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©¯∏²µ¨¶¦¨±·°¤µ® º¤¶° ¤¨¶∏µ¨§ qΡεσυλτ : Œ·º¤¶³µ²√ §¨¥¼ ¤ª¤µ¶∏ª¤µª¨¯¨¯ ¦¨·µ²³«²µ¨¶¬¶·«¤··«¨ °≤ • ¤°³¯¬©¬¨§³µ²§∏¦·¶²©·«¨ ¬±·¨µ2
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[ κεψ ωορδσ] Γεντιανα δαηυριχα ~±°≤ • ~ ° ¤¨¶∏µ¨ ·«¨ ¶¨ ∏´¨ ±¦¨ ²© ⁄‘„ ~µ• ‘„ ª¨ ±¨ ~¬§¨ ±·¬©¬¦¤·¬²±
≈责任编辑 袁桂京 
三七 ‹°≤ 指纹图谱的建立
王 雁t o毕开顺u
kt q辽宁省盘锦市药品检验所 o辽宁 盘锦 tuwsts ~
u q沈阳药科大学 o辽宁 沈阳 ttsstxl
≈摘要  目的 }建立三七药材的高效液相指纹图谱k‹°≤2ƒ°l o在量上为三七的鉴定与合理应用提供依据 ∀
方法 }∏±¤≤t{kul色谱柱 o流动相 }k„l乙腈2k…ls qsx h磷酸梯度洗脱 os ∗ { °¬±kus h „ o{s h …l o{ ∗ us °¬±kus h
„ ∗ ws h „ o{s h … ∗ ys h …l ous ∗ vs °¬±kws h „ ∗ us h „ oys h … ∗ {s h …l ovs ∗ vy°¬±kus h „ ∗ tss h „ o{s h … ∗
sl ovy ∗ xs °¬± ktss h „l oxs ∗ yx °¬±ktss h „ ∗ us h „ os ∗ {s h …l o流速 t qs °#°¬±p t o检测波长 usv ±° ∀咖啡
因为内标物 ∀结果 }通过聚类分析 out个不同产地 !不同规格的三七样品被聚为 w类 }地道药材优级品 !地道药材 !
市售一般品和次品 ∀通过相似度计算 out个三七样品的相似度均在 s q| ∗ t qs之间 o{个常见伪品的相似度均小于
s q| ∀结论 }该色谱图可作为三七的 ‹°≤2ƒ° o用于三七的真伪鉴别和质量评价 ∀
≈关键词  三七 ~指纹图谱
≈中图分类号  • u{u qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussvlsw2svty2sx
指纹图谱≈t 作为中药材及中成药的一种新的
质量控制技术 o正得到普遍关注 ∀三七≈u  o性味甘 !
微苦 !温 ∀主要用于治疗咯血 !衄血 !外伤出血 !跌打
肿痛 ∀药理资料证明≈v ow  o三七具有抗血栓 !改善心
血管功能和很强的止血作用 ∀中国中医研究院中药
研究所与云南文山州科委合作进行的开发应用三七
的基础研究结果表明 }在耐缺氧 !抗衰老 !提高机体
免疫力方面 o在相同剂量下 o三七皂苷的作用大于人
参皂苷 ∀因此 o三七成为目前最为常用的贵重中药
材 ∀血塞通 !血栓通注射液为三七总皂苷的水溶液
制剂 o同时三七也是多种中成药复方丹参片 !三七
片 !脑得生片等的主要组成成分≈x  o因而 o市场上三
≈收稿日期  ussu2s|2us
≈通讯作者  ר¯ }kswuzlu{s{ysv ƒ¤¬}kswuzlu{sssu{ ∞2
°¤¬¯}¶§®xx| ƒ ¼¤«²²q¦²° q¦±
七掺杂使假的现象时有发生 ∀为了有效打击假劣药
品 o保证药品质量 o同时为了实现中药标准标准化 o
推动中药材 Š„° 的实施 ∀本实验建立了三七的
‹°≤ 指纹图谱并对该指纹图谱的特征峰数据进行
系统聚类分析和相似度计算 o同时比较了三七与其
常见的伪品≈y oz  ) ) ) 姜黄 !高良姜 !郁金 !三棱 !白
术 !白芷 !白及 !莪术的高效液相色谱的差异 ∀
1 仪器与试剂
≥≥Œ ≥∞• Œ∞≥ Œ∂ 双泵高效液相色谱仪 o≥≥Œ xss
紫外检测器 o„±¤¶·¤µ色谱工作站 ∀
乙腈k色谱纯 l o磷酸k分析纯 l o内标咖啡因k
熔点标准品 o批号 tst2{wsv o中国药品生物制品检
定所提供l ∀
对照品 三七皂苷 • tk批号 szwx2usssszl !人
参皂苷 • ªtk批号 szsv2ussttzl !人参皂苷 • ¥tk批
号 zsw2ussttwl o均为化学对照品 !含量测定用 o中
国药品生物制品检定所提供 ∀
#ytv#
第 u{卷第 w期
ussv年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o‘²qw
„³µqoussv
样品来源见表 t ∀
表 t 三七样品来源
样品编号 样品名称 样品来源 规格 生长年限
t Π. νοτογινσενγ 购于云南文山三七种植农场 ws头 v
u Π. νοτογινσενγ 购于云南文山三七种植农场 vs头
v Π. νοτογινσενγ 购于昆明(礼品盒) ws头
w Π. νοτογινσενγ 购于云南文山三七直销点 vs头
x Π. νοτογινσενγ 购于云南文山三七种植农场 ws头 x
y Π. νοτογινσενγ 购于云南文山三七种植农场 ws头 u
z Π. νοτογινσενγ 购于广西 tus头
{ Π. νοτογινσενγ 购于四川 ws头
| Π. νοτογινσενγ 购于昆明 ws头 x
ts Π. νοτογινσενγ 购于云南文山三七种植农场 ys头 t
tt Π. νοτογινσενγ 购于昆明 ws头 v
tu Π. νοτογινσενγ 购于昆明 tws头 t
tv Π. νοτογινσενγ 购于安徽亳州药材市场 ys头
tw Π. νοτογινσενγ 购于辽河油田医院 tus头
tx Π. νοτογινσενγ 购于昆明 tus头
ty Π. νοτογινσενγ 购于辽河油田医院 无数头
tz Π. νοτογινσενγ 购于昆明 tvs头
t{ Π. νοτογινσενγ 购于安徽亳州药材市场 tvs头
t| Π. νοτογινσενγ 购于安徽亳州药材市场 无数头
us Π. νοτογινσενγ 购于辽河油田药材超市 ys头
ut Π. νοτογινσενγ 购于广西 ws头
uu Ανγελιχα δαηυριχα 盘锦市药品检验所标本室
uv Α . µ αχροχεπηαλα 盘锦市药品检验所标本室
uw Ραδιξ Χυρχυ µ αε 盘锦市药品检验所标本室
ux Χυρχυ µ α λονγα 盘锦市药品检验所标本室
uy Χ. ζεδοαρια 盘锦市药品检验所标本室
uz Βλετιλλα στριατα 盘锦市药品检验所标本室
u{ Αλπινια οφφιχιναρυ µ 盘锦市药品检验所标本室
u| Σπαργανιυ µ στολονιφερυ µ 盘锦市药品检验所标本室
注 }≠样品生药学鉴定由辽宁省盘锦市药品检验所王桂萍完成  样品编号表 u o图 y同
2 实验方法与结果
2 q1 色谱分析条件≈{ 
∏±¤ ≤t{kul分析柱kuxs °° ≅ w qy °° ox Λ°l o
流动相k„l乙腈2k…ls qsx h磷酸梯度洗脱 os ∗ { °¬±
kus h „ o{s h …l o{ ∗ us°¬±kus h „ ∗ ws h „ o{s h
… ∗ ys h …l ous ∗ vs °¬±kws h „ ∗ us h „ oys h … ∗
{s h …l ovs ∗ vy °¬±kus h „ ∗ tss h „ o{s h … ∗ sl o
vy ∗ xs °¬±ktss h „l oxs ∗ yx °¬±ktss h „ ∗ us h
„ os ∗ {s h …l o流速 t qs °# °¬±p t o检测波长 usv
±° ∀所有组分均在 zs °¬±内洗脱出柱 o见图 t ∗ 图
v ∀
2 q2 溶液制备
供试品溶液的制备 精密称取三七药材粉末
k过 tss目筛ls qux ª置 xs °具塞锥形瓶中 o精密
加入甲醇 ux °o精密称定 o超声 vs °¬±o放冷 o精密
称定 o用甲醇补足减失重量 o精密加入咖啡因内标液
s qx °o混匀 o滤过 ∀取续滤液 o经 s qwx Λ°有机系
微孔滤膜滤过 o取续滤液 o即得 ∀
内标液制备 精密称取咖啡因 s qsux zt ªo置
tss °量瓶中 o加水稀释至刻度 o摇匀 ∀
图 t 对照品溶液的 ‹°≤
≥ q咖啡因 u q三七皂苷 • t
v q人参皂苷 • ªt y q人参皂苷 • ¥t k图 u o图 v同l
#ztv#
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∂ ²¯ qu{ o‘²qw
„³µqoussv
图 u 三七样品溶液的 ‹°≤2ƒ° k全图l
图 v 三七样品溶液的 ‹°≤2ƒ° k局部图l
对照品溶液的制备 精密称取对照品三七皂
苷 • t v q|w °ª!人参皂苷 • ªt tu qzv °ª!人参皂苷
• ¥t tv q{u °ª置 ux °量瓶中 o精密加入咖啡因内
标液 t qs °加甲醇使溶解并稀释至刻度 o摇匀 o精
密吸取 x °置 ts °量瓶中 o加甲醇稀释至刻度 o
摇匀 o经 s qwx Λ°有机系微孔滤膜滤过 o取续滤液 o
即得 ∀
2 q3 系统适用性实验与精密度考察
取对照品溶液进样分析 o色谱图见图 t ∗ 图 v o
分离效果好 o以人参皂苷 • ªt峰计算 o理论塔板数大
于 uzssss o连续重复进样 y次 o计算峰面积的精密
度 }三七皂苷 • t 为 t qt h !人参皂苷 • ªt 为 t qt h !
人参皂苷 • ¥t为 t qs h ∀
2 q4 三七 ‹°≤2ƒ°的重现性与稳定性试验≈| 
取同一批药材k购于云南昆明 ov年生 ows头lx
份 o按上述 2 q2 方法制备供试品溶液 o进样并记录色
谱图 o见图 u ov o计算 t ou ov oy ots otu otv号峰相对
于内标峰 ≥的相对保留时间和相对峰面积 o结果显
示各峰相对保留时间的 • ≥⁄均在 t qs h以下 o相对
峰面积的 • ≥⁄为 t qs h ∗ v q{ h ∀取重现性试验第
t份样品溶液相隔 s ou ow o{ ouw «分别进样检测 o计
算相对保留时间和相对峰面积 o结果显示供试品的
指纹图谱在 uw «内基本稳定 o各峰相对保留时间的
• ≥⁄均在 t qs h以下 o相对峰面积的 • ≥⁄为 s q{ h
∗ v qz h ∀
2 q5 三七药材的 ‹°≤2ƒ°的建立
取不同产地 !不同规格的三七样品及其常见伪
品 o分别按上述 2 q2 方法制备供试品溶液 o进样并记
录指纹图谱k见图 w oxl ∀结果 ut批药材均显示与
图 w 不同产地三七样品的 ‹°≤2ƒ°
自下而上 }混合对照品溶液k咖啡因 !三七皂苷 • t !
人参皂苷 • ªt !人参皂苷 • ¥tl ot ∗ ut号样品溶液
参考指纹图谱有相同的特征峰 o其 tv个共有特征峰
的相对保留时间的 • ≥⁄均低于 t qs h o说明参考指
纹图谱中各特征峰为三七药材的共有成分 ∀采用
≥°≥≥软件对 ut批三七药材的 ‹°≤2ƒ°中各特征
峰的相对峰面积进行聚类分析 o以夹角余弦为测度
的聚类图结果见图 y o利用 ∞¬¦¨¯¯ 软件 o分别采用欧
氏距离 !相关系数和夹角余弦作测度 o以 t oy ou ow o
{ out ott o| ox号样品为标准样本 o计算所有样品的
相似度 ∀结果见表 u ∀
公式 }
¦²¶Αιϕ€
Ε
ν
κ€ t
Ξκι# Ξκϕ
[ ( Ε
ν
κ€ t
Ξuκι) #( Ε
ν
κ€ t
Ξuκϕ)] t/ u
#{tv#
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„³µqoussv
ριϕ€
Ε
ν
κ€ t
( Ξκι p Ξι)( Ξκϕp Ξϕ)
{[ Ε
ν
κ€ t
( Ξκι p Ξι)u] [ Ε
ν
κ€ t
( Ξκϕp Ξϕ)u] }t/ u
διϕ(u) € [ Ε
µ
κ€ t
( Ξιϕp Ξϕκ)u] t/ u
表 u 样品的相似度
样品编号 测度夹角余弦 相关系数 欧氏距离
t s q||s w s q|{z t s q|y{ v
u s q|yv y s q|xs v s q|xt x
v s q|{y t s q|{t u s q|yt u
w s q|yu { s q|w| w s q|ss s
x s q|zx | s q|y{ u s q|xz y
y s q|{z z s q|{v v s q|zs s
z s q|z{ x s q|zw { s q|yy z
{ s q||z | s q||z y s q|ys v
| s q|{w y s q|z| v s q|w{ y
ts s q|zz t s q|y| x s q|wx y
tt s q|{x s s q|{s z s q|zs y
tu s q|xz t s q|yz s s q|xv t
tv s q|ws s s q|t{ { s q|ut |
tw s q|xt { s q|v{ t s q|ww v
tx s q|{y z s q|{t | s q|w| t
ty s q|{w v s q|{s { s q|zt t
tz s q|{{ t s q|{w s s q|wt u
t{ s q|z{ u s q|zs v s q|xy y
t| s q|z| s s q|zt w s q|yx |
us s q||s { s q|{| x s q|xw y
ut s q|{y v s q|{u z s q|xt x
uu s qsx| xu p s qu|t x s q{ww |
uv s quyx | p s qssx y s q{w| v
uw s qxw{ v s qvu{ y s q{x| u
ux s qsuv vs p s qutu x s q{t{ |
uy s quyw x p s qssz xu s q{xv z
uz s quys | s qs{{ xy s q{ww t
u{ p s q{w{ t p
u| s quxs s s qsuz |y s q{xv v
3 结果与讨论
3 q1 三七常见伪品 ) ) ) 姜黄 !高良姜 !郁金 !三棱 !
白术 !白芷 !白及 !莪术的 ‹°≤ 图与三七的 ‹°≤2
ƒ°比较 o在此色谱条件下上述伪品均无三七的特征
峰 o采用此法可以方便地鉴别真伪 ∀
3 q2 通过系统聚类分析该 ‹°≤2ƒ°的特征峰数
据的系统聚类结果为 }w o{ out ott o| ox号样品为地
道药材优质品 o质量最好 ot oy ou 号样品为地道药
材 o质量较好 ots otx ot|号样品为次品 o质量最次 o
tu oty otz ov ous oz otw otv ot{号样品为市售一般品 o
系统聚类结果与药材的道地性和生药学鉴定结果相
吻合 ∀
图 x 三七常见伪品的 ‹°≤
自下而上 }三七 !姜黄 !高良姜 !郁金 !
白术 !莪术 !白及 !白芷 !三棱
图 y 系统聚类分析图
3 q3 通过对三七 ‹°≤2ƒ°特征峰的重现性和稳
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定性研究和相似度计算k分别以夹角余弦 !相关系数
和欧氏距离为测度l out个三七样品的相似度均在
s q| ∗ t o其常见伪品的相似度均低于 s q| o该方法可
作为评价三七质量的高效液相色谱指纹图谱≈ts  ∀
3 q4 该 ‹°≤2ƒ° o成功地选择了咖啡因作为内标
物 o在量上给出了各特征峰相对于内标的相对含量 o
可用于指导三七的使用 o保证疗效 ∀
≈参考文献 
≈t  郑 颖 o刘汉清 o费献慧 q指纹图谱在中药质量标准中的应用 q
中国中药杂志 ousst ouwktsl }zyu q
≈u  徐国钧 q生药学 q北京 }人民卫生出版社 ot|{z qu{u q
≈v  马逢生 q三七在养生保健方面的应用 q云南中医学院学报 o
usss ouvktl }xt q
≈w  李 琦 o叶蕴华 o邢其毅 q三七水溶性化学成分及其药理研究
新近展 q高等学校化学学报 ot||y otzktul }t{{y q
≈x  栗德林 o余传隆 o杨思澍 q中国药物大辞典 q上册 q北京 }中国医
药科技出版社 qt||v q
≈y  易忠盛 q真假三七的性状特征 q四川中医 ot|{{ okyl }w{ q
≈z  马利飞 q三七常见伪品浅析 q中药材 ot|{| otukvl }uz q
≈{  贾晓斌 o施亚芳 o黄一平 o等 q人参皂苷类成分的 ‹°≤ 指纹谱
研究 q中药材 ousst ouwktsl }zuu q
≈|  屠鹏飞 q高效液相色谱法制定中药材和中药注射剂特征指纹图
谱的探讨 q中成药 ousss ouukzl }xty q
≈ts  中药注射剂色谱指纹图谱试验研究操作规程指南k试行l q
Φινγερπριντ Χονστρυχτιον οφ Παναξ νοτογινσενγ
• „‘Š ≠¤±t o…Œ Ž¤¬2¶«∏±u
kt q°¤±­¬± Œ±¶·¬·∏·¨ ²© ⁄µ∏ª ≤²±·µ²¯ o°¤±­¬± tuwsts o¬¤²±¬±ªo≤«¬±¤~
u q≥«¨ ±¼¤±ª °«¤µ°¤¦¨∏·¬¦¤¯ ˜±¬√ µ¨¶¬·¼ o≥«¨ ±¼¤±ª ttsstx o¬¤²±¬±ªo≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ³µ²√¬§¨ ¤³³¯¬¦¤·¬²± ¤±§¬§¨ ±·¬©¬¦¤·¬²± ¥¤¶¬¶©²µΠαναξ νοτογινσενγ ¥¼ ¦²±¶·µ∏¦·¬±ª·«¨ ‹°≤2ƒ° ²©
Παναξ Νοτογινσινγ q Μετηοδ : × «¨ ∏¯±¤ ≤t{kul ¦²¯∏°± º¤¶∏¶¨§ º¬·«¤ °²¥¬¯¨ ³«¤¶¨ ²© k„l¤¦¨·²±¬·µ¬¯¨ 2k…ls qsx h ³«²¶³«²µ¬¦¤¦¬§
ªµ¤§¬¨±·¨ ∏¯·¬²± os ∗ { °¬± kus h „ o{s h …l o{ ∗ us °¬± kus h „ ∗ ws h „ o{s h … ∗ ys h …l ous ∗ vs °¬±kws h „ ∗ us h „ oys h … ∗
{s h …l ovs ∗ vy °¬±kus h „ ∗ tss h „ o{s h … ∗ sl ovy ∗ xs °¬±ktss h „l oxs ∗ yx °¬± ktss h „ ∗ us h „ os ∗ {s h …l q ׫¨ ©¯²º
µ¤·¨ º¤¶t qs °¯ #°¬±p t q× «¨ º¤√¨¯ ±¨ª·«²©§¨·¨¦·¨µº¤¶¶¨·¤·usv ±° q≤¤©©¨¬±¨ º¤¶¬±·¨µ±¤¯ ¶·¤±§¤µ§qΡεσυλτ :…¼ ≤ ∏¯¶·¨µ„±¤¯¼¶¬¶o
·«¨ ·º ±¨·¼2²±¨ ±²·²ª¬±¶¨±ª¶¤°³¯ ¶¨º µ¨¨ ¦¯¤¶¶¬©¬¨§¤¶©²∏µ¦¯∏¶·¨µ¶}·«¨ ¶∏³¨µ¬²µ¬± ³µ²§∏¦¬±ª¤µ¨¤o·«¨ ²µ§¬±¤µ¼¬± ³µ²§∏¦¬±ª¤µ¨¤ o·«¨
²µ§¬±¤µ¼ ¤±§·«¨ ¬±©¨µ¬²µq…¼ ≥¬°¬¯¤µ·¼ ≤¤¯¦∏¯¤·¬²± o·«¨ ¶¬°¬¯¤µ¬·¼ ²©·«¨ ·º ±¨·¼2²±¨ ±²·²ª¬±¶¨±ª¶¤°³¯ ¶¨º µ¨¨ s q|2t qs o¤±§·«¨ ¶¬°¬2
¤¯µ¬·¼ ²©·«¨ ¬¨ª«·¦²°°²±©¤¯¶¨¶¤µ¨ ¯¨ ¶¶·«¤± s q| qΧονχλυσιον : × «¨ ‹°≤2ƒ° ²©±²·²ª¬±¶¨±ª«¤¶¥¨ ±¨ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨ §q× «¨ ° ·¨«²§¦¤±
¥¨ ∏¶¨§·²¬§¨ ±·¬©¼ ¤±§ √¨¤¯∏¤·¨ ·«¨ ∏´¤¯¬·¼ ²©±²·²ª¬±¶¨±ªq
[ Κεψ ωορδσ] Παναξ νοτογινσενγ ~ ‹°≤2ƒ°
≈责任编辑 袁桂京 
本刊重要启事
为加快稿件刊用周期及扩大期刊信息量 o本刊将自 ussv年起调整页码 o由 ussu年的 {s页增加为 |y
页 o杂志售价由 ts元调整为 tu元 ∀
欢迎广大读者通过邮局或从本社直接订阅 ∀本刊联系电话 }kstslywswx{vs ∀
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