全 文 :τωο Τριχηοδερµ α ¶·µ¤¬±¶¶«²º §¨§¬©©¨µ¨±·ªµ²º·«µ¤·¨ ∏±§¨ µ ¬¯ª«·¦²±§¬·¬²±¶¤±§³ q Τριχηοδερµ α ¶·µ¤¬±¶º µ¨¨ ¶¨±¶¬·¬√¨·² °²¶·©∏±ª¬2
¦¬§¨ ¶∏¶¨§¬± ª¬±¶¨±ªµ²²·§¬¶¨¤¶¨ ¦²±·µ²¯ ¬¯±ªo«²º √¨ µ¨×√sw2u º¤¶±²·¶¨±¶¬·¬√¨·²·«¨ ©∏±ª¬¦¬§¨ ∏±¦«²±ª∏¨ ¥¤q
[ Κεψ ωορδσ] Τριχηοδερµ α ¶³³q~ ¤±·¤ª²±¬¶°~ ªµ²º·«µ¤·¨~ ª¬±¶¨±ªµ²²·³¤·«²ª¨ ±¶
≈责任编辑 张宁宁
≈收稿日期 ussx2tt2sw
≈基金项目 国家 / {yv0计划 kussvuwysytl
≈通讯作者 3 李召虎 o ר¯} k sts l yuzvvwuzo ƒ¤¬} k sts l
yuzvuxyzo∞2°¤¬¯} ¬¯½«¤²«∏ ¦¤∏q §¨∏q¦±
植物生长物质 2w对甘草叶片活性氧代谢
及 °≥µ光化学效率调控的研究
李 刚 tou o段留生 u o王保民 u o何钟佩 u o李召虎 u3 o周成明 v
kt1吉林农业科技学院 o吉林 吉林 tvuts|~ u1中国农业大学 农学与生物技术学院 o北京 tsss|w~
v1北京大兴时珍中草药技术研究所 o北京 tsuys|l
≈摘要 目的 }研究在大田条件下植物生长物质 2w系统调控对甘草叶片活性氧代谢及 °≥µ光化学效率
影响 ∀方法 }以乌拉尔甘草为材料 o定期测定 2w对甘草叶片的活性氧代谢及 °≥µ光化学效率的影响 ∀结果与
结论 }2w提高了叶片中叶绿素的含量 !提高了超氧化物歧化酶 k≥⁄l!过氧化氢酶 k≤×l活性 o降低了过氧化
物酶 k°⁄l活性和膜脂过氧化物产物丙二醛 k ⁄l的积累 o改善了活性氧代谢 o延缓了叶片的衰老 o提高了叶片的
光化学效率 kΦ√ rΦ° l∀
≈关键词 甘草 ~叶片 ~活性氧代谢 ~光化学效率 ~植物生长物质
≈中图分类号 ≥ xyz ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussylus2tyzw2sw
植物的干物质 |sh以上来自光合作用 ≈t o叶片
衰老过早或过晚都会对产量与品质造成不利影响 o
活性氧积累引起膜脂过氧化可能是叶片衰老和活性
下降的重要原因之一 ≈u ∀超氧化物歧化酶 k≥⁄l!
过氧化氢酶 k≤×l和过氧化物酶 k°⁄l是细胞抵
御活性氧伤害的酶保护系统 o在清除超氧自由基 !过
氧化氢和过氧化物及阻止或减少羟基自由基形成方
面起重要作用 ≈v o丙二醛 k ⁄l是脂质化过氧化的
产物 o其含量的高低反映着膜脂过氧化程度 ≈w ∀因
此 o人们认为 ≥⁄o≤×o°⁄等酶活性及 ⁄含量
变化作为行量叶片衰老的重要标志 ≈x ∀
乌拉尔甘草 Γλψχψρρηιζα υραλενσισ ƒ¬¶¦«¨ µqk简称
甘草 l是药典收载的甘草药材的原植物之一 o以干
燥的根及根状茎入药 ≈w ∀野生甘草资源日趋枯竭 o
有关甘草栽培生理的研究已引起人们的关注 ≈yoz ∀
李明等 ≈{ 开展了干旱胁迫对甘草幼苗保护酶活性
及脂质过氧化作用的影响研究 o但从活性氧代谢角
度研究植物生长物质对栽培甘草叶片衰老的效应调
控 o国内外尚未见报道 ∀
植物生长物质 2w在促进甘草生长发育方
面有良好的调控效应 ≈z o本研究以二年生栽培甘草
为材料 o应用 2w处理甘草 o研究甘草叶片的活
性氧代谢 o为探讨植物生长物质对甘草延缓衰老 o提
高光合效率 o增加产量 o改善品质的调控机理 o提供
依据 ∀
1 材料与方法
111 仪器及试剂 紫外可见分光谱 k°«¤µ°¤¦¬¤
¬²¦«µ²° w1ysl~ × ≥°⁄ p xsu型叶绿
素计 k日本 l~ƒ ≥u型便携式荧光仪 k英国 ¤±¶¤·2
¦¨«公司 l∀
112 材料 2wk主要成分为 {sh二乙氨基乙基
已酸脂 l是中国农业大学作物化学控制中心研制的
环境友好甘草专用型植物生长物质 ≈z ∀
实验材料为乌拉尔甘草 o种子用新疆野生乌拉
尔甘草 ∀在北京大兴时珍中草药技术研究所实验基
地 oussv年 w月机械等量条播 o正常田间管理 ∀用
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第 vt卷第 us期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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2w对二年生栽培甘草于 ussw年 {月 u{日叶面
喷施 ow次重复 o以叶片湿润 o叶尖可见水珠为限 o对
照组喷水 ∀然后分别于第 y天 k|月 u日 l!第 tt天
k|月 z日 l和第 tx天 k|月 tt日 l定期取样 o清水
冲净全株 o用吸水纸吸干表面附水 o立刻在液氮中冷
冻 us °¬±o再转入 pws ε 下保存 o待测 ∀
113 方法 叶绿素 k≥°⁄值 l含量采用 ×
≥°⁄ pxsu型叶绿素计 k日本 l测定 ≈| ∀ °≥µ光化
学效率用 ƒ ≥u型便携式荧光仪 k英国 ¤±¶¤·¨¦«公
司 l测定标记叶 °≥µ光化学效率 Φ√ rΦ° ≈ts ∀酶活
性测定 }测定 ≥⁄o ≤×o °⁄活性及 ⁄ 含
量 ≈tt2tv ∀
2 结果与分析
211 对叶片叶绿素含量的影响 光合色素是叶绿
体的重要组成部分 o也是研究植物光合的重要指标 o
本实验结果表明 k图 tlo随生长期的推迟 o甘草叶片
中的叶绿素 ≥°⁄值逐渐下降 o第 tx天较第 t天下
降了 tu1{h o这与进入生长未期的植物生长规律相
符 ∀在植物生长物质处理后 o甘草叶片的绿叶期得
到了延长 o第 yottotx天较对照分别提高了 y1|h o
tt1th otv1vh o表明植物生长物质调控了叶片的功
能期 ∀
图 t 2w处理对甘草叶绿素 ≥°⁄的影响
pσ p对照 ~ pυ p处理 k表 u ∗ y同 l
212 对叶片 °≥µ光化学效率的影响 叶绿素荧光
动力学技术为无损伤 !快速测定叶片光合功能提供
了方便 oΦ√ rΦ° 是 °≥µ最大光化学量子产量 o反映
°≥µ反应中心内最大的光能转换效率 oΦ√ rΦ°是一
个稳定的研究植物常用的基本荧光参数 ∀植物在低
温胁迫 !盐胁迫和水分胁迫等逆境条件下 oΦ√ rΦ°值
会明显降低 ≈{ ∀本实验结果表明 k见图 ul在实验期
内甘草叶片的 Φ√ rΦ°逐渐下降 o甘草经 2w处理
后 o提高了 Φ√ rΦ°值 k°≥µ原初光能转化效率 lo处
理后第 yo tto tx 天分别提高 tx1wh o tx1{h o
t|1vh ∀值得注意的是它的变化及调控效应与叶绿
素的相符 o说明 2w对 °≥µ应用中心起到了保护
作用 o提高了叶绿素的含量 o调控了叶片的 °≥µ的
光化效率 o增加了叶片 /源 0的强度 o延长了叶片的
光合功能期 o为根的生长提供多更的光合产物 ∀
图 u 2w对甘草叶片 °≥µ光化学效率的影响
213 对 ≥⁄活性的影响 如图 v所示 o叶片中
≥⁄活性随时间有逐渐下降的趋势 ∀经 2w处
理后 o≥⁄活性有了显著的增强 o喷施第 yottotx天
时分别较对照分别提高了 w1{h otu1wh ovs1th ∀
表明 2w处理提高了甘草叶片中的 ≥⁄活性 o说
明 2w处理后延缓了叶片的衰老 o特别是生长中
后期功能叶片的衰老 o有利于光合产物的形成和向
地下部的输送 ∀
图 v 2w处理对甘草叶片 ≥⁄活性的影响
214 对 ≤×活性的影响 图 w显示了叶片中 ≤×
活性变化情况 o依时间变化在第 tt天时最小 o较第
t天时下降了 yw1zh o然后有所上升 o第 tx天时较
第 y天时提高了 vuh ∀ 2w处理后 o显著地提高
了叶片中 ≤×的活性 o在喷施第 yottotx天分别较
对照提高了 ts1vh owx1uh owv1uh ∀说明 2w
处理能提高叶片中的 ≤×的活性 ∀
图 w 2w处理对甘草叶片 ≤×活性的影响
215 对 °⁄活性的影响 叶片中 °⁄活性与
≥⁄具有相反的变化 k图 xlo即随时间而有上升的
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趋势 o第 tx天较第 t天上升了 tt1xh ∀经 2w
处理后 o喷施第 y天 !第 tt天后降低了 °⁄的活
性 o不过变化较平缓 o分别比对照下降了 tu1zh和
us1zh ∀但在第 tx天时降低幅度较大 o与对照相比
降低了 xs1wh ∀结果表明 2w能减弱叶片中
°⁄的活性 ∀随植物细胞的衰老 o°⁄活性总是显
著地增加 ≈ttotu o叶绿素的降解受到 °⁄的影响 ≈tv o
说明 2w有可能通过降低 °⁄活性来减速叶绿
素的降解 ∀
图 x 2w处理对甘草叶片 °⁄活性的影响
216 对 ⁄含量的影响 本实验结果显示 k图
ylo随着时间推进 o叶处中 ⁄含量逐渐提高 o第
tx天较第 t天提高了 ty1xh ∀ 2w处理后 o叶处
中 ⁄含量比对照都有明显的下降 o喷施第 yotto
tx天时分别较对照下降了 z1zh otw1th ovx1xh ~
另外 o在第 tx天时处理与对照具有同样现象即处于
低谷 ∀结果说明 2w处理能降低脂质过氧化反
应 o减缓了叶片的衰老进程 ∀
图 y 2w处理对甘草叶片 ⁄含量的影响
3 讨论
在正常情况下 o植物细胞内自由基的产生和清
除处于平衡状态 o不易导致膜脂过氧化 ∀当植物受
到逆境胁迫时其体内活性氧都会有不同程度的积
累 o在绿色植物组织中 o光电子传递系统是活性氧的
主要来源 ≈tw ∀由于逆境条件的影响 o植物光能吸收
效率降低 o植物体内 ≤u固定受阻 o氧气被用作电子
受体 o从而形成超氧阴离子 o而超氧阴离子能引发一
系列的链式反应 o导致更多顺利性氧物质的形成 ∀
栽培甘草群体大 o特别是 {月份高温高湿时 o对甘草
来说是一个逆境过程 o叶片自下而上出现早衰现象
即逐渐脱落 o仅在茎尖留有几个小复叶 o不利于光能
利用 o如何延缓叶片衰老 o显得尤为重要 ∀本实验结
果表明 o{月未开始叶片 ⁄含量逐渐增加 o≥⁄o
≤×活性反而减小 o表现为衰老症状 o导致叶片叶
绿素含量降低 o°≥µ光化学效率下降 ∀
随植物细胞的衰老 o°⁄活性总量显著地增
加 ≈tx o叶绿素的降解受 °⁄的影响 ≈tyotz ∀丁文明
等研究表明 o随着黄瓜子叶的衰老 o°⁄活性提
高 ≈t{ ∀段留生等对棉花叶片研究认为 ≥⁄和 ≤×
是主要的活性氧削除酶 o°⁄通过削除活性氧以外
的机制介于叶片发育 ≈x ∀ 2w处理后 o显著提高
了 ≥⁄o≤×活性 o使叶片 ⁄含量显著下降 o而
°⁄活性明显低于对照 o同时 °⁄同工酶表达量也
小于对照 o与此同时叶片中 含量高于对照 k另
报 l∀说明 2w有可能通过降低 °⁄活性来减
速叶绿素的降解 o提高了叶绿素的含量 o这可能是通
过 2w处理减轻了叶片中 的氧化降解 o提高
了 的含量 o协调了叶片的生理活动 o改善了叶
片活性氧代谢 o延缓了叶片的衰老 o进而调控了叶片
生理功能期的延长 o提高了 °≥µ光化学效率 o促进
了物质向地下输出 o达到提高产量的目的 ∀
≈参考文献
≈t 邹 琦 o王学臣 q作物高产高效生理学研究进展 ≈ q北京 }
科学出版社 o t||y}t{q
≈u 何钟佩 q作物激素生理及化学控制 ≈ q北京 }中国农业大
学出版社 o t||z}vzq
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≈w 中国药典 ≈≥ q一部 q usss}yxq
≈x 段留生 o何钟佩 q ⁄°≤对棉花叶片发育及活性氧代谢的影响
≈ q棉花学报 o t||yo{kyl}vtuq
≈y 李 刚 o周成明 o姜晓莉 o等 q甘草栽培与甘草酸生物合成
及其调控的研究进展 ≈ q中药材 o usswo uzkyl}wyuq
≈z 李 刚 o赵 静 o王保民 o等 q植物生长物质对栽培甘草幼
苗根内源激素变化动态研究 ≈ q中国中药杂志 o ussxovs
ktwl}ttt{q
≈{ 李 明 o王根轩 q干旱胁迫对甘草幼苗保护酶活性及脂质过
氧化作用的影响 ≈ q生态学报 o ussuouukwl}xsvq
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吡啉基 l硫脲对萝卜中可溶性蛋白含量 !过氧化物酶和超氧
化物歧化酶活性的影响 ≈ q植物生理学通讯 o usstovzkyl}
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≈t{ 丁文明 o赵毓橘 q表油菜素内酯对黄瓜子叶过氧化物酶活性
和可溶性蛋白含量的影响 ≈ q植物生理学报 o t||xoutkvl}
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Εφφεχτ οφ ΗΚΛ2w ον αχτιϖε οξψγεν µ εταβολισµ ανδ πηοτοχηεµ ιχαλ
εφφιχιενχψ ιν λιχοριχε λεαφ
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¤²2°¬±ªu o ∞ «²±ª2³¨ ¬u o «¤²2«∏u o ≤«¨ ±ª2°¬±ªv
(t. ϑιλιν ΑγριχυλτυραλΣχιενχε ανδ Τεχηνολογψ Χολλεγε, ϑιλιν tvuts|, Χηινα;
u. Χολλεγε οφ Αγρονοµ ψ ανδ Βιοτεχηνολογψ, Χηινα ΑγριχυλτυραλΥνιϖερσιτψ, Βειϕινγ tsss|w, Χηινα;
v. Βειϕινγ Σηιζηεν Ινστιτυτε οφ ΤραδιτιοναλΧηινεσε Μεδιχινεσ, Βειϕινγ tsuys|, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶·∏§¼ ·«¨ ©¨©¨¦·¶²©2w ²± ³«¼¶¬²¯²ª¬¦¤¯ ¦«¤±ª¨ ¶§∏µ¬±ªªµ²º·« ²©¯¨ ¤√ ¶¨q Μετηοδ : ¶¬±ª ¬¯¦²2
µ¬¦¨kΓλψχψρρηιζα υραλενσισl ¤¶°¤·¨µ¬¤¯o ·«¨ ©¨©¨¦·¶²©2w ²± ¤¦·¬√¨²¬¼ª¨ ± ° ·¨¤¥²¯¬¶° ¤±§³«²·²¦«¨ °¬¦¤¯ ©¨©¬¦¬¨±¦¼ ¬± ¬¯¦²µ¬¦¨ ¯¨ ¤©
º µ¨¨ §¨ ·¨µ°¬± §¨∏±§¨ µ©¬¨ §¯ ¦²±§¬·¬²±q Ρ εσυλτ ανδ Χονχλυσιον: ׫¨ ¦²±·¨±·¶²©¦«¯²µ²³«¼¯ o¯ ¤¦·¬√¬·¼ ²©≥⁄ ¤±§ ≤× ¬±¦µ¨¤¶¨§o
º«¬¯¨ ·«¨ ⁄ ¦²±·¨±·¶¬± ¯¨ ¤√ ¶¨§¨ ¦µ¨¤¶¨§q ׫¨ ¶¨± ¶¨¦¨±¦¨ º¤¶§¨ ¤¯¼¨ §o ¶²·«¤··«¨ ³«²·²¦«¨ °¬¦¤¯ ©¨©¬¦¬¨±¦¼kΦ√ rΦ° l º¤¶¬±¦µ¨¤¶2
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[ Κεψ ωορδσ] ¬¯¦²µ¬¦¨~ ¯¨ ¤©~ ¤¦·¬√¨²¬¼ª¨ ± ° ·¨¤¥²¯¬¶°~ ³«²·²¦«¨ °¬¦¤¯ ©¨©¬¦¬¨±¦¬¨¶kΦ√ rΦ° l~ ³¯¤±·ªµ²º·«¶∏¥¶·¤±¦¨
≈责任编辑 张宁宁
≈收稿日期 ussx2tu2su
≈基金项目 国家中医药管理局重点资助项目 k国中医药科 usst⁄÷ssxl
≈通讯作者 3 王峥涛 oר¯}ksuxl{xv|tuwy
牡丹皮高效液相色谱指纹图谱研究
许舜军 t o李 鹏 u o杨 柳 v o张 勉 t o王峥涛 t3
kt1中国药科大学 生药学研究室 o江苏 南京 utssv{~u1广州市邮电医院 o广东 广州 xtsysv~
v1广东省中医院 中心实验室 o广东 广州 xtstusl
≈摘要 目的 }建立牡丹皮的高效液相色谱指纹图谱 o为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法 ∀方法 }利
用 °≤ 2⁄⁄o梯度洗脱 o测定了 vs批牡丹皮药材样品 o并应用 ≤ 2 ≥和 ≥2 ≥技术指认指纹图谱中的主要色谱
峰 ∀结果 }vs批牡丹皮样品得到的色谱指纹图谱有 tx个共有峰 o指认了色谱峰的化学归属 o主要特征峰的峰面积
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第 vt卷第 us期
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