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Changes of amino acid content in hippocampus of epileptic rats treated with volatile oil of Acorus tatarinowii

石菖蒲挥发油对癫痫大鼠海马氨基酸含量的影响



全 文 :≈参考文献 
≈t  徐 妙 o姒健敏 o王良静 o等 q云母对大鼠慢性萎缩性胃炎的干
预及治疗作用的研究 q中国中药杂志 oussw ou|kvl }uxt q
≈u  …µ¤√² • oƒµ¤±® • o …¯∏±§¨¯¯ ° „ o ετ αλq ≤¼¦¯¬±r°≤‘„ ¬¶·«¨ ¤∏¬¬¯2
¬¤µ¼ ³µ²·¨¬± ²© ⁄‘„ ³²¯¼°¨ µ¤¶¨2§¨ ·¯¤q Νατυρε , t|{z ovuy }xtx q
≈v  ≤¤¯√¨ µ·• o …¨ ¤∏¯¬¨∏ƒ o ⁄¨ ±¤µ§ ⁄q∞³¨ §¨µ°¤¯ ªµ²º·«©¤¦·²µk∞Šƒl
¤¦¦¨¯¨µ¤·¨¶·«¨ °¤·∏µ¤·¬²± ²© ©¨·¤¯ °²∏¶¨ ¬±·¨¶·¬±¤¯ °∏¦²¶¤¬± ∏·¨µ²q
Εξπερεντια , t|{u ov{ }ts|y q
≈w  吴加国 o姒健敏 o曹 倩 o等 q表皮生长因子对 ≥⁄大鼠萎缩性
胃炎的作用 q中华内科杂志 ousst owskvl }ty| q
≈x  姒健敏 o章 宏 o王开明 o等 q萎缩性胃炎表皮生长因子及其受
体表达的临床意义探讨 q中华消化杂志 ot||{ ot{kxl }uzt q
Μεχηανισµ οφισινγλασσιν πρεϖεντιον ανδ τρεατµεντ οφ
χηρονιχ ατροπηιχ γαστριτισιν ρατσ
≥Œ¬¤±2°¬±o ÷˜ ¬¤²o • „‘Š ¬¤±ª2­¬±ªo • „‘Š ‹¤¬2¼∏±o • ˜ ¬¤2ª∏²o≤„’ ±¬¤±
( Γαστροεντερολογιχ Λαβορατορψ οφ ΧλινιχαλΙνστιτυτε ,
Σιρ Ρυν Ρυν Σηαω Ηοσπιταλ Αφφιλιατεδ το Μεδιχαλ Σχηοολ οφ Ζηεϕιανγ Υνιϖερσιτψ, Ηανγζηου vtssty , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨·«¨ ° ¦¨«¤±¬¶° ²©¬¶¬±ª¯¤¶¶¬±·«¨ ³µ¨√ ±¨·¬²± ¤±§·µ¨¤·° ±¨·²©¦«µ²±¬¦¤·µ²³«¬¦ª¤¶·µ¬·¬¶k≤„Šl¬±
µ¤·¶q Μετηοδ : „±¬°¤¯ °²§¨ ¶¯²©≥⁄µ¤·¶º¬·«≤„Š º µ¨¨ °¤§¨ ¬± ¤¦¦²µ§¤±¦¨ º¬·«·«¨ ³µ¨√¬²∏¶ ¬¨³¨µ¬¨±¦¨ ²©¦²°¥¬±¨ §¤§°¬±¬¶·µ¤·¬²± ²©ys h
·¨«¤±²¯ ous °°²¯#pt ¶²§¬∏° §¨²¬¼¦«²¯¤·¨ ¤±§s qt h ¤°°²±¬¤º¤·¨µqŒ± ³µ¨√ ±¨·¬²± ªµ²∏³¶o¶∏¦µ¤¯©¤·¨ ¤±§¬¶¬±ª¯¤¶¶º µ¨¨ ∏¶¨§¤¶³µ¨√ ±¨·¬√¨
·«¨µ¤³¼ º«¬¯¨ ≤„Šµ¤·°²§¨¯ º¤¶¥¨¬±ª°¤§¨ qŒ±·«¨ µ¨√ µ¨¶¨ ªµ²∏³¶o¶∏¦µ¤¯©¤·¨ ¤±§¬¶¬±ª¯¤¶¶º µ¨¨ ∏¶¨§·²·µ¨¤·µ¤·¶¤©·¨µ ¶¨·¤¥¯¬¶«° ±¨·²©≤„Š
µ¤·°²§¨¯qƒ¬±¤¯ ¼¯ ¤¯¯·«¨ µ¤·¶º µ¨¨ ¬¨¨ ¦∏·¨§ q׫¨ ±·«¨ ¯¨ ±ª·«²©·«¨ ³µ²¯¬©¨µ¤·¬²± ½²±¨ ²©·«¨ ª¤¶·µ¬¦°∏¦²¶¤¤±§¶¨µ∏° ³¨¬§¨µ°¤¯ ªµ²º·«©¤¦2
·²µ¶k∞Šƒl ¤±§ªµ²º·««²µ°²±¨ ¶kŠ‹l¯ √¨¨¯ º µ¨¨ ¶·∏§¬¨§q Ρεσυλτ : Œ±¬¶¬±ª¯¤¶¶³µ¨√ ±¨·¬²± ªµ²∏³¶¤±§«¬ª«§²¶¨ ¬¶¬±ª¯¤¶¶µ¨√ µ¨¶¨ ªµ²∏³o·«¨
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ªµ²∏³k Π s qstl qŒ± ²¯º §²¶¨ ¬¶¬±ª¯¤¶¶µ¨√ µ¨¶¨ ªµ²∏³o¬·º¤¶ ²¯º µ¨·«¤±·«¤·¬± ±²µ°¤¯ ¦²±·µ²¯ ªµ²∏³k Π s qstl o¥∏·°∏¦« ¥¨·¨µ·«¤±
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[ Κεψ ωορδσ] ¬¶¬±ª¯¤¶¶~≤„Š ~≥⁄µ¤·~³µ²¯¬©¨µ¤·¬±ª¦¨¯¯ ±∏¦¯ ¤¨µ¤±·¬ª¨ ±~∞Šƒ ~Š‹
≈责任编辑 方文贤 
石菖蒲挥发油对癫痫大鼠海马氨基酸含量的影响
陈 俐t 3 o廖卫平u
kt q广州医学院 第一附属医院 神经内科 o广东 广州 xtstus ~
u q广州医学院 第二附属医院 神经研究所 o广东 广州 xtsuysl
≈摘要  目的 }研究石菖蒲萃取挥发油对癫痫大鼠海马内兴奋性与抑制性氨基酸含量的影响 o探讨其抗癫痫
的可能机制 ∀方法 }用超临界 ≤’u萃取法k≥ƒ∞2≤’ul提取石菖蒲挥发油 o脑室内注射海人酸kŽ„l建立大鼠癫痫模
型 o观察经挥发油治疗后的癫痫大鼠海马氨基酸含量的变化 ∀结果 }经石菖蒲挥发油 vx °ª#®ªp t腹腔注射后的 Ž„
大鼠海马的 Š„…„含量明显升高 o谷氨酸kŠ¯ ∏l显著降低k Π s qsxl ∀结论 }石菖蒲萃取挥发油可调节癫痫大鼠脑内
的兴奋性与抑制性氨基酸的平衡 o从而起到抗癫痫的作用 ∀
≈关键词  石菖蒲 ~挥发油 ~海人酸 ~海马 ~Š„…„ ~谷氨酸 ~癫痫
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswlsz2syzs2sw
≈收稿日期  ussv2tu2vs
≈基金项目  广东省医学科研基金资助项目k„ussvu{yl
≈通讯作者  3陈俐 oר¯ }ksusl{vvvzzxs oƒ¤¬}ksuslvwtxsy|x o∞°¤¬¯}√¬¦·²µ¬¤zu ƒ ¶¬±¤q¦²°
#szy#
第 u|卷第 z期
ussw年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ z
∏¯¼ oussw
癫痫是常见的神经系统慢性疾病 o也是神经科
学研究的重点课题之一 ∀目前临床大多用西药治
疗 o但仍有约 us h 成为难治性癫痫 ∀故有必要从我
国的传统中药中开发新型抗癫痫药物 ∀石菖蒲是天
南星科多年生草本植物石菖蒲 Αχορυστατρινοωιι ≥¦«²·
的干燥根茎 o具有镇静催眠 o定志宁神 o抗惊厥的药
理作用≈t  ∀其主要抗惊厥的成分是挥发油部分 o对
其研究亦不乏报道 o但多局限于药效 o甚少涉及药理
机制 ∀为进一步探讨石菖蒲挥发油可能的抗癫痫机
制 o作者用超临界 ≤’u萃取法提取出石菖蒲挥发油 o
治疗 Ž„模型大鼠 o并观察海马的兴奋性与抑制性氨
基酸的含量变化 ∀
1 材料
1 q1 动物 ≥⁄雄性大鼠 o动物证号 }usst„swy o体重
kuss ? ussl ªo购自广东省实验动物中心 ∀
1 q2 药物与试剂 石菖蒲生药 }购自广州市药材公
司 o经广州市药材公司鉴定为广西产天南星科草本
植物石菖蒲的根茎 ∀丙戊酸钠k∂°„l粉剂 }湖南湘中
制药公司惠赠 ∀海人酸kŽ„l o购自 ≥¬ª°¤公司 ∀
1 q3 仪器 美国惠普公司 ‹° p tsxs型高效液相色
谱仪 ∀德国 …¨ ¦®°¤±u p ut型高速离心机 ∀浙江 ⁄
p tus型超声波清洗机 ∀上海 ≤˜wus型电热恒温水
浴箱 ∀
2 实验方法
2 q1 石菖蒲挥发油的超临界 ≤’u萃取 条件 }萃取
压力 us °¤o解析 ´压力 ts °¤o解析 µ压力 y °¤o
萃取温度 w{ ε o解析 ´温度 xx ε o解析 µ温度 wx
ε o循环时间 v «o收油率 v q{| h ∀
2 q2 Ž„模型的建立与石菖蒲挥发油的处理 将 uw
只大鼠 o以 ts h 水合氯醛 s qvx °#ktss ªlp t腹腔注
射麻醉 o固定于大鼠脑立体定位仪上 o常规消毒后切
开头皮 o暴露前囟附近颅骨 o按照大鼠脑立体定位图
谱 o取 …2t qu °° o中线旁开k横lu °° o即相当于右侧
脑室处 o钻开颅骨至硬脑膜 o用微注射器垂直进针
v qx ∗ v q{ °° o其中 t{只缓慢注入 ‘≥配置的 Ž„ € t
Λª#uss ªp t o另 y 只注入等量 ‘≥ ∀注射 Ž„的 t{ 只
大鼠随机分 v组 o每组 y只 o第 u天始各组大鼠分别
腹腔注射石菖蒲挥发油 vx °ª#®ªpt≈u  o∂°„tuy °ª#
®ªpt和 ‘≥ k模型及正常对照组l o每日上午 { ∗ ts时
t次 o持续 tw §∀最后 t次给药 t «后 o全部大鼠剪断
头部 o迅速取脑 o在冰盘上分离双侧海马组织 o电子
天平准确称重 o即刻冻存在 p us ε 冰箱 ∀
2 q3 标本处理 取海马组织于匀浆器内用甲醇反
复充分溶浆 v次 o转移合并提取液至离心管内 o置超
声波上处理 vs °¬±ots sssµ#°¬±pt ots ε 以下冷冻离
心 vs °¬±o将上清液转入液闪瓶内 o{s ε 水浴使甲醇
蒸发干 o瓶内准确加入 t qvx °s qt °²¯#pt的 ‹≤¯ o
再超声处理 vs °¬±o使氨基酸充分溶出 ∀将溶出物
再次冷冻离心 vs °¬±o取上清液用于氨基酸分析 ∀
2 q4 氨基酸分析 色谱条件 }‹° ‹¼³¨µ¶¬¯ ’⁄≥ kw
°° ≅ tux °°l x Λ° o流动相 „ }{ qs °°²¯#pt磷酸缓
冲液k³‹ z qul o流动相 …}{ qs °°²¯#pt磷酸缓冲液
k³‹ z qul n甲醇 n乙腈kxs n vx n txl o流量 t qs °#
°¬±pt o柱前自动衍生程序 }设置自动进样程序为依
次吸取 t ˏ’°„ 试剂 ox ˏs qt °²¯#pt ³‹ ts qw硼
酸缓冲液和 t ˏ样品 o梯度洗脱程序 }s °¬±os h …~
ux °¬±otss h …~vx °¬±otss h …~vx qt °¬±otss h „ ~wx
°¬±otss h „ ∀检测程序 }荧光检测器波长 Ε¬€ vws
±° oΕ° € wxs ±°∀
2 q5 统计方法 组间比较用方差分析 o检验标准为
Α€ s qsx o小于 s qsx有显著性差异 o小于 s qst有非常
显著性差异 ∀
3 结果
侧脑室微量注射 Ž„ 造模后 o大鼠在大约注射
Ž„ € t «后逐渐出现唇须抖动 !咀嚼 !流涎 !呆视 !抽
搐 !遗尿及湿狗样抖动k • ⁄≥l等典型癫痫发作 ∀而
在之后的 tw §用挥发油和 ∂°„ 治疗的过程中可观
察到癫痫大鼠原来的惊厥激惹状态逐渐得到缓和 o
变温顺 o目光及行动变灵活 o• ⁄≥亦逐渐减少 ∀ Ž„
模型大鼠海马兴奋性氨基酸k∞„„¶lŠ¯∏与 „¶³含量
较正常对照组明显升高k Π  s qstl o抑制性氨基酸
kŒ„„¶l中的 Š„…„含量明显减少k Π s qstl ~石菖蒲
挥发油治疗组的 Š¯ ∏与 „¶³有明显下降 oŠ„…„有明
显回升k Π s qsxl ~∂°„治疗组的 Š¯ ∏也有显著回降
k Π s qstl o„¶³也有下降k Π s qsxl oŠ„…„明显回
升k Π s qstl ~而各组的 Š¯ ¼含量变化均无显著性意
义k表 tl ∀
4 讨论
以往对中药的挥发性成分多是采用水蒸蒸馏法
提取 o工艺落后 o效率低 ∀超临界流体萃取k≥ƒ∞l技
术是近 us年来国际上迅速发展的新一代化工分离
技术 o可选择性地进行中药中多种物质的分离 o减少
杂质 o使中药有效成分高度富集≈w  ∀超临界 ≤’u萃取
石菖蒲挥发油时间短 o效率高 o收油率亦较水蒸蒸馏
#tzy#
第 u|卷第 z期
ussw年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ z
∏¯¼ oussw
表 t 石菖蒲挥发油对 Ž„所致癫痫大鼠海马氨基酸含量的影响k ξ ? σ, ν € yl ±°²¯#ªp t
组别 剂量r°ª#®ªpt Š¯ ∏ „¶³ Š„…„ Š¯ ¼
挥发油 vx { q|w ? v qwzvl t q|z ? s qtuvl x qvv ? u qusvl t qx{ ? s qt|
∂°„ tuy y qvt ? u qvwwl t q{| ? s qvtvl y q{y ? u qvywl t qwz ? s qzt
模型组 tv qxw ? x qttul u q{y ? s qzxul v qut ? t qxyul t qyx ? s qz{
正常对照组 x q{| ? t qsv t qwt ? s qxz z qv{ ? u qy| t qt| ? s qvv
注 }方差分析 与正常对照组比 tlΠ s qsx oulΠ s qst ~与模型组比 vlΠ s qsx owlΠ s qst
法有所提高 ∀
现已被确认的癫痫性脑损害主要是兴奋性氨基
酸k∞„„¶l的兴奋性毒性作用引起的 ∀ ∞„„¶包括谷
氨酸kŠ¯ ∏l和天门冬氨酸k„¶³l ∀谷氨酸是中枢神经
系统兴奋性突触的主要神经递质 oŠ¯ ∏含量增高或释
放增加 o兴奋性增强 o可能是癫痫发作的原因之一 ∀
采用脑内微透析k¬¦µ²§¬¤¯¼¶¬¶l技术检测到癫痫病人
在惊厥发生前和惊厥期间 o海马细胞外 Š¯ ∏浓度持
续增高≈x  ∀Χ2氨基丁酸kŠ„…„l是中枢神经系统的主
要抑制性氨基酸kŒ„„¶l ∀海人酸kŽ„l是一种谷氨酸
类似物 o一次给予惊厥剂量的 Ž„可诱发大鼠出现急
性癫痫发作 o并伴有癫痫敏感性的长期持续增强 oŽ„
模型已被世界广泛接受作为模仿人类颞叶癫痫极好
的动物模型 ∀微量注射 Ž„于大鼠的脑室或边缘脑
组织内 o可选择性损毁神经元胞体 o其中海马的 ≤„v
锥体细胞尤为敏感 o并形成局部惊厥病灶≈y  ∀进入
脑内的 Ž„ o选择性作用于脑内兴奋性氨基酸能神经
末梢突触前膜的 Ž„受体上 o引起兴奋性氨基酸的释
放 o并抑制其再摄取 o从而提高了细胞外液中兴奋性
氨基酸水平≈z  ∀分离双侧海马氨基酸分析结果显
示 oŽ„模型组大鼠海马 Š¯ ∏和 „¶³比正常对照组明
显升高 oŠ„…„ 明显降低 o证实了 Ž„ 对脑内氨基酸
类递质的影响作用及癫痫造模的成功 ∀经石菖蒲挥
发油治疗后的 Ž„大鼠 oŠ¯ ∏和 „¶³有明显回降 oŠ„2
…„有一定程度回升 o说明石菖蒲挥发油可以维持脑
内兴奋性与抑制性氨基酸之间的平衡关系 o减少因
外来因素造成二者的失衡 o从而抑制癫痫的发作 ∀
推测其可能的抗癫痫机制是对 Š„…„神经元起保护
修复作用 o提高 Š„…„神经元内 Š„…„递质的合成及
向细胞外释放 o或同时减少 Š„…„的重摄取和降解 o
提高整体脑组织内的 Š„…„ 含量 o通过抑制性突触
后电位降低兴奋性 ∀在提高抑制性神经递质含量的
同时 o又降低了 Š¯ ∏和 „¶³等兴奋性氨基酸递质在脑
内的整体含量 o也减少它们对神经组织的兴奋毒性
作用 o从而在双方面共同抑制癫痫的异常放电 o起到
抗癫痫的作用 ∀
≈参考文献 
≈t  唐洪梅 o李 锐 o周莉玲 q石菖蒲对中枢神经系统作用研究进
展 q广州中医药大学学报 ousss otzkul }t{t q
≈u  陈 俐 o廖卫平 q石菖蒲萃取挥发油抗癫痫药效研究 q中药新
药与临床药理 oussv oysktwl }tzt q
≈v  葛发欢 o李 莹 o谢健鸣 o等 q超临界 ≤’u流体萃取技术在天然
产物提取及药物分析中的最新研究进展和前景 q中药材 ot||x o
t{kyl }vty q
≈w  Ž²±¬ª • oŽ¬³³¯¨ • „ o •²¥¨µ·∞q׫¨ µ¤·¥µ¤¬±q‹¤°¥∏µª}Žµ¬¨ª¨µ
°∏¥¯¬¶«¬±ª ≤²qt|yz qwx q
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²¯ªµ¤³«¬¦¤±§±¨ ∏µ²¯²ª¬¦¤¯ ¦²µµ¨ ¤¯·¨¶q Βραιν Ρεσ , t|{t out{ }u|| q
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²©Ž¤¬±¬¦¤¦¬§¬±¦µ¨¤¶¨¶Š„…„ ¯¨ √¨¯¶¬± ³¨µ©∏¶¨ ©µ²°·«¨ «¬³³²¦¤°³∏¶
²©µ¤·¶q ςιϖο Νευρολογψ Τοξιχολογψ, t||s ott }x| q
Χηανγεσ οφ αµινο αχιδ χοντεντ ιν ηιπποχαµ πυσ οφ επιλεπτιχ ρατστρεατεδ
ωιτη ϖολατιλε οιλ οφ Αχορυσταταρινοωιι
≤‹∞‘¬t oŒ„’ • ¬¨2³¬±ªu
(t . ∆επαρτµεντ οφ Νευρολογψ, Τηε Φιρστ Αφφιλιατεδ Ηοσπιταλ οφ Γυανγζηου Μεδιχαλ Χολλεγε , Γυανγζηου xtstus , Χηινα ;
u . Ινστιτυτε οφ Νευροσχιενχε , Τηε Σεχονδ Αφφιλιατεδ Ηοσπιταλ οφ Γυανγζηου Μεδιχαλ Χολλεγε , Γυανγζηου xtsuys , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε:ײ¶·∏§¼·«¨ ¦«¤±ª¨¶²© ¬¨¦¬·¤·²µ¼ ¤±§¬±«¬¥¬·²µ¼¤°¬±²¤¦¬§¦²±·¨±·¬± «¬³³²¦¤°³∏¶²© ³¨¬¯¨ ³·¬¦µ¤·¶·µ¨¤·¨§º¬·«
√²¯¤·¬¯¨ ²¬¯ ²© Α. ταταρινοωιι o¤±§ ¬¨³¯²µ¨ ·«¨ ³²¶¶¬¥¯¨¤±·¬¨³¬¯¨·¬¦° ¦¨«¤±¬¶° q Μετηοδ : ׫¨ √²¯¤·¬¯¨ ²¬¯ º¤¶ ¬¨·µ¤¦·¨§·«µ²∏ª«≥∏³¨µ¦µ¬·¬¦¤¯2
≤’u ƒ¯ ∏¬§∞¬·µ¤¦·¬²± k≥ƒ∞2≤’ul o¤±§ ³¨¬¯¨ ³·¬¦°²§¨ ¶¯º µ¨¨ ¥∏¬¯·∏³¥¼ ®¤¬±¬¦¤¦¬§kŽ„l ¤¯·¨µ¤¯ √ ±¨·µ¬¦¯¨¬±­¨¦·¬²±q׫¨ ¦²±·¨±·²©¤°¬±²
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第 u|卷第 z期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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[ Κεψ ωορδσ] Αχορυσταταρινοωιι ~√²¯¤·¬¯¨ ²¬¯~®¤¬±¬¦¤¦¬§~«¬³³²¦¤°³∏¶~Š„…„ ~ª¯∏·¤°¤·¨~∞³¬¯¨ ³¶¼
≈责任编辑 方文贤 
芦笋多糖对衰老模型小鼠的影响
苗明三 3 o顾丽亚 o方晓燕 o苗艳艳
k河南中医学院 药学院 o河南 郑州 wxsss{l
≈摘要  目的 }观察芦笋多糖对 ∆2半乳糖所致衰老小鼠的影响 ∀方法 }用 ∆2半乳糖造糖代谢衰老小鼠作为实
验对象 ∀结果 }芦笋多糖可显著提高衰老小鼠血 ≤„× o≥’⁄oŠ≥‹2°÷ 活力 o显著降低血浆 !脑 !肝匀浆 °’水平 ~可显
著拮抗衰老所致胸腺 !脾脏和脑组织的萎缩 ∀结论 }芦笋多糖有较好的抗衰老作用 ∀
≈关键词  芦笋多糖 ~衰老模型 ~抗氧化 ~免疫器官
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswlsz2syzv2sv
芦笋多糖为禾本科植物芦苇嫩苗的提取物 ∀芦
笋甘 !苦 !辛 !凉 o具有止咳散结 !杀虫止痒之功 o临床
常用于肺痈的治疗 ∀对芦笋虽有不少现代研究 o但
与其传统功效相吻合的并不多 ∀作者对芦笋的前期
研究表明 o芦笋含有较多的多糖类成分 o有一定的免
疫兴奋作用≈t  o并进行了芦笋多糖对衰老小鼠模型
抗氧化能力及对有关组织病理影响的观察 ∀
1 材料
1 q1 药物
芦笋 o禾本科植物芦苇 Πηραγ µιτεσ χοµ µυνισ
×µ¬±q的嫩苗 ow月份采于郑州 o并经本院生药学科曹
继华教授鉴定为正品 o经乙醇回流脱脂 !水提取 !浓
缩 !醇沉 !除蛋白 !透析 !真空干燥等程序 o得到芦笋
多糖 ~由本院药化学科提供 o多糖含量 |s h以上 ∀香
菇多糖片 o湖北省广水制药厂生产 o批号 ststty ~∆2
半乳糖 o上海试剂二厂生产 o批号 ssszsy ~≥’⁄试剂
盒 o南京建成生物工程公司生产 o批号 stsvus ∀
1 q2 动物
昆明种小鼠 o由河南省医学实验动物中心提供 ∀
2 方法
取体重 t{ ∗ us ª小鼠 ys只 o雌雄各半 o随机均
≈收稿日期  ussw2st2su
≈通讯作者   3 苗明三 oר¯ }ksvztl x|yuxwy o ƒ¤¬} ksvztl
x|yuxwy o∞2°¤¬¯} °¬¤²°¬±ª¶¤±ƒ ¶²«∏q¦²°
匀分为 y组 o其中 x组每天颈背部皮下注射 ∆2半乳
糖k生理盐水配成 x h o注射量为 s qux h l造糖代谢
衰老模型 o连续给 ∆2半乳糖 ws §∀从第 t 天开始 o
分别灌服大 !中 !小剂量的芦笋多糖水溶液 !香菇多
糖片混悬液和同体积生理盐水 o每天给药 t 次 o连续
给药 vs §∀另有 t组动物每天颈背部皮下注射生理
盐水作为空白对照 o每 v天称体重 t次 o根据体重调
整 ∆2半乳糖和相应药物的用量 ∀于最后 t 次给 ∆2
半乳糖和灌药后 u «o小鼠眼眶取血 o肝素抗凝备用 ~
再取小鼠肝 !脑制备肝匀浆和脑匀浆 o冰藏备用 o分
别测定该多糖的抗氧化作用≈u  ∀然后处死小鼠 o解
剖 o取脑 !胸腺 !脾脏 o福尔马林固定 o作镜检 ∀
2 q1 对衰老模型小鼠血超氧化物歧化酶k≥’⁄l活力
的影响
取小鼠血 xs ˏo加入盛有 x °生理盐水刻度
离心管中离心 o弃去上清液 o加预冷双蒸馏水 s qu
°o溶血后加预冷 |x h 乙醇 s qt °o混合器上抽
提 u °¬±o离心得抽提液 o按试剂盒说明书测血总
≥’⁄活力≈u ov  ∀
2 q2 对衰老模型小鼠血过氧化氢酶k≤„×l活力的影

取 vs h过氧化氢 s qxu °o加水至 xs °o取出
w °o加入 ³‹ z qs的 s qsx °²¯#磷酸缓冲液 uy °o
在 uvs ±°处测 t ¦°光路的 Α值为 s qxv o可作为过
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第 u|卷第 z期
ussw年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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