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Chemical constitutents of Bauhinia aurea

红绒毛羊蹄甲的化学成分研究



全 文 :红绒毛羊蹄甲的化学成分研究
尚小雅,李 帅,王映红,王素娟,杨永春,石建功
(中国医学科学院 中国协和医科大学 药物研究所
中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室,北京 100050)
[摘要] 目的:研究红绒毛羊蹄甲Bauhiniaaurea的化学成分。方法:应用各种色谱技术进行分离纯化,用MS
和NMR分析鉴定化合物结构。结果:从90%乙醇提取物中分离得到12个化合物,分别为:3,4二羟基苯甲酸(1),
4羟基苯甲酸(2),3羟基4甲氧基苯甲酸(3),4羟基3甲氧基苯甲酸(4),没食子酸(5),没食子酸甲酯(6),没食
子酸乙酯(7),羽扇豆3醇(8),羽扇豆3酮(9),豆甾4烯3酮(10),β谷甾醇(11)和胡萝卜苷(12)。结论:除化
合物5,8,11和12外,其余化合物均属首次从该属植物中发现。
[关键词] 豆科;红绒毛羊蹄甲;芳香酸;三萜;甾体
[中图分类号]R284.1 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2006)23195303
[收稿日期] 20051205
[基金项目] 国家自然科学基金项目(20432030);新世纪优秀
人才支持计划(NCET)
[通讯作者] 石建功,Tel:(010)83154789,Fax:(010)6301
7757,Email:shijg@imm.ac.cn
  羊蹄甲属植物(豆科)共包括250多种,包括灌
木、藤和小乔木,主要分布在非洲、亚洲和拉丁美洲,
资源丰富,多种植物用作传统药物,有较显著的生物
活性,如镇痛、抗糖尿病、抗感染、抗菌、收敛和利尿
作用等[1]。红绒毛羊蹄甲BauhiniaaureaLevl.分布
于我国广西、四川、贵州、云南等地,具有祛风除湿,
通络止痛的功效,主治风湿疼痛,鹤膝风,跌打损伤,
肾炎,黄疸型肝炎等[2],迄今为止,尚无其化学成分
的报道。作者对采自广西大瑶山的红绒毛羊蹄甲进
行了较系统地研究,从中分离得到7个芳香酸衍生
物、2个三萜和3个甾体类化合物,其中8个为首次
从该属植物中发现。
1 仪器与材料
Inova500核磁共振仪;VGZAB2F质谱仪;Wa
ters600高效液相色谱仪(Altech公司 Econosphere
C18制备柱,22mm×250mm,10μm,Waters2478型
检测器);SephadexLH-20;HPD100型大孔树脂
(河北沧州宝恩化工有限公司);柱色谱硅胶(200~
300目)和薄层硅胶 GF254(60型)(青岛海洋化工
厂)。
植物样品采自广西,经广西省柳州地区林业区
龙光日工程师鉴定为红绒毛羊蹄甲 B.aurea,标本
(No.2002144)保存于本所植物标本室。
2 提取分离
干燥红绒毛羊蹄甲藤茎(5kg),粉碎后用90%
乙醇超声提取,每次2h。提取液减压浓缩成浸膏后
混悬于水中,用醋酸乙酯萃取。醋酸乙酯萃取物
(2865g)进行硅胶柱色谱分离,用石油醚丙酮
(20∶1~0∶1)梯度洗脱,薄层色谱检查,合并相似洗
脱部分,得到12个组分。石油醚丙酮(2∶1)洗脱组
分,经SephadexLH-20柱色谱分离,用氯仿甲醇
(2∶1)洗脱,得到3个组分F1~F3,F1再经Sephadex
LH-20柱色谱分离,以氯仿甲醇(2∶1)洗脱得到1
(20mg)和2(23mg);F2经反相 HPLC制备柱分
离,以甲醇水(18∶82)为流动相,得到3(17mg)和
4(15mg)。F3再经SephadexLH-20柱色谱分离,
以氯仿甲醇(2∶1)洗脱,得到5(52mg)和1个混合
物,此混合物经反相 HPLC制备柱分离,以甲醇水
(30∶70)为流动相,得到6(12mg)和7(16mg)。
石油醚丙酮(20∶1)洗脱部分,经 SephadexLH-20
(石油醚氯仿甲醇 5∶5∶1)反复分离,得到 8(35
mg),9(27mg)和10(31mg);石油醚丙酮(10∶1)
洗脱部分,用丙酮重结晶,得到11(25g);石油醚
丙酮(1∶1)部分,用氯仿甲醇重结晶,得到12(31
g)。
3 结构鉴定
化合物1 白色粉末,mp179~181℃。EIMS
·3591·
第31卷第23期
2006年12月
         
    中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
Vol31,Issue 23
December,2006
m/z:154[M]+。1HNMR(DMSOd6,500MHz)δ:
733(1H,brs,H2),719(1H,brd,J=85Hz,H
5),660(1H,brd,J=85Hz,H6)。13CNMR(DM
SOd6,125MHz)δ:1212(C1,6),1176(C2),
1447(C3),1499(C4),1149(C5),1709(C
7)。以上数据与文献[3]报道的3,4二羟基苯甲酸
的数据一致。
化合物2 白色粉末,mp205~207℃。ESIMS
m/z:137[M-H]-。1HNMR(DMSOd6,500MHz)
δ:778(2H,d,J=85Hz,H2,6),680(2H,d,J=
85Hz,H3,5)。以上数据与文献[3]报道的4羟
基苯甲酸的数据一致。
化合物3 白色粉末,mp215~217℃。EIMS
m/z:168[M]+。1HNMR(DMSOd6,500MHz)δ:
743~744(2H,m,H2,6),684(1H,d,J=85
Hz,H5),380(3H,s,OCH3)。
13CNMR(DMSOd6,
125MHz)δ:1220(C1),1153(C2),1475(C3),
1513(C4),1130(C5),1237(C6),1675(C
7),558(OCH3)。以上数据与文献[4]报道的3羟
基4甲氧基苯甲酸的数据一致。
化合物4 白色粉末,mp238~240℃。EIMS
m/z:168[M]+。1HNMR(DMSOd6,500MHz)δ:
746(1H,brs,H2),668(1H,brd,J=85Hz,H
5),743(1H,d,J=85Hz,H6),375(3H,s,
OCH3)。
13CNMR(DMSOd6,125MHz)δ:1226(C
1,6),1143(C2),1480(C3),1465(C4),1135
(C5),1705(C7),556(OCH3)。以上数据与文
献[4]报道的4羟基3甲氧基苯甲酸的数据一致。
化合物 5 无色针状结晶,mp235~237℃。
EIMSm/z:170[M]+。1HNMR(CD3COCD3,500
MHz)δ:717(2H,s,H2,6)。13CNMR(CD3COCD3,
125MHz)δ:1214(C1),1095(C2,6),1454(C
3,5),1380(C4),1671(C7)。以上数据与文献
[5]报道的没食子酸的数据一致。
化合物6 黄色粉末,mp168~170℃。EIMS
m/z:184[M]+。1HNMR(DMSOd6,500MHz)δ:
693(2H,brs,H2,6),373(3H,s,OCH3)。
13C
NMR(DMSOd6,125MHz)δ:1193(C1),1085(C
2,6),1456(C3,5),1384(C4),1663(C7),
516(OCH3)。以上数据与文献[6]报道的没食子
酸甲酯的数据一致。
化合物7 黄色粉末,mp148~150℃。EIMS
m/z:198[M]+。1HNMR(CD3OD,500MHz)δ:699
(2H,s,H2,6),421(2H,q,J=70Hz,OCH2),
128(3H,t,J=70Hz,CH3)。
13CNMR(CD3OD,
125MHz)δ:1218(C1),1100(C2,6),1465(C
3,5),1397(C4),1686(C7),617(OCH2),146
(CH3)。以上数据与文献[7]报道的没食子酸乙酯
的数据一致。
化合物8 白色粉末,mp208~210℃。EIMS
m/z:426[M]+。1HNMR(CDCl3,500MHz)δ:320
(1H,dd,J=40,110Hz,H3),236(1H,m,H
19),469(1H,brs,H29a),457(1H,brs,H29b),
168,104,097,095,083,079,077(21H,s,7×
CH3)。
13CNMR(CDCl3,125MHz)δ:387(C1),
274(C2),790(C3),389(C4),553(C5),
183(C6),343(C7),408(C8),504(C9),
372(C10),209(C11),251(C12),381(C
13),428(C14),274(C15),356(C16),430
(C17),483(C18),480(C19),1510(C20),
298(C21),400(C22),280(C23),154(C
24),161(C25),160(C26),145(C27),180
(C28),1093(C29),193(C30)。以上数据与文
献[3]中羽扇豆3醇的数据一致。
化合物9 白色粉末,mp160~162℃。EIMS
m/z:396[M-CO]+。1HNMR(CDCl3,500MHz)δ:
470(1H,brs,H29a),457(1H,brs,H29b),109
(6H,s,CH3 ×2),170,104,097,095,081
(15H,s,5×CH3)。
13CNMR(CDCl3,125MHz)δ:
396(C1),341(C2),2181(C3),473(C4),
549(C5),197(C6),335(C7),408(C8),
498(C9),368(C10),214(C11),251(C12),
381(C13),429(C14),274(C15),355(C
16),430(C17),482(C18),479(C19),1508
(C20),298(C21),400(C22),266(C23),
210(C24),158(C25),160(C26),144(C
27),180(C28),1094(C29),193(C30)。以上
数据与文献[3]中羽扇豆3酮的数据一致。
化合物10 白色粉末,mp98~100℃。EIMS
m/z:412[M]+。1HNMR(CDCl3,500MHz)δ:571
(1H,s,H4),070(3H,s,H18),117(3H,s,H
19),091(3H,d,J=65Hz,H21),083(3H,d,
J=70Hz,H26),081(3H,d,J=65Hz,H27),
084(3H,t,J=70Hz,H29)。13CNMR(CDCl3,125
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第31卷第23期
2006年12月
         
    中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
Vol31,Issue 23
December,2006
MHz)δ:357(C1),339(C2),1997(C3),1237
(C4),1717(C5),329(C6),320(C7),356
(C8),538(C9),386(C10),210(C11),396
(C12),424(C13),559(C14),242(C15),
282(C16),560(C17),119(C18),174(C
19),361(C20),187(C21),340(C22),261
(C23),458(C24),291(C25),198(C26),
190(C27),231(C28),119(C29)。以上数据
与文献[8]中豆甾4烯3酮的数据吻合。
化合物11 无色针状结晶,mp128~130℃。
EIMSm/z:414[M]+。1HNMR(CDCl3,500MHz)δ:
352(1H,m,H3),534(1H,m,H6),068(3H,s,
H18),100(3H,s,H19),092(3H,d,J=65Hz,
H21),083(3H,d,J=70Hz,H26),081(3H,d,
J=70Hz,H27),084(3H,t,J=78Hz,H29)。
以上数据与文献[8]报道的β谷甾醇的数据吻合。
化合物12 白色片状结晶,mp>300℃,用不
同的展开剂薄层展开,Rf值均与胡萝卜苷的对照品
一致,鉴定该化合物为胡萝卜苷。
[参考文献]
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ChemicalconstitutentsofBauhiniaaurea
SHANGXiaoya,LIShuai,WANGYinghong,WANGSujuan,YANGYongchun,SHIJiangong
(InstituteofMateriaMedica,ChineseAcademyofMedicalSciencesandPekingUnionMedicalColege,KeyLaboratoryof
BioactiveSubstancesandResourcesUtilizationofChineseHerbalMedicine,MinistryofEducation,Beijing100050,China)
[Abstract] Objective:TostudythechemicalconstituentsofBauhiniaaurea.Method:Thecompoundswereisolatedwithcol
umnchromatography.ThestructuresweredeterminedbyMSandNMRspectroscopictechniques.Result:Ninearomaticacidderiva
tives,twotriterpenesandthreesteroidswereisolatedfromthe90% ethanolicextractandtheirstructureswereidentifiedas3,4di
hydroxybenzoicacid(1),4hydroxybenzoicacid(2),3hydroxy4methoxybenzoicacid(3),4hydroxy3methoxybenzoicacid
(4),galicacid(5),methylgalate(6),ethylgalate(7),lupeol(8),lupenone(9),stigmast4en3one(10),βsitosterol
(11)anddaucosterol(12)Conclusion:ThisisthefirstreportofchemicalconstituentsfromB.aurea.Compoundswereisolated
fromthisgenusforthefirsttime,except5,8,11and12.
[Keywords] leguminosae;Bauhiniaaurea;aromaticacids;triterpenoids;steroids
[责任编辑 李 禾]
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2006年12月
         
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Vol31,Issue 23
December,2006