全 文 ：≈收稿日期 ussv2sy2tu
≈通讯作者 3梁学林 oר¯ }ksuwl{y|s|ttw2utuy
tu味中草药体外抗解脲支原体的药敏试验
梁学林 3 o田正阳 o丁原全 o娄志华
k辽宁中医学院 附属医院 o辽宁 沈阳 ttssvul
解脲支原体k Υρεαπλασµα υρεαλψτιχυµ ol具有致病性现
已得到公认≈t ou ∀泌尿生殖道解脲支原体感染属性传播疾
病之一≈v o临床多采用大环内酯类和喹诺酮类抗生素治疗 ∀
由于抗生素的使用不规范 o不系统 o甚至于滥用 o现已发现解
脲支原体对抗生素产生耐药 ∀笔者采用中药治疗泌尿生殖
道解脲支原体感染 o临床收到较满意的疗效 ∀为了探求中药
抗支原体的抗菌作用 o笔者采用微量稀释法测定了 tu味中
草药对 z株解脲支原体标准株的体外抑制效应 o旨在了解中
药对解脲支原体的抑菌效果 o为临床进一步开展中医药治疗
泌尿生殖系支原体感染性疾病提供实验依据 ∀
1 材料与方法
111 标准株与中药煎剂的制备
11111 支原体标准株 解脲支原体菌液由首都儿科研究所
提供 o血清型为 t ou ow ox oz o{ o|k每型各 t株l ∀
11112 支原体培养基 由珠海银科生物技术应用研究所提
供 o批号 ussuswsw ∀
11113 中药煎剂的制备 选取临床治疗泌尿生殖道支原体
感染的常用中草药 tu味 }黄柏 !白芷 !蒲公英 !蚤休 !紫苏 !金
银花 !连翘 !板蓝根 !地肤子 !鹤虱 !牡丹皮 !苦参 ∀实验用药
均来自本院门诊中药房 o并经我院药剂科娄志华主任中药师
做生药鉴定 ∀每种生药用天平称取 ts ªo略粉碎后 o用纱布
包好 o放入 t sss °烧杯中 o煎药时间按药性不同确定 ∀根
据煎药时间的不同 o加入 uss ∗ wss °蒸馏水 o浸泡 t «o适当
加入山梨醇甲酯以增加药物的溶解度 o用电炉分别煎 tx ∗ ys
°¬±o过滤 o沉渣再加适当蒸馏水煎 vs °¬±o过滤 o两液混合 o
浓缩至 tΒtk即 t °煎液相当于 t ª生药l o离心 ov sss µ#
°¬±p t o离心 us °¬±∀取上清液 o补足失水 o用 xs h 枸橼酸钠
调 ³ z1s o分装试管 o{磅 tx °¬±灭菌备用 ou个月内用完 ∀
112 的培养与最小抑菌浓度k≤l测定
11211 的培养 将冰柜中保存的液体培养基ku °r瓶l
取出 o复温 o登记标本号 ∀给复温后的液体培养基中加入
标准株菌液 uss Λo封闭后置 vz ε 电热保温箱中培养 tu ∗
uw «o观察结果 ∀培养基中酚红指示剂由桔黄色变为粉红色
为 生长 ∀
11212 中药煎剂的 ≤ 测定 参照刘氏之法≈w ∀操作在净
化工作台内进行 ∀所有观察结果均由专人负责观察并记录 ∀
≠将备用新鲜培养液基置于 vz ε 电热保温箱中 o预温 t «~
在 tu m {孔聚苯乙烯微量板上 o将 xs Λ备用煎剂加入第
u ov孔 ~≈将 xs Λ新鲜培养液基分别加入第 v至 tt孔 ~…用
微量加样器 o从第 v孔开始倍比稀释备用煎剂至第 tt孔 ~
第 t孔加液基 txs Λo第 u至 tt孔各加 tss Λo第 tu孔 uss
Λ~¡第 t至 tt孔各加 液体培养物 xs Λ~¢第 t孔为阳
性对照 o第 tu孔为阴性对照 ∀药物浓度从第 u孔始依次为
uxs1ss otux1ss oyu1xs ovt1ux otx1yu oz1{t ov1|s ot1|x os1|z o
s1w{ ª#pt o共 ts个稀释度 ~£盖上板盖 o放入湿盒内 o置入
电热保温箱内 ovz ε 孵育 uw «后观察结果 o直至阳性对照孔
发生颜色改变 o以最低无颜色变化孔的药物浓度定为 ≤ ∀
11213 判断标准 中药对支原体的 ≤ 目前国内尚无统一
标准 ∀笔者参照同类实验≈w 的标准作为判断标准 o即 ≤ [
z1{t ª#pt生药浓度时为较高敏感 ~当 ≤在 z1{t ∗ uxs1ss ª
#pt生药浓度时为中度敏感 ~当 ≤ uxs1ss ª#pt生药浓
度时为不敏感 ∀
2 结果
tu味中草药煎剂对 z株解脲支原体标准株体外抑制作
用结果见表 t ~≤见表 u ∀设定 ≤ z1{t ª#pt生药浓度
作为中药对 的中介浓度 o在该浓度时 对 tu味中草药
的敏感率依次为黄柏 !蒲公英 !地肤子 !白芷 !金银花 !鹤虱 !
蚤休 !板蓝根 !连翘 !紫苏 !牡丹皮 !苦参 o见表 v ∀
3 讨论
目前我国妇女泌尿生殖道支原体感染的发病率呈逐年
上升趋势 o刘小澄等≈x 报道在妇女生殖道炎症中其检出率高
达 yw1v| h ∗ yz1ws h ∀由于支原体易产生耐药性 o过去曾对
四环素和大环内酯类药物敏感的支原体 o现在对其耐药率已
达较高程度 ∀朱健铭等≈y 对分离出的 t sxx株支原体的药物
抗性实验结果显示 o对红霉素的药物抗性频度已高达
yx1ut h o其次是对氧氟沙星和四环素 o分别占 u{1xv h 和
tt1s| h ∀冯华英≈z 等报道 ux{例支原体阳性患者对 ts种抗
生素的敏感率仅为 x|1z h o而 |v h发生不同程度的耐药 o其
中 阳性耐药发生率为 {|1v h ∀本实验结果表明 o临床选
用的具有清热解毒 o燥湿杀虫的中草药 o体外对解脲支原体
有不同程度的抑制作用 o其中最敏感的是黄柏 ∀而与临床用
药不甚一致的是苦参 ∀苦参具有清热燥湿 o祛风杀虫之功 o
妇科常用于湿热所致的带下 o阴痒 o在治疗支原体感染性疾
病中亦多选为主药 o但实验中观察其对解脲支原体的抑制作
用并不明显 o探其原因 o尚不明了 ∀笔者认为中药在体内的
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第 u|卷第 tt期
ussw年 tt月
中 国 中 药 杂 志
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作用机制比体外要复杂得多 o而且每味中药都含有多种有效
成分 o且临床多采用复方治疗 o体内与体外有何不同 o作用机
理如何 o均有待于进一步的深入研究 ∀本实验结果 o仅从一
个侧面说明中药具有抗支原体的作用 ∀
表 t tu味中药煎剂对 z株解脲支原体标准株体外抑制作用结果
药物 药物浓度rª#
pt
s1w{ s1|z t1|x v1|s z1{t tx1yu vt1ux yu1xs tux1ss uxs1ss uxs1ss
黄柏 p p p w v p p p p p p
蒲公英 p p u t u u p p p p p
地肤子 p p u p v u p p p p p
鹤虱 p p t p v t u p p p p
紫苏 p p t t p u v p p p p
板蓝根 p p t t u t p u p p p
白芷 p p p t w u p p p p p
蚤休 p p p u u t u p p p p
金银花 p p p v u t t p p p p
连翘 p p p t u t t t t p p
牡丹皮 p p p p u p v u p p p
苦参 p p p p p p p u v t t
注 }≠ / p 0说明该中药浓度对支原体标准株无抑制作用 ~ w ov ou ot o分别说明中药对支原体标准株有抑制作用的菌株数
表 u tu味中药对 z株解脲支原体标准株的 ≤值
药物 ≤rª#
pt
≤xs ≤|s
黄柏 v1|s z1{t
蒲公英 z1{t tx1yu
地肤子 z1{t tx1yu
鹤虱 z1{t vt1ux
紫苏 tx1yu vt1ux
板蓝根 z1{t yu1xs
白芷 z1{t tx1yu
蚤休 z1{t vt1ux
金银花 z1{t tx1yu
连翘 tx1yu yu1xs
牡丹皮 vt1ux yu1xs
苦参 tux1ss uxs1ss
表 v z株解脲支原体标准株
在中药浓度为 z1{t ª#pt时的敏感率
药物 敏感数r株 敏感率r h
黄柏 z tss1ss
蒲公英 x zt1ws
地肤子 x zt1ws
白芷 x zt1ws
金银花 x zt1ws
鹤虱 w xz1ts
蚤休 w xz1ts
板蓝根 w xz1ts
连翘 v wu1|s
紫苏 u u{1ys
牡丹皮 u u{1ys
苦参 s s
本实验用药中加入山梨醇甲酯 o主要是增加药物溶解
度 o实验用药在临床上多为外用 o故未设对照 o是本实验设计
不足之处 o有待进一步完善 ∀
最后指出 o笔者在实验过程中体会到 o有些中草药煎剂
本身有一定的颜色 o在实验中用肉眼判断其反应终点比较困
难 o可导致实验结果出现误差 ∀还有一些中草药煎剂加入反
应板后出现混浊和沉淀 o这对实验结果也有影响 ∀此外 o有
的中草药具有脂溶性 o其水煎剂的有效成分可能偏低 o进而
影响实验效果 ∀这些问题供同道参考借鉴 ∀
≈参考文献
≈t 曹泽毅 1 中华妇产科学 1北京 }人民卫生出版社 ot|||1yut1
≈u 曹玉璞 1 支原体感染诊治的新进展 1 中级医刊 ot||{ ovvkul }
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≈v 刘齐贵 1 淋病奈瑟菌 !沙眼衣原体 !解脲支原体与泌尿生殖系
临床 1 医学综述 ot||{ owkvl }tvs1
≈w 刘忠仪 o张国威 o何云志 1 解脲支原体中药药敏试验 1 中华皮
肤科杂志 ot||y ou|kxl }vw|1
≈x 刘小澄 o林 晨 o黄环珍 o等 1解脲支原体与不孕 !早孕 !生殖道
炎症关系探讨 1 实用妇产科杂志 ot||z otvkyl }vsy1
≈y 朱健铭 o吴晋兰 o徐天梁 o等 1泌尿生殖道支原体感染及其药物
抗性频度研究 1 中国全科医学 ousst owk{l }ys|1
≈z 冯华英 o黄耀斌 o梁焕松 1女性生殖道支原体培养与药敏分析 1
广东医学 ousss outkul }txu1
≈责任编辑 古云侠
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