全 文 ：Στυδιεσ ον Χηεµιχαλ Χονστιτυεντσιν τηε Λεαφ οφ Λιγυστρυµ δελαϖαψανυµ
°∏2·¤¬o ∞ ÷¬±ª2³¬±ªo ≠ ¬2¼²±ª
k±¶·¬·∏·¨ ²© ¤·¬²±¤¯ §¨¬¦¬±¨ o ¦¤§¨ °¼ ²© ×µ¤§¬·¬²±¤¯ §¨¬¦¬±¨ ²© ∏¬½«²∏o ∏¬¼¤±ªxxsssu o ∏¬½«²∏o≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶·∏§¼ ·«¨ ¦«¨ °¬¦¤¯ ¦²±¶·¬·∏¨ ±·¶¬± ·«¨ ¯¨ ¤© ²© ¬ª∏¶·µ∏° §¨ ¤¯√¤¼¤±∏° ¤µ¬²·q Μετηοδ : × «¨ ¦²±2
¶·¬·∏¨ ±·¶º µ¨¨ ¬¶²¯¤·¨§ º¬·«¦²¯∏°± ¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¬¨¶¤±§·«¨ ¶·µ∏¦·∏µ¨¶ º µ¨¨ ¬§¨ ±·¬©¬¨§ ¥¼ ≥ o o ∂ ¤±§ q Ρεσυλτ : ƒ²∏µ
¦²°³²∏±§¶º µ¨¨ ¬¶²¯¤·¨§¤±§¬§¨ ±·¬©¬¨§¤¶Β2¶¬·²¶·¨µ²¯ o²¯ ¤¨±¬¦¤¦¬§ouΑ2«¼§µ²¬¼∏µ¶²¯¬¦¤¦¬§o¤±§¤¦·¨²¶¬§¨ qΧονχλυσιον : ¯¯ ·«¨ ¦²°2
³²∏±§¶º µ¨¨ ¬¶²¯¤·¨§©µ²° ·«¨ ³¯¤±·©²µ·«¨ ©¬µ¶··¬°¨q
[ Κεψ ωορδσ] Λιγυστρυ µ ; Λιγυστρυ µ δελαϖαψανυ µ ~≤«¨ °¬¦¤¯ ¦²±¶·¬·∏¨ ±·¶
≈责任编辑 李 禾
茯苓中三萜酸类成分 °≤ 指纹图谱的初步研究
丁 岗t o王振中u o章晨峰u o盛龙生t
kt q中国药科大学 分析测试中心 o江苏 南京 utsss| ~
u q江苏康缘药业股份有限公司 药物研究所 o江苏 连云港 uuusstl
≈摘要 目的 }建立茯苓中三萜酸类成分 °≤ 指纹图谱的测试方法 ∀方法 }利用 °2°≤ !线性梯度洗脱筛
选最佳测试条件 o并应用 ≤r ≥技术指认指纹图谱中的主要色谱峰 ∀结果 }获得了较为理想的茯苓三萜酸类成分
°≤ 指纹图谱 o其中 |个色谱峰被指认 ∀结论 }用文中的最佳条件可较全面地反映茯苓中的三萜酸类成分 o为茯
苓药材的质量控制提供有效手段 ∀
≈关键词 茯苓 ~三萜酸 ~°≤ 指纹图谱
≈中图分类号 u{w qt ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukussults2szxy2sv
茯苓为多孔菌科真菌 Πορια χοχοσk≥¦«º ql • ²¯©
的菌核 o是一味常用的利水渗湿 !健脾和胃 !宁心安
神中药 o主要含有多糖 !三萜等有效成分≈t ∗ v ∀本文
对茯苓三萜酸类成分进行了 °≤ 指纹图谱研究 ∀
1 仪器与试药
ª¬¯¨ ±·ttss液相色谱仪 o⁄⁄及 ∞≥r ≥⁄检
测器 o含在线真空脱气机 !二元梯度泵 !自动进样器 !
柱温箱 ∀色谱和质谱数据的采集与处理由 ª¬¯¨ ±·
化学工作站完成 ∀
试剂 }甲醇 !磷酸 !甲酸为分析纯 o乙腈为美国
× §¨¬¤公司产品k色谱纯l o水为超纯水 ∀
≈收稿日期 ussu2st2u{
≈基金项目 国家重点科技攻关项目k||2|u|2su2syl
≈通讯作者 电话 }ksuxlvuztuyz ∞2°¤¬¯}§¬±ªªusss °¤¬¯q
¦«¬±¤q¦²°
药材 }自安徽亳州药材市场购得 v个样品 o经鉴定均
为多孔菌科真菌茯苓 Π. χοχοσ的干燥菌核 ∀
2 实验方法
2 q1 茯苓供试溶液的制备 称取 us ª药材 o粉碎 o
过 ws目筛 o取 t ª粉末 o加甲醇 ts °回流 vs °¬±
k沸腾开始计时l o放冷 o离心 o上清液经 s qwx Λ°滤
膜滤过 o取续滤液即得 ∀
2 q2 色谱分析条件 色谱柱 }¯¯·¬°¤≤t{ oxΛ° o
z qx °° ≅ w qy °°k保护柱l n w qy °° ≅ uxs °°k分
析柱l ∀梯度滞后体积为 t qw °o¯¯·¬°¤保护柱 n
分析柱死体积为 v °∀柱温 xs ε ∀流动相 }乙腈2
水2磷酸 o为 yssΒwssΒt o
为 |xsΒxsΒt ∀首先以
洗脱 ux °¬±o然后开始以线性梯度方式经 ws °¬±到
达
o再以
洗脱 ts °¬±∀流速 t °#°¬±p t ∀检测
波长为 uts ouwu ±° ∀进样 x Λo记录时间 zx °¬±∀
2 q3 ≤r ≥条件 流动相参见 2 q2 项 o其中 s qt h
#yxz#
第 uz卷第 ts期
ussu年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²qts
¦·²¥¨µqoussu
v°w改为 t h甲酸 o检测波长 uxw ±° o进样 us Λo
其他条件同 2 q2 项 ∀柱后分流 }s qw °#°¬±p t进质
谱仪 ∀质谱条件 }扫描范围 tss ∗ t sss o干燥气流速
| #°¬±p t o干燥气温度 vxs ε o雾化气压 vx °¤o传
输电压 zs ∂ o毛细管电压 }正离子为 w sss ∂ o负离
子为 v xss ∂ ∀
3 结果与讨论
3 q1 药材取样方法 为使取样更具代表性 o采用
2 q1 项下方法 ∀
3 q2 药材提取方法 茯苓三萜紫外吸收较弱 o样品
溶液需要较高的浓度 ∀经研究采用 2 q1 项下方法提
取 vs °¬±即可达到平衡 o提取液不需要浓缩即可直
接进样 ∀
3 q3 梯度滞后体积与柱死体积 }给出这些参数以便
其他实验室重复本文的结果 ∀
3 q4 检测波长的确定 通过对 °≤2 ∂ v维图
谱的分析 o参考文献≈v ow o确定检测波长为 uts o
uwu ±° o在 uwu ±°处信号响应较强 o在 uts ±°处信
号响应较弱 ∀
3 q5 最佳色谱条件的筛选 有关茯苓三萜酸类成
分的 °≤ 分析已有报道≈w ox o但这些文献中极性
较大的三萜酸分离度均不理想 ∀经研究 o茯苓中多
数三萜在 2 q2 项条件下可获得较理想的分离效果
k见图 tl ∀t|x °¬±色谱记录图显示 zs °¬±后无有
意义的色谱峰出现 o因此确定记录 zs °¬±∀空白试
验除基线稍有漂移外 o无杂质峰干扰 ∀方法学考察
表明 o样品溶液的稳定性kw{ «l !仪器精密度 !方法
重复性均符合/中药注射剂指纹图谱研究的技术要
求0的相关规定 ∀
3 q6 主要色谱峰的指认 在 2 q3 项条件下 o茯苓供
试品对质谱的正 !负离子检测都有较好的信号响应 o
参考文献≈w ox o我们指认了 |个色谱峰k见图 ul o其
中 t号峰为去氢土莫酸k§¨ «¼§µ²·∏°∏¯²¶¬¦¤¦¬§o分子
量为 w{wl ou号峰为土莫酸k·∏°∏¯²¶¬¦¤¦¬§o分子量
为 w{yl ov号峰为猪苓酸 ≤k³²¯¼³²µ¨±¬¦¤¦¬§ ≤ o分子
量为 w{ul ow号峰为 v2表去氢土莫酸kv2 ³¨¬2§¨ «¼§µ²2
·∏°∏¯²¶¬¦¤¦¬§o分子量为 w{wl ox号峰为 vΒ2乙酰氧基
2tyΑ2羟基羊毛甾2{ ouw2二烯2ut2酸kv2 Ο2¤¦¨·¼¯2tyΑ2
«¼§µ²¬¼·µ¤° ·¨¨±²¯¬¦¤¦¬§o分子量为 xtwl oy 号峰为
去氢茯苓酸k§¨ «¼§µ²³¤¦«¼°¬¦¤¦¬§o分子量为 xuyl oz
号峰为茯苓酸k³¤¦«¼°¬¦¤¦¬§o分子量为 xu{l o{号峰
为 vΒ2羟基2羊毛甾2z o|kttl ouw2三烯2ut2酸k§¨ «¼2
§µ²·µ¤° ·¨¨±²¯¬¦¤¦¬§o分子量为 wxwl o|号峰为 vΒ2羟
基2羊毛甾2{ ouw2二烯2ut2酸k·µ¤° ·¨¨±²¯¬¦¤¦¬§o分子
量为 wxyl ∀
3 q7 对 ¯¯·¬°¤色谱柱的初步考察 我们对两根
¯¯·¬°¤色谱柱的重现性k²·²quztv o ³¤µ·²q
{{sxy o¶¨µ¬¤¯ ²qsstttwvs qt和 ²·²quztv o³¤µ·
²q{{sxy o¶¨µ¬¤¯ ²qsstus{|t qtl进行了初步考
察 o结果同一样品在两根 ¯¯·¬°¤色谱柱上的色谱行
为有较好的一致性 ∀
3 q8 色谱指纹图谱 茯苓分布广泛 o不同来源的茯
苓中三萜成分差异较大≈v ow ∀从我们收集的 v个样
品来看 o尽管各样品中 t ou ov ow oy oz号峰相对峰高
互有差异 o但均较强 o这与文献≈w 基本一致 ~图 t与
文献≈w 中河南信阳产茯苓很相似 ~与图 t 样品相
比 o另外 u个样品中 ox o{ o|号峰则有不同程度的显
著降低 o差异明显 ∀因此茯苓三萜指纹图谱的制定
尚需进行大量样本分析和药效比较研究 ∀
3 q9 等梯度洗脱的可行性 我们曾研究过等梯度
洗脱的可行性 o结果流动相为乙腈2水2磷酸kzssΒ
vssΒt o其他条件同 2 q2 项l时 o能兼顾茯苓中多数
三萜成分 o但分离度 !峰形等均不如梯度洗脱理想 ∀
图 t 茯苓三萜酸在 uts ±°k¤l和 uwu ±°k¥l处的
°≤ 指纹图谱k色谱条件见 2 q2 项l
t q去氢土莫酸 u q土莫酸 v q猪苓酸 ≤ w qv2表去氢土莫酸
x qvΒ2乙酰氧基2tyΑ2羟基羊毛甾2{ ouw2二烯2ut2酸 y q去氢茯苓酸
z q茯苓酸 { qvΒ2羟基2羊毛甾2z o|kttl ouw2三烯2ut2酸
| qvΒ2羟基2羊毛甾2{ ouw2二烯2ut2酸k图 u同l
#zxz#
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²qts
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图 u 茯苓三萜酸 ∞≥k n l ≥ ×≤ 指纹图谱
k色谱条件见 2 q3 项l
≈参考文献
≈t 国家中医药管理局5中华本草6编委会 q中华本草 q上册 q上海 }
上海科学技术出版社 ot||| qxxw q
≈u 仲兆金 o刘 浚 q茯苓有效成分三萜的研究进展 q中成药 ousst }
uvktl }x{ q
≈v 仲兆金 o许先栋 q茯苓三萜化学成分及其光谱特征研究进展 q中
国药物化学杂志 ot||z ozktl }zt q
≈w 王慕邹 o陈毓亨 o相乐和彦 o等 q常用中草药高效液相色谱分
析 q北京 }科学出版社 ot||| quwx q
≈x פ¬× o ®¤«²µ¬ q ±¤¯¼·¬¦¤¯ ≥·∏§¬¨¶²± Πορια χοχοσ k ´ l ׫¨
±∏¤±·¬·¤·¬√¨ ±¤¯¼¶¬¶²© ⁄¨ «¼§µ²³¤¦«¼°¬¦ ¦¬§q生 学 o
t||v owzkul }uts q
Στυδψ ον ΗΠΛΧ Φινγερπριντ οφ τηε Τριτερπενε Αχιδσιν Πορια χοχοσ
⁄ ¤±ªt o • «¨ ±2½«²±ªu o ≤«¨ ±2©¨ ±ªu o≥∞ ²±ª2¶«¨ ±ªt
kt q≤ ±¨·¨µ©²µ±¶·µ∏° ±¨·¤¯ ±¤¯¼¶¬¶o≤«¬±¤ °«¤µ°¤¦¨∏·¬¦¤¯ ±¬√ µ¨¶¬·¼ o ¤±¬±ª utsss| o¬¤±ª¶∏o≤«¬±¤~
u q°«¤µ°¤¦¨∏·¬¦¤¯ ±¶·¬·∏·¨ o¬¤±ª¶∏¤±¬²± °«¤µ°¤¦¨∏·¬¦¤¯ ≤²qo·§qo¬¤±¼∏±ª¤±ª uuusst o¬¤±ª¶∏o≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶¨·¤¥¯¬¶« ¤ ° ·¨«²§©²µ °≤ ©¬±ª¨µ³µ¬±·§¨·¨µ°¬±¤·¬²± ²© ·«¨ ·µ¬·¨µ³¨ ±¨ ¤¦¬§¶¬± Πορια χοχοσq
Μετηοδ : °2°≤ o¯¬±¨ ¤µªµ¤§¬¨±·¨ ∏¯·¬²± ¤±§≤r ≥ o ·¨¦qº µ¨¨ ∏¶¨§·²²³·¬°¬½¨ ·«¨ ©¬±ª¨µ³µ¬±·§¨·¨µ°¬±¤·¬²± ° ·¨«²§o¤±§¬§¨ ±2
·¬©¼·«¨ °¤¬± ³¨ ¤®¶¬±·«¨ °≤ ©¬±ª¨µ³µ¬±·qΡεσυλτ : ³µ¨©¨µ¤¥¯¨ ° ·¨«²§©²µ°≤ ©¬±ª¨µ³µ¬±·§¨·¨µ°¬±¤·¬²± ²©·«¨ ·µ¬·¨µ³¨ ±¨ ¤¦¬§¶
¬± Π. χοχοσ º¤¶ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨ §o¤±§| ³¨ ¤®¶¬±·«¨ °≤ ©¬±ª¨µ³µ¬±·º µ¨¨ ¬§¨ ±·¬©¬¨§qΧονχλυσιον : ª¨ ±¨ µ¤¯ ¤¦´∏¤¬±·¤±¦¨ ²©·«¨ ·µ¬·¨µ2
³¨ ±¨ ¤¦¬§¶¬± Π. χοχο󦤱 ¥¨ ²¥·¤¬±¨ §¥¼ ∏¶¬±ª·«¨ ³µ¨©¨µ¤¥¯¨ °≤ ©¬±ª¨µ³µ¬±·§¨·¨µ°¬±¤·¬²± ° ·¨«²§o º«¬¦«¬¶∏¶¨©∏¯ ©²µ ∏´¤¯¬·¼ 2¨
√¤¯∏¤·¬²± ²©·«¨ ¦µ∏§§µ∏ª²© Π. χοχοσq
[ Κεψ ωορδσ] Πορια χοχοσ~·µ¬·¨µ³¨ ±¨ ¤¦¬§¶~ °≤ ©¬±ª¨µ³µ¬±·
≈责任编辑 李 禾
高效液相色谱法测定地锦草中槲皮素的含量
邢俊波 o水彩虹 o刘 云
k总后勤部卫生部药品仪器检验所中药室 o北京 tsssztl
≈摘要 目的 }建立地锦草中槲皮素高效液相色谱测定方法 ∀方法 }色谱柱 µ²°¤¶¬¯2≤t{kw qy °° ≅ uxs °° ox
Λ°l o流动相为乙腈2s qw h磷酸kwsΒysl o检测波长 vzs ±° o流速 t qs °# °¬±p t ∀结果 }槲皮素在 s qsvyw ∗ s qtuzw
Λª线性关系良好kρ s q||||l o回收率 tss qz h o ≥⁄ u qx h ∀结论 }为地锦草及其制剂提供了分析方法 o该法简
便 o结果可靠 ∀
≈关键词 地锦草 ~槲皮素 ~含量测定 ~高效液相色谱法
≈中图分类号 u{w qt ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukussults2szx{2sv
≈收稿日期 ussu2sw2sv
≈通讯作者 电话 }kstslyy|w|s{t ∞2°¤¬¯}∏±¥²¬¬±ª ¶²«∏q¦²°
#{xz#
第 uz卷第 ts期
ussu年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²qts
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