全 文 ：#栽培#
浙贝母种子两种低温解除休眠过程中
酯酶同工酶的电泳分析
高文远 李志亮 肖培根
k中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所 北京 tsss|wl
摘要 为了探讨浙贝母种子低温解除休眠的生理机制 o用电泳手段分析了浙贝母种子在 { ∗ ts ε
和 v ∗ x ε 两种低温下解除休眠过程中酯酶同工酶的电泳图谱 ∀结果表明两种低温条件下酯酶同工酶
的变化规律相似 ∀随着低温处理 o一些原有谱带的颜色加深 o并有新谱带的出现 ∀这些结果说明两种低
温下解除休眠的过程可能存在着相似的代谢机制 ∀
关键词 浙贝母 种子 休眠 酯酶同工酶
浙贝母 Φριτιλλαρια τηυνβεργιι ¬ªq是一种
常用中药 o其鳞茎具有止咳化痰等功效 ∀浙贝
母的生产栽培上存在着无性繁殖系数低 !有性
繁殖时间长的问题 ∀我们的研究表明 o一定时
期的低温可以解除浙贝母种子的休眠 o缩短有
性繁殖时间 ∀还发现 { ∗ ts ε 的低温 xs天左
右可以解除浙贝母种子的休眠 ~而 v ∗ x ε 的低
温解除休眠则需要 {s天左右的时间≈t ∀为探
讨浙贝母种子休眠解除的生理机制 o给生产栽
培提供理论依据 o本文利用电泳手段分析浙贝
母种子在两种低温下解除休眠过程中酯酶同工
酶的变化 ∀
1 材料与方法
浙贝母的种子购于浙江省中药研究所 o为
当年采收的种子 ∀种子去杂后 o用蒸馏水浸
uw«o然后分别放在 { ∗ ts ε 和 v ∗ x ε 低温下处
理 ∀取样间隔为 ts§o取样后液氮固定 o于低温
冰箱中保存 o最后统一进行电泳分析 ∀
酯酶同工酶的电泳参照袁晓华等≈u 的方
法进行 ∀采用聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳 ∀分
离胶浓度 ts h o浓缩胶浓度 w h ∀稳流电泳 o电
流强度 us ∗ ws° ∀整个电泳过程需要 v1x«∀
染色液含 z h醋酸2Α2萘酯的丙酮溶液 s qx °¯ o
坚牢蓝 p 盐 tu qx°ªos qu°²¯r的 ×µ¬¶2≤¯
缓冲液 t °¯ o³z1t ou uv1w °¯ ∀样品的提取 }
精确称取 tª材料 o加入 s1t°²¯ro³{1x 的
×µ¬¶2≤¯缓冲液 w °¯ 及少许石英砂 o冰浴条件
下充分研磨 ow层纱布过滤 o滤液于 s ∗ w ε 下
{sssµr °¬±离心tx °¬± o取上清液与ts h甘油
tΒt混合 o加入少许溴酚蓝后点样 ∀
2 结果与分析
实验结果如图 t和图 u所示 ∀图 t为浙贝
母种子在 { ∗ ts ε 低温下解除休眠过程中酯酶
同工酶的电泳图谱 ∀可以看出 o休眠状态时 o浙
贝母种子的酯酶同工酶共由 |条谱带组成 ∀低
温处理 ts天后 o谱带条数没有增加 o只是 t条
谱带的颜色加深 ∀低温处理 us天后 o增加了 w
条谱带 o并有 v条谱带的颜色加深 ∀低温处理
vs天后 o谱带条数不变 ot条谱带的颜色加深 ∀
以后直到低温作用 xs天这段时期 o图谱保持稳
定 ∀在整个低温解除休眠过程中 o图谱中部的
x条深颜色谱带保持稳定 ∀
图 u为浙贝母种子在 v ∗ x ε 低温下解除
休眠过程中酯酶同工酶的电泳图谱 ∀可以看
出 ov ∗ x ε 低温下酯酶同工酶的图谱变化规律
与 { ∗ ts ε 低温下图谱的变化规律基本一致 o
只是谱带的变化时期有些不同 ∀v ∗ x ε 低温作
用 ts天后 o谱带条数未增 o但有 v条谱带的颜
#vvv# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 y期
色加深 ∀低温作用 us天后 o增加了 w条谱带 o
并有 t条谱带的颜色加深 ∀此后直至低温作用
ys天这段时期 o图谱保持稳定 ∀低温作用 zs ∗
{s天这段时期 o又有 t条谱带的颜色加深 ∀
图 t 浙贝母种子在 { ∗ ts ε 低温下解除休眠过程中
酯酶同工酶的电泳图谱
注 }s ots ous ovs , ,为低温时间k天 o图 u同l
图 u 浙贝母种子在 v ∗ x ε 低温下解除休眠过程中
酯酶同工酶的电泳图谱
3 讨论
两种低温下浙贝母种子酯酶同工酶的图谱
变化比较相似 o反映了其内在代谢变化比较相
似 ∀酯酶同工酶的变化或者是新谱带的增加 o
或者是原有谱带颜色的加深 ∀这说明 °
的翻译有所增加 o进而导致了种子内在生理代
谢的活跃 o到一定程度时 o休眠被解除 ∀
酯酶在植物体内广泛存在 o它可能参与酯
代谢 o与内膜系统的发育有关≈v o也参与若干
酶类的修饰 !激活或钝化≈w ∀浙贝母种子低温
解除休眠的过程是一个复杂的代谢过程≈x ∀
由于低温的持续作用 o会导致一系列的激素和
酶的变化 o而这些变化都离不开细胞内膜系统
k内质网等l的参与 o从而都可能直接或间接的
与酯酶的代谢有关 ∀酯酶合成的增加则表明了
细胞内在代谢体系的活跃 o这种活跃的最终结
果便是种子休眠的解除 ∀
4 参考文献
t 李志亮等 1 中草药 ot|{x ~tyktl }tz
u 袁晓华等 1 植物生理生化实验 1 北京 }高等教育出版社 o
t|{x }tv{
v ≥«¤±±²± ·¨¤¯ q ±± √¨ °¯ ¤±·°«¼¶¬²¯ ot|zy ~t| }t{z
w ≥¤±§¨µ¶× ·¨¤¯ q¬³¬§¶ot|zx ~ts }xs
x 高文远等 1 中国药学杂志 ot||x ~vsk增刊l }{s
t||y ) sy ) tw收稿
儿茶引种栽培的研究
肖杰易 周正 余明安
k四川省中医药研究院药物种植研究所 南川 yw{ws{l
儿茶 Αχαχια χατεχηkql • ¬¯¯§别名黑儿
茶 o为豆科落叶乔木 o以树干心材的水浸干膏入
药 ∀有止血 !镇痛 !消食化痰等功能 ∀产于亚洲
南部至非洲东部 o我国主产云南西双版纳地区 o
过去产品主要依赖国外进口 ∀四川从云南引种
到渡口市米易县的安宁河谷地带试种 o经多年
研究获得成功 o并具一定规模 o现介绍如下 ∀
1 植物特征
株高 y ∗ tv°树皮棕色或绿褐色 o小枝纤
细棕色或绿褐色 o有刺 o叶为偶数二回羽状复
叶 o互生 o羽片 ts ∗ us对 o长 u ∗ w¦° o每羽片有
小叶 us ∗ xs对 o小叶细长矩形 o穗状花序腋生 o
花蝶形 o白黄色 o荚果扁而薄 o成熟时褐色 o光
滑 ∀
#wvv# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 y期