全 文 ：芦荟粗多糖对人表皮细胞体外分泌细胞因子的影响
陈晓东t 3 o吴伯瑜t o江 琼t o黄丽英u o王中成u
kt1 福建医科大学 附属协和医院 福建省烧伤研究所 o福建 福州 vxssst ~
u1 福建医科大学 药学院 o福建 福州 vxssswl
≈摘要 目的 }观察芦荟粗多糖对体外培养表皮细胞分泌生长因子k∞ƒ o׃2Αo׃2Βtl !白细胞介素k2tΒo
2y o2{l及肿瘤坏死因子k׃l的影响 ∀方法 }用不同剂量kzx otxs ovss oyss ot uss °ª#ptl芦荟粗多糖作用于
表皮细胞 o采用 ∞≥和放射免疫法kl测定细胞培养上清液中 ∞ƒ o׃2Αo׃2Βt o2tΒo2y o2{ o׃的水平 o
并以等体积的细胞培养液处理为对照组 ∀结果 }经芦荟粗多糖作用后 o表皮细胞培养液中 ∞ƒ o׃2Αo׃2Βt o2
tΒo2y o2{ o׃水平呈不同程度升高 o其中 ∞ƒ o׃2Αo2tΒo2y o2{水平与对照组比较其差异具有显著性意义
k Π s1sx oΠ s1st l o且呈一定的量效关系 ∀结论 }芦荟粗多糖对表皮细胞分泌 ∞ƒ o׃2Αo2tΒo2y o2{具有促
进作用 ∀
≈关键词 芦荟粗多糖 ~表皮细胞 ~细胞因子 ~生长因子 ~白细胞介素 ~肿瘤坏死因子
≈中图分类号 u{x1x ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussxluw2t|ww2sv
≈收稿日期 ussx2sx2uy
≈基金项目 福建省科技厅重点资助项目kussustxl ~福建省卫
生厅青年基金资助项目kusst2t2txl
≈通讯作者 3 陈晓东 oר¯ }ksx|tl{vvxz{|y2{vxt o ∞2°¤¬¯}©½¬§2
¦«¨ ± ¶¬±¤1¦²°
自古以来 o芦荟作为一种天然药用植物在民间
得以广泛应用 o它具有安全 !有效 !易用等突出特点 o
被用于治疗烧伤 !烫伤 !便秘等多种疾病 ~芦荟多糖
是芦荟凝胶中的主要活性成分 o研究表明它具有增
强免疫力 !抗炎 !抗病毒 !抗肿瘤等作用≈t2v ∀本研究
从药用库拉索芦荟中提取芦荟粗多糖作用于体外培
养的表皮细胞 o研究其对表皮细胞分泌表皮生长因
子k∞ƒl !转化生长因子2ΑoΒtk׃2ΑoΒtl以及白细胞
介素2tΒoy o{k2tΒo2y o2{l和肿瘤坏死因子
k׃l等炎症相关介质的影响 o并探讨其对表皮细
胞的可能作用机制 ∀
1 材料和方法
111 库拉索芦荟粗多糖的提取分离 应用醇沉淀
法从库拉索芦荟凝胶中提取粗多糖后 o经低温冷冻
干燥后得浅黄色芦荟粗多糖无定形粉末k由福建医
科大学药学院提供及鉴定l o所提取的芦荟多糖为
Β2∆2乙酰化甘露聚糖 o其糖含量为 ux1v h ∀
112 分组 将表皮细胞随机分为对照组和实验组 o
对照组加 ⁄2≥ƒ 培养液 o实验组分别加入临用时
配制的以终含量为 zx otxs ovss oyss ot uss °ª#pt芦
荟粗多糖的 ⁄2≥ƒ 培养液 ∀
113 培养上清液的收集 取第 w代融合培养的表
皮细胞 o经 s1ux h胰蛋白酶和 s1su h ∞⁄×等体积
消化后 o用培养液将其配制成每 t °含 t1x ≅ tsw个
的单细胞悬液 o以每孔 u °接种于 tu孔培养板中 o
置 vy1x ε ox h ≤u o培养 uw «~贴壁后 o换为实验组
和对照组培养液 u °o继续培养 w{ «后 o吸取上清
液 o经冷冻干燥后 o于 p {s ε 冻存 o测定时用样品稀
释液复溶 o各组设 {个复孔 ∀
114 生长因子和炎症相关介质的检测 ׃2Βt o
∞ƒ o2tΒo2y o2{ 的测定采用 ∞≥ 法 o其中
∞ƒ o׃2Βt试剂盒由上海茂元科技有限公司提供 o
2tΒo2y o2{ 试剂盒由法国 ⁄¬¤¦¯²±¨ 公司提供 ~
׃2Αo׃的测定采用放射免疫法 o试剂盒由解放
军总医院科技开发中心放免研究所提供 o操作步骤
严格按说明书 ∀
115 统计学处理 数据以 cξ ? σ表示 o全部统计资
料采用 ≥°≥≥ tu1s统计软件包完成 o多组样本间比较
采用 ±¨ 2 • ¤¼ ∂ 分析 o数据相互关系采用相关
分析 ∀
2 结果
211 芦荟粗多糖对表皮细胞分泌生长因子的影响
不同剂量芦荟粗多糖组培养上清液中 ∞ƒ 和
׃2Α水平呈现不同程度升高 o其中 vss oyss ot uss
#ww|t#
第 vs卷第 uw期
ussx年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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⁄¨ ¦¨ °¥¨µoussx
°ª#pt芦荟粗多糖组 ∞ƒ 和 ׃2Α水平与对照组
比较具有显著性差异k Π s1sx oΠ s1stl ot uss °ª
#pt芦荟粗多糖组 ∞ƒ水平还显著高于 zx otxs °ª
#pt组k Π s1sxl o且 ∞ƒ 增加趋势与剂量呈明显
相关kρ s1|yz , Π s1stl ~培养上清液中 ׃2Βt水
平略有升高 o但与对照组比较无显著性差异k表 tl ∀
表 t 芦荟粗多糖对表皮细胞分泌生长因子的影响kcξ ? σ, ν {l ±ª#pt
分组 剂量r°ª#pt ∞ƒ ׃2Α ׃2Βt
对照组 t|qxx ? wqsy tq{z ? sqxu uqsw ? sq{s
芦荟粗多糖 zx uvqxz ? zquy uqvy ? sqxs uqsx ? sqvx
txs uvq{z ? xqyz uqx| ? sqzs uqt| ? sq|{
vss uyqyw ? zqwstl u qyz ? sq{ttl u qxv ? sqzz
yss uyqzs ? yqsytl u q{v ? tqtztl u qy{ ? sqyw
t uss vtqs{ ? yqusuovowl u q{z ? sqxttl u qzv ? sqxz
注 }与对照组比较tl Π s qsx oul Π s qst ~与 zx °ª#pt组比较vl Π s qsx ~与 txs °ª#pt组比较wl Π s1sx
212 芦荟粗多糖对表皮细胞分泌白细胞介素及肿
瘤坏死因子的影响 芦荟粗多糖作用后 o培养上清
液中 2tΒ水平略有升高 o其中 t uss °ª#pt芦荟粗
多糖组 2tΒ水平与对照组和 yss °ª#pt以下各组
比较具有显著性差异k Π s1st l ~芦荟粗多糖组培
养上清液中 2y水平呈不同程度升高 o其中 txs °ª
#pt以上芦荟粗多糖各组与对照组比较具有显著
性差异k Π s1stl o且 vss °ª#pt以上芦荟粗多糖
各组与 txs °ª#pt以下各组比较也具有显著性差异
kΠ s1sx oΠ s1stl ~芦荟粗多糖组中 2{水平也
有不同程度升高 o其中 yss ot uss °ª#pt芦荟粗多
糖组中 2{水平均高于对照组和 vss °ª#pt以下
各组 o其差异具有显著性意义k Π s1stl ~结果还显
示 o表皮细胞分泌 2tΒ和 2{水平与芦荟粗多糖
剂量明显相关kρ分别为 s1|{s和 s1|tv , Π s1sx o
Π s1stl ∀而芦荟粗多糖组培养上清液中 ׃ 水
平也略有升高 o但与对照组比较差异无统计学意义
k表 ul ∀
表 u 芦荟粗多糖对表皮细胞分泌白细胞介素及肿瘤坏死因子的影响kcξ ? σ, ν {l
分组 剂量r°ª#pt ptΒr±ª#pt pyr±ª#pt p{r±ª#pt ׃r°ª#pt
对照组 {qyz ? tqyx vsqxx ? xqyt twyq|| ? u{qyw uquy ? sqtv
芦荟粗多糖 zx |q|z ? tq{s v|qw{ ? |qw| tyzq{| ? uvqxz uqvu ? sq||
txs |qw| ? tq|{ w{q|| ? {qzvtl tx|qtw ? xqu{ uqyt ? tqss
vss tsqw{ ? vqut ytqy{ ? {qsutouowl tz{q|{ ? uyqx{ uqxu ? sq|z
yss ttquy ? tq|s ytqxx ? tvqzstouowl vxtqtu ? wxquttouovoxl u qyx ? tqss
t uss twqzt ? vqzytouovoxoyl zt qwv ? txqustouovl vz{q|s ? {xqzvtouovoxl u qzz ? tqys
注 }与对照组比较tl Π s qst ~与 zx °ª#pt组比较ul Π s qst ~与 txs °ª#pt组比较vl Π s qst owl Π s qsx ~与 vss °ª#pt组比较 }xl Π s qst ~
与 yss °ª#pt组比较yl Π s qst
3 讨论
芦荟是一种多年生百合科芦荟属肉质的草本植
物 o富含多种生物活性物质 o作为一种传统的中药 o
具有良好的抑菌抗炎 !促进创面愈合等药理作用 o而
芦荟多糖则是芦荟中主要生物活性成分≈w ox ∀在创
面愈合过程中细胞因子具有重要的作用 o它可调节
多种细胞反应 o并影响细胞增殖 !迁移 !细胞外基质
合成与释放等≈y ~创面愈合首先表现为由多种炎性
介质如 2tΒo2y o׃等介导的局部炎症反应 o并
同时启动和调控创面修复 o使细胞进入增殖修复状
态 o在 ∞ƒ o¥ƒƒ o°⁄ƒ o׃2Αo׃2Βt等生长因子作
用下 o促进细胞增殖及细胞间基质蛋白合成≈z ∀
本研究结果显示 o经芦荟粗多糖作用后 o表皮细
胞培养上清液中 ∞ƒ 和 ׃2Α水平呈不同程度地
升高 o其中 ∞ƒ 水平升高与剂量明显相关 o表明芦
荟粗多糖能促进表皮细胞表达 ∞ƒ和 ׃2Αo并以
自分泌形式合成和分泌 ∞ƒ和 ׃2Α~∞ƒ和 ׃2Α
能促进正常细胞分化 o刺激表皮细胞 !成纤维细胞和
内皮细胞增殖 o促进新生血管形成 o加速创面的愈
合 ∀结果还显示 o芦荟粗多糖作用后 o表皮细胞合成
和分泌 ׃2Βt水平虽与对照组比较无显著差异 o但
其分泌能力略有增强 o׃2Βt在体内能刺激血管内
皮细胞 !成纤维细胞的增殖 o加速血管化和上皮化 o
促进胶原合成与成熟 ~有资料显示 o芦荟可通过促进
创面组织的胶原更新来影响创面的愈合≈{ ∀
有研究表明 o芦荟多糖对体外正常大鼠脾细胞
分泌 2t o2y o׃等细胞因子均有一定的促进作
#xw|t#
第 vs卷第 uw期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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用 o而对内毒素诱导脾细胞分泌的细胞因子 2t o
2y o׃有显著抑制作用 o表明芦荟多糖对细胞因
子的分泌可产生双向调控作用≈| ∀2y对表皮细胞
有活化增殖作用 o且能间接诱导表皮细胞的迁
移≈ts o2{能促进表皮细胞生长增殖 o并加速新生
血管的形成 o而 ׃ 能促进成纤维细胞的成熟 o并
与 2tΒ及 2y共同作用下 o诱导组织损伤后的修
复≈tt ∀本研究结果发现 o芦荟粗多糖作用后 o表皮
细胞培养上清液中 2tΒo2y o2{ o׃水平呈不同
程度地升高 o其中 2tΒo2y o2{ 升高水平与对照
组比较具有显著性差异 o且与芦荟粗多糖剂量呈一
定的相关 o表明芦荟粗多糖能促进表皮细胞分泌炎
性因子 o而这些因子一方面可能作为炎症介质参与
局部炎症反应 o另一方面对表皮细胞或其他细胞如
成纤维细胞 !内皮细胞的增殖起不同的调节作用 ∀
以上研究结果提示 o芦荟粗多糖可能通过影响表皮
细胞分泌细胞因子来调控表皮细胞的增殖 o但有关
确切的作用机制有待进一步研究 ∀
≈参考文献
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·«¨ ¤±·¬²¬¬§¤±·¶·¤·∏¶²© §¬©©¨µ¨±··¬¶¶∏¨¶¬± ¬µµ¤§¬¤·¨§µ¤·¶q Πηαρ2
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Βυρνσ , ussv ou|k{l }{vw q
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≈y 屈纪富 o郝 利 o孙 薇 o等 q细胞因子在创伤愈合过程中的
变化及其意义的研究进展 q创伤外科杂志 oussv ox ktl }zw q
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≈| 王 莉 o杜俊蓉 o蔡绍晖 o等 q °对正常和内毒素化大鼠脾
细胞体外分泌细胞因子的影响 q华西药学杂志 ot||| otwkx2
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≈tt 付小兵 o李校坤 o赵建钢 q创伤修复的分子生物学 q见 }付小
兵 o王德文 q现代创伤修复学 q北京 }人民军医出版社 ot||| q
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Εφφεχτ οφ αλοε χοαρσε πολψσαχχηαριδε ον χψτοκινε σεχρετιον
οφ κερατινοχψτεσ ιν ϖιτρο
≤∞÷¬¤²2§²±ªt o •
²2¼∏t o ¬´²±ªt o ¬2¼¬±ªu o • «²±ª2¦«¨ ±ªu
(t . Προϖινχιαλ Βυρνσ Ινστιτυτε , Υνιον Ηοσπιταλ, Φυϕιαν Μεδιχαλ Υνιϖερσιτψ, Φυζηου vxssst , Χηινα ;
u . ∆επαρτµεντ οφ Χηεµιχαλ, Φυϕιαν Μεδιχαλ Υνιϖερσιτψ, Φυζηου vxsssw , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¶·∏§¼·«¨ ©¨©¨¦·¶²© ¯ ²¨ ¦²¤µ¶¨ ³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ²±·«¨ ¯¨ √¨¯¶²©ªµ²º·«©¤¦·²µ¶k∞ƒ o׃2Αo׃2Βtl ¤±§
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º¬·« ¯ ²¨ ¦²¤µ¶¨ ³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ¤·¦²±¦¨±·µ¤·¬²±¶²©zx otxs ovss oyss ot uss °ª#pt¤±§·«¨ ¨´ ∏¤¯ √²¯∏°¨²© ° §¨¬¤¤¶¦²±·µ²¯ ªµ²∏³q׫¨
¯¨ √¨¯¶²© ∞ƒ o׃2Αo׃2Βt o2tΒo2y o2{ ¤±§×ƒ ¬±·«¨ ¶∏³¨µ±¤·¤±·¶²©¦∏¯·∏µ¨§®¨µ¤·¬±²¦¼·¨¶º µ¨¨ ¤¶¶¤¼¨ §¥¼ ±¨½¼° 2¨¯¬±®¨ §¬°2
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¤±§·«¨ ¯¨ √¨¯¶²©×ƒ2Βt ¤±§×ƒ º µ¨¨ ¤¯¶²¬±¦µ¨¤¶¨§¥∏·±²¶·¤·¬¶·¬¦¤¯ ¶¬ª±¬©¬¦¤±¦¨ q Χονχλυσιον : ¯ ²¨ ¦²¤µ¶¨ ³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ °¤¼ ³µ²°²·¨
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[ Κεψ ωορδσ] ¤¯²¨ ¦²¤µ¶¨ ³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ~®¨µ¤·¬±²¦¼·¨ ~¦¼·²®¬±¨ ~ªµ²º·«©¤¦·²µ~¬±·¨µ¯¨ ∏®¬±¶~·∏°²µ±¨ ¦µ²¶¬¶©¤¦·²µ
≈责任编辑 方文贤
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