全 文 ：#研究简报#
丹参中脂溶性成分提取工艺优选实验
黄政德 o蒋孟良 o李昌刚 o李 红
k湖南中医学院 药学院 o湖南 长沙 wtssswl
丹参具有活血祛瘀 o凉血消痈 o养心安神等作
用 o临床上用于治疗瘀血阻滞 o疮痈肿痛 o热入营血
所至高热等症状≈t ∀其脂溶性成分丹参酮 µ 为抗
菌有效成分之一 o对人型结核杆菌 vz ∂ 菌株有
较强的活性≈u ∀为充分提取丹参中有效成分 o增强
其疗效 o作者用正交设计法对丹参中脂溶性成分提
取工艺进行了优选 o报道如下 ∀
1 仪器与试药
双波长薄层扫描分析仪 ≤≥2|vs型k岛津l ~电热
恒温水浴箱 q≥utw型k江苏省医疗器械厂l ~微量
进样器 ts Λ¯ k上海安亭微量进样器厂l ~丹参酮 µ
与原儿茶醛对照品k中国药品生物制品检定所l ~硅
胶 k青岛海洋化工厂l ~其他试剂均为分析纯 ∀
2 方法与结果
2 q1 正交设计
根据丹参所含成分的理化性质以及文献与预试
结果 o其影响因素主要有醇浓度 !加醇量 !提取时间
与提取温度等 o故以 |kvwl进行设计 o其因素水平
见表 t ∀
表 t 丹参醇提工艺正交实验因素水平表
因素 Α
温度r ε
Β
加醇量r倍
Χ
乙醇浓度r h
∆
提取时间r°¬±
t zs ykxl ys tusk|sl
u {s xkwl zs |skysl
v |s wkvl {s yskvsl
注 }括号内为第 u次提取的加醇量和提取时间
2 q2 供试液的制备
2 q2 q1 样品供试液的制备 称取丹参饮片 us qs ª
共 uz份 o分别置圆底烧瓶中 o按表 t因素水平及表
u中搭配顺序进行水浴加热回流提取 o每份均提取 u
次 o滤过 o合并滤液 ~每一实验号重复提取 v次供用 ∀
取上述各滤液的 trus置蒸发皿中 o于水浴上蒸干 o
残留物用甲醇少量多次溶解 o转移至 x °¯ 量瓶中定
容 o静置备用 ∀
≈收稿日期 t|||2sx2us
2 q2 q2 对照品溶液的制备 精密称取丹参酮 µ
对照品 o用甲醇溶解制成 s qx °ª# °¯ p t浓度的对照
品溶液 ∀
2 q3 丹参酮 µ 含量测定
根据样品供试液颜色深浅的不同 o精密吸取 v
∗ ts Λ¯ o对照品溶液 x ots Λ¯ 分别点在同一块硅胶
薄层板上 o以石油醚kys ∗ |s ε l2醋酸乙酯 k{Βul为
展开剂 o展开k预先饱和 tx °¬±l o取出 o晾干 ∀以双
波长反射法锯齿扫描kΚ≥ wxs ±° oΚ zss ±° o≥÷
vl≈v 进行含量测定 o以外标两点法计算出各提取液
中丹参酮 µ 含量 o结果见表 u ∀
表 u 丹参酮 µ 及浸出物测定结果 h
实验号 丹参酮 µ 浸出物
t s quvz vt q{
u s qw{v t{ qy
v s qzvx vt qu
w s qvwx uu q{
x s qxyt vx qz
y s qvvv u{ q{
z t qswz vz qv
{ s quzs ut qy
| s qxzv vu qt
对表 u数据按文献≈x 进行方差分析 o结果表明
以因素 Χ对其影响最显著 ,其次为 Α因素 , Α , Β ,
Χ, ∆w因素 Π均 s .st ,影响因素顺序为 Χ Α
∆ Β ,最佳搭配为 Αv Βv Χv ∆u ;浸出物以因素 Χ对
其 影响最显著 , Π s . st ,其次为 Β , ∆因素
Π s .sx ,影响因素顺序为 Χ ∆ Β Α ,最佳搭
配为 Αv Βv Χv ∆t ∀
3 讨论与小结
丹参酮 µ Α在氯仿中易溶 ,故开始残留物用氯
仿溶解 ,其效果反而不佳 ,改用甲醇后 ,也许是其溶
解范围更广 !渗透力更强等原因 ,使被包裹在浸膏中
的成分更易溶出 ∀因而供试品的颜色较氯仿溶解者
为深 ,其含量也高些 ,故最后确定以甲醇溶解残留
物 ∀
因中药为多成分作用的结果 ,故另测浸出物量 ,
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第 uy卷第 x期
usst年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o²qx
¤¼ qousst
以此作为评价提取条件优劣的指标之一 ,使设计更
全面 !结果更可靠 ∀
从统计结果看 ,丹参丹参中脂溶性成分提取最
佳工艺为 Αv Βt Χv ∆u o即 |s ε ott倍量 o{s h乙醇
提取 |s °¬±∀
≈参考文献
≈t 凌一揆 q中药学 q上海 }上海科学技术出版社 ot|{w qtxw q
≈u 国家医药管理局中草药情报中心站 q植物药有效成分手册 q北
京 }人民卫生出版社 ot|{y qts| o{x| q
≈v 王宝 q中成药质量标准与标准物质研究 q北京 }中国医药科
技出版社 ot||w quww q
≈w 杨 锡 o张伯崇 q冠心冲剂质量标准的研究 q中成药 ot||t otv
kzl }ts q
≈x 贺石林 q中医科研设计与统计方法 q长沙 }湖南科学技术出版
社 ot|{| quuz q
≈责任编辑 李 禾
高效液相色谱法测定金森脑泰粉针剂中葛根素含量
权丽辉 o赵淑平 o薛 岚 o徐丽珍 o杨世林
k中国协和医科大学 中国医学科学院 药用植物研究所 o北京 tsss|wl
金森脑泰粉针剂由三七 !葛根 !西洋参等中药
组成 o具有活血化瘀 o清补通络作用 o主治中风病中
经络风痰 o瘀血痹阻络脉症的急性期患者 ∀曾有文
献≈t ∗ w 用高效液相色谱法测定葛根及其制剂中黄
酮的含量 o但在针剂中尚未见到用高效液相色谱法
测定葛根素含量 o本文选择葛根素作为其中含量测
定指标之一 o为该药粉针剂质控提供了可靠的方法 ∀
1 仪器 !试剂和样品
仪器 • ¤·¨µ¶||y高效液相色谱仪 o光电二极
管阵列检测器 ousts处理软件 ∀
试剂与样品 甲醇为分析纯 o重蒸 ~水为重蒸
水 ~金森脑泰粉针为本所新药室提供 ~葛根素由中国
药品生物制品检定所提供 ∀
2 实验方法与结果
2 q1 色谱条件
色谱柱 ¼³¨µ¶¬¯2⁄≥kw qy °°¬§ ≅ uxs °° ox
Λ°l o流动相甲醇2水kuuΒz{l o检测波长 uxs ±° o流
速 t °¯ #°¬±p t ∀
2 q2 样品制备及方法可行性考察
葛根素对照品溶液 }精密称取葛根素对照品
u qtx °ªo置 u °¯ 容量瓶中 o甲醇溶解至刻度 o制成
t qszx °ª# °¯ p t溶液 ∀
样品溶液制备 }精密称取金森脑泰粉针剂 tss
°ªo另取不含葛根的粉针剂 o同法制成阴性溶液 o分
≈收稿日期 usss2s|2us
≈基金项目 国家新药基金项目k|y2|st2sx2tsxl
别置于 ts °¯ 容量瓶中 o加水定容至刻度 ∀精密量
取 tss Λ¯ 置于 u °¯ 量瓶中 o甲醇稀释至刻度 o作为
供试品溶液 ∀
分别吸取上述两种溶液各 ts Λ¯ o注入 °≤
仪 o绘制色谱图 ∀结果表明阴性样品在相同位置没
有干扰 o说明方法可行 ∀
2 q3 线性关系 精密量取对照品溶液 us ows oys o
{s otss Λ¯ o分别置 t °¯ 容量瓶中 o甲醇稀释至刻度 o
注入 ts Λ¯ o按上述色谱条测定 o以峰面积为纵坐标 o
对照品量为横坐标绘制标准曲线 o求得回归方程为
Ψ tx|tvz| Ξ p w|ws , ρ s q|||z o线性范围 s qutx
∗ t qszx Λª∀
2 q4 回收率测定
精密称取已知葛根素含量的金森脑泰粉针剂 x
份适量 o分别置于 ux °¯ 容量瓶中 o分别加入葛根素
对照品适量 o按样品溶液制备方法操作 o结果见表
t ∀
表 t 金森脑泰粉针剂中葛根素的回收率试验结果
样品中含量
r˪
加入量
r˪
测定量
r˪
回收率
r h
s qxyx s qwt{ s q|z{ |{ q{
s qxv| s qwt{ s q|wx |z qt
s qxx| s qwt{ s q|zv || qs
s qxww s qwt{ s q|yz tst qu
s qxxu s qwt{ s q|yz || q{
注 }平均回收率 || qu h oΡΣ∆ t qxt h
2 q5 精密度试验
在相同色谱条件下精密吸取葛根素标准品溶液
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第 uy卷第 x期
usst年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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