全 文 ：山茱萸水提取物对肾阳虚动物模型
肝脏和睾丸影响的实验研究
李春生t o张国玺t o石体仁t o董小霞t o
孙 丕u o李电东u o许鸿章u o陈可冀t
kt q中国中医研究院 西苑医院 o北京 tsss|t ~
u q中国医学科学院 协和医科大学 医药生物技术研究所 o北京 tsssxsl
≈摘要  目的 }探讨山茱萸补肾阳作用 ∀方法 }应用氢化考的松所致的肾阳虚动物模型 o观察山茱萸水溶物对
肾阳虚大鼠的影响 ∀结果 }山茱萸水溶物具有使肾阳虚大鼠肝脏重量接近正常 o肝细胞病理改变减轻 o肝细胞 • ‘„
和糖原含量升高 o丙二醛含量下降 ~它还能使肾阳虚大鼠睾丸脏器系数向正常方向逆转 o使睾丸间质细胞内 • ‘„
含量增加 ∀结论 }山茱萸水溶物具有保护和改善肾阳虚动物模型肝脏和睾丸器官机能的功效 ∀
≈关键词  山茱萸 ~肝脏 ~睾丸 ~组织化学
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussvls{2szwv2sw
山茱萸为山茱萸科灯台树属植物山茱萸 Χορ2
νυσ οφφιχιναλισ ≥¬¨¥q ·¨∏¦¦q的成熟干燥果肉 o功能
补肾益肝 !涩精止汗 o是著名的传统补肾延缓衰老药
物 ∀其地道药材的主产区在河南省南阳地区伏牛山
南麓 ∀为探讨该药的补肾阳作用 o我们观察了该药
水溶性总提取物对肾阳虚动物模型的影响 ∀
1 材料与方法
1 q1 材料
1 q1 q1 动物 选用 • ¬¶·¤µ雄性大鼠 |s 只 o体重
tws ∗ tzs ªov月龄 ot级动物 o由北京友谊医院动物
室提供 ∀饲养在西苑医院实验动物室内 o室温kuw ?
tl ε o食用全价营养颗粒饲料 o饮用自来水 ∀
1 q1 q2 受试药物 山茱萸水溶性总提取物 o由中国
医学科学院医药生物技术研究所提供 ∀每 t ª相当
于原生药 u ªo其主要成分为山茱萸总多糖 ∀该生药
从河南省西峡县药材公司二郎坪分公司购买 ∀西洋
参蜂王浆口服液 o做阳性对照药 ∀中国医学科学院
药用植物资源开发研究所实验药厂生产 o批号
|wsuuy ∀x h氢化考的松注射液 ∀北京第三制药厂
生产 o批号 |vsvtu ∀
1 q1 q3 仪器设备 医用显微镜图像分析仪 o≥÷ ≠2t
≈收稿日期  ussu2tu2tu
≈基金项目  国家自然科学基金资助项目kv|tzs{z{l
≈通讯作者  ר¯ }kstslyu{zxx||2yvtv ƒ¤¬}kstslyu{{vw|x
型 ∀生物化学发光测定仪 o上海上立检测仪器厂生
产 o≥‹ Š2≤ 型 ∀
1 q2 方法
1 q2 q1 肾阳虚动物模型的复制与用药 采用上海
第二医科大学邝安坤以肾上腺皮质激素造模的模
型≈t  ∀将雄性大鼠按体重随机分为 y 组 o每组 tx
只 ∀正常空白对照组每只按每日 ts °#®ªp t给予
自来水灌胃 o其余 x组每只每日上午在臀部肌肉注
射氢化考的松 s qx °#tss ªp tk相当于氢化考的松
每日 ux °ª#®ªp tl ∀与此同时 o模型空白对照组每
只灌胃自来水每日 ts °#®ªp t ~模型阳性药对照组
每日按 w °#®ªp t灌胃西洋参蜂王浆水溶液k每 t
°水溶液含西洋参蜂王浆口服液 s qw °l ∀山茱
萸小 !中 !大剂量组 o每日每只灌胃分别给予 s qwx o
s q| ot q{ ª#®ªp t山茱萸总提取物水溶液 ∀连续注射
氢化考的松 z §后 o停药 y §∀在造模同时 o各组均
连续灌胃给予自来水或药物 tv §o于第 tv天灌胃 t
«后 o处死全部动物 ∀
1 q2 q2 观察内容及检测指标 实验自开始起 o每 v
天称重 t次 o观察大鼠的体形 !毛色 !步态 !觅食及活
动情况 o并记录动物每天死亡只数 ∀第 tv天处死全
部动物后 o取血送实验室 o用化学发光法则定各组动
物血清丙二醛k  ⁄„l和超氧化物歧化酶k≥’⁄l含
量 ∀取肝脏称重 o部分肝脏做  ⁄„ 测定 o部分做病
理学 !组织化学观察 ∀取睾丸称重 o与肾上腺一起进
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第 u{卷第 {期
ussv年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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„∏ª∏¶·oussv
行病理 !组化研究 ∀ ‹∞染色 o观察病理学改变 ~经
∞¯¬¤¶甲基绿2焦宁技术 o显示 • ‘„ ~°„≥法 o显示肝
脏糖元 ∀最后用医用图像分析仪 o测定肝脏和睾丸
切片的感光灰度 ∀脏器的病理学改变 o采用积分法
评定 ∀凡细胞肿胀 !变性 !坏死 o呈大量者 o记 v 分
k 7 l ~中等量者 o记 u分k 6 l ~小量者 o记 t分k n l ~
无肿胀 !变性 !坏死者 o记 s分 ok p l ∀
1 q3 统计学处理 计数资料采用等级序值法 o计量
资料采用方差分析 ∀
2 结果
2 q1 山茱萸提取物对肾阳虚大鼠肝脏的影响
2 q1 q1 山茱萸提取物对肝脏重量和病变积分的影
响 见表 t ∀
表 t 山茱萸水溶性总提取物对
大鼠肝脏重量和病变积分的影响k ξ ? σ, ν € txl
组别
剂量
rª#®ªp t
实验结束
时鼠数
肝脏重量
rª
肝脏病理
改变积分
山茱萸大剂量组 ≠ t q{ tt | qxz ? u qvv s qt{ ? s qys
山茱萸中剂量组  s q| z { qwy ? t qw{ s qxz ? s q|{
山茱萸小剂量组 ≈ s qwx w z qvs ? t q|s u qux ? t qxs
模型阳性药对照组 … t qys w y q{| ? u qzy u qux ? t qxs
模型空白对照组   ts w tt qwu ? s qv| t qux ? t qxs
正常空白对照组 ¡ ts tx { qww ? t qwt s qws ? s q{w
注 }肝脏重量组间比较 比   o 比 ¡ °  s qsx ≈ 比   o…
比   Π s qst 肝脏病理改变积分组间比较  比 ≈ o 比 …o≈
比 ¡o…比 ¡ Π s qsx ≠比 ≈ o≠比 … Π s qst
表 t示 o模型空白对照组大鼠肝脏重量最重 o模
型阳性药对照组大鼠肝脏最轻 ∀山茱萸大 !中 !小剂
量组与正常空白对照组之间比较 o大鼠肝脏重量无
统计学差异 ∀
表 t又示 o在用氢化考的松造模的过程中 o大鼠
肝脏都有不同程度的病理损伤 ∀山茱萸提取物小剂
量组和模型阳性药对照组 o肝损伤病理改变积分较
中剂量组 !正常空白对照组为高 o统计学差异显著 ~
较山茱萸提取物大剂量组更高 o统计学差异非常显
著 ∀山茱萸大 !中剂量组肝脏病理改变最轻 o与正常
空白对照组相比 o统计学差异不显著 ∀
2 q1 q2 山茱萸提取物对大鼠肝脏  ⁄„ 含量的影
响 见表 u ∀
表 u示 o前 x个组与正常空白对照组相比较 o注
射氢化考的松造模的各组 o肝脏  ⁄„ 含量均有不
同程度的升高 o差异高度显著 ∀前 w个组与后两个
组相比较 o模型空白对照组肝脏  ⁄„ 含量最高 o模
型阳性药对照组  ⁄„含量次之 o山茱萸 v个剂量
表 u 山茱萸水溶性总提取物对肾阳虚大鼠肝脏
 ⁄„含量的影响k ξ ? σl °°²¯#ªp t
组别 ν 肝脏  ⁄„含量
山茱萸大剂量组 z uss qws ? y qzst ou ovl
山茱萸中剂量组 x uxz qts ? { qust ou ovl
山茱萸小剂量组 w uxs qzs ? tx qust ou ov owl
模型阳性药对照组 w vy{ qws ? t{ qxst ovl
模型空白对照组 w wux qss ? | qzs tl
正常空白对照组 z txz qts ? y qxs
注 }与正常空白对照组比较 tl Π s .sst 与模型空白对照组
比较 u) Π s .sst 与模型阳性药对照组比 v) Π s .sst 与山茱
萸大剂量组比较 w) Π s qsst
组动物肝脏  ⁄„含量排第 v至 x ∀其中 o山茱萸大
剂量组大鼠肝脏  ⁄„ 含量低于小剂量组 o统计学
差异高度显著 ∀提示随着山茱萸提取物剂量的增
加 o对氢化考的松所致肝脏  ⁄„ 升高的抑制作用
增强 ∀
2 q1 q3 山茱萸提取物对肝脏 • ‘„和糖元含量的影
响 见表 v ∀
表 v 山茱萸水溶性总提取物对肾阳虚大鼠肝脏 • ‘„
和糖元含量k感光灰度值l的影响k ξ ? σl
组别 ν 肝 • ‘„感光灰度值肝糖元感光灰度值
山茱萸大剂量组 ≠ ts uss qus ? w qz{ tyz qxs ? tt qw|
山茱萸中剂量组  z usu qtw ? w q|t t{s qxz ? tw quy
山茱萸小剂量组 ≈ w us| qzx ? x qsy t|z qss ? { q{v
模型阳性药对照组 … w usw qss ? w q|z t|x qss ? tv qzw
模型空白对照组   w utu qxs ? w qsw t{{ qss ? y q{v
正常空白对照组 ¡ ts usw qzs ? y qwx tz| qzs ? { qvz
注 }肝 • ‘„含量组间比较 比   o…比   o 比 ¡o 比 ¡o≠
比 ≈ Π s qsx ≠比 ¡ Π s qst 肝糖元含量组间比较 ≠ 比
  Π s qsx ≠比 ≈ o≠比 … Π s qst
所谓灰度 o系指组织细胞的透光程度 ∀采用医
用显微图像分析仪进行检测时 o凡透光程度高 o则感
光灰度值大 o表明组织细胞中的物质含量少 ~凡透光
程度低 o则感光灰度值小 o表明组织细胞中的物质含
量多 ∀故感光灰度值与细胞组织化学定量结果呈反
比关系 ∀表 v示 o模型空白对照组肝脏 • ‘„感光灰
度值最高 o山茱萸小剂量组次高 o山茱萸大剂量组最
低 o山茱萸中剂量组次低 o模型空白对照组与正常空
白对照组之间灰度无统计学差异 ∀提示山茱萸提取
物大 !中剂量和人参蜂王浆对动物肝脏 • ‘„有不同
程度的保护作用 o大剂量山茱萸提取物还有增加肝
脏 • ‘„含量的效果 ∀表 v又示 o模型空白对照组肝
糖元感光灰度与山茱萸大剂量组相比 o前者呈显著
增强 ~山茱萸小剂量组 !模型阳性药对照组与山茱萸
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第 u{卷第 {期
ussv年 {月
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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„∏ª∏¶·oussv
大剂量组相比 o前两者肝糖元感光灰度呈非常显著
之增强 ~正常空白对照组与山茱萸大剂量组相比 o两
者肝糖元感光灰度无统计学差异 ∀表明大剂量山茱
萸提取物有维持肝糖元正常水平 !提高动物肝糖元
含量的作用 ∀
2 q2 山茱萸提取物对肾阳虚大鼠睾丸的影响
2 q2 q1 山茱萸提取物对大鼠睾丸脏器重量和脏器
系数的影响 见表 w ∀
表 w 山茱萸水溶性总提取物对肾阳虚大鼠睾丸重量
和睾丸脏器系数k体重 h l的影响k ξ ? σl
组别 ν 睾丸重量rª 脏器系数r h
山茱萸大剂量组 ≠ tt s q|| ? s qtx s qw{ ? s qsx
山茱萸中剂量组  z s q{w ? s qtz s qxz ? s qsu
山茱萸小剂量组 ≈ w s q{{ ? s qtz s qxv ? { q{v
模型阳性药对照组 … w s q|v ? s qtw s qxt ? s qsz
模型空白对照组   w s q|t ? s qtx s qxu ? s qs{
正常空白对照组 ¡ ts s q|w ? s qtt s qw{ ? s qsz
注 }睾丸重量组间比较 Ё s qsx 睾丸脏器系数组间比较
…比   Π s qsx ≠ 比  o≠ 比 ≈ o≠ 比 …o≠ 比   o 比 ≈ o 比
…o比   o比 ¡o≈比 ¡o…比 ¡o 比 ¡ Π s qst
表 w示 o睾丸重量各组间无统计学差异 o但脏器
系数各组间差异显著 ∀尤需指出的是 o山茱萸中 !小
剂量组 !模型阳性药组 !模型空白对照组的睾丸脏器
系数均显著增加 o只有山茱萸大剂量组睾丸脏器系
数未增加 o与正常空白对照组无统计学差异 ∀表明
大剂量山茱萸提取物具有维持大鼠睾丸正常脏器系
数的作用 ∀
2 q2 q2 药物对睾丸间质细胞 • ‘„含量的影响 见
表 x ∀
表 x 山茱萸水溶性总提取物对肾阳虚大鼠睾丸
间质细胞 • ‘„含量的影响k ξ ? σl
组别 ν 睾丸间质细胞 • ‘„含量k感光灰度值l
山茱萸大剂量组 ≠ ts tyy qws ? z qxs
山茱萸中剂量组  z tzx qu| ? ts qss
山茱萸小剂量组 ≈ w t{x qss ? y q||
模型阳性药对照组 … w t{v qzx ? w qxz
模型空白对照组   w t{t qxs ? y quw
正常空白对照组 ¡ ts tz| qss ? y qwy
注 }≠比 ¡o≠比  Π s qsx ≠比 ≈ o≠比 …o≠比   Π
s qst
表 x示 o山茱萸提取物小剂量组 !模型阳性药对
照组 !模型空白对照组大鼠睾丸间质 • ‘„感光灰度
值高于山茱萸大剂量组 o统计学差异非常显著 ~山茱
萸中剂量组 !正常空白对照组大鼠睾丸间质细胞
• ‘„感光灰度值亦高于山茱萸大剂量组 o统计学差
异显著 ∀提示大剂量山茱萸提取物能够促进睾丸间
质细胞 • ‘„的合成 ∀
3 讨论
山茱萸成熟干燥果肉酸涩微温 o并有显著的苦
味 ∀采用酒炖法制成饮片 o临床上水煎口服 o能起到
补肾益肝功效 ∀我们通过科学方法进一步加工处
理 o去掉了山茱萸原药材的苦涩味 o使之变为酸甜适
口的水溶性总提取物 ∀为了探讨该提取物的药理效
应及其强度 o本课题组复制了氢化考的松致肾阳虚
动物模型 o观察了山茱萸水溶性总提取物不同剂量
对肾阳虚大鼠的影响 ∀
结果表明 }山茱萸水提取物能够提高肾阳虚大
鼠的存活率和生命质量 ∀其中大剂量组的存活率为
zv qv h o明显高于中剂量组kwy qyz h l o小剂量组 !模
型阳性药组和模型空白对照组k均为 uy qyz h oΠ
s qsxl≈u  ∀投以大 !中剂量的山茱萸水提取物 o可以
使肾阳虚模型大鼠肾上腺病理改变显著减轻≈u  ∀山
茱萸水提取物能够使肾阳虚模型大鼠肝脏重量趋近
正常 o肝细胞病理改变减轻 o肝细胞 • ‘„ 和糖元含
量升高 o丙二醛含量降低 ∀它对肝脏的这些改善作
用 o随剂量增大而增强 ∀山茱萸水提取物能使肾阳
虚模型大鼠的睾丸脏器系数向正常方向逆转 o使睾
丸间质细胞 • ‘„ 合成量增加 ∀此效应以大剂量组
最为明显 ∀
用肾上腺皮质激素造模而建立的肾阳虚动物模
型 o是创建最早的中医动物模型 o在实验室应用已有
ws年历史 ∀这种以注射2停药法复制的肾阳虚动物 o
所用激素剂量相当大 o故有人认为实质上是导致重
要脏器损害 o是属于急性毒性的表现≈v  ∀补肾药物
山茱萸水溶性总提取物 o可以保护皮质激素所致肝 !
肾上腺 !睾丸等器官的病理形态学和组织化学改变 o
降低模型动物死亡率 ∀提示该药对阴损及阳的肾阳
虚证 o有较显著的补益肾阳功效 ∀该药的补肾阳作
用 o不是激素替代治疗 o而是通过机体自身调节功能
来实现的 ∀它能够恢复动物免疫水平 o可能是其自
身调节的机理之一≈w ox  ∀
≈参考文献 
≈t  陈小野 q实用中医证候动物模型学 q北京 }北京医科大学 中国
协和医科大学联合出版社 ot||v qtss q
≈u  李春生 o张国玺 o石体仁 o等 q山茱萸水溶性总提取物对肾阳虚
动物模型生命质量和肾上腺组织的影响 q中医杂志 ousst owu
k{l }w|t q
≈v  陈 奇 q中药药理研究方法学 q北京 }人民卫生出版社 ot|{v q
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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≈w  周京华 o李春生 o李电东 q山茱萸水溶物对老年小鼠 ‘Ž细胞
活性及 Œ2u °• ‘„ 表达的影响 q中国药学杂志 ousss o vx
k|l }yt{ q
≈x  周京华 o李春生 o李电东 q山茱萸水溶物对老年小鼠淋巴细胞
功能的影响 q中国中西医结合杂志 ousst outk基础理论特集l }
vx q
Εξπεριµενταλ Στυδψ ον Εφφεχτ οφ τηε Ωατερ Εξτραχτ οφ ∆ογ ωοοδ Φρυιτσ
ον τηε Λιϖερ ανδ Τεστισιν Ρατσ Μοδελ οφ Κιδνεψ2ψανγ ∆εφιχιενχψ
Œ ≤«∏±2¶«¨ ±ªt o ‹ „‘Š Š∏²2¬¬t o≥«¬×¬2µ¨±t o⁄’‘Š ÷¬¤²2¬¬¤t o
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε:ײ ¬¨³¯²µ¨ ·«¨ ©¨©¨ ¦·²© ⁄²ªº²²§©µ∏¬·¶²± ·²±¬©¼¬±ª®¬§±¨ ¼2¼¤±ªq Μετηοδ : × «¨ ©¨©¨ ¦·²©·«¨ º¤·¨µ ¬¨2
·µ¤¦·²© ⁄²ªº²²§©µ∏¬·¶²± µ¤·¶°²§¨¯²©®¬§±¨ ¼2¼¤±ª §¨©¬¦¬¨±¦¼ º¬·«·«¨ «¼§µ²¦²µ·¬¶²±¨ º¤¶²¥¶¨µ√ §¨q Ρεσυλτ : × «¨ º¤·¨µ ¬¨·µ¤¦·²©
⁄²ªº²²§©µ∏¬·¶¦²∏¯§ °¤®¨ ±²µ°¤¯ ·«¨ ¬¯√ µ¨º ¬¨ª«·o¤±§ °¬·¬ª¤·¨ «¨ ³¤·²¦¼·¨ ³¤·«²¯²ª¬¦¦«¤±ª¨¶o¬±¦µ¨¤¶¨ ·«¨ «¨ ³·²¦¨¯¯∏¯¤µ¯¨ √¨¯¶²©
• ‘„ ¤±§«¨ ³¤·¬± o¤±§§¨¦µ¨¤¶¨ ·«¨ °¤¯²±§¬¤¯§¨ «¼§¨ k  ⁄„l¬±µ¤·¶°²§¨¯²©®¬§±¨ ¼2¼¤±ª§¨©¬¦¬¨±¦¼ qŒ·¦²∏¯§¤¯¶² °¤®¨ ·«¨ √¬¶¦¨µ¤
∏´²·¬¨·¼ µ¨·∏µ±·²±²µ°¤¯ º¤¼ ¤±§¬±¦µ¨¤¶¨ ·«¨ ¯¨ √¨¯¶²© • ‘„ ¬±·«¨ ¬±·¨µ¶·¬·¬¤¯ ¦¨¯¯¶²©·¨¶·¬¦¯¨¬±µ¤·¶°²§¨¯²©®¬§±¨ ¼2¼¤±ª§¨©¬¦¬¨±¦¼ q
Χονχλυσιον : • ¤·¨µ ¬¨·µ¤¦·²© ⁄²ªº²²§©µ∏¬·¶¦¤± ³µ²·¨¦·¤±§¬°³µ²√¨·«¨ ©∏±¦·¬²±¶²©·«¨ ¬¯√ µ¨¤±§·¨¶·¬¦¯¨¬± µ¤·¶°²§¨¯ ²© ®¬§±¨ ¼2
¼¤±ª§¨©¬¦¬¨±¦¼ q
[ Κεψ ωορδσ] ⁄²ªº²²§©µ∏¬·¶~ ¬¯√ µ¨~·¨¶·¬¶~«¬¶·²¦«¨ °¬¶·µ¼ ≈责任编辑 方文贤 
益肾降压方对 • °‹ 大鼠降压及肾脏保护作用的研究
陈孟莉t o刘文军u o王彩云t o朱秀美v o殷建芬t o王东晓t o刘 屏t
kt q解放军总医院 临床药理研究室 o北京 tss{xv ~
u q中国中医研究院 广安门医院 o北京 tsssxs ~v q解放军海军 wst医院 o山东 青岛 uyysstl
≈摘要  目的 }研究益肾降压方降低 • °‹ 大鼠血压 !改善肾功能的作用及机制 ∀方法 }采用大鼠 xry肾切除
术法建立 • °‹ 模型 ∀动态测定血压 !肌酐 !尿素氮 o及在给药 {周后测定血浆 °„ • o„ µ o× ÷ …u oy2酮2°ŠƒtΑ的含量 ∀
同时观察给药 {周后 • °‹ 大鼠肾脏病理改变 ∀结果 }各剂量益肾降压方均可降低 • °‹ 大鼠的 …° o≤µ∀但对 • °‹
大鼠 …˜‘未见影响 ~各剂量益肾降压方可显著降低血浆 °„ • o„ µ o同时还可显著降低 × ÷ …u含量 o升高血浆 y2酮2
°ŠƒtΑ含量 ∀各剂量益肾降压方组大鼠肾小球硬化 o肾小管的萎缩均明显好于对照组和西药组 ∀结论 }益肾降压方
可降低 • °‹ 大鼠的血压 o并对肾脏具有保护功能 ~益肾降压方的降压作用和对肾脏的保护功能是通过影响 • °‹
大鼠肾素2血管紧张素2醛固酮系统而完成 ∀
≈关键词  中药复方 ~• °‹ 大鼠 ~• „≥ ~肾脏组织病理
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussvls{2szwy2sx
≈收稿日期  ussu2sz2u|
≈基金项目  国家自然科学基金资助项目kv||sst|wl
≈通讯作者  刘 屏 ר¯ }kstsly{uvws|s
肾实质性高血压k• °‹l是肾脏病引起的继发性
高血压 o是由一侧或双侧肾实质损害引起的高血压 o
其病理机制目前尚未完全清楚 o治疗也较困难 ∀益
#ywz#
第 u{卷第 {期
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