全 文 ：313 柴胡茎中醇浸出物约为根的 trv ∗ trw o总皂
苷约为 try ∗ trx o挥发油约为 trv ∗ tru ∀虽然茎中
有效成分含量较根为低 o但地上部分在全株中占
{s h以上的重量 o因此本研究表明 }栽培柴胡的茎亦
有一定的药用价值 o这将为扩大北柴胡的应用范围 o
提高利用度提供了一定的实验依据 ∀
≈参考文献
≈t 王天鹏 q柴胡栽培管理技术 q中国中药杂志 ot||vot{kwl }uszq
≈u 中国药典 q一部 qusssq附录 xwq
≈v 肖培根 q新编中药志 q第一卷 q北京 }化学工业出版社 oussuqz{xq
≈责任编辑 张宁宁
≈收稿日期 ussw2su2st
≈通讯作者 3丁怡 oר¯ }kstslyuz|yuzs o ∞2°¤¬¯}¼¬§¬±ª °¤¬¯q
·¶¬±ª«∏¤q¨§∏q¦±
剑麻总皂苷制备工艺研究
马 超 o丁 怡 3 o王 伟 o王卫华 o邢东明 o杜力军
k清华大学 生物科学与技术系 o北京 tsss{wl
东一号剑麻 Αγαϖε σισαλανα©²µ° ⁄²±ª qt是龙
舌兰属植物的一个变种 o是从国外引种并在中国南
方栽培成功的一种龙舌兰麻 o是用于生产硬质纤维
的重要原料 ∀该种植物叶片抽去纤维的液汁经自然
发酵后 o其滤渣中含有大量的皂苷成分 o主要为
§²±ª¶¤³²±¬± o
o≤ o⁄o∞≈t ou ∀
药理研究表明 o这些皂苷成分具有较明显的抗
炎 !抗菌 !止血 !抗衰老和降血糖的活性 o经过初步活
性筛选 o还发现其具有较好的调血脂活性k结果待
报l ∀
为了更好地开发利用发酵后麻渣中的皂苷类成
分 o开发具有降血脂活性的药物 o作者对剑麻总皂苷
的提取纯化工艺进行了研究 o从而确定了最佳工艺 o
得到了含量较高的总皂苷部分 ∀
1 仪器与试剂
× p t{ss°≤紫外可见分光光度计k北京普析通
用仪器有限公司l ∀东一号剑麻麻渣k广西东方红剑
麻农垦总公司 o批号 susyt{l o剑麻皂苷对照品k自
制 o经 ∂ o ot 2 otv ≤2 及 ⁄2≥ 确定结
构 o°≤面积归一化法测定纯度为 |{1vy h l o°⁄2
tss大孔树脂k河北沧州宝恩化工有限公司l o香草
醛 !冰乙酸 !高氯酸和甲醇等均为国产分析纯 ∀
2 方法和结果
211 分光光度法测定剑麻总皂苷的含量
21111 标准曲线的制备 精密称取剑麻皂苷对照
品 z1{t °ªo用甲醇溶解并定容至 x °∀分别吸取
s1u os1w os1y os1{ ot1s °o置 ux °具塞试管中 o
然后加入甲醇使终体积均为 t1s ∀另取 t1s °甲醇
作空白对照 ∀各管中依次加入 x h香草醛2冰醋酸溶
液 s1u °o高氯酸 s1{ °o摇匀后置于 zs ε 水浴中
加热 us °¬±o取出后迅速流水冷却至室温 o再分别加
入 x °冰醋酸 o摇匀 o于 wxs ±°处测定吸光度 ∀以
含量为横坐标 o吸光度 Α为纵坐标绘制标准曲线 o
得回归方程 }Χ ux|1tutΑ p t1twy , ρ s1||| z o剑
麻皂苷在 ww1y ∗ uuv1t Λª#°pt线性关系良好 ∀
21112 样品的预处理 取 x ª干燥的麻渣粗提物 o
用 {s h乙醇溶解后 o用 tx ª干燥的大孔树脂拌样 o
干燥后上柱 o先用 vs h乙醇 uss °洗脱 o再用 {s h
乙醇 uss °洗脱 o收集 {s h乙醇洗脱液 o蒸干至恒
重后称重 ∀
21113 样品中总皂苷含量的测定 精密称取处理
后的样品约 ts °ªo用甲醇溶解并定容至 x °o取 t
°置于 ux °具塞试管中 o按/标准曲线制备0项下
操作 o测得样品的吸光度 Α值 o根据标准曲线求总
皂苷的含量 ∀
212 单因素设计考察醇提含量
称取干燥剑麻麻渣 xs ªo共 y份 o按单因素实验
设计分别加入 y倍量不同含量乙醇 o回流提取 v次 o
每次 t «o提取液合并过滤并浓缩至干 o然后进行含
量测定 o并计算总皂苷得率 ∀试验结果见表 t ∀
由表 t结果可知 o{s h o|x h乙醇提取时 o其总
皂苷得率均较高 o两者效果相差不大 o从成本角度考
虑 o确定 {s h乙醇为最终提取溶剂 ∀
#t|v#
第 vs卷第 x期
ussx年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vs o¶¶∏¨ x
¤µ¦«oussx
表 t 单因素试验
²1 乙醇含量r h
提取物干重
rª
皂苷含量
r h
皂苷得率
r h
t s z1us z1{y t1tv
u vs ts1ys ts1vt u1t|
v xs tv1z{ t|1uv x1vs
w zs tw1zu u|1ut {1ys
x {s tx1{s vw1vx ts1{x
y |x tx1xv vx1tv ts1|t
213 正交设计考察提取次数 !溶剂用量 !提取时间
称取干燥剑麻麻渣 xs ªo共 |份 o正交设计分别
回流提取 o提取液过滤后浓缩至干 o并进行含量测
定 o计算总皂苷得率 ∀试验设计见表 u o试验结果及
方差分析见表 v ow ∀
表 u |kvwl正交试验因素水平
水平
Α
提取次数
r次
Β
溶剂用量
r倍
Χ
提取时间
r«
t t y t
u u | u
v v tu v
表 v 正交试验结果
²1 提取物量rª 总皂苷含量r h 总皂苷得率r h
t z qsz u| qux w qtw
u ts q{v uy q{t x q{t
v tv qxx vt qtt { qwv
w tw q{y vt qvt | qvt
x tx q|u u| qz{ | qw{
y tt qx| uz qsy y quz
z ty q{| vt q|t ts qz{
{ tw qxy uw qst y q||
| tz qt{ vu qyx tt quu
表 w 方差分析表
方差来源 离均差平方和 自由度 均方 Φ Π
Α t| .t{ u | .x| uv .uw s .sx
Β u .ut u t .tt u .y{ s .sx
Χ uv qyy u tt q{v u{ qyy s qsx
误差 s q{v u s qwt
注 }Φs qsxku oul t| qss
由方差分析可见 o各因素对剑麻总皂苷提取效
果的影响程度依次为 Χ Α Β o即提取时间和提取
次数对剑麻总皂苷得率的影响有显著性意义 o而溶
剂用量的影响无显著性意义 o因此 o剑麻总皂苷的最
佳提取工艺确定为 Αv Βt Χv o即 y倍量的 {s h乙醇提
取 v次 o每次 v «∀
214 皂苷分离条件的考察
麻渣提取物的水溶性较差 o直接上样流速太慢
而且容易使树脂柱堵塞 o因此采用大孔树脂拌样吸
附 !乙醇梯度洗脱的工艺进行分离 ∀其中 o样品与大
孔树脂的用量比 !乙醇的洗脱梯度对树脂柱的洗脱
速度 !总皂苷纯度和得率均有较大的影响 ∀
21411 样品与大孔树脂用量比的考察 取 xs ª干
燥麻渣 o用最佳提取工艺回流提取 o提取液浓缩至
vss °后 o均分为 x份 o分别与 ts otx ous oux ovs ª大
孔树脂均匀搅拌 o水浴kys ε l蒸干上柱 o并用 vs h
乙醇 uss °洗脱 o记录各柱子的流速并用 ×≤检测
洗脱液中有无皂苷成分 ∀结果表明 o当大孔树脂的
量大于 us ª时 o柱子的流速较快且皂苷被完全吸
附 ∀因此 o确定大孔树脂与麻渣的量之比为 uΒt ∀
21412 乙醇洗脱梯度的考察 取 tss ª干燥麻渣 o
采用最佳工艺提取 o提取液浓缩至 yss °o加入 uss
ª干燥的大孔树脂 o拌匀后干燥上柱 o然后依次用
vs h乙醇 u xss °oxs h乙醇 v xss °o{s h乙醇 w
sss °o|x h 乙醇 u xss °洗脱 o分段收集 o每份
xss °∀洗脱液浓缩蒸干后称重并测定总皂苷含
量 ∀分别以洗脱物干重kªl和总皂苷的量kªl按洗脱
序号作图 o结果洗脱曲线显示 o剑麻总皂苷主要集中
在 {s h的乙醇洗脱液中 o占全部醇洗液中总皂苷含
量的 {{1w h o而 yz1{ h的杂质被除去 ∀故确定洗脱
条件为 o先用 xs h乙醇洗去大量杂质 o再用 {s h乙
醇洗脱剑麻总皂苷 o收集 {s h乙醇洗脱部分 ∀
215 工艺验证试验
从以上试验得出剑麻总皂苷的最佳提取工艺
为 }y倍量 {s h乙醇回流提取 v次 o每次 v «o提取液
合并后拌以麻渣重量 u倍的大孔树脂 o水浴蒸干上
柱 o并用 xs h乙醇洗至颜色较浅k约 w倍柱体积l o
然后用 w ∗ x倍柱体积的 {s h乙醇洗脱 o收集洗脱
液 o回收乙醇并浓缩 o真空干燥 o即得剑麻总皂苷 ∀
为考察上述工艺的稳定性 o按筛选出的最佳工艺进
行验证试验 o结果见表 x
表 x 工艺验证试验
²q 投料量rª
提取物得率
r h
≥⁄
r h
剑麻总皂苷
含量r h
≥⁄
r h
t uss tv qz{ zt qus
u xss tv q{y v qst zu qxs u qvy
v tsss tw qxx zw qys
可见 ov次实验结果 ≥⁄均在 x h以内 o说明该
工艺稳定可行 ∀
3 讨论
311 麻渣提取物水溶性较差 o用蒸馏水洗脱时流速
很慢 o且容易引起树脂柱堵塞 o因此实验中采用大孔
#u|v#
第 vs卷第 x期
ussx年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vs o¶¶∏¨ x
¤µ¦«oussx
树脂拌样上柱 o然后用 xs h乙醇除杂 o{s h乙醇洗
脱的工艺 o这样不仅使流速加快 o而且杂质去除率
高 o皂苷损失少 o效果较为理想 ∀
312 本试验采用的原料为发酵后的干燥剑麻麻渣 o
其含有黑色的水溶性色素和叶绿素 o水溶性色素可
以被 xs h乙醇洗下 o而叶绿素可以先被大孔树脂吸
附 o最后又可被 |x h乙醇洗脱 o大量的剑麻总皂苷
集中在 {s h洗脱液中 o损失较少k|x h洗脱液中皂
苷含量仅占总皂苷的 z1z{ h l o因此 o收集了 {s h洗
脱液 o用 |x h乙醇使树脂再生 ∀
≈参考文献
≈t ⁄ ≠ o× o≠ ≤ o ετ αλ. ׺² ±¨ º ¶·¨µ²¬§¤¯ ¶¤³²±¬±¶
©µ²° §µ¬¨§ ©¨µ° ±¨·¨§ µ¨¶¬§∏¨¶²© ¯¨ ¤©2∏¬¦¨¶²© Αγαϖε σισαλανα ©²µ°
⁄²±ª²qt q Χηεµ Πηαρµ Βυλλ,t||v owt }xxz q
≈u ⁄ ≠ o≤∞ ≠ ≠ o• ⁄ o ετ αλ1 ≥·¨µ²¬§¤¯ ¶¤³²±¬±¶©µ²°¤
¦∏¯·¬√¤·¨§©²µ° ²© Αγαϖε σισαλανα . Πηψτοχηεµιστρψ, t|{| ou{ktsl }
uz{z q ≈责任编辑 刘
茜草饮片炒炭前后大叶茜草素含量比较
张振凌 3 o周 艳 o张本山
k河南中医学院 药学院 o河南 郑州 wxsss{l
≈收稿日期 ussv2st2tx
≈基金项目 国家/十五0科技攻关课题kusst
zstxx2{l
≈通讯作者 3张振凌 oר¯ }ksvztlxy{s|zs
茜草为茜草科植物茜草 Ρυβια χορδιφολια q的干
燥根及根茎 o其主要有效成分为蒽醌及其苷类 !萘醌
及其苷类和萘酸酯类等≈t ∀其中萘醌类化合物大叶
茜草素k°²¯ ∏¯ª¬±l是茜草中有效成分之一≈u o5中国
药典6usss年版规定茜草药材中大叶茜草素含量不
得少于 s qw h ≈v o但茜草根的不同部位饮片特别是
经炒炭以后大叶茜草素含量却没有明确规定 o也没
有见到相关报道 ∀作者依据文献≈v o采用 °≤ 对
不同部位切制的茜草饮片与不同火候制成的茜草炭
中大叶茜草素含量进行比较 ∀
1 仪器和试剂
高效液相色谱分析仪k岛津 ≤ p ts o≥°⁄ p
ts检测器l ~温度计 |{xtz ~大叶茜草素
对照品k中国药品生物制品检定所 o批号 {{w2ussss o
供含量测定用l ~甲醇为色谱纯 ~其余试剂为分析纯 ∀
茜草药材购于郑州市药材公司 o经河南中医学院鉴
定教研室曹继华教授鉴定为茜草科植物茜草 Ρ .
χορδιφολια的干燥根及根茎 ∀
2 饮片制备
取茜草原药材 o根据根的粗细分为 茜草粗
根 ~
茜草根端膨大部分 ~≤ 茜草细根 ∀分别水洗 o
闷润至用弯曲法检查至能对折不断 o将细根切为 x
°°段 o将粗根和根端膨大部分切厚片 o于 xs ε 烘箱
中烘干 o过 t号筛kts目l o筛下的碎屑合并 o即为茜
草碎屑细末k⁄l ∀取切制后的 o
和 v份 ≤ 各 ws
ªo编号 t o
t o≤t o≤u o≤v ∀分别调整火力 o用温度计
测量锅底温度 o控制炒炭时间 o按下列要求炒炭 ∀参
数条件见表 t ∀
表 t 不同部位茜草饮片炒炭不同程度参数条件
²q 部位及程度 锅底温度r ε
时间
r°¬±
炒后量
rª
t 茜草粗根炭 uvs { vu
t 茜草根端膨大部分炭 uvs { vv
≤t 茜草细根轻炭 tzs v vx
≤u 茜草细根中炭 uss x vw
≤v 茜草细根重炭 uvs z vt
3 大叶茜草素含量测定
3 q1 色谱条件 ≥«¬°2³¤¦® ≤≤2⁄≥柱ky qs °° ≅
tx ¦° ox Λ°l o流动相甲醇2水2四氢呋喃kvtsΒ|sΒvl o
检测波长 uxs ±° o流速 t qs °#°¬±pt o分析时间 ux
°¬±∀
3 q2 对照品溶液的制备 精密称取大叶茜草素对
照品适量置于 ux °量瓶中 o加甲醇稀释至刻度 o摇
匀 o制成每 t °含大叶茜草素 {{ Λª的溶液 ∀
3 q3 标准曲线的制备 用微量注射器精密吸取对
照品溶液 t ou ow oy o{ ots Λo依次进样 o测定 ∀以峰
面积积分值为纵坐标 o进样量为横坐标绘制标准曲
线 ∀回归方程 Ψ t q{tw t ≅ tsy Ξ p t qtvu ≅ tsw oρ
s q||| { ∀结果表明 o大叶茜草素在 s qs{{ ∗ s q{{ Λª
#v|v#
第 vs卷第 x期
ussx年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vs o¶¶∏¨ x
¤µ¦«oussx