全 文 ：液各 x Λo测定样品中尿苷的含量 o结果见表 u ∀
表 u ts批脾胃康胶囊样品中尿苷的含量
批号 含量r°ªr粒 ≥⁄r h
sssxst s qs|{ t qu
sssxsu s qtsw u qv
sssxsv s qs|{ u q|
sssyst s qtsv t qv
sssysu s qs{y t q|
sssysv s qs{u u qx
sssysw s qs{x t qz
ssszu{ s qtts t qs
ssszvs s qtts u qy
sss{st s qttu u qv
2 q10 空白试验 按脾胃康胶囊处方 !制法项下要
求制备缺蜂皇胎冻干粉的阴性对照 ∀精密称取相应
的量 o依法制备供试液及测定 o以检查在相同测定条
件下是否有干扰成分存在 o结果表明缺蜂皇胎冻干
粉的阴性样品对成药中尿苷的测定无干扰 o见图 t ∀
图 t 脾胃康胶囊样品 !对照品
及阴性对照的高效液相色谱图
q样品
q对照品 ≤ q阴性对照 t q尿苷
3 讨论
3 q1 核苷类成分的含量测定方法有紫外分光光度
法 !薄层扫描法和高效液相色谱法 ∀紫外分光光度
法需刮板 o操作繁琐 o易引起误差 ~薄层扫描法灵敏
度较低 ~本文采用高效液相色谱法 o并用硅胶小柱对
样品进行预处理 ∀因该胶囊成分复杂 o相互干扰较
大 o如不进行预处理 o基线漂移大 o使分析很难进行 ∀
本法快速简便 o重现性好 o可做脾胃康胶囊的质量控
制方法 ∀
3 q2 在供试品溶液的制备过程中 o比较了水浴加热
回流及超声处理提取方法 o后者可减少样品中多维
葡萄糖与淀粉的提出 o超声提取 u次 o可将尿苷提取
完全 ∀提取液用硅胶小柱处理 o先用氯仿洗脱 o除去
油脂性成分 o再用苯2无水乙醇kwΒtl洗脱 o可将尿苷
完全洗脱下来 o而多维葡萄糖和淀粉等极性大的成
分则被留在柱上 ∀
3 q3 实验中比较了 s qst °²¯#p t磷酸二氢钾溶液 o
磷酸盐缓冲液k³ y qxl2甲醇ktzΒvl o磷酸盐缓冲液
k³ w qsl2甲醇k|sΒtsl os qst °²¯#p t磷酸二氢钾2
甲醇k|s ∗ tsl o水2乙腈k|sΒtsl及磷酸盐缓冲液k³
y qxl2甲醇k||Βtl等流动相 o发现磷酸盐缓冲液k³
y qxl2甲醇k||Βtl为最佳 o尿苷与其他成分达到基线
分离 o分离度为 v qx o理论塔板数大于 z sss ∀
≈参考文献
≈t 黄红兵 o江英桥 q虫草口服液的质量标准研究 q中成药 ot||| out
kxl }uu{ q
≈u 丁振成 o赵仁庚 q薄层扫描法测定金水宝胶囊中腺苷的含量 q中
国药学杂志 ot||x ovskyl }v{s q
≈v 楮西宁 o张 强 o陈巧梅 o等 q棒束饱属菌中游离尿苷 !腺嘌呤 !
腺苷的 °≤ 测定 q药物分析杂志 ot||y otykwl }uw| q
≈w 扬江丰 o陈 理 q高效液相色谱法测定护龄神及百令胶囊中腺
苷的含量 q中成药 ot||{ ouskyl }us q
≈x 陈 博 o金 瓯 q冬虫夏草菌粉中核苷成分的 °≤ 测定 q中国
生化药物杂志 ot||{ ot|kul }{{ q
≈y 王新华 o博智宏 o白 霜 q百令胶囊中腺苷的含量测定 q中国现
代应用药学 ot||z otwkyl }vv q
≈责任编辑 李 禾
复方丹参制剂中活性成分的 °≤ 同时定量分析
邢俊波t o方白玉u
kt q总后卫生部 药品仪器检验所 o北京 tssszt ~u q广东省韶关学院 生命科学院 o广东 韶关 xtussxl
≈摘要 目的 }研究复方丹参片等制剂的质量标准 o对复方丹参片中的活性成分进行定量分析 ∀方法 }°≤2
≈收稿日期 ussu2s{2s{
≈通讯作者 ר¯ }kstslyy|w|s{t ∞2°¤¬¯}∏±¥²¬¬±ª ¶²«∏q¦²°
#yv#
第 u{卷第 t期
ussv年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o²qt
¤±±∏¤µ¼ oussv
⁄⁄法 ∀结果 }建立了可同时测定复方丹参制剂中活性成分的 °≤ 法 o并对市场上的多种复方丹参制剂进行了
定量分析 ∀结论 }该法精密度高 !重复性好 o适宜于复方丹参制剂的全面质量控制 ∀
≈关键词 复方丹参制剂 ~活性成分
≈中图分类号 u{v qy ~ u{w qt ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussvlst2ssvy2sv
复方丹参片是目前治疗冠心病的基本中成药 ∀
由丹参 !三七 !冰片三味中药组成 ∀有效成分可分为
脂溶性的丹参酮类及水溶性的丹酚酸类k包括丹参
素 !原儿茶醛等l ∀脂溶性成分具有抗心肌缺血 !抗
菌 !抗雄性激素作用 o水溶性成分具有抗心肌缺血和
增加冠状动脉血流量等生物活性 ∀由于疗效显著 o
价格低廉 o被广泛用于临床 o故5中国药典6usss年
版中将丹参的提取工艺定为醇提和水提结合的工艺
路线 ∀但其中复方丹参片的质量标准仅有脂溶性成
分丹参酮 µ 的含量测定项≈t ∗ v o无水溶性成分测
定项 ~丹参制剂中水溶性成分含量测定有文献报
道≈w ox ~为了有效的控制复方丹参制剂的质量 o本文
对不同厂家的复方丹参片水溶性成分丹参素 !原儿
茶醛及脂溶性成分丹参酮 µ 进行了定量分析 ∀
1 仪器与试药
ª¬¯¨ ±·ttss系列高效液相色谱仪 oª¬¯¨ ±·自
动进样器 oª¬¯¨ ±·⁄⁄检测器 ~ ° ⁄≥ ¼³¨µ¶¬¯
色谱柱 w qy °° ≅ uxs °° ots Λ°l ~对照品k中国药
品生物制品检定所 o纯度 || h l ~甲醇k色谱醇 o美国
× §¨¬¤公司l ~双蒸水 ∀
2 方法与结果
2 q1 色谱条件 流动相甲醇2s qx h 磷酸溶液kwΒ
|yl o流速 t qs °# °¬±p t o梯度洗脱 o多波长检测 o
见表 t ∀
表 t 流动相比例设置
τr°¬± 甲醇r h 检测波长r±°
s ∗ ts w u{s
ts ∗ vs w ∗ ww uzs
vs ∗ xs ww ∗ {w uzs
2 q2 对照品溶液的制备 精密称取对照品适量 o置
棕色瓶中 o加 zs h甲醇制成含丹参素 !原儿茶醛和
丹参酮 µ 的混合对照品溶液 o即得kts ε 以下保
存l ∀
2 q3 溶媒的选择 参照5中国药典6usss年版中的
含量测定项≈t o本文以不同浓度的甲醇溶液kvs h o
xs h ozs h甲醇l !甲醇和水作溶媒对丹参酮 µ 及
丹参素 !原儿茶醛的同时提取效率进行了考察 ∀
取某厂复方丹参片 t qs ªk批号 susvtyl o照含
量测定项下供试液的制备方法同法操作 ∀结果表
明 o以水提取时 o很难将丹参酮 µ 提取出来 o随着
甲醇浓度的递增 o丹参酮 µ 的提出量也增大 ozs h
的甲醇和甲醇的提出率无显著差别 ~对于水溶性成
分丹参素和原儿茶醛 o以水 !vs h 甲醇 !xs h 甲醇 !
zs h甲醇的提取效率相当 o甲醇的提取效率差 ∀
zs h的甲醇能同时将水溶性成分和脂溶性成分提取
完全 o故以 zs h的甲醇作为提取溶剂 ∀
2 q4 提取时间考察 取同一批样品 o以 zs h甲醇
为溶剂 o分别超声 tx ovs owx°¬±o结果表明超声
vs°¬±和 wx°¬±提取效率差异极小 o皆高于 tx°¬±o
故定为 vs°¬±∀
2 q5 供试品溶液的制备 取本品 ts片kus丸l o除
去包衣 o精密称定 o研细 o取约 t qs ªo精密称定 o精密
加入 zs h甲醇 ux °¯ o超声提取 vs °¬±o滤过 o取续
滤液作为供试液 ∀
2 q6 线性关系考察 取混合对照品溶液 o分别进样
u ow oy o{ ots Λ¯ o按样品测定项下的色谱条件测定k ν
vl o记录色谱图及峰面积 ∀以混合对照品的进样
量kΛªl为横坐标 o色谱峰的面积为纵坐标 o绘制标准
曲线 o求出回归方程 o结果表明 o在考察范围内 o丹参
素 !原儿茶醛和丹参酮 µ 的进样量与色其谱峰面
积均呈良好的线性关系 ∀回归方程 }原儿茶醛 Ψ
v zwv .u Ξ p u| .wx , ρ s q||| { o线性范围 w{ qu ∗
uwt ±ª~丹参素 Ψ vzt .t| Ξ p t .w , ρ s q||| | o线
性范围 wsw ∗ u sus ±ª~丹参酮 µ Ψ uwy .ut Ξ n
vx .w , ρ s q||| | o线性范围 zw qw ∗ vzu ±ª∀
2 q7 精密度试验 取样品溶液连续进样 x次 o测得
峰面积 o其精密度分别为 }原儿茶醛 ≥⁄ u qv h ~丹
参素 ≥⁄ t qz h ~丹参酮 µ ≥⁄ t qu h ∀
2 q8 样品溶液的稳定性试验 精密吸取同一批样
品溶液 o每隔 x «测 t次 o连续测 x次 o其 ≥⁄分别
为 }原儿茶醛t qw h o丹参素s qy h ~丹参酮 µ
s qz h ∀结果表明 o供试品溶液在 us «内基本稳定 ∀
2 q9 重复性实验 取一批样品称重 x份 o分别依样
品溶液制备方法操作 o进样测定 o结果丹参素含量的
≥⁄ s qz h o原儿茶醛 ≥⁄ u qw h o丹参酮 µ ≥⁄
#zv#
第 u{卷第 t期
ussv年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o²qt
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图 t 对照品及样品的高效液相色谱图
q对照品
q样品
t q丹参素 u q原儿茶醛 v q丹参酮 µ
t qt h ∀
2 q10 加样回收率实验 称取已知含量的供试品
ksususx批lx份 o分别加入适量混合对照品溶液 o按
供试品溶液的制备方法操作 o测定结果见表 u ∀
2 q11 样品的测定 精密吸取供试品溶液和对照品
溶液各 x Λ¯ o注入液相色谱仪 o测定 o按外标法计算
含量 ∀对抽自市场上的 v批样品测定结果见表 v ∀
3 讨论
3 q1 本文建立的 °≤ 方法 o同时测定复方丹参制
剂中的活性成分丹参素 !原儿茶醛和丹参酮 µ 的
表 u 样品加样回收率实验结果
对照品
称样量
rª
样品中含量
r°ª
加入量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
r h
平均回收率
r h
≥⁄
r h
丹参素 s qxtu t v qtuw v qsts y qtxu tss qy || q| u qu
s qxsu t v qsyv v qsts y qswy || qt
s qxsy { v qs|t v qsts y quss tsv qv
s qxtx w v qtww v qsts y qttx |{ qz
s qw|x y v qsuv v qsts x q|yw |z qz
原儿茶醛 s qxtu t s qttu z s qtys s s quzv t tss qu |{ qz x qw
s qxsu t s qtts x s qtys s s quysv |v qy
s qxsy { s qttt x s qtys s s quztu || q{
s qxtx w s qttv w s qtys s s quyvt |v qy
s qw|x y s qts| s s qtys s s quz|s tsy qu
丹参酮 µ s qxtu t s qz{w w s qzwss t qxuv || q{ |z qs w qs
s qxsu t s qzzv u s qzws s t qwz{ |x qu
s qxsy { s qz{s x s qzws s t qwxw |t qs
s qxtx w s qz|v z s qzws s t qxuy || qs
s qw|x y s qzyv u s qzws s t qxsv tss qs
表 v 样品中丹参素 !原儿茶醛和丹参酮 µ 含量 h
编号 批号 丹参素 原儿茶醛 丹参酮 µ
t sususx s qyts s qsuu t s qtxw
u susws{ s qx|y s qsus u s qtxs
÷ sustsv s qwyu s qsut s s qttx
含量 o该法精密度高 !重复性好 o适宜于复方丹参制
剂中 v种活性成分的同时测定 o为复方丹参制剂提
供了全面质量控制的参考方法 ∀
3 q2 在提取溶剂的选择上 o参照药典中丹参酮 µ
和丹参素的提取方法 o考察了不同浓度的甲醇对丹
参中水溶性成分和脂溶性成分的同时提取效率 o优
选出了 zs h的甲醇作为提取溶剂 o能将丹参中的水
溶性成分和脂溶性成分完全提取出来 ∀
3 q3 目前 o市场上复方丹参制剂的种类较多 o关于
其质量控制 o有的采用控制其水溶性成分丹参素的
含量 o有的则控制其中脂溶性成分丹参酮 µ 的含
量 o同是复方丹参制剂 o标准却不一致 ∀笔者认为 o
既然水溶性成分和脂溶性成分都是其中的活性成
分 o则同时控制其中水溶性成分和脂溶性成分应更
加合理 ∀本文的研究证明其方法可行 ∀
3 q4 从大量抽样测定结果看 o市售样品中丹参素 !
原儿茶醛和丹参酮 µ 含量差异很大 o分别为 ys o
zx oz倍 ∀不知是由于工艺不同 o或药材质量差异造
成 ∀建议规范该药的质量标准 ∀
≈参考文献
≈t 中国药典 q一部 qusss qxt{ o增补本 }tz q
≈u 吴卫新 o陈秀銮 o翟 红 o等 q高效液相色谱法测定丹参片中丹
参酮 µ 的含量 q时珍国医国药 ousst otuk|l }zzv q
≈v 张 峡 o李雪松 o吴 晖 o等 q高效液相色谱法测定三七丹参片
中丹参酮 µ 的含量 q中国医院药学杂志 ousst outkyl }vww q
≈w 张建中 o吕迁洲 o王新宏 o等 q°≤ 法测定活血合剂中丹参素 !
原儿茶醛的含量 q中成药 oussu ouwktl }us q
≈x 袁俊贤 o朱立中 q丹参片中丹参素和原儿茶醛的 °≤ 测定法 q
中成药 ot||y ot{ktl }tx q
≈责任编辑 李 禾
#{v#
第 u{卷第 t期
ussv年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o²qt
¤±±∏¤µ¼ oussv