全 文 ：首茸方对利血平小鼠脑内多巴胺
及其代谢产物的影响
王 巍 o赵德忠 o孙晓芳 o谷胜东
k中国中医研究院 西苑医院 o北京 tsss|tl
≈摘要  目的 }探讨在临床可协同西药治疗帕金森病k°⁄l的首茸方的药效作用 ∀方法 }利血平皮下注射造成
小鼠 °⁄模型 o应用高效液相色谱2电化学k‹°≤2∞≤l检测器测定小鼠脑匀浆中多巴胺k⁄„l及其代谢产物的水平 ∀
结果 }发现美多巴可以提高 °⁄小鼠脑内 ⁄„ 的水平 o首茸方与美多巴合用后 o小鼠脑内的 ⁄„ 水平不仅明显高于模
型组而且高于美多巴组 ∀结论 }首茸方可以协同美多巴增加脑内 ⁄„ 的含量 o提高美多巴的疗效 o可减少美多巴的
用量 o降低其副作用 ∀
≈关键词  首茸方 ~帕金森病 ~多巴胺 ~高效液相色谱2电化学检测器
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukussulsx2svy{2sv
帕金森病k°⁄l是老年人常见的一种以黑质纹
状体区多巴胺k⁄„l能神经元进行性缺失为特征的
中枢神经系统变性疾病 o患者脑内 ⁄„ 含量明显较
正常人下降 o其确切的发病机制仍不清楚≈t  ∀us世
纪 ys年代左旋多巴k2⁄’°„l作为 ⁄„ 的前体用于
°⁄的治疗 o可改善病人的症状和体征 ∀但长期应用
可产生明显的副作用 o且疗效逐渐减退 o甚至无效 ∀
°⁄属于中医颤症范畴 o中医学认为年迈之人 o
肝肾脾诸脏俱虚 o肝藏血而主筋 o肾藏精而通脑髓 o
肝肾虚而精血亏少 o筋脉失濡则肢体颤振 o肌肉挛急
而强直 ∀脾为后天之本主四肢 o脾虚则湿浊内生 o化
痰生火 o动而生风 o易致痰浊内阻 o血脉不畅 o四肢失
养发为僵硬震颤 ∀中医药治疗 °⁄有其特色 o能辨
证施治 o从整体调节机体功能 ∀我们用补肝肾 o益精
血 o祛风止颤的首茸方在临床协同西药治疗 °⁄o使
原来单用西药已无效的病人症状和体征改善 o并可
减少西药的用量 ∀本实验探讨首茸方对利血平所致
°⁄小鼠脑内 ⁄„ 及其代谢产物的影响 o为临床疗效
提供依据 ∀
1 材料和方法
1 q1 仪器 ≤  „ruys 除气装置 !…„≥ 的 ° 2{s
泵 !≤2w≤ 电化学检测器 !°‹ „≥∞2ŒŒ柱k’⁄≥ v Λ° o
≈收稿日期  usst2sw2tz
≈通 讯 作 者   电 话 }kstsl yu{zxx||2ywts 传 真 }kstsl
yu{{s{yu
tss °° ≅ v qu °°l !玻璃碳工作电极和 „ªr„ª≤¯参
考电极 ! ≤≤2x液相色谱装置 !ztux 注入阀和色谱工
作站k≤ ‹∞2„…电脑化积分器l ∀日本日立 xx°2
zu超速离心机 o⁄≠{|2Œ型电动玻璃匀浆机 ∀
1 q2 试剂和药物 ⁄„ !v ow2二羟基苯乙酸
k⁄’°„≤l !高香草酸k‹ ∂ „l !v ow 二羟基苄胺k⁄‹2
…„l !三乙胺k×∞„l !t2庚烷磺酸钠k‹≥„l均为 ≥¬ª2
°¤产品 ~磷酸k°„l !乙腈k„≤‘l !甲醇 !高氯酸 !焦
亚硫酸钠 !乙二胺四乙酸四钠k‘¤w∞⁄× „l及其它试
剂均为国产 „ • 级 ∀水为去离子双蒸馏水 ∀美多巴
为杭州利民制药厂产品 o批号 |usxtu ∀利血平为广
州侨光制药厂产品 o批号 |ttstt ∀ 首茸方由何首
乌 !鹿茸 !钩藤 !厚朴等组成 ∀除鹿茸用万能粉碎机
碾细备用外 o其余各味药水煎 u 次 o每次煮沸半小
时 o去渣后 u次煎液合并浓缩为 t qx ª#°p t ∀
1 q3 色谱条件 流动相组成 }‹≥„t qzxªo×∞„
v qx °o°„ w qs °o„≤‘yu qx °o‘¤w∞⁄× „ s qt
ªo蒸馏水 |vs °o共 t sss °∀流动相的流速为
s qz °#°¬±p t o电化学检测工作电压为 zxs °∂ o增
益为 xs ±„ ∀清洗流动相为甲醇2水k体积l € uΒv ∀
1 q4 标准液的配制 准确称取 ⁄„ o⁄’°„≤ o‹ ∂ „ o
⁄‹…„各 t °ª分别溶于 ts °s qt°²¯#pt的高氯
酸中作为储备液ks qt °ª#°p tl o存放于 p us ε 的
冰箱中 ∀分别取 ⁄„ o⁄’°„≤ o‹ ∂ „ 的储备液等量
混合 o加入 s qt °²¯ #p t高氯酸配成 v qty ±ª#us
ˏpt的混合标准液 ∀取 ⁄‹…„ 储备液用 s qu °²¯ #
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第 uz卷第 x期
ussu年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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¤¼ qoussu
pt的高氯酸稀释成 s qt Λª#°p tk含 s qsw h焦亚
硫酸钠和 s qsw h ∞⁄× „l的溶液作为含内标液和蛋
白质沉淀剂的工作液 ∀以上工作标准液和内标液在
w ε 保存 ou周内使用 ∀
1 q5 方法 t{ ∗ uw ª雄性昆明种小鼠 ys只 o按体
重随机分为 x组 }正常组 !模型组 !美多巴组 !首茸方
组 !首茸方 n 美多巴组 o每组 tu 只 ∀各组动物自由
饮水 !进食 ∀各给药组分别按 tus °ª#®ªp t美多巴
kt qux倍人等效剂量l !ux ª#®ªp tk生药量 ou倍人的
等效剂量l首茸方 !tus °ª#®ªp t美多巴 n ux ª#®ªp t
k生药量l首茸方灌胃给药 ~模型组灌胃等量自来水 ∀
同时以上 w组动物每天以 t °ª#®ªp t的利血平注射
液皮下注射造模 ∀正常组动物仅做操作对照 ∀连续
y §造模和给药后各组动物断头处死 o迅速取出全
脑 o立即投入液氮中 o固化后称重 o每 tss °ª脑组织
加 u °冰冷的工作内标液ks qt Λª#°p tl o在冰浴
中用电动的玻璃匀浆器匀浆k固定转速和匀浆次
数l o然后在 s ∗ w ε tu sss µ#°¬±p t离心 us °¬±o取
出上清液用 s quu Λ° 滤膜和注射器式的抽滤器抽
滤 o滤液分装于带盖的塑料管中 o保存于 p us ε 冰
箱中待测 ∀取 us ˏ注入 ‹°≤ 进行分析 ∀
1 q6 统计 各组资料采用 Φ检验 ∀
2 结果
2 q1 一般观察 各造模组小鼠皮下注射利血平 uw
«后出现眼睑下垂 o眼睛眯成线状 o精神不振 o个别
动物体温明显下降 o四肢震颤 o类似寒战 ~vs «后除
上述症状外 o还可见小鼠前肢腕关节弯曲 o贴近躯
干 o步态失常 o脊背拱起 o两耳竖起 o头缩向躯干 o前
肢紧贴口鼻 o肛门口有粪便堆积等现象 ∀
2 q2 对利血平小鼠脑内 ⁄„ 及其代谢产物的影响
表 t 各给药组对利血平小鼠脑内 ⁄„ 及其代谢产物的影响k ξ ? σl
组别
动物
数
峰高r内标峰高
⁄„ ⁄’°„≤ ‹ ∂ „
正常 ts t qwwz ? s qt|{ul s q|uu ? s quuz s qswt ? s qsty
模型 { s qtzx ? s qsyv s q||{ ? s qt|{ s qsvy ? s qstz
美多巴 ts s qyw| ? s qu{xul w qwux ? v qzvutl s qvuw ? s qt|vul
首茸方 { s qt|t ? s qsy| t qtw| ? s qt{| s qswx ? s qst|
美多巴 n 首茸方 ts t qsyu ? s qvztu ovl tv q|uv ? x q{wsu ovl s qyu| ? s qtvsu ovl
注 }与模型组比较 tl Π s .sx u) Π s .sst 与美多巴组比较 v) Π s qsst
从表 t 可见 o模型组脑内 ⁄„ 水平明显低于正常
组k Π s qsstl o美多巴组脑内 ⁄„ 水平明显高于模
型组k Π s qsstl o首茸方组与模型组无显著差异 o
首茸方 n美多巴组脑内 ⁄„ 水平不仅明显高于模型
组而且高于美多巴组k Π均  s qsstl o表明中药首
茸方可协同美多巴增加脑内 ⁄„ 的含量 ∀模型组脑
内 ⁄’°„≤ o‹ ∂ „ 的水平与正常组和首茸方组无显
著差异 o美多巴组和首茸方 n 美多巴组脑内
⁄’°„≤ o‹ ∂ „ 水平明显高于模型组k Π s .sx , Π
s qsstl o且首茸方 n美多巴组脑内 ⁄’°„≤ o‹ ∂ „ 水
高于美多巴组k Π s qsstl ∀提示随着 ⁄„ 水平的升
高 o其代谢产物也增加 o与美多巴和首茸方 n美多巴
增加 ⁄„ 水平是一致的 ∀
2 q3 对利血平小鼠脑内 ⁄„ 及其代谢产物比值的
影响 表 u可见 o模型组 ⁄„r⁄„°„≤ o⁄„r‹ ∂ „ 明
显低于正常组k Π s qsstl ∀各给药组与模型组无
显著差异 ∀表明药物对多巴胺的代谢无明显影响 ∀
表 u 各给药组对利血平小鼠脑内
多巴胺与其代谢产物比值的影响k ξ ? σl
组别 动物数 ⁄„r⁄’°„≤ ⁄„r‹ ∂ „
正常 ts t qyx ? s qwwtl ws qvw ? ty qxxtl
模型 { s qt{ ? s qsy x qts ? t q|y
美多巴 ts s quw ? s qtz v qts ? u qtx
首茸方 { s qt{ ? s qs| x qw{ ? v qy|
首茸方 n 美多巴 ts s qs| ? s qsx t qzz ? s q{t
注 }与模型组比较 tl Π s qsst
3 讨论
临床上使用利血平治疗高血压和精神病时常出
现一些与震颤性麻痹相似的症状 ∀动物实验中用利
血平造小鼠 °⁄模型 o不仅可使小鼠产生如上所述的
一系列症状 o而且组织学检查可见大脑皮质和基底
节有神经细胞变性 o其改变与死于震颤性麻痹的患
者的神经系统改变一致≈u  ∀本实验用皮下注射利血
平制造小鼠 °⁄模型 o测定其脑内 ⁄„ 的含量比正常
组小鼠明显下降k Π s qsstl o而帕金森病主要的病
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理改变是中枢神经递质 ⁄„ 含量减少 ∀因此 o本实
验中皮下注射利血平的模型是成功的 ∀ ⁄’°„≤ 和
‹ ∂ „ 是 ⁄„ 的代谢产物 o本实验结果显示模型组
⁄„r⁄’°„≤ 和 ⁄„r‹ ∂ „ 均较正常组明显降低k Π
s qsstl o提示 °⁄模型脑内 ⁄„ 神经元对 ⁄„ 的代谢
率加快≈v  ∀
本实验给 °⁄小鼠灌胃美多巴后 o其脑内 ⁄„ 的
水平明显高于模型组 ∀可表明美多巴有外源性补充
脑内 ⁄„ o治疗帕金森病的作用≈w  ∀但美多巴并不能
使 °⁄小鼠脑内的 ⁄„ 的含量恢复到正常水平 ∀
单独应用首茸方对 °⁄小鼠脑内 ⁄„ 水平无显
著影响 o因此推测首茸方无促进 ⁄„ 的合成和释放
作用 o不能完全替代西药用于 °⁄的治疗 ∀
首茸方 n美多巴组小鼠脑内 ⁄„ 水平较模型组
显著提高 o并且较美多巴组明显增高 o可见首茸方可
以协同美多巴治疗 °⁄o提高美多巴的疗效 ∀此结果
与临床首茸方的应用疗效是一致的 ∀此外 o根据实
验结果还可推测 o欲达到相同的治疗效果 o首茸方和
美多巴合用可以减少美多巴的用量 o从而减轻美多
巴的不良反应 ∀
据近年研究认为 2⁄’°„ 治疗可通过自身氧化
产生氧自由基促进氧化增强 o加速 °⁄患者神经元变
性≈v  o这可能也是 2⁄’°„ 长期治疗 °⁄会导致失
效和产生一些副作用的原因 ∀经现代药理研究发现
首茸方的主药何首乌和鹿茸都具有延缓衰老 !抗氧
化 !抑制脑内单胺氧化酶2…等作用 o何首乌还能促进
细胞代谢 !防止纹状体中间神经元数量减少 !提高 ⁄u
受体水平≈x  ∀故在本实验中首茸方增加西药美多巴
对脑内 ⁄„ 水平的升高 o在临床可协同 2⁄’°„ 治
疗 °⁄可能与其上述的药理作用有关 o其作用机理是
否与其神经保护性作用有关 o尚待进一步研究 ∀
≈参考文献 
≈t  李成文 o李增富 q中医治疗帕金森病现状与展望 q湖南中医学
院学报 ot||{ ot{ktl }yz q
≈u  许延康译 q震颤性麻痹一些征候的实验模型 q国外医学参考资
料#内科分册 ot|zw okul }{y q
≈v  ¨ ±±¨ µ° o’ ¤¯±²º ≤ • q ’¬¬§¤·¬√¨≥·µ¨¶¶¤±§·«¨ °¤·«²ª¨ ±¨ ¶¬¶²©
°¤µ®¬±¶²±. ¶⁄¬¶¨¤¶¨ q ‘¨ ∏µ²¯²ª¼ ot||y owz k ¶∏³³¯ vl }tyt q
≈w  江明性 q药理学 q第 w版 q北京 }人民卫生出版社 ot||{ qtsy q
≈x  和冠生 o刘 理 o彭培国 q何首乌对老年大鼠纹状体神经细胞
⁄u 受体的影响 q中国老年医学杂志 ot||y otxkul }{s q
Τηε Εφφεχτ οφ Σηουρονγ Χοµ πουνδ Φορµ υλα ον Λεϖελσ οφ ∆οπαµινε ανδ Ιτσ
Μεταβολιτεσιν Βραιν οφ Παρκινσον. σ ∆ισεασε ΜιχεΙνδυχεδ βψ Ρεσερπινε
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º µ¨¨ §¨·¨µ°¬±¨ §q Ρεσυλτ : ¤§²³¤µ¦²∏¯§¬±¦µ¨¤¶¨ ·«¨ ¯¨ √¨¯¶²© ⁄„ ¬± ¥µ¤¬± ²©°⁄ °¬¦¨ q׫¨ ©¨©¨ ¦·²© °¤§²³¤µ·²ª¨·«¨µº¬·«≥²∏µ²±ª
¦²°³²∏±§©²µ°∏¯¤ º¤¶¥¨··¨µ·«¤± ·«¤·²© °¤§²³¤µk Π s qsstl q Χονχλυσιον : ≥«²∏µ²±ª¦²°³²∏±§©²µ°∏¯¤·²ª¨·«¨µº¬·« °¤§²³¤µ
«¤¶¶¼±¨ µª¬¦ ©¨©¨ ¦·²±¬±¦µ¨¤¶¨ ²© ⁄„ ¯¨ √¨¯ ¬± ¥µ¤¬± ¤±§¦¤± µ¨§∏¦¨ ¦¯¬±¬¦§²¶¨ ²© °¤§²³¤µ¶²·«¤·¶¬§¨ ©¨©¨ ¦·²© °¤§²³¤µ¦¤± ¥¨ §¨ 2
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[ Κεψ ωορδσ] ¶«²∏µ²±ª¦²°³²∏±§©²µ°∏¯¤~°¤µ®¬±¶²±. ¶§¬¶¨¤¶¨ ~§²³¤°¬±¨ ~«¬ª«³µ¨¶¶∏µ¨ ¬¯´∏¬§¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¼ º¬·«¨¯ ¦¨·µ²2
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≈责任编辑 方文贤 
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