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HPLC测定不同品种酸模中蒽醌类成分的含量



全 文 : 中国现代应用药学 2011 年 4 月第 28 卷第 4 期 Chin JMAP, 2011 April, Vol.28 No.4 ·353·
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收稿日期:2010-04-26



HPLC 测定不同品种酸模中蒽醌类成分的含量

肖凌(湖北省食品药品监督检验研究院,武汉 430064)

摘要:目的 建立酸模药材中蒽醌类成分含量测定的方法;并比较不同品种不同产地酸模药材中蒽醌类成分的含量,为
确定酸模药材来源提供依据。方法 采用 HPLC 测定酸模药材中蒽醌类成分的含量。结果 比较不同品种不同产地 13
批样品的测定结果,酸模中蒽醌类成分的含量最高,大黄素、大黄酚、大黄素甲醚 3 者总量,酸模约为 0.95%~2.12%,
齿果酸模约 0.24%~0.39%,长刺酸模约为 0.04%~0.15%,小酸模约为 0.39%~0.46%。结论 建立的蒽醌类成分含量测定
方法准确可靠;不同品种酸模中蒽醌含量差异较大。
关键词:酸模;蒽醌类;高效液相色谱法;品种
中图分类号:R917.101;R917.73 文献标志码:B 文章编号:1007-7693(2011)04-0353-04

Determination of Anthraquinones in Different Varieties of Rumex by HPLC

XIAO Ling(Hubei Provincial Institute for Food and Drug Control, Wuhan 430064, China)

ABSTRACT: OBJECTIVE To establish the method of determining the content of anthraquinones in Rumicis Acetosae Radix,
and to compare anthraquinones content in different species of Rumex from different areas. METHODS The content of
anthraquinones was determined by HPLC. RESULTS The content of anthraquinones in Rumex of different species of 13
batches from different areas were determined. The content of anthraquinones in R.acetosa was the highest, the total content of
emodin, chrysophanol and physcion in R. acetosa was about 0.95%−2.12%, R. dentatus 0.24%−0.39%, R. trisetifer 0.04%−0.15%,
and R. acetosella 0.39%−0.46%. CONCLUSION The determination method of anthraquinone established is accurate and
reliable; the content of anthraquinone in different varieties of Rumex is quite different.
KEY WORDS: Rumex; anthraquinones; HPLC; variety

酸模(Rumex acetosa L.)又名土大黄等,为蓼科
酸模属植物,为较常用草药,以根入药,性味苦、
酸、寒。酸模有清热解毒、活血止血、抗菌消炎、
通便杀虫之功效,用于治疗多种皮肤病、出血症
及各种炎症[1-4]。据报道[4-6]其中的蒽醌类成分为抗
菌止血的主要活性成分。酸模属植物资源丰富,
我国产26种、2变种,具有较好的开发前景。酸模
药材即无国家级标准也无省级标准,笔者以湖北
省资源为基础,兼顾邻近省分布情况,建立了蒽
醌类成分的含量测定方法,又对不同产地的4个不
同品种酸模中的蒽醌类成分的含量进行了比较分
析,为确定酸模药材的来源提供依据。根据此研
究成果制订的酸模药材标准收载于《湖北省中药
材质量标准》2009版,为该药材规范使用及进一
步开发奠定了基础。
1 仪器与试药
1.1 仪器
DIONEX U3000 液相色谱仪 (美国戴安 );
作者简介:肖凌,女,硕士,主管药师 Tel: (027)87272513 E-mail: lingyun724@126.com
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UV500 紫外分光光度计(美国热电);GENIUS210
型分析天平(德国塞多利斯)。
1.2 药材和试剂
大黄素(批号:110756-200110)、大黄酚(批号:
110796-200208)、大黄素甲醚(批号:110758-200509)
均由中国药品生物制品检定所提供。甲醇为色谱
纯,水为蒸馏水,其他试剂为分析纯。酸模
(R. acetosa)7 批、小酸模(R. acetosella)2 批、长刺
酸模(R. trisetifer)2 批、齿果酸模(R. dentatus)2 批。
以上药材均由湖北省食品药品监督检验研究院冯
海龙副主任药师鉴定。
2 方法与结果
2.1 色谱条件[7-8]
色谱柱:COSMOSIL 5C18-MS-II(250 mm×4.5
mm,5 µm);流动相:甲醇-0.5%冰醋酸(85 15)∶ ;
检测波长:254 nm;流速:1.0 mL·min−1;进样量:
20 µL。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取3种对照品适量,加甲醇制成每1 mL
分别含大黄素25 µg、大黄酚20 µg、大黄素甲醚
10 µg的溶液。
2.3 供试品溶液的制备
取本品粉末(过三号筛)约0.5 g,精密称定,精
密加入甲醇25 mL,称定重量,超声处理30 min,
放冷,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取
续滤液5 mL,加10%盐酸10 mL,二氯甲烷10 mL,
加热回流40 min,放冷,置分液漏斗中,分取二氯
甲烷层,再用二氯甲烷振摇提取3次,每次10 mL,
合并二氯甲烷液,挥干溶剂,残渣加甲醇使溶解,
转移至10 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,
取续滤液,即得。对照品及供试品色谱图见图1。
2.4 线性关系的考察
精密称取上述3种对照品,用甲醇配制成标准溶
液,大黄素:0.231 2 mg·mL−1、大黄酚:0.109 2
mg·mL−1、大黄素甲醚:0.059 8 mg·mL−1,分别用甲
醇稀释成6个浓度,按“2.1”项下色谱条件,进样20
µL,以进样量(Y,µg)对峰面积(X)进行线性回归。大
黄素:Y=26.080 81X+1.538 305,r=0.999 6,0.185 0~
4.624 µg。大黄酚:Y=64.400 14X−0.482 46,r=0.999 7,
线性范围为0.087 4~2.184 µg。大黄素甲醚:Y=
38.461 838 2X+0.133 638 68,r=0.999 8,线性范围为
0.059 8~1.196 µg。

图 1 高效液相色谱图
A−对照品;B−供试品;1−大黄素;2−大黄酚;3−大黄素甲醚
Fig 1 HPLC chromatograms
A−control; B−sample; 1−emodin; 2−chrysophanol; 3−physcion
2.5 仪器精密度试验
精密吸取同一供试品溶液,连续进样5次,测
定峰面积,计算含量得RSD分别为:大黄素0.71%、
大黄酚0.51%、大黄素甲醚0.97%。
2.6 重复性试验
精密称定同一批酸模样品(产地:大别山)粉末
6份,每份0.5 g,按“2.3”项下方法制备供试品溶
液,分别测定,计算含量分别为:大黄素
(0.528±2.03)%、大黄酚(0.319±2.57)%、大黄素甲
醚(0.207±3.43)%、总量(1.05±1.71)%。
2.7 稳定性试验
精密吸取同一供试品溶液,在0,2,4,8,
12,24 h分别进样20 µL,测定含量,RSD分别为:
大黄素0.58%、大黄酚0.31%、大黄素甲醚0.47%。
2.8 加样回收率试验
分别精密称取已知含量的酸模药材(产地:大
别山)粉末约0.25 g共6份,分别按1∶0.5、1∶1、1∶
1.5 比例精密加入大黄素对照品溶液 (0.231 2
mg·mL−1)3,5,8 mL;大黄酚对照品溶液(0.109 2
mg·mL−1)4,8,12 mL;大黄素甲醚对照品溶液
(0.059 8 mg·mL−1)5,10,15 mL;制备供试品溶液,
分别测定,计算回收率,结果见表1。
2.9 样品测定
精密称定不同品种不同产地酸模药材13批,
按“2.3”项下方法制备供试品溶液,分别测定,
计算样品含量,结果见表2。
中国现代应用药学 2011 年 4 月第 28 卷第 4 期 Chin JMAP, 2011 April, Vol.28 No.4 ·355·
表 1 回收率测定结果(n=6)
Tab1 Results of recovery test (n=6)
成分 取样量/g 已知量/mg 加入量/mg 测得量/mg 回收率/% 平均回收率/% RSD/%
0.250 7 1.323 7 0.693 6 1.992 0 96.38
0.250 8 1.324 2 0.693 6 2.009 0 98.73
0.255 3 1.348 0 1.156 0 2.479 0 97.83
0.251 6 1.328 4 1.156 0 2.431 0 95.37
0.250 9 1.324 7 1.849 6 3.141 0 98.19
大黄素
0.2507 1.323 7 1.849 6 3.123 0 97.29
97.3 1.27
0.250 7 0.799 7 0.436 8 1.221 0 96.38
0.250 8 0.800 1 0.436 8 1.231 0 98.75
0.255 3 0.814 4 0.873 6 1.569 0 98.75
0.251 6 0.802 6 0.873 6 1.529 0 95.06
0.250 9 0.800 4 1.310 4 2.090 0 98.44
大黄酚
0.250 7 0.799 7 1.310 4 2.085 0 98.12
97.6 1.56
0.250 7 0.518 9 0.299 0 0.815 3 99.13
0.250 8 0.519 1 0.299 0 0.812 1 97.98
0.255 3 0.528 5 0.598 0 1.115 0 98.04
0.251 6 0.520 8 0.598 0 1.091 0 95.41
0.250 9 0.519 4 0.897 0 1.384 0 96.44
大黄素甲醚
0.250 7 0.518 9 0.897 0 1.400 0 98.18
97.5 1.38
表 2 不同品种不同产地酸模中蒽醌类成分的含量测定结果
Tab 2 Determination results of anthraquinone in different species of Rumex from different areas
品种(产地 批号) 大黄素/% 大黄酚/% 大黄素甲醚/% 三者总量/%
酸模(产地:湖北大别山) 0.595 0 0.282 0 0.199 0 1.08
酸模(采集地:湖北恩施 070518) 0.643 0 0.308 0 0.216 0 1.17
酸模(采集地:湖北新洲 070528) 0.525 0 0.246 0 0.182 0 0.95
酸模(采集地:湖北黄陂 070430) 1.080 0 0.584 0 0.453 0 2.12
酸模(采集地:湖北麻城 070423) 0.597 0 0.369 0 0.226 0 1.19
酸模(采集地:江西庐山 070706) 0.862 0 0.447 0 0.327 0 1.64
酸模(采集地:安徽黄山 070610) 0.770 0 0.389 0 0.291 0 1.45
小酸模(采集地:湖北麻城 070423) 0.138 0 0.208 0 0.115 0 0.46
小酸模(产地:浙江金华) 0.115 0 0.197 0 0.076 1 0.39
齿果酸模(采集地:湖北利川 070518) 0.185 0 0.129 0 0.073 1 0.39
齿果酸模(采集地:湖北恩施 070518) 0.104 0 0.074 6 0.061 4 0.24
长刺酸模(产地:安徽广德) 0.089 9 0.038 3 0.020 7 0.15
长刺酸模(采集地:湖北恩施 070518) 0.018 8 0.012 1 0.010 6 0.04

3 讨论
供试品溶液的制备,参考中国药典2005版一
部大黄项下含量测定条件,选用甲醇为提取溶剂,
超声提取;提取液用酸水解,比较5%盐酸、8%盐
酸、10%盐酸酸水解条件,萃取溶剂比较三氯甲烷
与二氯甲烷。结果10%盐酸水解含量最高,故选
择10%盐酸水解;而三氯甲烷与二氯甲烷萃取效
果无明显差异,从环保考虑,选择二氯甲烷为萃
取溶剂。
实验中还测定了各品种酸模药材中游离蒽醌
的含量。供试品溶液制备方法为:取本品粉末(过
三号筛)约0.5 g,精密称定,精密加入甲醇25 mL,
称定重量,超声处理30 min,放冷,用甲醇补足减
失的重量,摇匀,滤过,取续滤液5 mL,转移至
10 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续
滤液,按“2.1”项下色谱条件测定。每类成分游
·356· Chin JMAP, 2011 April, Vol.28 No.4 中国现代应用药学 2011 年 4 月第 28 卷第 4 期
离量约占相应成分总量的比例约为:大黄素
0.11%~0.45%、大黄酚0.087%~0.62%、大黄素甲醚
0.093 6%~0.67%。不同类型蒽醌的含量,反映了
药材中有效成分存在的实际情况,也为供试品溶
液的制备提供了合理的依据。
通过比较13批酸模药材中蒽醌类成分的含
量,可看出,蒽醌类成分大黄素、大黄酚、大黄
素甲醚总量酸模约为0.95%~2.12%,齿果酸模约
0.24%~0.39%,长刺酸模约为0.04%~0.15%,小酸
模约为0.39%~0.46%。其中酸模不论产地蒽醌类含
量都相对较高,小酸模与齿果酸模相当,长刺酸模
最低。同时考虑湖北省酸模属植物的分布情况[9],
其药材来源确定为酸模属酸模Rumex acetosa L.。
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收稿日期:2010-03-16



2011 年全国医药学术论文交流会暨临床药学与药学服务研究进展培训班通知
为了进一步提高药物治疗水平,保障临床用药有效、安全,经中国药理学会研究,决定于 2011 年 8 月中旬在山西太
原召开 2011 年全国医药学术论文交流会暨临床药学与药学服务研究进展培训班。会议主题为加强合理用药,促进个体化
治疗。会议将采取主题演讲和互动等方式进行广泛而深入的研讨和交流。与会代表可获得国家级Ⅰ类继续教育学分 10 分
[项目编号:2011-13-01-052 (国)],并颁发论文证书。现将有关事宜通知如下。
1 会议主要内容
1.1 专题讲座
① 21 世纪个体化医学(周宏灏院士/所长 中南大学临床药理研究所和遗传药理研究所);
② 国家基本药物制度与合理用药(张淑芳主任 卫生部合理用药专家委员会主任委员);
③ 合理用药与个体化治疗(曾繁典教授 华中科技大学同济医学院临床药物研究所);
④ 药物基因组学在中药合理应用中的意义(杜冠华教授/理事长 中国协和医科大学药物研究所副所长);
⑤ 替代终点:在药物研究和临床治疗的现实或希望(魏伟教授/所长 安徽医科大学临床药理研究所);
⑥ 生物制剂及其类似物差异探讨(陈东生教授/主任 华中科技大学同济医学院附属协和医院药剂科);
⑦ 药物基因组学与个体化用药(辛华雯主任医师/主任 广州军区武汉总医院临床药理科);
⑧ 糖皮质激素合理应用与个体化治疗(杜光教授/主任 华中科技大学同济医学院附属同济医院药剂科)。
⑨ 电子健康环境下医药人员的信息素养(张士靖教授 华中科技大学同济医学院;本专题报告旨在提高医药工作者信
息查询能力)。
1.2 学术论文报告 大会代表作学术论文发言,并进行互动交流与讨论。
1.3 培训班结业 培训班结业考试,颁发学分证书和论文证书。
2 会议时间、地点与收费
会议时间:2011 年 8 月 17~21 日 ,8 月 17 日全天报到;8 月 18~20 日开会,8 月 21 日离会。会议地点:太原市太
航大酒店西楼(太原市亲贤北街 28 号,邮编:030006,三星级,标准间预计每人每天约 150 元)。收费:会务费及资料
费共 1200 元,食宿费自理。若有意参加会议者,请直接向《医药导报》编辑部索取会议通知。
《医药导报》编辑部地址:武汉市解放大道 1095 号同济医院《医药导报》编辑部,邮编:430030,联系电话:
027-83663559,83643083,83666619。E-mail:66855609@qq.com;联系人:胡家胜。
中国药理学会