全 文 ：组分别为 w qx ox ow qzx ox ox ~实验组分别为 u ou o
u ou qux ov ov ∀经此作用后病毒滴度明显下降 o
抑制对数k对照组与实验组 × ≤Œ⁄xs之差l分别
为 u qx ov ou qx ou ou ∀进一步证实 °…≠ 对 °∂ o
≤ ∂ …v o≤ ∂ „ty o∞≤ ‹ ’y ∂ o∞zt ∂ 直接灭活作用 ∀
3 讨论
实验结果表明 o°…≠ 具有明显抗病毒效应 o
特别是对肠道属 x种 • ‘„ 病毒有显效 ∀抑制
对数可达 u ∗ v o经定量试验证明 °…≠ 在
x{x q|wΛªr°¯ 时对各种病毒均有抑制作用 ∀
关于 °…≠ 抗病毒作用机制 o从分组实验结
果可看出作用是多途径的 o不仅有直接灭活作
用 o而且对细胞内外的病毒都有抑制作用 ∀至
于 °…≠ 抗病毒作用是通过改变细胞膜上的某
种成分的作用 o还是促进干扰素等细胞因子的
产生 o我们正在研究 ∀
4 参考文献
t ƒ∏±¤¼¤°¤  ·¨¤¯ q≤¤µ¥²«¼§µ• ¶¨ot|{v ~ttz }uu|
u ’®¤º¤ ≠ ·¨¤¯ q ≤¤µ¥²«¼§µ• ¶¨ ot|{u ~ts{ }vu{
v 戴华生 q新实验病毒学 q北京 }中国学术出版社 ot|{v }ttv
w 曾产毅等 q中华医学杂志 ot|yw ~xsk{l }xut
x 王克夷 q生理科学进展 ot|{v ~twkul }tvx
t||y2tt2ux收稿
三七总皂甙对 ≥‹ • 心肌细胞内 ≤¤u n
及其肌浆网膜上钙泵活性的影响
冯培芳 蒋惠芳 3
k浙江中医学院附属医院 杭州 vtsssyl
摘要 通过对三七总皂甙k ×≥°‘≥l及 ‘≥ !开搏通治疗 ≥‹ • 效果的对比研究 o并以月龄相仿的
• Ž≠ 为正常对照 o发现 ×≥°‘≥能显著提高心肌细胞内肌浆网膜上钙泵活性 o减少心肌细胞 ≤¤u n o减轻
左室心肌重量 ∀
关键词 三七总皂甙 钙离子 钙泵 肌浆网 自发性高血压大鼠
三七总皂甙k×≥°‘≥l为三七的主要活性成
分 o本研究就其对 ≥‹ • 心肌细胞内 ≤¤u n浓度 !
肌浆网膜上钙泵活性及左室游离壁心肌重量的
影响进行观察 o以对 ×≥°‘≥改善高血压病左室
舒张功能提供细胞内生化调节水平的理论依
据 ∀
1 材料
111 动物
y周龄 ‘≥‹ • 和京都威斯特大鼠k≥¬¶·¤µ
Ž¼²·²o• Ž≠l由上海高血压研究所提供 ∀
112 主要仪器与试剂
美国 ∂¬§¨²2uu 型双通道双光束原子分光
光度计 o…¨ ¦®°¤±wu 型分光光度计 o≤²∏¯·¨µ2
‹∞ ’2 • × °血红蛋白仪 o恒温振荡水浴箱 o低
温冰箱 ∀喹巴因 !皂碱 ! ≤¼¦¯²2³¬¤¼²±¬¦ „¦¬§
k≤°„l为 ≥¬ª°¤产品 o„×° o组氨酸为中国科
学院上海生化研究所产 o其余试剂均为国产分
析纯 ∀
113 药品
×≥°‘≥为昆明制药厂产品ku °¯ 含 ×≥°‘≥
tss°ªo批号 |vs{vv otul o开搏通为上海施贵宝
产品 ∀
2 方法
211 观察指标
21111 左室心肌重量测定 乙醚麻醉大鼠后 o
快速剖胸取出心脏 o分离出左心室游离壁 o剔除
心包膜后立即称重 ∀
21112 心肌细胞内 ≤¤u n测定 取 s qtª左右
3 浙江省中医药研究院附属医院 杭州 vtssss
#vzt# 中国中药杂志 t||{年第 uv卷第 v期
心肌组织称重后放入刻度试管内 o按俞锡林
等≈t 方法作标本前处理 o后用 ∂¬§¨²2uu型双通
道 !双光束原子吸收分光光度计火焰法测定 o方
法按说明书进行 ∀
21113 心肌细胞膜及肌浆网k≥• l膜钙泵活性
测定 首先需制备膜 ∀将余下的 s qvª左右心
肌组织中加入少许试剂 ´ k蔗糖 s qux°²¯ro
∞⁄× „ u°°²¯ro咪唑 t°°²¯ro³‹z qwl于水
浴中剪碎 o匀浆 !两层纱布过滤 !滤液前后浓度
为 ts h k • r∂ l o滤液离心 tsssµr°¬± us°¬±o取
沉淀物以试剂 ´洗 u次 ∀取沉淀物加 ts °¯ 试
剂 µ k尿素 t qv°°²¯ro咪唑 tu°°²¯ro∞⁄2
× „ u°°²¯ro ª≤ u¯ # y‹u’ s qt°°²¯ro
k‘‹wlu≥’wz qy°°²¯ro³‹z qwl混匀后于 s ε
放置 w{«o将沉淀物混悬离心 tsssµr°¬±us°¬±o
然后将沉淀物以试剂 ¶k咪唑 ux°°²¯ro组氨
酸 tux°°²¯ro∞⁄× „ tvΛ°²¯ro³‹y q{l洗 u
次 o沉淀物悬于 ts °¯ 试剂 ·中k咪唑 tss°°²¯r
o组 氨 酸 xs°°²¯ro ∞⁄× „s1v°°²¯ro
³‹y1{l o即为膜组织 ∀其次用福林2酚试剂法测
膜蛋白 ∀先配制试剂 ´ k将 w h ‘¤u≤ ’v os qu h
‘¤’ ‹ ot h ≤¤≥’w ou h 酒石酸钠以 xsΒxsΒtΒt
比例混合均匀l当天使用 ∀试剂 µk酚试剂l购
自试剂商店 o在 y个试剂管中分别加入标准蛋
白溶液 o其中含蛋白质分别为 s ous ows oys o{s o
tssΛªo用水或缓冲液补足至 s1w °¯ o加入试剂
´u °¯ o混匀 o再加试剂 µs1u °¯ o混匀 o置 uw ε
保温 vs°¬±∀在 zxs±°处比色测定 o绘制标准
曲线 ∀样品适当稀释取 s1w °¯ o按上法测定
„zxs值 o从标准曲线中查出蛋白质含量 ∀最后
用直接溶血比色法≈u 测膜上钙泵活性 ∀为了解
×≥°‘≥所增强活性的钙泵是否位于 ≥• 膜上 o
以及 ×≥°‘≥是否为特异性 ≥• 膜上钙泵活性
激动剂 o再置 ⁄管 o在缓冲底物中以 tssΛ°²¯r
°ª膜蛋白比例加入 ≤°„ o其余同 „ 管 ∀ ∞管
为在缓冲底物中以同样比例加 ×≥°‘≥ o其余同
„管 ∀ „管减 …管 !„管减 ⁄管 !„管减 ∞管之
光吸收值查标准曲线得无机磷值 o再除以每 °¯
膜蛋白的值即为酶活力kΛ°²¯#°ªp t#°¬±p tl ∀
21114 红细胞膜钙泵活性测定 在剖胸取出
心脏之前 o先从心脏抽取肝素抗凝血 w °¯ o按方
法 2 q1 q1 处理标本 o再按方法 2 q1 q2 测定 ∀
212 具体步骤
将 ≥‹ • 随机分成 w组 o第 t组与 • Ž≠ 在
未作任何处理时即处死 o测定各项指标 o作治疗
前对照 ∀第 u组为阴性对照 o给予 ‘≥ 每只 t °¯
#§p t o¬³∀第 v 组为阳性对照 o给予开博通
s1u°ª#®ªp t#§p t o¬ª∀第 w 组为治疗组 o给予
×≥°‘≥ u°ª#®ªp t#§p t o¬³∀治疗 w周后处死测
各指标 ∀最后将治疗后的酶反应液k包括血与
心肌l用 ≤°„ 及 ×≥°‘≥ 作体外试验 o了解
×≥°‘≥所提高活力的钙泵是否位于心肌细胞
内的 ≥• 上 ∀
3 数据处理
实验所得数据以均数 ? 标准差k ξ ? σl表
示 ∀两样本比较经 Φ检验后再予 τ或 τ.检验 ∀
4 结果
411 • Ž≠ 与 ≥‹ • 各测值比较
治疗前 ≥‹ • 心肌较重 o心肌细胞内 ≤¤u n
浓度较高 o其 ≥• 膜上钙泵活性较低 o与 • Ž≠
比差异显著k Π s1sxl ∀
412 ×≥°‘≥对 ≥‹ • 各测值的影响
经 ‘≥ 治疗后 o≥‹ • 各测值无变化 oΠ 
s1sx ∀说明腹腔注射对 ≥‹ • 各测值无明显影
响 ∀经开搏通治疗后 o除心肌质量减轻k Π 
s1sxl外 o余测值无变化k Ё s1sxl ∀ ×≥°‘≥治
疗后 o心肌细胞内 ≤¤u n降低k Π s1sxl o其 ≥•
膜上钙泵活性增加k Π s1sxl o心肌质量明显
减轻 o与治疗前比 Π s1sx o与开搏通治疗后比
Π s1sx ∀说明 ×≥°‘≥ 对心肌作用比开搏通
多 ∀详见表 t ∀
413 用 ×≥°‘≥治疗后的酶反应液k血及心肌l
中加 ≤°„及 ×≥°‘≥后钙泵活性变化
如表 u所示 o加入 ≤°„ 后 o红细胞膜上的
钙泵活性无明显变化 o而心肌细胞内 ≥• 膜上
钙泵活性显著减少 ∀由于 ≤°„是特异性 ≥• 膜
上钙泵活性抑制剂≈v  o所以上述结果提示 ×≥°2
‘≥所增加活性的钙泵是位于 ≥• 膜上 o而加入
×≥°‘≥后 o红细胞膜上的钙泵活性与 ≥• 膜上
钙泵活性均无变化 o说明 ×≥°‘≥ 为非特异性
#wzt# 中国中药杂志 t||{年第 uv卷第 v期
≥• 膜上钙泵活性激动剂 ∀
表 t ×≥°‘≥对 ≥‹ • 心肌细胞内 ≤¤u n及其 ≥• 膜上钙泵活性的影响
组别 左室心肌重量 ª
心肌细胞内 ≤¤u n
Λ°²¯#°ªp t
心肌细胞内 ≥• 膜上钙泵
Λ°²¯#°ªp t#°¬±p t
• Ž≠ s qvwt ? s qstw s qtuu ? s qst{ t{ quy ? t qs|
治疗前 s qwtt ? s qss|tl s quv{ ? s qstztl { qxv ? s qt{ztl
‘≥ s qwts ? s qsts s quv| ? s qsus { qyt ? s qzu{
≥‹ • 开搏通 s qv{t ? s qstvvl s quvz ? s qswt { qys ? s q{tv
k ν € v{l ×≥°‘≥ s qvyy ? s qsuxwl s qt{s ? s qsutw oxl | q{y ? s qyx{w oxl
注 }≠ ξ ? σ  ν € tsk下同l tl与 • Ž≠ 比 Π s1sx ul与 ‘≥比 Π s1sx vl与开搏通治前比 Π s1sx wl与 ×≥°‘≥治前
比 Π s1sx xl×≥°‘≥与开搏通比 Π s1sx
表 u ×≥°‘≥治疗后的酶反应液中加入 ≤°„与 ×≥°‘≥后钙泵活性变化
不同来源的酶反应液
钙泵活性
经 ×≥°‘≥治疗后 加 ≤°„后 加 ×≥°‘≥后
红细胞膜 Λ°²¯#ªp t#«p t tz qvt ? t qyuy ty q{| ? t qxuw tz qst ? t quyv
心肌 ≥• 膜 Λ°²¯#°ªp t#°¬±p t | q{y ? s qyx{ v qwz ? s qv|xtl | qzx ? s qxvt
注 }tl与治疗后比 Π s1sx
5 讨论
临床研究显示≈w  o×≥°‘≥在人体内可显著
改善高血压病患者左室舒张功能 ∀高血压病实
质上是一种超负荷的心肌病≈x  o由于动脉血压
升高致左室壁张力增高 o心肌氧耗量增加 o心肌
细胞能量相对不足 o因此能量依赖性钙泵活性
降低 o心肌细胞内 ≤¤u n即超负荷 ∀此外心脏压
力负荷增加也能直接刺激心肌细胞的肥厚增
生 ∀而心肌细胞内 ≤¤u n超负荷及心肌细胞肥
大增生正是高血压病左室舒张功能受损的两个
主要原因≈y  ∀药理研究证实 o×≥°‘≥有抑制血
小板 !抗血栓≈z  !增加冠脉流量≈{  !降低动脉血
压≈|  !心肌负性变频及变力作用≈ts ott  o净得的
效应是纠正了心肌细胞的能量缺乏 ∀本研究进
一步以 ≥‹ • 为实验模型 o作 ×≥°‘≥疗效的体
内 !外试验 ∀结果表明 ×≥°‘≥通过上述多种药
理作用 o提高了心肌细胞 ≥• 膜上钙泵活性 o因
而使心肌细胞内 ≤¤u n也明显减少 ∀ ×≥°‘≥是
一种非特异性 ≥• 膜钙泵活性激动剂 ∀本研究
结果也显示 ×≥°‘≥能减轻 ≥‹ • 左室游离壁心
肌重量 ∀早期高血压病所发生的舒张功能不全
是高血压病心衰的始动阶段 o心肌细胞可塑性
大 o此时能适当运用 ×≥°‘≥将会对改变心衰病
程有深远意义 ∀ ×≥°‘≥ 是一种有前途的治疗
心衰的药物 ∀
6 参考文献
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{ 张子照等 1 药学学报 ot|{s ~txkzl }v{x
| 王东甲等 1 中国药理学报 ot|{w ~xkvl }t{t
ts 伍杰雄等 1 中国药理学报 ot|{{ ~|kxl }ws|
tt 李洪泰等 1 中国药理学报 ot||s ~ttkvl }utv
t||y2ts2ty收稿
更正 本刊 t||{年第 t期第 wv页5胡椒根挥发油的化学成分及其微量元素测定6一文的收稿日期应为/ t||z2
st2sy0 o特此更正 ∀
#xzt# 中国中药杂志 t||{年第 uv卷第 v期