全 文 ：pt的培养基中 o诱导并培养甘草的愈伤组织 o在 tx
§左右进行继代培养 ∀
≈参考文献 
≈t  肖培根 1 新编中药志 1 第一卷 1 北京 }化学工业出版社 ousst1
ux|1
≈u  魏胜利 o王全文 o王 海 1 我国中西部地区甘草资源及其可持
续利用的研究 1 中国中药杂志 oussv ou{kvl }usu1
≈v  王玉庆 o朱 玫 1 我国甘草资源调查与分析 1 山西农业大学
学报k自然科学版l oussu ouukwl }vyy1
≈w  白金贵 o黄建民 o明光礼 1 甘草栽培技术 1 中国种业 oussv o
tu }x|1
≈x  宋世明 o王斌银 1 甘草栽培 1 农民科技培训 oussv otu }uv1
≈y  Š • •²²·o≥ ≥¤°¤±·¤µ¤¼o° ⁄¤¶1 Ιν ϖιτρο °¤±¬³∏¯¤·¬²± ¤±§³µ²³¤ª¤2
·¬²± ²© °¨ §¬¦¬±¤¯ ³¯¤±·1 Βιοτεχηνολ Αδϖ, usss ot{ }|t1
≈z  梁玉玲 o管延英 o阳 丽 o等 1 胀果甘草愈伤组织培养及甘草
酸含量分析 1 河北大学学报 ousss ouskwl }vyx1
≈{  Ž²√¤¯ ±¨®² ° Š o „±·²±¬∏® ∂ ° o ¤¯¬∏·¤ ≥ ≥1 ≥ ¦¨²±§¤µ¼ ° ·¨¤¥²¯¬·¨¶
³µ²§∏¦·¬²±©µ²°·µ¤±¶©²µ° §¨¦¨¯¯ ¶¨²© Γλψχψρρηιζα γλαβρα ¤±§³¨·¨±·¬¯¯¤
¤¥¯¥¤ ¤¶ ¤ ³µ²§∏¦¨±·¶ ²© µ¤§¬²³µ²·¨¦·¬√¨ ¦²°³²∏±§¶1 Υκραιµιχα
βιοογρανιχα Αχτα , ussu ot }ut1
≈|  裴雁曦 o郝建平 1 甘草的组织培养 1 内蒙古农业科技 ot||| o
v }ty1
≈责任编辑 张宁宁 
高效液相色谱法测定杜仲皮中绿原酸的含量
石少澜u o王祝举t o邵爱娟t o黄璐琦t 3
kt1 中国中医研究院 中药研究所 o北京 tsszss ~u1 河北农业大学 o河北 保定 sztsstl
≈收稿日期  ussw2ts2tv
≈通讯作者  3黄璐琦 oר¯ }kstsl{wswwvws oƒ¤¬}kstsl{wswwvws o
∞2°¤¬¯}«∏¤±ª¯∏´¬ƒ uyv1±¨ ·
杜仲为杜仲科杜仲属植物 Ευχοµ µια υλµοιδεσ
’¯ ¬√1 o是我国特有的经济树种 o国家二级保护植物 ∀
传统以皮入药 o味甘 !性温 o归肝 !肾经 o具有补肝肾 !
强筋骨 !安胎的功效≈t  o是一种名贵滋补药材 o也是
我国传统的出口创汇商品之一 ∀杜仲皮含有木脂素
类 !环烯醚萜类 !苯丙素类 !多糖等多种活性成分≈u  ∀
绿原酸属苯丙素类化合物 o具有抗菌消炎作用≈v  o是
杜仲皮中主要有效成分之一 ∀为了考察其与产地 !
年龄 !树皮变异类型k光皮型 !浅裂型 !深裂型l之间
的关系 o本研究建立了反相高效液相色谱法 o对不同
产地 !不同树龄 !不同变异类型 !炮制与非炮制等杜
仲皮中的绿原酸含量进行分析 o为药材的质量评价
提供了依据 ∀
1 仪器与试剂
• ¤·¨µ¶„¯ ¬¯¤±¦¨ 高效液相色谱仪k • ¤·¨µ¶yss ¦²±2
·µ²¯¯¨µo• ¤·¨µ¶uw{z单波长紫外检测器 o¬¯¯ ±¨±¬∏°vu
色谱工作站l ~ …Œ≥uts≥型 trt万电子分析天平k德
国¶¤µ·²µ¬∏¶公司l ~≤÷2uxs超声波清洗器k北京医疗
设备二厂l ∀甲醇 !乙腈为一级色谱醇 ~醋酸为优级
纯 ~绿原酸对照品购自中国药品生物制品检定所 o批
号为 xv2ussttt ~实验药材分别购自四川成都 !湖北
郧西黑山林场 !湖北巴东三峡林场 !湖南慈利江垭林
场 !陕西略阳金家河林场等 o经中国中医研究院中药
研究所黄璐琦研究员鉴定为杜仲科植物杜仲
Ε1 υλµοιδεσ的树皮 ∀
2 方法与结果
211 色谱条件 Žµ²°¤¶¬¯2≤t{色谱柱kw1y °° ≅ uxs
°° ox1s Λ°l ~流动相甲醇2乙腈2冰醋酸2水kwΒvΒuΒ
|tl ~检测波长 vux ±° ~流速 t1s °#°¬±pt ∀柱温 ux
ε ∀在该色谱条件下 o样品中绿原酸峰与其他非被
测成分峰能够达到基线分离 o对照品与样品的色谱
图见图 t ∀
图 t 对照品及样品色谱图
„1对照品 ~…1供试品 ~t1 绿原酸
212 对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品
t1ux °ªo置于 ts °量瓶中 o加甲醇溶解并稀释至
#xtz#
第 vs卷第 |期
ussx年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vs oŒ¶¶∏¨ |
¤¼oussx
刻度 o即得 s1tux °ª#°pt的贮备液 o准确吸取 u1x
°的贮备液置另一 ts °量瓶中 o再用甲醇稀释至
刻度 o摇匀 o即得含绿原酸 s1svtu °ª#°pt的对照
品溶液 ∀
213 供试品溶液的制备 取干燥的杜仲树皮 o用碾
碎机碾成絮状 o混合均匀 ∀精密称定 t ªo置 tss °
锥形瓶中 o准确加入 xs h甲醇 xs °o称重后超声提
取 ys °¬±o取出 o放至室温后再称重 o补足挥发的溶
剂重量 o摇匀 o过滤 o取续滤液 ux °oxs ε 以下减压
蒸干 o用甲醇溶解 o定容到 x °量瓶中 o用微孔滤膜
过滤即为供试品溶液 ∀
214 线性关系考察 分别精密吸取 s1svt u °ª#
°pt的对照品溶液 t ov ox oz o| ott otv otx ˏo在所选
择的色谱条件下进样分析 ∀以进样量kΛªl为横坐
标 o峰面积为纵坐标 o绘制标准曲线 o回归方程为 Ψ
€ u1z{{ y ≅ tsy Ξ n t| sv| oρ€ s1||| { ∀结果绿原酸
在 s1svt u ∗ s1wy{ { Λª线性关系良好 ∀
215 稳定性试验 对同一供试品溶液分别于制备
后 s ou o{ ouw ow{ «测定绿原酸峰面积 ∀结果 • ≥⁄
t1u h o表明样品在 w{ «内具有良好的稳定性 ∀
216 精密度试验 精密吸取对照品溶液 ts ˏo连
续进样 x次 o测定峰面积值 o• ≥⁄s1ty h ∀
217 重复性实验 准确称取同一样品共 x份 o每
份 t ªo照/供试品溶液制备0项下操作 o测定 o测得其
平均含量为 s1stv h o• ≥⁄t1t h o表明方法重复性良
好 ∀
218 加样回收率试验 精密称取已知含量的样品
x份 o每份 t ªo加对照品适量 o按/供试品溶液制备0
项下操作 o测定 o计算回收率 o结果见表 t ∀
表 t 绿原酸加样回收率
样品含量rΛª 测得量rΛª 回收率r h 平均值r h • ≥⁄r h
||1x{ t|z1x{ |x1s
tst1{w uss1vv |x1x
{y1x| t|t1|| tsu1u |z1w v1s
{z1x{ t{y1x| |y1s
tss1u| ust1w{ |{1t
注 }加入量均为 tsv1tu Λª
219 样品含量测定 根据上述条件对 tw份样品
进行含量测定 ∀结果见表 u ∀绿原酸的含量随树皮
类型的不同有较大差异 ∀其中光皮型含量最高 o浅
裂型次之 o深裂型最低 ∀光皮型与深裂型能相差几
十倍 ∀而与树龄 !地域关系不大 ∀炮制后的杜仲皮
仍含有绿原酸 ∀枝皮中的绿原酸含量很低 ∀
表 u 样品含量
编号 采样点 树龄r年 树皮类型 含量r h
t 四 川 成 都 tx 浅裂 s1tuz
u 成都 ux 深裂 s1sv|
v 成都 vs 深裂 s1syt
w 大邑 us 光皮 s1wuz
x 广元 us 浅裂 s1uw{
y 湖 北 武 汉 us 深裂 s1tzy
z 陨西 us 浅裂 s1u|w
{ 巴东 us 深裂 s1stv
| 巴东 炮制后 p s1suy
ts 巴东 枝皮 p s1stz
tt 陕西白石沟 us 浅裂 s1ut{
tu 略阳 us 深裂 s1twz
tv 金家河 us 浅裂 s1u{s
tw 贵 州 遵 义 us 浅裂 s1vyt
3 讨论
311 实验采用 ‹°≤ 测定杜仲树皮中绿原酸的含
量 o结果准确 o精密度 o重复性好 o平均加样回收率为
|z1w h o• ≥⁄v1s h ∀
312 对流动相进行了比较 o曾用了不同比例的甲
醇2水 o甲醇2醋酸2水 o甲醇2异丙醇2醋酸2水 o乙腈2醋
酸2水 o甲醇2乙腈2醋酸2水等系统 o结果以甲醇2乙腈2
冰醋酸2水kwΒvΒuΒ|tl条件较好 o保留时间适中 o绿
原酸能与非被测成分基线分离 ∀
313 对提取方法进行考察时 o比较了甲醇的含量
及提取时间 ∀以水 !us h甲醇 !xs h甲醇 !{s h甲醇 !
甲醇为溶剂 o超声提取 ys °¬±o结果以 xs h甲醇为溶
剂时 o色谱峰分离效果最佳 o而且提取完全 ~比较
tx ovs owx oys o|s °¬±的超声提取效果 o结果 ys °¬±
可提取完全 ∀
≈参考文献 
≈t  中国药典 1 一部 1 usss1 tvt1
≈u  国家中医药管理局中华本草编委会 1 中华本草 1上册 1 上海 }
上海科学技术出版社 ot||y1 u{y1
≈v  杜红岩 1 杜仲活性成分与药理研究的新进展 1 经济林研究 o
ussv outkul }x{1
≈w  王嗣岑 o贺浪冲 o高锦明 o等 1 • °2‹°≤法同时分离测定杜仲叶
中 v种有效成分 1 西北药学杂志 ousst otyktl }tx1
≈x  董娟娥 o马柏林 o刘 丽 o等 1 超声波提取杜仲叶中有效成分
工艺研究 1 西北林学院学报 oussv ot{kvl }yy1
≈y  张康健 o王 蓝 o张凤云 o等 1 杜仲叶与皮有效成分含量的比
较研究 1 西北林学院学报 ot||y ottkul }wu1
≈z  熊佐章 1 ‹°≤法测定银翘解毒颗粒中绿原酸的含量 1 中国药
师 oussv oyktsl }yvy1
≈责任编辑 张宁宁 
#ytz#
第 vs卷第 |期
ussx年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vs oŒ¶¶∏¨ |
¤¼oussx