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Determination of Shikimic Acid in Fruit of Illiciaceae Plants by HPLC with Diode-Array Detection

高效液相法测定八角属部分植物果实中莽草酸的含量



全 文 :≈t| 梁红健 o刘 敏 o钟志宇 o等 q中国部分兰花品种 • „°⁄分析 q
园艺学报 ot||y ouvkwl }vyx q
≈us  冯丽春 o杨光伟 o余茂德 o等 q利用 • „°⁄对桑属植物种间亲
缘关系的研究 q中国农业科学 ot||z ovsktl }xu q
Χλυστερ Αναλψσισ οφ ∆ενδροβιυµ βψ Ρ ΑΠ∆ ανδ ∆εσιγν οφ
Σπεχιφιχ Πριµερ φορ ∆ενδροβιυµ χανδιδυµ
 ‹ „‘Š ¬±ªt o ‹ ˜„‘Š ‹∏¤2µ²±ªt oŒ„’ ≥∏2° ¬¨t o Š„’ ¬¤±ª2¼∏±u
kt q≤²¯¯¨ ª¨ ²©¬©¨ ≥¦¬¨±¦¨¶o«¨­¬¤±ª ˜±¬√ µ¨¶¬·¼ o ‹¤±ª½«²∏ vtsstu o«¨­¬¤±ªo≤«¬±¤~
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ¤±¤¯¼½¨ ·«¨ ª¨ ±¨ ·¬¦µ¨ ¤¯·¬²±¶«¬³²© ∆ενδροβιυ µ ¤±§§¨¶¬ª± ¤¶³¨¦¬©¬¦³µ¬° µ¨·²
§¬©©¨ µ¨±·¬¤·¨ ∆ενδροβιυ µ χανδιδυ µ ©¨©¨ ¦·¬√¨¯¼ q Μετηοδ : • ¤±§²° ¤°³¯¬©¬¨§³²¯¼°²µ³«¬¦⁄‘„ k• „°⁄l ·¨¦«2
±¬´∏¨ º¤¶∏¶¨§·²¤±¤¯¼½¨ ·«¨ ª¨ ±¨ ·¬¦µ¨ ¤¯·¬²±¶«¬³¶²©uy ¶³¨¦¬¨¶²© ∆ενδροβιυ µ ¤±§²±¨ ¶³¨¦¬¨¶²© Επηε µεραν2
τηα . ⁄¨ ±§µ²ªµ¤° º¤¶¦²±¶·µ∏¦·¨§¥¼ ˜°Š  „ q „¦¦²µ§¬±ª·²·«¨ ¶¨ ∏´¨ ±¦¨ ²© ⁄‘„ ©µ¤ª° ±¨·¶¨¯¨ ¦·¨§o≥¤±ª²±
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σιον : ׫¬¶³µ¬° µ¨¦¤± ¥¨ ∏¶¨§·²§¬¶·¬±ª∏¬¶« ∆ενδροβιυ µ χανδιδυ µ ©µ²° ²·«¨µ ∆ενδροβιυ µ ©¨©¨ ¦·¬√¨¯¼ q≥∏¦«¤
·¨¦«±¬´∏¨ ³µ²√¬§¨¶¤ ±¨ º º¤¼ ©²µ·«¨ ¬§¨ ±·¬©¬¦¤·¬²± ²© ≤«¬±¨ ¶¨ ·µ¤§¬·¬²±¤¯ ° §¨¬¦¬±¨ ¶q
[ Κεψ ωορδσ] ∆ενδροβιυ µ ; ∆ενδροβιυ µ χανδιδυ µ ; • „°⁄~¶³¨¦¬©¬¦³µ¬° µ¨
≈责任编辑 袁桂京 
高效液相法测定八角属部分植物
果实中莽草酸的含量
王晓强 o郭亚健 o杨春澍
k北京中医药大学 中药学院 o北京 tsssu| l
≈摘要  目的 }建立莽草酸含量测定方法 ∀方法 }采用 ‘‹u 键合相硅胶柱 o乙腈2u h ‹v°’wk|xΒxl为移动相 o
检测波长 utv ±° o ‹°≤ 法 ∀结果 }平均回收率为 |{ qx h oΡΣ∆为 t qyz h k ν € xl ∀结论 }适用于含莽草酸药材及
制剂的质量控制 ∀
≈关键词  二极管阵列高效液相色谱法 ~莽草酸 ~八角属
≈中图分类号  • u{w qt ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukusstlsz2swwz2sv
八角茴香和地枫皮为5中国药典6usss年版收
载的品种 o我国为八角属植物的主要分布区≈t  ∀八
≈收稿日期  usss2sz2t{
≈基金项目  国家科委课题 k|y2|st2st2vxl
角属植物果实普遍含有莽草酸 o为莽草酸的丰富资
源之一 ∀现代药理学研究证明 o莽草酸具有较强的
镇痛和抑制血小板聚集作用≈u ∗ w  o但其高效液相色
谱含量测定方法未见文献报道 ∀本文建立八角属植
物果实中莽草酸的高效液相含量测定方法 o测定了
#zww#
第 uy卷第 z期
usst年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o‘²qz
∏¯ qousst
八角属几种植物果实的含量 o并对色谱峰进行了纯
度检查 ∀
1 药品与试剂
莽草酸对照品为本室自制 o熔点 t{w ∗ t{y ε o
其 Œ• o∞Œ2  ≥ otv ≤ ‘ • 及 ¯‹‘ • 与文献≈u 一致 o
色谱归一化法测得含量为 |{ quu h ~八角属植物果
实样品由杨春澍教授提供并鉴定 ~乙腈为色谱纯
kƒ¬¶«¨µ公司l ~‹v°’w为 „ • ∀
2 仪器及色谱条件
惠普 ‹°tsxs 液相色谱仪 o⁄„⁄检测器 ~化学
工作站 ∀ ‹yysux型超声清 洗仪k无锡市超声电子
设备厂l ∀
色谱柱 } ’ • …„÷ ‘‹ukx Λ° ow qy °° ≅ txs
°°l ~移动相 }乙腈2u h ‹v°’wk|xΒxl ~
流速 }t °¯ # °¬±p t ~测定波长 utv ±° o带宽 w
±° ~参比波长 vss ±° o带宽 {s ±° ∀
衰减 | ~柱温 }室温 ~柱效以莽草酸计 o理论塔板
数应不低于 xwss ∀
3 方法学考察
3 q1 样品提取条件优化
精密称取干燥的红茴香果实粉末k过 ws目筛l
约 s qv ªo分别精密加入 vs °¯ kt ∗ x号l !ws °¯ ky
号l甲醇 o称重 o按下述条件超声提取kuxs • l ∀提
取完毕后再精密称重 o以甲醇补足至原重量 ∀取 x
°¯ 上清液 o以 s qwx Λ°微孔滤膜滤过 o滤液进样 o外
标一点法测定含量 o并对测定结果进行 θ检验 ∀检
验结果表明各条件间无显著性差异 o样品供试液的
制备采用以下条件 ∀
样品供试液的制备 }精密称取干燥的八角属植
物果实粉末k过 ws目筛l约 s qu ªo精密加入 us °¯
甲醇 o称重 o超声提取kuxs • lus °¬±o提取完毕后
再精密称定 o以甲醇补足至原重量 o取 x °¯ 上清液 o
以 s qwx Λ°微孔滤膜滤过 o滤液作为样品供试液 ∀
3 q2 标准曲线制备
精密称取莽草酸对照品适量 o加甲醇制成每 ¯
°¯ 含 s qv °ª的溶液 o作为对照品溶液 ∀精密吸取
对照品溶液 u qx ox qs ots qs otx qs otz qx Λ¯ 进样 o测
定色谱峰峰面积 o并以色谱峰峰面积对对照品的量
回归k包括原点l o得回归方程为 Α € twz . {v n
vu{x .xy µ , ρ € s q|||x o其线性范围为 s qyt ∗ w quz
Λªo可用外标一点法测定 ∀
3 q3 精密度试验
精密吸取莽草酸对照品溶液 x Λ¯ o重复进样 y
次 o测得色谱峰峰面积平均值为 wt|t qz o ΡΣ∆ 为
t quv h o符合分析要求 ∀
3 q4 回收率试验
精密称取红茴香果实粉末约 s qt ªo在其中精密
加入莽草酸对照品约 x °ªo以下按样品供试液制备
及样品测定项下操作测定 o测定结果见表 t o其平均
回收率为 |{ qx h oΡΣ∆为 t qzs h o符合分析要求 ∀
表 t 回收率测定结果
试验号

样品相当对
照品的量r°ª
测得莽草酸
的总量r°ª
回收率
r h
ΡΣ∆
r h
t vs q|s vx qz{ tst qs t qzs
u vs qwz vx quv |{ qx
v u| qsv vv qzs |y qy
w vs qtx vw q|v |{ q|
x vs qs{ vw qz| |z qw
注 }≠加入对照品的量均为 w q{vw °ª  ν € vk表 u 同l
3 q5 重复性试验
取同一品种样品k红茴香l果实粉末 o按样品测
定法重复测定x次 o测得莽草酸含量平均值为
w qyy h oΡΣ∆为 t q|x h o符合要求 ∀
4 样品测定
按上述样品液制备方法制备各样品供试液 o精
密吸取样品供试液 x ∗ tx Λt o莽草酸对照品溶液 ts
Λt o分别进入高效液相色谱仪 o测定色谱峰峰面积 o
计算含量 o见表 u ∀莽草酸对照品及样品的 ‹°≤
色谱图见图 t o图 u ∀
表 u 样品测定结果 h
样品 产地 莽草酸平均含量
红茴香 Ιλλιχιυ µ ηενρψι 四川 w .y{
厚皮香八角 Ι . τε µστροε µιοιδεσ 海南 ts .uu
厚叶八角 Ι . παχηπηψλλυ µ 广西 { .xx
八角茴香 Ι . ϖερυ µ 广西 tu .xz
野八角 Ι . σι µ ονσι 四川 v .y{
披针叶茴香 Ι . λανχεολατυ µ 浙江 y .tv
红花八角 Ι . δυννιανυ µ 四川 { qzu
5 讨论
5 q1 曾探讨过以 ≤t{及硅胶柱分离测定莽草酸 o但
分离效果都不好 o不如采用氨基键合相硅胶柱 o经实
验摸索建立了本文的色谱条件 ∀
5 q2 就本文的色谱条件 o对样品中莽草酸的色谱峰
作过光谱及纯度检查k光谱归一化法及吸收比率
图l o同时以薄层色谱为对照≈展开剂为甲醇2氯仿2
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第 uy卷第 z期
usst年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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甲酸kuΒz qxΒs qxl oΚ¶€ utv ±° oΚ• € vxs ±°  o说明
在此点样量及测定条件下 o莽草酸的色谱峰为单一
成分 ∀莽草酸对照品及八角茴香的 ‹°≤ 三维色
谱图见图 v及图 w ∀
图 t 莽草酸对照品 ‹°≤ 色谱图
图 u 样品k八角茴香l‹°≤ 色谱图
5 q3 现代药理学研究证明 o莽草酸具有较强的镇痛
和抑制血小板聚集作用 o八角属植物果实中普遍含
有莽草酸 o所以研究莽草酸在八角属植物果实中的
分布对该属植物的资源利用有一定的参考价值 ∀本
文建立的方法可用于莽草酸的资源研究及含莽草酸
制剂的质控研究 ∀
图 v 莽草酸对照品 ‹°≤ 三维色谱图
图 w 八角茴香 ‹°≤ 三维色谱图
≈参考文献 
≈t  黄建梅 o刘 慧 o杨春澍 o等 q八角科 ty种植物果实的形态鉴
别 q中草药 ousss ovtktl }xw q
≈u  张俊巍 q红花八角茎叶化学成分研究 q中国中药杂志 ot|{| o
twktl }vy q
≈v  方玉珍 o宋杰云 o岑燕飞 o等 q毒八角酸的镇痛作用研究 q贵阳中
医学院学报 ot|{| oktl }x| q
≈w  马 怡 o孙建宁 o徐秋萍 o等 q莽草酸对血小板聚集和凝血的
抑制作用 q药学学报 ousss ovxktl }t q
∆ετερµινατιον οφ Σηικιµιχ Αχιδ ιν Φρυιτ οφ Ιλλιχιαχεαε Πλαντσ
βψ ΗΠΛΧ ωιτη ∆ιοδε2Αρραψ ∆ετεχτιον
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²© „¦¨·²±¬·µ¬¯¨ 2u h ‹v°’w º¤·¨µ¶²¯∏·¬²± k|xΒxl ~׫¨ ¶¤°³¯¨ º¤√¨¯ ±¨ª·« º¤¶utv ±° oµ¨©¨ µ¨±¦¨ º¤√¨¯ ±¨ª·«vss
±° ∀Ρεσυλτ : × «¨ ¤√ µ¨¤ª¨ ¦²¯¯¨ ¦·¬²± º¤¶|{ qx h o ΡΣ∆ t qyz h k ν € xl qΧονχλυσιον : ׫¬¶ ° ·¨«²§¬¶¶∏¬·¤¥¯¨
©²µ·«¨ §¨·¨µ°¬±¤·¬²± ²© ≥«®¬°¬¦¤¦¬§¬± «¨µ¥ ° §¨¬¦¬±¨ ¶¤±§³µ¨³¤µ¤·¬²± ¦²±·¤¬±¬±ª≥«¬®¬°¬¦¤¦¬§q
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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