。淫羊藿具有补肝肾、强
筋骨、祛风湿的作用 ,临床上用于治疗阳痿、腰膝酸
软、风湿痹痛等症。淫羊藿主要有效成分为黄酮类
化合物 ,其中以 8 位异戊烯基取代黄酮的量较高 ,主
要是淫羊藿苷、朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿定 C、宝藿
苷Ⅰ。现代药理研究表明[1 ,2 ] ,淫羊藿苷等异戊烯基
取代黄酮对心脑血管系统、骨代谢、免疫系统、及性
机能等方面具有广泛的药理功效 ,但此类黄酮在体
内吸收转运的情况并不清楚。Caco22 细胞系 ( hu2
man colon adenocarcinoma cell lines)来源于人的直
肠癌 ,其结构和生化作用类似于人小肠上皮细胞 ,含
有与小肠刷状缘上皮相关的酶系[3 ] 。由于药物透过
Caco22 细胞单层的体外过程与口服药物在肠道吸
收有良好的相关性 ,因此 Caco22 细胞模型近年来被
国外药物研究机构或开发公司广泛用于药物摄取、
外排及跨膜转运等吸收机制的研究。本实验采用
Caco22 细胞单层模型研究淫羊藿苷等异戊烯基取
代黄酮的肠渗透性 ,从而揭示其吸收转运情况。
1  材料
二氧化碳培养箱 ( Hearous ,德国) ;XDS - 1B 倒
置显微镜 (重庆) ;超高压液相色谱仪 Waters Acqu2
ityTM ( Waters ,美国) ; Millicell - ERS 跨膜电阻仪
(Millipore ,美国 ) ; Transwell 培养板 ( NUNC , 丹
麦) ;高速冷冻离心机 (Beckman ,美国) ;Milli - Q 纯
水机 (Millipore ,美国) 。
Caco22 TC7 细胞株由法国 MoniquÓ Rousset
博士馈赠。
DM EM 培养基 ( dulbecco’s modified eagle’s
medium , Hyclone 公司) ; 胎牛血清 ( Equitech2Bio
Inc. 公司) ;非必需氨基酸、H EPES 粉末 (J R H 公
司) ;谷氨酰胺、胰蛋白酶、Hank’s 平衡盐粉末 ( sig2
ma 公司) ;淫羊藿苷 (批号 1107372200312 ,质量分数
大于 98 %)由中国药品生物制品检定所提供。朝藿
定 A、朝藿定 B、朝藿定 C、宝藿苷 Ⅰ对照品为实验
室自制 ,质量分数均大于 98 %。乙腈、三乙胺、甲酸
均为色谱纯 ,水为超纯水 ,其他试剂均为分析纯。
2  方法与结果
21 l  Caco22 细胞单层模型的建立[4 ,5 ] : Caco22 细胞
培养于 DM EM 培养液中 ,含胎牛血清 10 % ,非必需
氨基酸 1 % ,谷氨酰胺 1 % ,青霉素 (100 U/ mL )2链
霉素 (100μg/ mL)双抗液 ,在 37 ℃的 5 %CO2 恒温
培养箱中培养。隔天换 1 次培养液 ,每 5~7 天用胰
蛋白酶消化传代。将 Caco22 细胞混悬液种植于
Transwell 培养板上的多聚碳酸酯膜中 ,细胞种植
密度为 1 ×106 个/ cm2 ,单层细胞于 19~21 d 左右
分化形成 ,用跨膜电阻仪检测跨膜电阻 ,各孔跨膜电
阻值均大于空白对照值 100 hm/ 41 2 cm2 以上 ,即符
合实验要求可用于试验。Caco22 细胞单层模型见
文献报道[6 ] 。
212  超高压液相色谱对样品分析方法的建立
21211  色谱条件 :ACQU IT Y U PL CTM B EH C18柱
(50 mm ×211 mm ,117μm) ;流动相 : A 相为三乙
胺2甲酸缓冲溶液 (p H 310)2乙腈 (9 ∶1) ,B 相为乙
腈2水溶液 (9 ∶1) ,梯度洗脱 , 0 min : A 95 % , 013
min :A 95 % , 21 9 min :A 65 % , 312 min :A 0 % ,保
持 018 min ;体积流量为 0175 mL/ min ;检测波长为
268 nm ;内标物睾丸酮检测波长为 245 nm ;检测柱
温 45 ℃;样品温度 20 ℃。色谱图见图 1。
t/ min
12朝藿定 A  22朝藿定 B  32朝藿定 C  42淫羊藿苷
52宝藿苷 62睾丸酮内标
12epimedin A  22epimedin B  32epimedin C  42icariin
52baohuoside Ⅰ 62testosterone internal standard
图 1  各化合物经过 Caco22 细胞单层后的超高效液相色谱图
Fig. 1  UPLC Chromatogram of compounds transported
from Caco22 cell monolayer
21212  对照品储备液的配制 :精密称取淫羊藿苷
·122·中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs  第 40 卷第 2 期 2009 年 2 月
21704 mg ,朝藿定 A 31291 mg、朝藿定 B 31168
mg、朝藿定 C 31160 mg、宝藿苷 Ⅰ21058 mg 分别
加二甲亚砜2乙醇 (6 ∶4) 溶解至 2 mL ,配制成 2
mmol/ L 的各药物储备液。
21213  睾丸酮内标溶液的配制 :精密称取睾丸酮
1414 mg ,加乙腈溶解定容至 5 mL ,即配制成 10
mmol/ L 的储备液。精密吸取睾丸酮储备液 011
mL ,加入 914 mL 乙腈与 016 mL 冰乙酸 ,混合均
匀 ,即为 100μmol/ L 内标液 ,备用。
21214  供试品溶液的制备 :吸取供给池或接收池中
的样品溶液 400μL 按体积比 4 ∶1 立刻加入 100
μL 睾丸酮 (100μmol/ L ) 内标溶液 ,于离心机中离
心 15 min (13 000 r/ min) ,用超高压液相色谱仪进
行分析。
21215  线性关系考察 :分别精密量取淫羊藿苷、朝
藿定 A、朝藿定B、朝藿定 C、宝藿苷 Ⅰ2 mmol/ L 储
备液适量 ,用 HBSS 溶液稀释至 01625、1125、215、
5、10、20、40μmol/ L 。取上述各溶液 400μL 与 100
μL 内标溶液混合 ,吸取此溶液 10μL 进样 ,测定其
峰面积。以质量浓度为横坐标 ,对照品与内标峰面
积比为纵坐标 ,计算得线性方程。淫羊藿苷 : Y =
01049 X , r = 01996 ;朝藿定 A : Y = 0106 X , r =
01999 ;朝藿定 B : Y = 0105 1 X , r = 01993 ;朝藿定
C : Y = 01059 X , r = 01997 ;宝藿苷 Ⅰ: Y = 0103 5
X , r = 01997。结果表明各成分在 0~40μmol/ L
线性关系较好。
21216  精密度试验 :取供试品溶液重复进样 6 次 ,
结果淫羊藿苷、朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿定 C、宝藿
苷 Ⅰ质量浓度的 RSD 分别为 0165 %、0118 %、
0115 %、0106 %、2179 %。
21217  重现性试验 :取同一批样品 6 份 ,制备供试
品溶液 ,进样测定 ,结果淫羊藿苷、朝藿定 A、朝藿定
B、朝藿定 C、宝藿苷 Ⅰ质量浓度 RSD 分别为
1103 %、1161 %、1139 %、0180 %、2145 %。
21218  稳定性试验 :取同一样品溶液 ,分别在 0、2、
4、8、24 h 进样测定 ,结果淫羊藿苷、朝藿定 A、朝藿
定 B、朝藿定 C、宝藿苷 I 质量浓度的 RSD 分别为
0129 %、0161 %、0140 %、013 5 %、0189 % ,表明各样
品溶液在 24 h 内稳定。
21219  加样回收率试验 :取已知淫羊藿苷、朝藿定
A、朝藿定 B、朝藿定 C、宝藿苷 I 质量浓度的经过
Caco22 细胞单层的收集液各 6 份 ,分别精密加入相
应的对照品溶液 ,取出 400μL ,加入 100μL 内标溶
液与之混合 ,离心 ,取上清液进样 ,测定 ,计算回收
率。结果淫羊藿苷的平均回收率为 10112 % , RSD
为 1167 % ;朝藿定 A 的平均回收率为 9916 % ,RSD
为 2159 % ;朝藿定 B 的平均回收率为 9919 % , RSD
为 2151 % ;朝藿定 C 的平均回收率为 10010 % ,RSD
为 2118 % ;宝藿苷 Ⅰ的平均回收率为 99182 % ,RSD
为 2186 %。
213  黄酮成分的跨膜转运试验[7 ]
21311  溶液的配制 :称取 Hank’s 平衡盐粉末 1916
g ,Na HCO3 0174 g , D - ( + ) Glucose 710 g , H EPES
粉末 11192 g ,加纯净水溶解稀释至 2 L ,用 5 mol/ L
NaO H 调节 p H 值至 714 ,即得 HBSS 溶液。
分别吸取淫羊藿苷、朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿
定 C、宝藿苷 Ⅰ储备液各 300μL ,加 HBSS 溶液溶
解稀释至 30 mL ,分别配制成浓度为 10μmol/ L 的
淫羊藿苷、朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿定 C、宝藿苷 Ⅰ
溶液。
21312  试验步骤 :试验前首先用 37 ℃预热的 p H
714 的 HBSS 溶液洗涤细胞单层 3 次 ,测定跨膜电
阻 ,跨膜电阻值不符合要求的弃去。再加入预热的
HBSS 溶液 ,于 37 ℃摇床中孵育 1 h ,吸弃 HBSS 溶
液。对于药物从细胞绒毛面 Apical (A) 侧到基底面
Basolateral (B)侧的转运 :将药物溶液 2 mL 加到 A
侧作为供给池 ,同时 B 侧加入空白的 p H 714 HBSS
溶液 2 mL 作为接收池 ;对于药物从 B 侧到 A 侧的
转运 :将药物溶液 2 mL 加到 B 侧作为供给池 ,空白
的 HBSS 溶液 2 mL 加到 A 侧作为接收池。分别用
10μmol/ L 淫羊藿苷、朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿定
C、宝藿苷 Ⅰ HBSS 溶液作为供试药物 ,把加好药物
溶液和空白 HBSS 溶液的 Transwell 培养板置于转
速为 50 r/ min 的 37 ℃恒温摇床中 ,分别在 1、2、3、4
h 时吸取供给池、接收池溶液各 400μL ,同时补足相
应的溶液。试验平行做 3 份。
取供给池、接收池收集溶液各 400μL 加入 100
μmol/ L 睾丸酮内标溶液 100 μL , 于离心机中
13 000 r/ min 离心 15 min ,用超高压液相色谱仪进
行分析 ,计算渗透系数。
21313  数据分析 : Caco22 细胞模型表观渗透系数
(apparent permeability coefficient s Papp)的计算参
考 Art ursson[8 ] 于 1991 年报道的药物透过 Caco22
细胞单层的 Papp ,进行数据处理。Papp 值越大 ,通
透率越高。用 t 检验对两组数据进行比较处理 ,均
以 x ±s 表示。
  Papp = ( dQ/ dt) / ( S C)
dQ/ dt 为接收池药物出现的速率 , S 为膜面积 (412 cm2 ) , C
·222· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs  第 40 卷第 2 期 2009 年 2 月
为药物的初始质量浓度
5 个化合物渗透系数测定结果见表 1 ,从 A 侧
到 B 侧及从 B 侧到 A 侧转运量随时间的变化见图
2。实验表明 ,10μmol/ L 淫羊藿苷、朝藿定 A、朝藿
定 B、朝藿定 C、宝藿苷 Ⅰ从 A 侧到B 侧的转运量以
及从 B 侧到 A 侧转运量在 4 h 内都随着时间的增
加而呈线性增长。5 个化合物从 A 侧到 B 侧的吸
收渗透系数 ( PAB ) 都较小 ,其中宝藿苷 Ⅰ(11460 ×
10 - 6 cm/ s) > 淫羊藿苷 (5191 ×10 - 7 cm/ s) > 朝藿
定 C (4123 ×10 - 7 cm/ s) > 朝藿定 A (3122 ×10 - 7
cm/ s) > 朝藿定 B (2176 ×10 - 7 cm/ s) ,表明单糖苷
(宝藿苷 Ⅰ)的吸收要大于二糖苷 (淫羊藿苷) ,二糖
苷的吸收要好于三糖苷 (朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿
定 C) 。
表 1  淫羊藿黄酮成分的表观渗透系数与外排比率
( x ±s , n = 3)
  Table 1  Permeability coeff icients and efflux ratios
of flavonoids in Herba Epimedii ( x ±s , n = 3)
化合物
吸收渗透系数 PAB
×10 - 6/ (cm·s - 1)
分泌渗透系数 PAB
×10 - 6/ (cm·s - 1)
外排比率 PBA
/ PAB
朝藿定 A 01 322 ±01039 11 595 ±01194 4. 94
朝藿定 B 01 276 ±01020 11 338 ±01190 4. 82
朝藿定 C 01 423 ±01003 11 201 ±01105 2. 85
淫羊藿苷 01 591 ±01009 21364 ±01 07l 3. 99
宝藿苷Ⅰ 11 460 ±01202 141302 ±01 125 9. 84
图 2  淫羊藿黄酮朝藿定 A( A) 、朝藿定 B( B) 、朝藿定 C
( C) 、淫羊藿苷( D) 、宝藿苷 Ⅰ( E)转运量
Fig. 2  Transported amount of epimedin A ( A) , epimedin B
( B) , epimedin C ( C) , icariin ( D) , and baohuoside
Ⅰ( E) in Herba Epimedii
5 个化合物从 B 侧到 A 侧的渗透系数即分泌
渗透系数 ( PBA ) 比其吸收渗透系数大 ,外排比率
( PBA / PAB )分别为淫羊藿苷 3199 ,朝藿定 A 4194、
朝藿定B 4182、朝藿定 C 2185、宝藿苷 Ⅰ9184 ,因此
提示这 5 个黄酮苷在小肠吸收转运的过程中可能存
在肠道转运蛋白的外排作用。
3  讨论
黄酮是淫羊藿的主要有效成分 ,具有多种药理
活性 ,作为主成分的淫羊藿苷 ,药动学研究表明 ,其
生物利用度较低 (12 %) [9 ] ,而导致其生物利用度较
低的原因 ,以及与其结构类似的其它异戊烯基取代
黄酮的吸收代谢情况不得而知。由于 Caco22 细胞
模型与体内的肠道吸收情况有很好的相关性 ,因此 ,
本研究通过 Caco22 细胞模型 ,研究淫羊藿苷等黄酮
跨膜转运的情况 ,初步探讨淫羊藿黄酮小肠吸收转
运的机制。
药物通过胃肠道的吸收性能可以通过药物透过
胃肠道壁的渗透性来评价 ,此外 ,肠壁细胞膜内侧存
在的药物外排泵如 P2糖蛋白 ( P2gp) 和多药耐药相
关蛋白 (MRP)等 ,可以把已经摄入细胞内的药物外
排出去 ,从而影响药物的吸收与药物的生物利用
度[10 ,11 ] 。一般认为完全吸收的药物其渗透系数较
大 ( Papp > 1 ×10 - 4 cm/ s) ,而不完全吸收的药物具
有较低的渗透系数 ( Papp < 1 ×10 - 7 cm/ s) [12 ] 。实
验结果表明 ,淫羊藿黄酮的吸收渗透系数普遍较小 ,
淫羊藿苷、朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿定 C 的吸收渗
透系数约在 2 ×10 - 7~015 ×10 - 6 cm/ s ,因此吸收较
差 ,是导致这类化合物生物利用度较低的原因之一。
通常理论上讲如果化合物由小肠顶侧膜的转运蛋白
分泌或外排 ,那么 B 到 A 侧的渗透系数会远远大于
A 到B 侧的渗透系数[7 ] 。这 5 个黄酮苷的分泌渗透
系数约是吸收渗透系数的 3 倍或更大 ,尤其是宝藿
苷Ⅰ,外排比率 ( PBA / PAB )达到了 9184 ,因此提示这
5 个黄酮苷在小肠吸收转运的过程中可能存在肠道
转运蛋白的外排作用 ,这也可能是导致这类化合物
生物利用度较低的另一个原因。
此外 ,本实验运用了超高效液相来分析样品 ,分
析速度快 ,所用时间只有高效液相分析时间的十分
之一 ,大大地提高了样品分析的效率。
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吕琳昂1 ,2 ,师  涛1 ,2 ,杨辉华2 ,梁琼麟2 ,王义明2 ,罗国安2 3 
(1. 江西中医学院 ,江西 南昌  330004 ; 2. 清华大学分析中心 ,北京  100084)
摘 要 :目的  建立近红外光谱快速测定安神补脑液提取过程中有效成分的方法。方法  按照厂家工艺实验室模
拟安神补脑液水提过程 ,近红外在线检测并对提取物进行 HPLC 法测定 ,获取提取液的近红外 (NIR) 光谱信息与
提取物中的代表活性成分二苯乙烯苷、淫羊藿苷的信息 ,采用偏最小二乘法建立 NIR 与 HPLC 信息间的关系。结
果  校正模型相关系数分别为 01953 8、01975 6 ,预测样本集的误差均方根 ( RMSEP)分为 01048 7、01043 2。结论
本法操作简便、快速 ,可用于安神补脑液水提过程质量监控。
关键词 :安神补脑液 ;近红外 ;偏最小二乘法
中图分类号 :R28412 ;R286102    文献标识码 :A    文章编号 :025322670 (2009) 0220224205
Application of on2l ine detection and analytical technique by NIR in quality control of water
extracting process of Anshen Bunao Liquid.
L Β Lin2ang1 ,2 , SH I Tao1 ,2 , YAN G Hui2hua , L IAN G Qiong2lin2 , WAN G Yi2ming2 , L UO Guo2an2
(1. J iangxi University of Traditional Chinese Medicine , Nanchang 330004 , China ; 2. Analysis Center ,
Tsinghua University , Beijing 100084 , China)
Abstract : Objective  To develop a novel met hod for fast determination of the active component s in t he
ext ract s of Anshen Bunao Liquid wit h near inf rared (N IR) spect ro scopy. Methods  The samples in this
experiment were simulated according to t he manufacture p rocess. H PL C was used to determine t he con2
tent s of stilbene glycoside and icariin in t he ext ract s of Anshen Bunao Liquid. N IR spect ra of t he samples
were collected in range of 4 000 —12 500 cm - 1 . Multivariate calibration models based on PL S algorit hm
were developed to correlate t he spect ra and corresponding values determined by HPL C. Results  The core2
lation coefficient s of t he calibration models were 01953 8 and 01975 6 , and the RSE for stilbene glycoside
and icariin were 01048 7 and 01043 2 , respectively. Conclusion  The proposed met hod is simple and rapid ,
and used to quality cont rol of Anshen Bunao Liquid.
Key words : Anshen Bunao Liquid ; N IR ; PL S
  安神补脑液收载于《中华人民共和国卫生部药
品标准》中药成方制剂第 21 册 ,由制何首乌、淫羊
藿、大枣、甘草、干姜等中药精制而成 ,主要用于治疗
神经衰弱症、神经官能症、头痛、脑血管病恢复期、更
年期综合征等病证。安神补脑液中二苯乙烯苷和淫
羊藿苷的 HPL C 法测定已有报道[1 ,2 ] 。本研究以安
神补脑液提取过程为例 ,实验室模拟其工艺提取过
程 ,以近红外在线检测 ,并采用 HPL C 法测定所采
集样品的二苯乙烯苷和淫羊藿苷 ,采用偏最小二乘
( PL S)法建立近红外 (N IR)光谱信息与 H PL C 色谱
信息间的关系 ,探讨安神补脑液水提液中二苯乙烯
苷和淫羊藿苷的快速测定方法 ,以用于中药提取过
·422· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs  第 40 卷第 2 期 2009 年 2 月
3 收稿日期 :2008206215   
基金项目 :国家“十一五”科技支撑计划项目 (2006BAI08B04201) ;国家 973 中医理论专项 (2005CB523503)