全 文 ：大孔吸附树脂纯化注射用栀子提取物的研究
陈 钢 o侯世祥 3 o叶利民 o胡 平
k四川大学 华西药学院 o四川 成都 ytsswtl
≈摘要  目的 }初步探讨大孔吸附树脂应用于中药注射剂纯化的特点和评价方法 ∀方法 }以栀子提取液为样
本 o使用大孔吸附树脂纯化得到其提取物 o并从提取物的粉体学特性 !有效成分定性定量分析 !安全性 !稳定性等方
面来评价其质量和纯化方法的合理性 ∀结果 }采用大孔吸附树脂成功制得符合注射用要求的栀子提取物 ∀结论 }大
孔吸附树脂技术可用作中药注射剂的纯化工艺 o但需建立完善的质量评价方法以确保制剂的安全 !有效 !稳定 ∀
≈关键词  大孔吸附树脂 ~中药注射剂 ~栀子 ~纯化 ~注射用提取物
≈中图分类号  • u{w1u ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussxlsv2st{{2sv
≈收稿日期  ussw2su2sw
≈通讯作者  3侯世祥 oר¯ }ksu{l{xxsu{s| oksu{l{xxstvzy oƒ¤¬}
ksu{l{xxsu{s| o∞2°¤¬¯}«²∏¶¬¬ƒ uyv q±¨ ·
随着大孔吸附树脂分离纯化中药的基础研究不
断深入 o其在中药制剂中的应用越来越广泛并取得
了成功 o其中银杏黄酮≈t  !白芍药总苷≈u  !降压胶
囊≈v 等已用于工业生产 o但在中药注射剂中的应用
尚不多见 ∀本研究以栀子提取液为样本 o利用此纯
化方法制备注射用提取物 o并初步研究其应用特点 o
这将为大孔吸附树脂在中药注射剂制备中的推广提
供借鉴 ∀在目前大孔吸附树脂纯化注射用中药提取
物的研究中 o通常只测定有效部位的含量来评价所
得的提取物≈w ox  o难以保证其质量 o研究中又探索建
立了提取物的质量评价方法 o为大孔吸附树脂应用
于中药注射剂纯化的控制方法提供参考 ∀
1 仪器与材料
„ª¬¯¨ ±· ttss ≤ ~ ’• …„÷≥…2≤t{ 色 谱 柱
kw1y °° ≅ txs °° ox Λ°l ~ט p t{ss型紫外仪k北京
普析通用l ~≥¤µ·²µ¬²∏¶tztu型 trts万 ~≠…p u型澄明
度检测仪k天津大学精密仪器厂l ~喷雾干燥器k日本
大川原化工机株式会社l ~Š≤ ‹°x{|s ∀
大孔吸附树脂 ⁄2Ž• ⁄k简阳药业l ~栀子苷
k中国药品生物制品检定所l ~栀子药材为市售 o经本
院生药教研室王曙教授鉴定为茜草科植物栀子
Γαρδενιαϕασµινοιδεσ ∞¯ ¬¯¶~所用试剂均为分析纯 ∀
2 方法与结果
211 栀子苷k类l含量测定方法
参照5中国药典6usss年版栀子药材的测定方
法 o建立了栀子苷 ‹°≤含量测定方法 o该法具有良
好的线性 !重复性和加样回收率 ∀以乙腈2水kusΒ
{sl为流动相 o检测波长 uv{ ±°∀标准曲线方程 Ψ€
|{s1vy Ξ n v1v|s y oρ € s1||| yk ν € xl o含量在
tx1s ∗ vss1s Λª#°pt ~日内与日间精密度 • ≥⁄分别
为 s1|{ h ot1ww h ~平均加样回收率为 tss1z h o• ≥⁄
s1|t h ∀
参照文献≈y  o建立的栀子苷类紫外分光光度含
量测定方法也具有良好的线性 !重复性和加样回收
率 ∀以乙醇为溶剂 o测定波长 uv{ ±°∀标准曲线方
程 }Χ€ v{1|Αp s1ssz z{ , ρ€ s1||| {( ν € z) o含量
在 ts1s ∗ vs1s Λª#°pt ~日内与日间精密度 • ≥⁄分
别为 t1su h ot1sx h ~平均加样回收率为 |{1{ h o
• ≥⁄t1s h ∀
212 供试样品k栀子提取液l的制备
取栀子药材适量 o加入 y倍 zs h乙醇 o分 v次提
取 o每次 ys °¬±得醇提液 ∀将醇提液回收乙醇后滤
过 o加水稀释至每 y °药液相当于 t ª药材 o测得其
中栀子苷含量为 |1yz{ °ª#°pt o即得供试样品 ∀
213 大孔吸附树脂纯化栀子提取液
21311 大孔吸附树脂的选择与前处理 将大孔吸
附树脂 ⁄2Ž• ⁄ ys ε 干燥 o取适量 o称重 o加 |x h
乙醇浸泡充分溶胀 o湿法装柱 o再用 |x h乙醇冲洗
至流出液加水不呈白色浑浊为止 o水洗乙醇备用 ∀
21312 纯化过程 将供试样品上柱 o水洗 o再依次
用不同浓度的乙醇kwx h o|x h l洗脱 o分段收集过柱
残液与流出液 o用 ƒ ≤¨¯ v试液对分段收集液进行定性
鉴别 o依据定性鉴别的结果合并收集液 ∀
21313 树脂纯化特性参数的测定 采用 ‹°≤ 测
#{{t#
第 vs卷第 v期
ussx年 u月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vs oŒ¶¶∏¨ v
ƒ ¥¨µ∏¤µ¼oussx
得上柱液 !过柱残液和不同洗脱液中栀子苷的量 o参
照文献≈z 计算得到大孔吸附树脂对栀子提取液吸
附洗脱性能评价的特性参数 }比上柱量为 {t1| °ª#
ªpt o比吸附量为 z{1{ °ª#ªpt o比洗脱量为 yu1u °ª#
ªpt o保留率为 zw1w h k比洗脱量和保留率是以 wx h
乙醇洗脱量计算l ∀
21314 纯化液的干燥 将 wx h 乙醇洗脱液加
s1u h针剂用活性炭脱色 o然后回收乙醇 o浓缩至相
对密度为 t1sx ∗ t1tskux ε 测得l o喷雾干燥得棕
色 !疏松粉末 o即栀子提取物 ∀
214 栀子提取物的质量评价
21411 粉体学特性考察 测得堆密度为 s1xuw v ª#
°pt o休止角为 ww1vβ o临界相对湿度 k≤• ‹l为
zv1xz h ∀
21412 有效成分定性定量分析 ‹°≤ 测得有效
单体栀子苷含量为 wu1u h o˜∂ 测得栀子苷类含量
为 {x1s h ~定性检查发现 o提取物保留了药材提取
液中绝大部分有效成分如酚类 !生物碱 !黄酮类 !糖
类等 o不含鞣质 !蛋白 !树脂等成分 ∀
21413 按注射剂制剂通则检查 按5中国药典6
usss年版规定注射剂的检查项目k澄明度 !³‹ !无菌
检查等l o对提取物溶液进行澄明度检查 o结果澄清
透明 ~将提取物溶液灌封煮沸后检查 o无菌检查和
³‹均符合规定 ∀
21414 杂质检查 按照5中药注射剂研究的技术
要求6对砷盐 !炽灼残渣 !重金属 !蛋白质 !树脂 !鞣
质 !草酸盐 !钾离子等进行检查 o结果均符合规定 ∀
21415 安全性的特殊评价项目 异常毒性检查结果
表明 o提取物溶液对小鼠异常毒性试验合格 ~溶血试
验结果表明 o提取物溶液无溶血作用 o对红细胞有凝
聚作用 o但此凝聚作用不影响临床使用 ~全身过敏试
验结果表明 o提取物溶液对豚鼠无全身过敏反应 ~刺
激性试验结果表明 o局部刺激性试验符合规定 o而且
对家兔血管也无刺激作用 ∀
21416 有机残留物的检查 采用气相色谱法的溶
液直接进样法对提取物中有机残留物进行检查 o进
样样品为提取物的无水乙醇提液和二甲基亚砜
k⁄≥’l提液 ∀
提取物 ⁄≥’k或无水乙醇l液ks1t ª#°ptl中
各残留物的含量均在其检测限以下 o分别为 }苯 !甲
苯 !二乙烯苯  x Λª#°pt ~二甲苯 !苯乙烯  u Λª#
°pt ∀残留物总量  us Λª#°pt ∀
21417 稳定性影响因素试验 按5中国药典6usss
年版二部附录/药物稳定性试验指导原则0对提取物
进行影响因素试验 ∀在高温kys ε l和强光照射试
验中 o提取物的外观性状均无明显变化 o并分别于 x
§和 ts §采用 ‹°≤ 测定栀子苷含量 ∀高温试验 x
§测得栀子苷残留量为 ||1{ h ots §为 ||1t h ~强光
照射试验测定结果见表 t ∀
表 t 栀子提取物强光照射试验结果 h
光源 x §残留量 ts §残留量
紫外灯下 |t1w {y1u
荧光灯下 |z1t {y1z
白炽灯下 |{1| |{1y
在高湿试验k• ‹zx h l中 o提取物逐渐聚集 o后
呈半固体糊状 o并分别于 x §和 ts §测定吸湿率 ∀x
§测得吸湿率为 tt1w| h ots §为 tu1wu h ∀
21418 初步稳定性考察 取提取物适量 o于室温
放置在干燥器中 o分别放置 s ot ou ov月 o发现其外观
性状均无明显变化 ~并将其配成溶液进行澄明度检
查 o均澄清透明 ∀放置 t ou ov月 o‹°≤ 测得栀子苷
残留量分别为 ||1{ h o||1w h o||1w h ∀
3 讨论
311 以上各检查项中的栀子提取物溶液的按照部
颁标准≈{ 中茵栀黄注射液的处方浓度和 ³‹值配制
而成 ∀
312 注射用中药提取物 o是参照西药初步提出的 o
系指采用科学合理的方法 o对中药材进行提取纯化
而得到的具有相对明确药效物质基础 !符合注射用
标准的提取物 o可作为中药注射剂的原料药 ∀
313 栀子提取物的检查结果初步表明 o提取物安
全 !有效 !稳定 o可供注射用 ∀当然 o还需用药理 !药
效实验进一步证明 ∀本研究曾采用水醇法纯化栀子
提取液 o制备得到的注射用提取物收率与大孔吸附
树脂法基本相同 o但其中栀子苷含量较低k‹°≤ 测
得结果为 uv1t h o˜∂ 为 wy1s h l ∀化学成分定性定
量检查结果可知 o大孔吸附树脂不仅能有效地除去
栀子药材提取液中不适合注射的杂质还能很好地保
留其有效组分 ∀总之 o大孔吸附树脂法作为注射用
栀子提取物的制备方法是可行的 ∀不过 o若要充分
说明采用大孔吸附树脂纯化的必要性与合理性 o还
应进行药效学对比试验以确保上柱前后药物的/等
效性0 ∀
314 供试样品制备过程中的药材提取工艺是经正
交试验优选所得 o用此工艺条件药材中的栀子苷转
#|{t#
第 vs卷第 v期
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中 国 中 药 杂 志
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移率达 |{1s h ∀根据本研究室毕岳琦等≈| 的研究 o
大孔吸附树脂 ⁄2Ž• ⁄对栀子苷吸附速率较快 o比
吸附量较大 ~wx h乙醇洗脱能力较强 ∀而且 o该树脂
已见有用在新药开发的工艺中 ∀故本研究大孔吸附
树脂采用 ⁄2Ž• ⁄o洗脱溶剂采用 wx h乙醇 ∀
315 制备所得的注射用栀子提取物为粉末 o若储
存条件不当k如环境湿度过高l可能吸潮使其变质或
投料不准 o并且注射用栀子提取物可用作注射用无
菌分装产品 o为了分装和定量准确需知道分装产品
的堆密度与休止角等 ∀所以 o有必要对所得提取物
的粉体学特性进行考察 ∀
316 本研究所用大孔吸附树脂⁄2Ž• ⁄为苯乙烯
型骨架结构 o其原料有甲苯 !二乙烯苯 !辛醇 !聚乙烯
醇等 o聚合反应之后回收后 o树脂的孔隙中仍会残留
一些溶剂甲苯 !二乙烯苯 ∀所以 o需对栀子提取物中
的有机残留物进行检查以确保药物的安全 ∀根据国
家药监局5关于/大孔吸附树脂分离纯化中药提取液
的技术要求0的补充说明6 o对提取物中有机残留物
苯 !甲苯 !二甲苯 !苯乙烯 !二乙烯苯进行检测 ∀没对
烷烃类进行检查 o是因为残留烷烃主要来自甲苯 o工
业甲苯中烷烃不大于 s1ux h o而经检测发现甲苯 
s1x Λª#°pt o因此烷烃含量极低 o没必要检查 ∀栀
子提取物中有机残留物的检测结果可知 o其含量极
低 o对人体影响可能甚微 ∀不过 o最好再通过毒理学
实验加以确定 ∀
317 影响因素试验结果表明 o提取物在白炽灯照
射下较紫外灯和荧光灯稳定 ~在高温试验条件下比
较稳定 ~受湿度影响较大 o与其粉体学特性相符 ∀上
述结果提示制备的注射用栀子提取物最好在干燥条
件下避光贮存 ∀初步稳定性考察结果表明 o室温放
置 v个月后 o提取物的有效成分含量 !性状和澄明度
皆无明显变化 o说明其在室温条件下稳定性较好 ∀
≈参考文献 
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的吸附纯化特性研究 q中国中药杂志 oussv ou{kvl }utz q
Στυδιεσ ον πυριφιχατιον οφ τηε εξτραχτ οφ φρυχτυσ γαρδενιαε
φορ ινϕεχτιον βψ µαχρορετιχυλαρ ρεσινσ
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( Ηυαξι Σχηοολ οφ Πηαρµαχψ, Σιχηυαν Υνιϖερσιτψ, Χηενγδυ ytsswt , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ³∏µ¬©¼ ²©·«¨ ¬¨·µ¤¦·²©©µ∏¦·∏¶ª¤µ§¨±¬¤¨ ©²µ¬±­¨¦·¬²± ¥¼ °¤¦µ²µ¨·¬¦∏¯¤µµ¨¶¬±¶¬± ³∏µ¬©¬¦¤·¬²± ³µ²¦¨¶¶²©·µ¤§¬·¬²±¤¯
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¦¨¶¶©∏¯¯ ¼ ¥¼ °¤¦µ²µ¨·¬¦∏¯¤µµ¨¶¬±qΧονχλυσιον :˜¶¬±ª°¤¦µ²µ¨·¬¦∏¯¤µµ¨¶¬±¶¬¶¤³µ²°¬¶¬±ª³∏µ¬©¬¦¤·¬²± º¤¼ ²©×≤ ¬±­¨¦·¬²±¶oº«¨µ¨¤¶¤ °²µ¨ ¦²±¶∏°2
°¤·¨ °¨ ·«²§²© ∏´¤¯¬·¼ √¨¤¯∏¤·¬²± °∏¶·¥¨ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨§·² ±¨¶∏µ¨ ¶¤©¨·¼o ©¨©¬¦¬¨±¦¼ ¤±§¶·¤¥¬¯¬·¼ ²©·«¨ ³µ¨³¤µ¤·¬²±¬±·«¨ ³µ²¦¨¶¶q
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≈责任编辑 刘  
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