全 文 ：大豆磷脂中磷脂类成分的含量测定
马辰 段宏瑾
k中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所 北京 tsssxsl
摘要 目的 }应用薄层色谱扫描法测定样品中磷脂的含量 o比较不同样品中磷脂含量 ∀方法 }展开
剂为氯仿2甲醇2冰醋酸2丙酮2水kwxΒuxΒzΒwΒul o磷显色剂显色 ∀结果 }北京卵磷脂中磷脂酰胆碱的含量
大于 zs h o四川卵磷脂中含有所测的 z种成分 o大豆磷脂胶囊 !美国卵磷脂胶囊和 ∞≤× 胶囊为口
服剂型 o磷脂总含量较低 ∀结论 }本法可作为磷脂质量控制的有效方法 ∀
关键词 磷脂 薄层色谱扫描法 含量测定
磷脂是动物与人体细胞膜重要组成部分 o
亦是生殖腺和精液的主要成分 ∀磷脂中的不饱
和脂肪酸是体内多烯酸的重要来源 o尤其是机
体正常需要而又不能合成的必需脂肪酸 ∀近年
来发现多烯酸对大脑细胞 o特别是脑神经传导
和生长发育有重要作用 ∀本文探讨了 z种磷脂
的薄层分离 !显色条件 o对膦脂的开发利用及质
量控制与评价提供了有效手段 ∀
1 仪器 !试剂与样品
≤≥2|vs薄层扫描仪k岛津l ∀
自制硅胶 板 }硅胶 k青岛海洋化工厂l
适量 o加入 s qx h硫酸铵溶液k含 s qv h羧甲基
纤维素钠l o调匀后涂布于 tx¦° ≅ us¦°玻璃板
上 o使用前 tts ε 活化 u«∀
磷脂对照品 }磷脂酰胆碱k°≤l o溶血磷脂
酰胆碱k°≤l o磷脂酰乙醇胺k°∞l o磷脂酰肌
醇k°l o神经鞘磷脂k≥ l o磷脂酸k°l o磷脂
酰丝氨酸k°≥l均购于 ≥¬ª°¤公司 ∀
磷脂样品 }卵磷脂k四川l o卵磷脂k北京l o
大豆磷脂胶囊k北京l o卵磷脂胶囊k美国l o
∞≤× 胶囊k美国l ∀
试剂均为分析纯 o水为去离子水 ∀
2 实验方法
2 q1 对照品溶液的配制 精密称取 °≤ o°≤ o
°o≥ o° o°≥等对照品各约 us°ªo置于 x °¯
容量瓶中 o加二氯甲烷溶解并稀释至刻度 o摇
匀 o备用 ∀
2 q2 磷脂显色剂的配制 溶液 }称取 vª钼
酸钠 o加入 tx °¯ 水 o溶解后再加入 tx °¯ 盐酸 ∀
溶液
}称取 s qvª硫酸肼 o加入 ux °¯ 水 o加热
溶解 ∀合并溶液 o
o置 xs ε 水浴中 vs°¬±o冷
却后加水至 vss °¯ o溶液呈棕红色 o避光保存 ∀
2 q3 测定方法 精密吸取样品液及对照品溶
液各 usΛ¯ 点于硅胶板上 ∀以展开剂氯仿2甲醇2
冰醋酸2丙酮2水kwxΒuxΒzΒwΒul饱和 us°¬±后 o
直立上行展开 tx¦° ∀取出薄层板 o挥干溶剂 ∀
喷显色剂后 o喷 ts h硫酸甲醇液 o斑点呈蓝色 o
薄层色谱图见图 t ∀
图 t 磷脂的薄层色谱图
t q混合对照品 u q北京卵磷脂ktl v q北京卵磷脂kul
w q四川卵磷脂 x q大豆磷脂胶囊
y q卵磷脂胶囊 z q∞≤× 胶囊
扫描测定 检测波长zss±° ~狭缝y°° ≅
s qw°° ∀采用反射法线性扫描 o测定灵敏度
中 ∀记录峰面积 o用外标二点法计算含量 ∀
3 方法评价
3 q1 标准曲线及线性范围 分别取磷脂混合
对照品溶液 y ots oty ous ovsΛ¯ o点于同一块板
#tzy# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 tt期
上 o按 2 q3 方法展开 !显色 !测定 ∀以磷脂对照
品峰面积与磷脂对照品点样量进行回归分析 o
线性方程 !相关系数及线性范围见表 t ∀
3 q2 回收率试验 精密称取四川产卵磷脂
zs°ªo置于 xs °¯ 量瓶中 o加入混合对照品各约
uxΛªo加二氯甲烷溶解并稀释至刻度 ∀按 2 q3
方法展开 !显色 !测定 o以外标二点法计算 o测得
回收率见表 t ∀
表 t 磷脂的线性方程 !相关系数 !
线性范围及回收率
磷脂 线性方程 ρ 线性范围
Λª
回收率
h
°≤ Ψ u{z n t .sw ≅ tsv Ξ s q||{t t{ qy ∗ |v qs tss qv
≥ Ψ zxx n t .uw ≅ tsv Ξ s q||{y t| qw ∗ |z qu |y q{
°≤ Ψ zsy n t .w{ ≅ tsv Ξ s q|||t tx qu ∗ zy qu |y qw
° Ψ w{u n t .xy ≅ tsv Ξ s q||{t t{ qs ∗ |s qs |z qt
°≥ Ψ vts n u .xt ≅ tsv Ξ s q||{w ut qy ∗ ts{ qs |z qu
°∞ Ψ vts n v .ty ≅ tsv Ξ s q||zw us qy ∗ tsv qu tst qs
° Ψ yu{ n v .vt ≅ tsv Ξ s q||{t tz qt ∗ {x q{ |y qw
3 q3 精密度试验 用磷脂混合对照品溶液在
同一块板上点样 y次 o每次点样量 ysΛªo按 2 q3
方法展开 !显色 !测定 o结果 ΡΣ∆ 分别为 }°≤
t qx h o≥ t q{ h o°≤ u qx h o°u qv h o°≥
u qw h o°∞ u q{ h o° v qt h ∀
3 q4 稳定性测定 样品显色后 o按 2 q3 方法测
定 v«o结果表明显色后 v«稳定 ∀
4 样品测定
称取样品约 zs°ªo置于 ts °¯ 量瓶中 o用二
氯甲烷溶解并稀释至刻度 o摇匀 o备用 ∀分别吸
取适量 o点于硅胶板上 o随行点磷脂对照品溶
液 o按 2 q3 方法展开 !显色 !测定 !计算 ∀结果见
表 u ∀
表 u 样品中磷脂含量测定 h
样品 °≤ ≥ °≤ ° °≥ °∞ °
北京卵磷脂ktl w qt v q{ zw qt p p ts qu p
北京卵磷脂kul w qw v qw z{ qv p p y qx p
四川卵磷脂 tw qx ts qt ux qs tv qt v qt t| qz ts qu
大豆磷脂胶囊 v qx p tt qs v qu u qw { qt v qt
卵磷脂胶囊 y qu p tv qw z qv w qt tu qu x q|
∞≤× 胶囊 x qz p tw qs | qs v qy tt qt x qv
注 }ν w
5 讨论
5 q1 文献≈t 报道 o用 s qsu°²¯ #p t碳酸钠溶
液涂碱性板 o试用后发现 o其斑点k尤其是 °≥
与 °l拖尾严重 o°≥与 °不能分离 ∀用 s qx h
硫酸铵溶液≈u 铺板 o可以较好地改善这一情
况 o通过展开剂氯仿2甲醇2冰醋酸2丙酮2水kwxΒ
uxΒzΒwΒul达到 °≥与 °的分离 o这一方法完成
了 z种磷脂的分离测定 ∀
5 q2 用选定的展开剂系统 o改变硫酸铵的浓
度 o当硫酸铵浓度低时 o磷脂中 °≥与 °的分离
不好 o且拖尾 ~如果硫酸铵的浓度高 o°≥ o°的
φ值增加 o分离情况改善 o最后选定的铵盐浓
度是 s qx h ∀
5 q3 磷脂在 ∂ 区只有末端吸收 o故须经显色
后 o才能测定 ∀曾采用碘蒸气熏板≈v 后 o封板
测定 o亦可稳定 v«o但碘显色法的影响因素很
多 ∀用磷显色剂喷板≈w o斑点呈蓝色 o背景类
白色 o对比明显 o显色条件易于掌握 ∀薄层板放
干后 o约 u«后背景变蓝 ∀如在喷显色剂后 o喷
ts h硫酸甲醇溶液 o可以避免背景变蓝 o提高薄
层板稳定性 o有利于测定 ∀
5 q4 应用本法测定了样品含量 o北京产卵磷脂
中 °≤ 的含量在 zs h以上 o其它磷脂含量较少 o
四川卵磷脂含有所测定的 z种成分 o以 °≤ 的
含量最高 o为 ux h o大豆磷脂胶囊 !美国卵磷脂
胶囊和 ∞≤× 胶囊为口服剂型 o磷脂的总
含量较低 o本文为开发利用磷脂和评价磷脂的
质量提供了可靠的数据 ∀
6 参考文献
t 郭戎 o周永治 o许益民 o等 1 百合磷脂组分的研究及品种鉴
定的数学判别 1 中药材 ot||t otwk|l }vu
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