全 文 ：大孔吸附树脂预分离在 ‹°≤ 测定芍药甙中的应用
金芳 姚仲青 顾家栋 3
k南京市中医院 南京 utssstl
摘要 目的 }为排除其他成分的干扰 o准确 !快速地测定复方中药制剂中的芍药甙 ∀方法 }采用大孔
吸附树脂k⁄„2ustl吸附样品 o以水 !ts h乙醇洗脱除去干扰成分 o以 xs h乙醇洗脱液用于 ‹°≤ 测定 ∀
结果 }回归方程 Ψ € uuz{| .x Ξ n twtv .{ , ρ € s .|||{ ; 重现性 ΡΣ∆t .y| % ; 回收率 |{ .zz % , ΡΣ∆
t .vz % ;精密度 ΡΣ∆ t qxz h ∀结论 }可供 ‹°≤ 测定芍药甙含量参考 ∀
关键词 大孔吸附树脂 ‹°≤ 功血冲剂 芍药甙
近年来 o文献报道了许多有关 ‹°≤ 测定
复方中药制剂中芍药甙的含量 o其方法均以甲
醇≈t ou 或乙醇≈v 提取液直接注入 ‹°≤ 仪分析
测定 ∀此法对一些药味较多的或含糖量较多的
复方中药制剂不适合 ∀因为甲醇 !乙醇属极性
溶剂 o提出的有机成分较多 o如用经典的溶剂萃
取法进一步纯化样品 o操作较繁琐且影响回收
率 ∀本文将功血冲剂k由地黄 !白芍 !阿胶 !女贞
子 !墨旱莲 !枸杞 !黄芪 !续断 !沙苑子 !地骨皮 !
陈皮制成l直接用乙醇或甲醇的提取液进行分
离 !测定 o发现芍药甙和其他成分无法分离 o改
用大孔吸附树脂处理 o利用水和 ts h oxs h乙
醇不同的洗脱能力 o可选择性地截流芍药甙部
位 o纯化样品 o既有利于准确测定 o又利于色谱
柱的保护 ∀
1 仪器 !试剂和样品
≤2y„ ‹°≤ 仪 o≤2• v„ 数据处理机 o
≥°⁄2y„ ∂ 紫外检测器k岛津l ∀
⁄„2ust型大孔吸附树脂k上海南汇兴华化
工厂l ∀芍药甙对照品k中国药品生物制品检定
所l ∀
功血冲剂为本院制剂室提供 o其中白芍经
我院俞明霞鉴定为 Παεονια λαχτιφλορα °¤¯¯q∀
甲醇 !乙腈为色谱纯 o乙醇为分析纯 ∀
2 方法和结果
211 色谱条件 ’⁄≥2≤t{ 柱 kw qy°° ≅
vss°° oxΛ° o大连依利特公司l ∀流动相甲醇2
乙腈2水kuyΒxΒy{l oΚuvs±° o柱温 vx ε o流速
s qx °¯ #°¬±p t o相对保留时间 ty ∗ tz°¬±o理论
塔板数 ± xsss o分离度 ∴u ∀
212 干扰性实验 将除去白芍制得的功血冲
剂模拟品按样品供试液制备方法制得阴性对照
液 o同法测定 o证明在功血冲剂中芍药甙峰处无
干扰峰 o见图 t ∀
τr°¬±
附图 样品 ‹°≤ 色谱图
„1 芍药甙对照品 …1 去白芍的阴性样品k经吸附处理l
≤1 样品供试液k经吸附处理l
⁄1 样品供试液k未经吸附处理l t1 芍药甙峰
213 标准曲线的绘制 精密称取芍药甙对照
品k干燥器内保存lw qv°ªo用 |x h乙醇溶解 o定
容至 xs °¯ ∀精密吸取对照品液 u ow oy o{ ots o
tuΛ¯ 注入液相色谱仪 o照上述色谱条件测定 o
得回归方程 Ψ € uuz{| .x Ξ n twtv .{ , ρ €
s q|||{ ∀表明芍药甙进样量在 s qt{ ∗ t qs{Λª
线性关系良好 ∀直线未通过原点 o故采用峰面
积积分外标两点法计算 ∀
214 供试液的制备 精密称取功血冲剂 s qxª
k每tª冲剂含药材vªo其中含白芍s qvzxªl o加
3 南京中医药大学 |v级实习生
#{sy# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 ts期
us °¯ 蒸馏水加热溶解后全部倾入大孔吸附树
脂柱内ktu°° ≅ tus°°l o药液以 u °¯ #°¬±p t流
速下滴 o然后用蒸馏水冲洗至洗出液为无色 o继
续以 ts h乙醇冲洗至洗脱液无色 ∀弃去上述
洗脱液 o最后以 xs h 乙醇 !w °¯ # °¬±p t流速洗
脱 o收集最初流出的 xs °¯ 洗脱液即为样品供试
液≈w  ∀
吸取白芍水煎液ks qsyª# °¯ p tlu °¯ o加到
上述树脂内 o按功血冲剂样品供试液制备方法
同法制得 xs °¯ 白芍供试液 ∀
215 芍药甙含量测定 分别吸取上述 u种供
试液 ts ∗ usΛ¯ o注入液相色谱柱内 o照上述色谱
条件测定 o以外标两点法计算芍药甙量 o结果见
表 t ∀
表 t 样品中芍药甙含量测定结果
样品号
样品量
ª
测得量
°ª
ξ
%
ΡΣ∆
h
|yswu| s qxt{t u qts s qwt v qsz
s qxs{y u qs|
s qw{yx t q{x
|ysxuy s qxw|x t qyz s qvt t q|y
s qx{s| t qz{
s qxtty t qxy
|ys{tv s qw|uv u qty s qww u qtw
s qxxxv u qws
s qxxsy u qws
注 }每 tª冲剂含白芍量为 s qvzxª o上述功血冲剂所用
白芍中芍药甙量分别为 u qwt h k|yswu|l ot q|{ h k|ysxuyl o
u qxz h k|ys{tvl
216 重现性试验 精密称取批号为 |ys{tv的
样品 x份 o按供试液制备方法提取 !测定 o计算
平均含量 o其 ΡΣ∆ t .y|%( ν € xl ∀说明方法
重现性良好 ∀
217 回收率试验 精密称取批号 |ysxuy的功
血冲剂 x 份 o分别加入芍药甙对照品溶液
ktzuΛª# °¯ p tlu °¯ o按样品供试液制备法提取 !
测定 o结果见表 u ∀
2 q8 精密度试验 精密吸取芍药甙对照品
kwvΛª# °¯ p tlusΛ¯ o连续进样 x次 o峰面积 ΡΣ∆
t qxz h ∀说明仪器性能良好 ∀
3 结论和讨论
311 供试液制备法是在多次实验基础上确定
表 u 样品中芍药甙的回收率试验结果
样品量
°ª
测得量
°ª
回收率
h
ξ
%
ΡΣ∆
h
t qy|v u qsvt |{ qux
t qzwy u qs{v |z q|y
t qvxw t qy|t |z q|y |{ qzz t qvz
t qyvz t q|zy |{ qxw
t qx{t t q|u| tst qty
注 }≠样品量 €取样量 ≅ 样品平均含量  加入量均为
s qvww°ª
的 ∀将功血冲剂的水溶液经树脂吸附后 o依次
用水和 ts h otx h ovs h ows h oxs h乙醇冲洗 o
结合 ‹°≤ 检测发现 o水和 ts h乙醇洗脱液中
始终未检出芍药甙 ~tx h乙醇洗脱液流出 xs °¯
以后就有少量芍药甙被洗出 oxs h乙醇 xs °¯ 就
能把树脂上的芍药甙全部洗下k指白芍生药量
在 s qtu ∗ s quwªl ∀实验中发现 o用水冲洗至无
色后 o如果不经 ts h乙醇冲洗而直接用 xs h乙
醇冲洗制备供试液 o结果此供试液中成分较多 o
芍药甙仍无法分离 ∀
312 乙醇浓度增大 o对芍药甙的洗脱能力也相
应加强 ∀|x h乙醇 ux °¯ 就能将上述样品中的
芍药甙全部洗下 o但 |x h乙醇洗脱液放置 tu«
以上有大量白色絮状沉淀 o经抽滤后 o仍有析
出 o将抽滤过的澄清液注入高效液相色谱柱内 o
有堵柱现象 ∀其原因不明 o可能是低极性成分
被 |x h乙醇洗出而致 o而 xs h乙醇洗脱液则无
此现象 ∀因此 o用 ⁄„2ust型大孔吸附树脂分
离芍药甙时 o应以水 !ts h乙醇洗脱除去强极性
物质 oxs h乙醇洗脱液用于 ‹°≤ 测定 ∀
313 本法操作简便 !快速 o可供 ‹°≤ 测定芍
药甙含量参考 ∀
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t||z2tu2st收稿
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