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Assays on nutrient and effective ingredients in different parts of Cordyceps militaris

蚕虫草不同部位营养与活性成分分析



全 文 :#研究论文#
蚕虫草不同部位营养与活性成分分析
温 鲁t 3 o唐玉玲t o尹起范u o夏 敏u o杨雁玲u
kt1 淮阴师范学院 生物系 o江苏 淮安 uuvvss ~u1 淮阴师范学院 分析测试中心 o江苏 淮安 uuvvssl
≈摘要  目的 }明确蚕虫草不同部位的营养与活性成分 o以便开发利用 ∀方法 }对蚕虫草 !子座 !菌核和蚕粉进
行分析研究 ∀虫草素和腺苷测定采用高效液相色谱法 o虫草多糖测定采用 v ox2二硝基水杨酸比色法 o虫草酸测定
采用高碘酸钠比色法 o蛋白质测定采用考马氏亮蓝比色法 o粗脂肪测定采用索氏提取法 ∀结果 }蚕虫草的多糖含量
达 {y1w| °ª#ªpt ~子座的腺苷含量达 y1{u °ª#ªp t ~菌核的虫草素和虫草酸含量分别达到 tv1u{ °ª#ªp t和 ww1sz °ª#
ªp t ∀结论 }不同活性成分在蚕虫草及其不同部位的含量不同 o其中蚕虫草活性成分总量最高 o菌核虫草素和虫草
酸含量最高 ~研究还表明蛹虫草菌对蚕体脂肪和蛋白质的分解利用能力很强 ∀
≈关键词  虫草 ~子座 ~菌核 ~蚕粉 ~虫草素 ~腺苷 ~脂肪
≈中图分类号  ≥ xyz ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussxls|2syx|2sv
≈收稿日期  ussw2st2tu
≈通讯作者  3温鲁 oר¯ }ksxtzlvu{{s{x o∞2°¤¬¯}¬­¯ ª´­ƒ tyv1¦²°
蛹虫草是虫草属的模式种 o营养和活性成分与
冬虫夏草相似 o但不象冬虫夏草寄主专一 !生境特
殊 o因此成为近年药用真菌的研究热点 ∀作者以蛹
虫草作菌种 o用 x龄家蚕为寄主 o成功地批量培育出
蚕虫草≈t  ∀蚕虫草与以蚕蛹为寄主的蚕蛹草相比 o
蚕体内丝腺蛋白成为虫草菌的营养 o使蚕虫草的活
性成分含量较蚕蛹草有显著增加 o特别是虫草素含
量提高到 w1wx倍k另文报告l o具有很好的开发应用
前景 ∀为进一步搞清蚕虫草不同部位 o以及蚕虫草
和蚕体营养与活性成分的含量变化 o作者进行了本
课题的分析研究 ∀
1 材料和方法
111 材料
11111 样品 蚕虫草为本院生物系虫草课题组培
养 o子座从蚕虫草分离而得 o余下僵蚕体为菌核k其
中包括少量出草很少或未出草的僵蚕l o蚕粉用 x龄
蚕制备 o以上样品均于 ys ε 烘干 o冷却 !粉碎 o装入
塑料袋中密封备用 ∀
11112 试剂 腺苷标准品 !牛白蛋白标准品和鼠李
糖 !考马氏亮蓝为上海化学试剂公司进口分装 o虫草
素标准品由常州大康保健药品有限公司提供 o试剂
均为分析纯 ∀
11113 仪器 • ¤·¨µ¶高效液相色谱仪 o• ¤·¨µ¶紫外
检测器 o岛津 „ • 电子天平 o超声波振荡仪 ozuu≥分
光光度计 o索氏提取器 o细胞匀浆机 ∀
112 方法
11211 腺苷和虫草素测定 采用高效液相色谱
法≈u2w  o色谱柱 ‘’∂„2°„Ž≤t{反相柱kv1| °° ≅ vss
°° ow Λ°l ~流动相 Ž‹u°’w2Žu‹°’w缓冲液k³‹ y1{y o
s1ssx °²¯#ptl n t h四氢呋喃 ~流量 t °#°¬±pt ~检
测波长 uys ±°∀
准确称取 s1tss s ª样品 o置碘量瓶中 o加 ts1ss
°双蒸水 o超声浸提 t «o先用滤纸粗滤 o再用 s1u
Λ°微孔滤膜压滤 o取 tx ˏ滤液进样测定 ∀
腺苷或虫草素含量k°ª#ªp tl € ts1ss ≅ Σ ≅ Χs ≅ tsp vr Σs ≅ µ
式中 Σ 为试样峰面积 oΧs为标样含量 k°ª#
ptl oΣs为标样峰面积 oµ 为试样准确质量kªl ∀
11212 虫草多糖测定 采用 v ox2二硝基水杨酸比
色法≈x oy  ∀先测定总糖和还原糖 o多糖 €总糖 p还
原糖 ∀用葡萄糖配制系列标准溶液 o检测波长 xus
±° o糖含量 Χ 与吸光度 Α 的回归方程为 Χ €
t1uxx yΑn s1t{u | oρ€ s1||| v ∀
准确称取 s1ux ª左右的样品 o置 uxs °量瓶
中 o加 tx °双蒸水和 ts °y °²¯#pt ‹≤¯ otss ε
水浴 vs °¬±o冷却 o加 vs h ‘¤’‹ 中和 o定容 o离心 o
取上清液测定总糖 ∀
总糖含量k°ª#ªp tl € Χ≅ uxs ≅ s1|/ ς≅ µ
#|xy#
第 vs卷第 |期
ussx年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vs oŒ¶¶∏¨ |
¤¼oussx
式中 Χ为所取试液中糖含量k通过上述回归方
程求得l os1| 为校正系数≈x  oς为所取试液体积
k°l oµ 为称取试样的准确质量kªl ∀
准确称取 s1ux ª左右的样品 o置 xs °量瓶中 o
加 us °双蒸水 oxs ε 水浴 vs °¬±o冷却 o定容 o离
心 o取上清液测定还原糖 ∀
还原糖含量k°ª#ªp tl € Χ≅ xs/ ς≅ µ
式中 Χ为所取试液中糖含量k通过回归方程求
得l oς为所取试液体积k°l oµ 为称取试样的准确
质量kªl ∀
多糖含量k°ª#ªp tl €总糖含量 p还原糖含量 ∀
11213 虫草酸测定 采用高碘酸钠比色法≈z o{  ∀
用甘露醇配制系列标准溶液 o检测波长 wus ±° o甘
露醇含量 Χ 与吸光度 Α 的回归方程为 Χ €
tsw1xxΑn s1vst u , ρ€ s1||| | ∀
准确称取 s1x ª左右样品 o置 xss °烧杯中 o加
uss °双蒸水 o用塑料薄膜和皮筋扎口 otss ε 水浴
u «o冷却 o转移至 uxs °量瓶中 o定容 o离心 o取上
清液测定虫草酸 ∀
虫草酸含量k°ª#ªp tl € Χ≅ tsp v ≅ uxs/ ς≅ µ
式中 Χ为试液虫草酸含量k°ª#ptl oς是所取
试液体积k°l oµ 为样品的准确质量kªl ∀
11214 蛋白质测定 采用考马氏亮蓝比色法≈x  o
该法只测定水溶性蛋白质 ∀用牛白蛋白配制标准溶
液 o检测波长 x|x ±° o蛋白质含量 Χ与吸光度 Α的
回归方程为 Χ€ uwz1wxΑp tx1tt oρ€ s1||{ v ∀
准确称取 s1x ª左右的样品 o加 u °s1t °²¯ #
pt‘¤≤¯ 溶液浸润 u «o再加 us °双蒸水 o于匀浆机
中以 ts sssµ#°¬±pt匀浆 t °¬±o转移至 uxs °量瓶 o
定容 o离心 o取上清液测定蛋白质 ∀
水溶性蛋白质含量k°ª#ªptl € Χ≅ tspv ≅ uxsr ς≅ µ
式中 Χ为试液蛋白质含量k°ª#ptl oς为所取
试液体积k°l oµ 是准确称取的试样质量kªl ∀
11215 粗脂肪测定 采用索氏提取法≈x  ∀为提高
可比性和节省时间 o几个样品应同步检测 ∀
准确称取 s1ux ª样品 o用中性滤纸包裹 o放入
索氏提取器 o用石油醚于 ys ε 左右回流提取 x «o取
出样品包 o回收溶剂 o先吹干再烘干以去除残余溶
剂 o称重测定粗脂肪 ∀
粗脂肪含量k°ª#ªp tl € k Αp Βl ≅ tsvr µ
式中 Α为提取瓶和粗脂肪质量kªl oΒ为空瓶
质量kªl oµ 为样品质量kªl ∀
2 结果与分析
211 腺苷 !虫草素含量
从图 t可看出 o蚕虫草及其子座 !菌核的虫草素
含量都很高 o其中菌核最高 o达 tv1u{ °ª#ªpt o其次
是蚕虫草 o为 tu1x| °ª#ªpt o子座为 ts1xs °ª#ªpt o
而蚕粉的虫草素含量非常低 o仅 s1ut °ª#ªpt ∀腺苷
含量 o以子座最高 o达 y1{u °ª#ªpt o蚕虫草次之 o菌
核很低 o三者悬殊很大 o而蚕粉仍然处于最低水平 ∀
图 t 腺苷 !虫草素含量比较
212 多糖 !虫草酸含量
从图 u可看出 o蚕虫草 !子座和菌核的虫草酸含
量均很高 o且差别很小 ~蚕粉也含有一些虫草酸 o约
为前三者水平的 ws h ∀虫草酸即甘露醇 o不是虫草
的独有活性成分 o因此蚕粉中也含有一定数量 ∀多
糖以蚕虫草最多 o达 {y1w| °ª#ªpt o子座次之 o菌核
又次 o这三者的多糖都是虫草多糖 ~蚕粉虽然也含有
ux1wz °ª#ªpt的多糖 o但不是虫草多糖 o而是昆虫多
糖 o主要成分为糖元 o是昆虫体内的糖类贮存物≈|  o
不象虫草多糖那样具有生物活性 o不能看作活性成
分 ∀
图 u 多糖 !虫草酸含量比较
213 蛋白质 !粗脂肪含量
从图 v可看出 o蚕虫草 !子座和菌核的水溶性蛋
白质含量 o都在 vs °ª#ªpt以上 o三者虽有差别 o但不
很大 ~粗脂肪亦如此 o都在 uw °ª#ªpt以上 ∀未经蛹
虫草作用的蚕粉 o水溶性蛋白质是前三者的 u1w ∗
v1s倍 o粗脂肪是前三者的 y1z ∗ z1y倍 ∀这里需要
说明的是 o蚕粉的蛋白质和粗脂肪是昆虫蛋白和脂
肪 o前三者则是真菌蛋白和脂肪 o两类蛋白和脂肪在
构成和营养特性上有本质不同 o这里的比较只是相
#syy#
第 vs卷第 |期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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对于数量而言 ∀
图 v 蛋白质 !粗脂肪含量比较
3 讨论
311 蚕虫草及其子座 !菌核的虫草素 o分别是蚕粉
的 xs ∗ ys倍 ~蚕虫草和子座的腺苷 o则是蚕粉的 ts
∗ vs多倍 ~蚕虫草的虫草多糖 o含量高达 {y1w| °ª#
ªpt o最低的菌核也有 wu °ª#ªpt以上 o而蚕粉的多糖
只是营养物质 o不是活性成分 o生物活性远不如虫草
多糖 ∀因此 o从活性成分看 o蚕粉是无法与蚕虫草及
其子座和菌核相比的 ∀将大量饲养的家蚕培育成蚕
虫草 o是一条获得虫草生物活性物质的好途径 ∀
312 对蚕虫草及其子座和菌核 o三者在活性成分上
各有长短 o蚕虫草多糖最高 o其余 v项均为第二 ~子
座腺苷最高 o多糖第二 ~菌核虫草素和虫草酸 u项第
一 o但腺苷很低 ∀因此 o若以获取虫草多糖为目的 o
宜用蚕虫草 ~若以腺苷为目的 o宜选子座 ~若以虫草
素和虫草酸为目的 o宜取菌核 ∀从 w项指标之和看 o
蚕虫草高达 tww1xu °ª#ªpt o子座次之 o为 tvu1u|

°ª#ªpt o菌核最低 o只有 ||1zy °ª#ªpt o若考虑活性
成分总量 o还是蚕虫草为宜 ∀
313 蚕粉的蛋白质和脂肪 o比蚕虫草及其子座 !菌
核高得多 o说明蛹虫草菌充分分解 !吸收 !转化了蚕
体中的蛋白质和脂肪 ∀特别是脂肪 o蛹虫草菌对昆
虫脂肪的利用能力非常强 o这提示在人工配制虫草
菌的培养基时 o适当添加脂肪 o特别是昆虫脂肪 o将
有利于虫草菌的生长 ∀
≈参考文献 
≈t  温 鲁 o张以俭 o张天宝 o等 1 蚕虫草人工培育研究 1 江苏农
业科学 oussw oktl }|t1
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菌丝中腺苷和虫草素的含量 1 中国中药杂志 ot||{ ouvkwl }
uvy1
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用菌 oussv ouukul }t|1
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方法 1 贵州化工 oussu ouzkvl }uv1
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露醇的含量 1 中草药 ousst ovuk{l }y|z1
≈{  张信旭 o高海波 1 分光光度法测定古尼虫草中甘露醇的含量 1
贵州化工 oussu ouzkul }u|1
≈|  冯 慧 1 昆虫生物化学分析法 1 北京 }农业出版社 ot|{|1w1
Ασσαψσ ον νυτριεντ ανδ εφφεχτιϖεινγρεδιεντσιν διφφερεντ παρτσ
οφ Χορδψχεπσ µιλιταρισ
• ∞‘∏t oׄ‘Š ≠∏2¯¬±ªt o ≠Œ‘±¬2©¤±u o ÷Œ„ ¬±u o ≠„‘Š ≠¤±2¯¬±ªu
(t1 Βιολογιχαλ Σχιενχε ∆επαρτµεντ , Ηυαιψιν Τεαχηερσ Χολλεγε , Ηυαι. αν uuvvss , Χηινα ;
u1 Ινστρυµενταλ Αναλψσισ Χεντερ, Ηυαιψιν Τεαχηερσ Χολλεγε , Ηυαι. αν uuvvss , Χηινα )
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ¤±¤¯¼¶¬¶·«¨ ±∏·µ¬¨±·¤±§ ©¨©¨¦·¬√¨¬±ªµ¨§¬¨±·¶²©¬± Χορδψχεπσ µιλιταρι󤱧°¤®¨ ·«¨ ¥¨¶·∏¶¨ ²©¬·¶° §¨¬¦¤¯
√¤¯∏¨1 Μετηοδ : „§¨ ±²¶¬±¨ o¦²µ§¼¦¨³¬±o³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨¶o¦²µ§¼¦¨³¶¤¦¬§o³µ²·¨¬± ¤±§©¤·¬± §¬©©¨µ¨±·³¤µ·¶²© Χ1 µιλιταρισ º µ¨¨ ¬¨·µ¤¦·¨§o
·«¨ ¼ ¤µ¨ ∏´¤±·¬©¬¨§¥¼ ‹°≤ ¤±§²·«¨µ¦²¯²µ¬° ·¨µ¬¦¤±¤¯¼¶¬¶1 Ρεσυλτ : ׫¨ ¦²±·¨±·¶²©³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ º¤¶©²∏±§·²¥¨ {y1w| °ª#ªp t¬± Χ1 µιλ2
ιταρισ , y1{u °ª#ªpt²©¤§¨ ±²¶¬±¨ ¬±¶·µ²°¤otv1u{ °ª#ªp t ²©¦²µ§¼¦¨³¬± ¤±§ww1sz °ª#ªp t ²©¦²µ§¼¦¨³¶¤¦¬§¬±¶¦¯ µ¨²¯¬∏°1 Χονχλυσιον : Œ±
§¬©©¨µ¨±·³¤µ·¶²© Χ1 µιλιταρισ , ·«¨ ¥¬²¶¼±·«¨¶¬¶²© ©¨©¨¦·¬√¨¬±ªµ¨§¬¨±·¶¬¶§¬©©¨µ¨±·1 ׫¨ ·²·¤¯ ¤°²∏±·²© ©¨©¨¦·¬√¨¬±ªµ¨§¬¨±·¶¬¶«¬ª«¨¶·¬± Χ1
µιλιταρισ, ·«¨ ³µ²§∏¦·¬²± ²©¦²µ§¼¦¨³¬± ¤±§¦²µ§¼¦¨³¶¤¦¬§¬¶«¬ª«¨¶·¬± ¶¦¯ µ¨²·¬∏° ¬± ¦²°³¤µ¬¶²± º¬·« ²·«¨µ³¤µ·¶1 Šµ²º·« ²© Χ1 µιλιταρισ
¤¯µª¨ ¼¯ µ¨ ¬¯¨¶²±¬·¶¦¤³¤¥¬¯¬·¼·²∏·¬¯¬½¨ ©¤·¤±§³µ²·¨¬±©µ²° ¶¬¯®º²µ°1
[ Κεψ ωορδσ] Χορδψχεπσ µιλιταρισ; ¶·µ²°¤~¶¦¯ µ¨²·¬∏° ~¶¬¯®º²µ° ³²º§¨µ~¦²µ§¼¦¨³¬±~¤§¨±²¶¬±¨ ~©¤·
≈责任编辑 王康正 
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