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芦荟叶片过氧化物酶与可溶性蛋白质的研究



全 文 :#栽培#
芦荟叶片过氧化物酶与可溶性蛋白质的研究
高文远 肖培根
k中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所 北京 tsss|wl
摘要 用比色法测定了芦荟叶片不同部位的过氧化物酶活性与可溶性蛋白质的含量 ∀结果表明 o
最上部和较下部叶片的过氧化物酶活性较高 o由上到下叶片的蛋白质含量逐渐减少 ∀可溶性蛋白质的
电泳结果表明上部叶片的电泳谱带比下部叶片的多且颜色较深 ∀
关键词 芦荟 叶片 过氧化物酶 可溶性蛋白质
芦荟 Αλοϖε ϖερα qϖαρ . χηινενσισ k‹¤º ql
…¨ µª¨µ为百合科多年生肉质草本药用植物 o有
清热导积 !通便 !杀虫 !通经的功能 ∀近代研究
表明 o芦荟的提取物可用于抗肿瘤药物和广泛
用于化妆品 !护肤产品 ∀为了解芦荟的生长发
育习性 o本文对芦荟叶片不同部位的过氧化物
酶和蛋白质进行了研究 ∀
1 材料与方法
111 材料
芦荟取自本所温室 ∀对叶片自上而下取
样 o编号为 t ∗ x ot ∗ x各取样位置之间间隔约
x¦° ∀t号为最上部的叶子 ox号为最下部的叶
子 o取样部位均为叶子的中部 ∀
112 过氧化物酶的活性测定
取 t °¯ 提取液 o加入 v °¯ 反应混合液 o同时
启动秒表计时 o在 zxt2Š • 型分光光度计上
wzs±°处比色 ∀对照加入 s1t°²¯r的磷酸缓
冲液 v °¯ k³‹y1sl o反应混合液中含 s1t°²¯r
的磷酸缓冲液k³‹y1slxs °¯ o‹u ’u s1su{ °¯ 和
愈创木酚 s1st| °¯ ∀酶活性的大小以 ’⁄wzsr
°¬±#ª鲜重表示 ∀酶的提取 }称取叶片 tªo加入
³‹{1x的 s1t°²¯r×¬µ¶2‹≤¯缓冲液 x °¯ o于研
钵中加入少许石英砂后充分研磨 os ∗ w ε o
{sssµr°¬±条件下离心 tx°¬±o取得上清液备
用 ∀
113 可溶性蛋白质的含量测定
标准曲线采用 s ∗ tsssΛªr°¯ 牛血清白蛋
白溶液 ∀测定时 o吸取 s1t °¯ 提取液 o放入具塞
试管中 o加入 x °¯ 考马斯亮蓝 Šuxs试剂 o充分混
合 ou°¬±后于 zxt2Š • 型分光光度计上 x|x±°
处比色 ∀在标准曲线上查出并计算蛋白质含
量 ∀可溶性蛋白质的提取 }称取叶片 tªo加入
x °¯ 双蒸水 o于研钵中加入少许石英砂后充分
研磨 os ∗ w ε o{sssµr°¬±条件下离心 tx°¬±o取
其上清液备用 ∀
114 可溶性蛋白质的电泳
采用聚丙烯酰胺凝胶电泳 o分离胶浓度
ts h o浓缩胶浓度 w h o点样量 xsΛ¯ o电流 us ∗
ws°„ ∀染色采用 us h甲醇和 z h醋酸配制的
s1t h考马斯亮蓝 • uxs试剂 ∀脱色液为 us h甲
醇和 z h醋酸的水溶液 ∀
2 实验结果
211 各部位叶片的过氧化物酶活性
实验结果如图 t所示 ∀可见 o部位 t处叶
片的过氧化物酶活性较高 !部位 u处叶片的过
氧化物酶活性最低 o部位 u ∗ x叶片的过氧化物
酶活性逐渐升高 o最下部叶片的过氧化物酶活
性最高 ∀
212 各部位叶片的可溶性蛋白质含量
实验结果如图 u所示 ∀可见 o部位 t处叶
#vxy# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 tt期
片的可溶性蛋白质含量最高 o部位 x处叶片的
可溶性蛋白质含量最低 ∀自上而下 o叶片的可
溶性蛋白质含量逐渐减少 ∀
图 t 不同部位叶片的过氧化物酶活性
图 u 不同部位叶片的可溶性蛋白质含量
213 各部位叶片可溶性蛋白质的电泳结果
实验结果如图 v所示 o从图 v可见 o除个别
谱带外 o上部叶片的可溶性蛋白质电泳图谱谱
带较多 o颜色较深 ~而下部叶片的可溶性蛋白质
电泳图谱谱带较少 o颜色较浅 ∀
3 讨论
芦荟最上部的叶子不断生长 o最下部的叶
子逐渐枯萎 o从而它完成新老叶片的更替 ∀部
位 t处的叶片为生长中心 o部位 u ov处的叶片
为芦荟光合作用的中心 o部位 w ox处的叶片则
不断降解其自身物质运往新生器官 o为芦荟的
衰退中心 ∀部位 t ou ov处叶片的可溶性蛋白质
含量较高 o电泳谱带较多且颜色较深 o显示了这
些叶片旺盛的生命活动 ∀部位 w ox处叶片的可
溶性蛋白质含量较低 o电泳谱带相对较少且颜
色较浅 o是这些器官正在衰老的象征 ∀
图 v 不同部位叶片可溶性蛋白质的电泳图谱
注 }t ou ov ow ox同图 t
过氧化物酶与细胞内的多种代谢活动有
关 ∀它一方面能防御活性氧和其他过氧物自由
基对细胞膜的伤害≈t  ~另一方面还参与结构分
子的合成调节 o对细胞分化起重要作用≈u  ∀较
下部叶片的过氧化物酶活性较高 o可能是叶片
衰老时产生了较多的活性氧和其他过氧物自由
基 o需要过氧化物酶起保护作用 ∀最上部叶片
的过氧化物酶活性较高 o可能是过氧化物酶对
细胞分化起作用 o因为最上部的叶片不断伸展 o
细胞不断分化的缘故 ∀
4 参考文献
t 杨和平等 1 武汉植物学研究 ot||t ~| }vsy
u Ž²¦«¯²¤ ·¨¤¯ q°¯ ¤±·≤¨¯¯ °«¼¶¬²¯ ot|zz ~t{ }wyv
t||y ) ts ) sw收稿
5中国中药杂志6入编中国科学引文数据库
中国科学引文数据库是在国家自然科学基金委和中国科学院共同资 助下建成的一个大型综合性的多功能期
刊引文数据库 ∀它以国内出版的数 !理 !化 !天 !地 !生 !农林 !医药 !卫生 !工程技术等领域的核心期刊作为来源期
刊 ∀它的建立弥补了美国5科学引文索引6收录中国期刊少的缺憾 o可为科技人员查询论著被引用情况提供有效途
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到导向作用 o对图书情报单位的馆藏选定种类将起到参考作用 o对高等院校 !科研机构确定期刊等级 o考核人员绩
效将发挥独特的评价作用 ∀
#wxy# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 tt期