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Analysis of Anthraquinones in Serum and Urine after Oral Adm inistration of Semen Cassiae

口服决明子后血清及尿液中的蒽醌类分析



全 文 :口服决明子后血清及尿液中的蒽醌类分析
李续娥t o马 伟u o郭宝江t o曾 志t
kt q华南师范大学 生命科学学院 o广东 广州 xtsyvt ~
u q广州中医药大学 o广东 广州 xtswsxl
≈摘要  目的 }分析不同动物k人l口服决明子后吸收入血的蒽醌类 ∀方法 }用 ‹°≤ 法对口服决明子后的大
鼠血清和尿液 !健康人尿液中的结合蒽醌和游离蒽醌进行测定 ∀结果 }大鼠和人对决明子粉及其煎液中的蒽醌类
只能部分吸收入血 o且所吸收的蒽醌种类存在差异 ~在决明子蒽醌类的吸收及代谢过程中 o有新物质产生 ∀结论 }
决明子蒽醌类活性成分的进一步筛选应以所研究的动物k人l吸收入血的蒽醌类为切入点 ∀
≈关键词  决明子 ~蒽醌类 ~血清 ~尿液
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussvls|2s{w|2sv
蒽醌类是决明子的主要成分之一 ∀研究表明决
明子中的游离蒽醌具有抗肿瘤活性≈t  o蒽醌苷具有
降低血压≈u  !降低血脂和改善血液流变学的作
用≈v ow  ∀因为中药吸收入血的成分才可能成为有效
成分k治疗胃肠道内疾病除外l≈x  o本文对大鼠和人
口服决明子后血清及尿液中的蒽醌类进行检测 o以
分析其吸收入血的蒽醌类 o为决明子蒽醌类抗肿瘤 !
降压 !降脂等活性成分的进一步筛选提供参考 ∀
1 材料
1 q1 决明子 为豆科植物 Χασσια οβτυσιφολια q的
干燥成熟种子 o安徽产 o广东药学院药用植物教研室
鉴定 ∀
1 q2 仪器 日本岛津 ≤2y„ 高效液相色谱仪 ~
≥°⁄2y„ ∂ 紫外可见光检测器 ∀
1 q3 试剂 乙腈为色谱纯 o其他试剂均为分析纯 ∀
1 q4 动物 ≥⁄雄性大鼠 o体重 uss ∗ uts ª∀由广
州中医药大学实验动物中心提供 o合格证号 }
usss„st|号 ∀
1 q5 健康人 健康志愿者 ∀
2 方法
2 q1 决明子煎液 决明子 us ª加入适量水 o加热
至沸后文火煎煮 wx °¬±o制成 tss °的煎液 ∀
2 q2 大鼠血清样品的制备≈y  取大鼠 t{只 o随机
≈收稿日期  ussu2tt2tu
≈基金项目  广东省科技计划项目k≤vsttvl
≈通讯作者  ר¯ }ksusl{xuttwus ƒ¤¬}ksusl{xuts{xx
∞2°¤¬¯}¯¬¬∏¨ ƒ ¶¦±∏q¨§∏q¦±
均分为 y组 ∀禁食 uw «后 o第 t组大鼠¬ª给予生理
盐水 ts °#®ªp t作为对照组 o其余 x组大鼠¬ª给予
决明子粉 t qu ª#®ªp t ∀于给药后 s ot ou ow oy o{ «分
别将 t ∗ y 组大鼠钳摘眼球取血 o全血于 vz ε 温孵
vs °¬±ov xss µ#°¬±p t离心 ts °¬±o取血清备用 ∀
2 q3 大鼠尿液样品的制备≈y  由于吸收入血的成
分在血清样品中的浓度一般较低 o故需要收集给药
大鼠的尿液进行检测 ∀取大鼠 ty 只 o随机均分为 w
组 ∀禁食 uw «后 o第 t组大鼠¬ª给予生理盐水 ts
°#®ªp t作为对照组 o其余 v组大鼠¬ª给予决明子
粉 t qu ª#®ªp t ∀然后置于代谢笼中 o继续禁食 o自由
饮糖盐水k含 x h葡萄糖和 s q| h氯化钠l ∀第 u组
于给药后 w «o第 v组于给药后 { «o第 w组于给药后
uw «分别收集尿液 ∀
2 q4 健康口服者尿液样品的制备 健康志愿者 v
人 o清晨空腹各服决明子煎液 tss °∀分别收集其
服药后 s ow o{ ouw «的尿液 ∀
2 q5 蒽醌类的分析 按文献≈z 方法提取游离蒽醌
和结合蒽醌 ∀色谱条件 }迪马 ≤t{色谱柱kw qy °° ≅
tx ¦° ox Λ°l ~流动相乙腈2s qx h磷酸kxsΒxsl ~流速
t °#°¬±p t ~柱温 ws ε ~检测波长 uz{ ±° ∀
3 结果与讨论
决明子粉中结合蒽醌的 ‹°≤ 图谱见图 t o口
服决明子后血清及尿液中蒽醌类检测结果见表 t ∀
3 q1 决明子及其煎液中的蒽醌 决明子粉中共检
出结合蒽醌 tx 种 !游离蒽醌 tw 种 ∀决明子煎液中
的结合蒽醌种类比决明子粉中的结合蒽醌种类少 u
种 o游离蒽醌种类与决明子粉中的相同 ∀见表 t ∀
#|w{#
第 u{卷第 |期
ussv年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ oŒ¶¶∏¨ |≥ ³¨·¨°¥¨µoussv
表 t 口服决明子后血清及尿液中蒽醌类的检测结果
项目 t u v w x ¤ ¥ y z ¦ { | ts tt tu tv tw tx
τr°¬± x qu x qy y qw z qv z q{ { qv { q| | q{ ts q{ tu qx tv qt tw qy ty qu t{ qu t| qs us qy uz qx v| qz
粉 ≤ n n n n n n n n n n n n n n n
粉 ƒ n n n n n n n n n n n n n n
煎液 ≤ n n n n n n n n n n n n n
煎液 ƒ n n n n n n n n n n n n n n
血 ≤s
血 ≤t n n n n n n
血 ≤u n n n n n n
血 ≤w n n n n n n
血 ≤y n n
血 ≤{ n n
尿 ≤s
尿 ≤w n n n n n n
尿 ≤{ n n n n n n n n n n
尿 ≤uw n n n n n n n n n
尿 ƒs
尿 ƒw n n n n n n n n n n n
尿 ƒ{ n n n n n n n n n n n
尿 ƒuw n n n n n n n n n
人 ≤s
人 ≤w n n n n n n n n n n n n
人 ≤{ n n n n n n n n n n n n
人 ≤uw n n n n n n n n n n n
人 ƒs
人 ƒw n n n n n n n n n
人 ƒ{ n n n n n n n n n n n
人 ƒuw n n n n n n n n n
注 }t ou ov , ,tx q分别与图 t中的峰号相对应 ¤o¥o¦q为决明子口服后新产生的蒽醌所对应的峰 τ q保留时间 ≤ q结合蒽醌 ƒ q游离
蒽醌 其后的数字为给药后取样的时间k«l
图 t 决明子粉中结合蒽醌的 ‹°≤ 图谱
t q橙钝新素 u q去甲基橙钝新素 v q芦荟大黄素
w q大黄酸 x q黄钝新素 y q钝新素 z q钝叶素 { q大黄素
tw q大黄酚 tx q大黄素甲醚
3 q2 血清及尿液中的蒽醌 大鼠¬ª决明子粉后血
清中检出的结合蒽醌有橙钝新素 !去甲基橙钝新素 !
钝叶素 !大黄素 !大黄酚 !大黄素甲醚等 y 种 ∀血清
中没有检出游离蒽醌 ∀说明吸收入血的游离蒽醌浓
度甚低 o不易检出 ∀这与决明子中游离蒽醌的含量
远低于结合蒽醌有关≈z  ∀
由于尿液的富集作用 o使得大鼠¬ª决明子粉后
尿液中检出的结合蒽醌种类比血清中多了芦荟大黄
素 !大黄酸 !黄钝新素 !钝新素k但大黄素甲醚消失l ∀
尿液中能检出一些游离蒽醌 o此除了与尿液的富集
作用有关外 o还与结合蒽醌的体内水解相关 ∀大鼠
¬ª决明子粉后 o其尿液中的结合蒽醌和游离蒽醌均
有 t种新的物质k{ q| °¬±峰 o结构待测l出现 ∀健康
人口服决明子煎液后尿液中检出的结合蒽醌与大鼠
¬ª决明子粉后尿液中的结合蒽醌比较 o多了大黄素
甲醚等 o少了大黄酸 ∀检出的游离蒽醌比检出的结
合蒽醌少了大黄素甲醚 ∀此外结合蒽醌和游离蒽醌
均有另外 u 种新的物质k{ qv °¬±和 tu qx °¬±的峰 o
结构待测l出现 ∀说明口服决明子煎液的健康人与
¬ª决明子粉的大鼠在对蒽醌类的吸收与代谢上存在
差异 ∀从表 t 中决明子粉与其煎液中蒽醌的种类差
别看 o大鼠与健康人之间存在的这种差异不可能完
全是由¬ª决明子粉与口服决明子煎液引起的 ∀
4 结论
在决明子蒽醌类活性成分k治疗胃肠道内疾病
除外l的进一步筛选中 o应以所研究的动物k人l吸收
入血的蒽醌类为切入点 ∀因为从检测结果看 o决明
子粉与其煎液中的蒽醌类存在着差异 o同时在吸收
#sx{#
第 u{卷第 |期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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和代谢过程中有新的蒽醌产生 ∀可见 o在蒽醌类活
性成分的研究中 o不能忽视煎煮等加工过程的影响 o
以及吸收和代谢过程中新产生的物质 ∀而血清中的
蒽醌类是各种来源的活性成分共存的唯一位置 ~吸
收入血的成分是有限的 o可使研究工作得以简化 ~确
定了表现活性的研究动物k人l o则避免了不同动物
k人l在蒽醌类吸收和代谢上存在的差异 ∀
≈参考文献 
≈t  Ž²¼¤°¤o  ²µ¬·¤Œo פª¤«¤µ¤ Žo ·¨¤¯ qŒ±«¬¥¬·²µ¼ ∞©©¨ ¦·¶²© „±2
·«µ¤´ ∏¬±²±¨ ¶¤±§ …¬¤±·«µ¤´ ∏¬±²±¨ ¶ ²± ∞³¶·¨¬±2…¤µµ ∂¬µ∏¶ „¦·¬√¤2
·¬²±q≤¤±¦¨µ¨··ousst otzs }tx q
≈u  李续娥 o郭宝江 o曾 志 q决明子蛋白质 !低聚糖及蒽醌苷降压作
用的实验研究 q中草药 oussv ovwk|l }{wu q
≈v  李续娥 o郭宝江 q决明子蛋白质和蒽醌苷对高脂血症大鼠血脂的
影响 q中国中药杂志 oussu ouzkxl }vzw q
≈w  ¬÷ ∞o ≠¤±ª ≥ ≠ o «¤² •  o ·¨¤¯ q ∞©©¨ ¦·²© °µ²·¨¬± ¤±§ „±2
·«µ¤´ ∏¬±²±¨ Š¯ ∏¦²¶¬§¨¶©µ²° ≥¨° ±¨ ≤¤¶¶¬¤¨ ²± ‹¨°²µµ«¨ ²¯²ª¼ ²©
‹¼³¨ µ¯¬³¬§¨ °¬¦• ¤·¶q≤«¬± ×µ¤§¬·‹ µ¨¥ ⁄µ∏ª¶oussu ovvkxl }wvs q
≈x  王本祥 o周秋丽 q关于中药活性成分的认识及其研究方法 q中国
中药杂志 ousst ouyktl }ts q
≈y  陈 昕 o周秋丽 o王本祥 q人参皂苷 • ¥t在大鼠肠内菌代谢物吸
收入血成分的研究 q药学学报 ot||| ovwkzl }w{t q
≈z  李续娥 q决明子降脂有效成分及其降脂蛋白结构的研究 q博士
论文集 q西安 }西安交通大学生命科学与技术学院 ousss qtt q
Αναλψσισ οφ Αντηραθυινονεσιν Σερυµ ανδ
Υρινε αφτερ Οραλ Αδ µινιστρατιον οφ Σεµεν Χασσιαε
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u q Š∏¤±ª½«²∏ ˜±¬√ µ¨¶¬·¼ ²© ×µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨  §¨¬¦¬±¨ o Š∏¤±ª½«²∏ xtswsx o Š∏¤±ª§²±ªo≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ¤±¤¯¼¶¬¨ ·«¨ ¤±·«µ¤´ ∏¬±²±¨ ¶¤¥¶²µ¥¨ §¬±·² ¶¨µ∏° ¥¼ §¬©©¨ µ¨±·¤±¬°¤¯¶k²µ«∏°¤± ¥¨¬±ª¶l¤©·¨µ²µ¤¯
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Χονχλυσιον : „±·«µ¤´ ∏¬±²±¨ ¶¤¥¶²µ¥¨ §¬±·²¶¨µ∏° ¥¼·«¨ ¬¨³¨µ¬° ±¨·¤¯ ¤±¬°¤¯¶²µ° ±¨ ¶«²∏¯§¥¨¦²°¨·¤µª¨·©²µµ¨¶¨¤µ¦«¬±ª¬±·²¤¦·¬√¨
¦²°³²∏±§¶²©¤±·«µ¤´ ∏¬±²±¨ ¶¬± ≥¨° ±¨ ≤¤¶¶¬¤¨ q
[ Κεψ ωορδσ] ≥¨° ±¨ ≤¤¶¶¬¤¨ ~¤±·«µ¤´ ∏¬±²±¨ ¶~¶¨µ∏° ~∏µ¬±¨ ≈责任编辑 方文贤 
人参皂苷保护脊髓神经元与 ‘’ 的关系
潘树义t o潘晓雯t o王苏平u
kt q海军总医院 全军高压氧中心 o北京 tsssvz ~u q大连市中心医院 神经内科 o辽宁 大连 tywsssl
≈摘要  目的 }探讨人参皂苷保护脊髓神经元与一氧化氮k‘’l的关系 ∀方法 }体外培养鼠胚脊髓神经细胞 o
划痕法建立周围神经损伤模型 o用 Šµ¬¨¶¶法间接测定 ‘’ 含量 ∀结果 }损伤组的 ‘’ 含量比非损伤组高 o损伤时人
参皂苷培养组的 ‘’ 含量比常规培养基组的含量低 ∀结论 }周围神经损伤时 ‘’ 含量增高 o人参皂苷保护神经作用
可能通过抑制 ‘’ 释放实现的 ∀
≈关键词  人参皂苷 ~脊髓神经元 ~周围神经损伤 ~一氧化氮 ~Šµ¬¨¶¶法
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussvls|2s{xt2sv
≈收稿日期  ussu2sx2s|
≈基金项目  国家自然科学基金kv||zs{vvl
≈通讯作者  ר¯ }kstslyy|x{xuz
人参皂苷kŠ≥lk主要成分是 • ªt o• ªul对中枢神
经系统k≤‘≥l的作用及机制已基本明确 ∀从现有的
资料看 oŠ≥的主要功能有 }≠促进海马 ¦2©²¬基因表
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第 u{卷第 |期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ oŒ¶¶∏¨ |≥ ³¨·¨°¥¨µoussv